Hematologia Veterinaria - Atlas de Especies domesticas comunes Spanish

HEMATOLOGÍA VETERINARIA

Atlas de Especies Domésticas Comunes William J. Reagan Teresa G. Sanders Dennis B. DeNicofa (Eds.)

HARCOURT BRACE

CONTENIDO

Prefacio vii 1. Hematopoyesis 3 2. Morfología normal del eritrocito 13 3. Variaciones de la morfología del eritrocito 17 4. Inclusiones y parásitos eritrocitarios 25 5. Morfología normal del leucocito 29 6. Variaciones de la morfología del leucocito 37 7. Inclusiones y parásitos leucocitarios 43 8. Plaquetas 47 9. Trastornos linfoproliferativos y mieloproliferativos 49 10. Descubrimientos varios 59 Apéndices 63 1. Esquema de gradación semicuantitativa para la evaluación de la morfología eritrocitaria 63 2. Esquema de gradación semicuantitativa para la evaluación de la toxicidad de los neutrófilos 64 Glosario 65 Referencias seleccionadas 71 Indice 73

CAPITULO UNO

HEMATOPOYESIS CARACTERÍSTICAS GENERALES Todas las células sanguíneas tienen una vida media finita, pero en los animales sanos el número de células en circulación se mantiene en un nivel constante. Para conseguirlo, las células que se hallan en circulación necesitan ser repuestas constantemente, y ello se consigue mediante la producción y emisión de células desde la medula ósea. Los centros de producción en la medula ósea se conocen normalmente como lugares medulares. En momentos de una mayor demanda, la producción puede realizarse fuera de la medula ósea en lugares como el bazo, el hígado y los ganglios linfáticos. Se trata de los llamados lugares extramedulares.

La Hematopoyesis, la producción de células de la sangre, es un proceso complejo y sumamente regulado. Todas las células sanguíneas de la medula ósea surgen de una célula madre común. Esta célula madre multipotencial origina diferentes fases de células progenitoras, que, posteriormente, se diferencian en células de la serie eritrocítica, granulocítica, megacariocítica y agranulocítica (monocitos y linfocitos). El resultado final de este proceso es la emisión de eritrocitos, de leucocitos y de plaquetas al torrente sanguíneo. Con un microscopio óptico, resulta difícil identificar con precisión las primeras células madres de la medula ósea, pero podemos identificar los niveles mas diferenciados de desarrollo, los cuales se indican y describen graficamente en la figura 1.1.

4

HEMATOPOYESIS.

La figura 1.2 muestra una sección histológica de una biopsia del núcleo de la medula ósea de un perro. Observe que hay una mezcla de un 50% aproximadamente de células hematopoyéticas y un 50% de grasa rodeado de trabéculas óseas. Puede resultar difícil reconocer, en secciones histológicas, los tipos específicos de células de

la medula ósea en esta ampliación de bajo aumento, pero las células grandes presentes son megacariocitos. Las células son más fácilmente identificables en un frotis de aspirado de medula ósea (figura 1.3). Las células presentes incluyen precursores de eritrocitos y granulocitos y un megacariocito. Para clasificar estos tres tipos dis-

Figura 1.2. Sección histológica de medula ósea canina. Aparecen trabéculas óseas rosáceas en la esquina inferior izquierda, en la esquina inferior derecha y en la parte superior de la microfotografía y rodean las células hematopoyéticas y la grasa. La grasa aparece en forma de áreas redondas u ovales, de aspecto claro. Las células precursoras de eritrocitos y granulocitos son las estructuras pequeñas, numerosas, redondeadas y de color púrpura. Las estructuras mas grandes densamente teñidas de color púrpura distribuidas por el espacio de la medula son megacariocitos. Biopsia del núcleo de medula ósea canina; tinción de hematoxilina y eosina. Objetivo lOx.

Figura 1.4. Precursores del eritrocito. La mayoría de las células intactas presentes son precursores tempranos del eritrocito con núcleos redondos situados en el centro y citoplasma azul oscuro. Las células con núcleos redondos situados excéntricamente y citoplasma azul-rojizo son precursores del eritrocito de última fase. La célula mas grande, en el centro derecho del campo, que tiene peque-nos gránulos rosados en el citoplasma, es un promielocito. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

*■$,

Figura 1.3. Megacariocito, precursores del eritrocito y precursores granulocíticos. El Megacariocito es la célula mas grande situada en Id parte central derecha del campo. Los precursores eritrocitarios mas iniciales tienen núcleos centrales redondos y un citoplasma azul oscuro. Los precursores de granulocitos tienen núcleos ovales o dentados y citoplasma azul. Hay un predominio de granulocitos en este campo. Frotis de medula ósea canina. Objetivo 50x.

Figura 1.5. Precursores de granulocitos. La mayoría de las células intactas presentes son precursores de granulocitos con núcleos ovales o dentados y citoplasma azul. Las formas inmaduras mas grandes tienen gránulos citoplásmicos pequeños y rosados. FJ citoplasma se vuelve menos azul al madurar las células. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

HEMATOPOYESIS 5 tintos de células, pueden utilizarse algunas características generales. Los megacariocitos se pueden distinguir con mayor facilidad por su tamaño muy grande; la mayoría de ellos tienen un diámetro de 100 a 200 um en comparación con los 20 a 30 )um aproximadamente de los precursores mas grandes de granulocitos o eritrocitos. Las celulas de la línea eritrocitaria pueden distinguirse inicialmente de las de la línea de los granulocitos basándose en la forma nuclear y el color del citoplasma (imágenes 1.4 y 1.5). Las celulas de la línea eritrocitaria tienen núcleos muy redondeados a lo largo de la mayoría de las fases de su desarrollo. Por el contrario, los núcleos de las celulas de la línea de los granulocitos se van dentando y segmentando al madurar. Por otra parte, el citoplasma de los precursores iníciales de eritrocitos es mucho mas azul que el de los precursores de los granulocitos. Hay varias características morfológicas comunes adicionales que aparecen durante el desarrollo tanto de los precursores del eritrocito y granulocito. Tanto la celula como el núcleo disminuyen de tamaño al madurar. Como las células pierden su capacidad para dividirse, se produce una perdida de nucleolos y una condensación de la cromatina nuclear. También se producen cambios en el citoplasma. A medida que aumenta el contenido de hemoglobina de los precursores del eritrocito, el citoplasma se vuelve menos azul y mas rojo. Mientras se produce la maduración en las células granulocítica, el ■citoplasma también se vuelve menos azul.

ERITROPOYESIS

;-;-

Hay varias fases del desarrollo de los eritrocitos que son perceptibles en la medula ósea. La figura 1.6 representa el desarrollo del eritrocito y la lamina 1 muestra la morfología de todos los precursores del eritrocito. El desarrollo de los eritrocitos se detalla brevemente a continuación.

El rubriblasto es el primer precursor del eritrocito reconocible morfológicamente. El rubriblasto es una célula grande y redonda con un núcleo grande y redondo con una cromatina granular gruesa y un nucleolo prominente. Estas células tienen pequeñas cantidades de citoplasma azul oscuro. El rubriblasto se divide para producir dos prorubricitos. El prorubricito es redondo y del mismo tamaño o, a veces, mayor que el rubriblasto. El núcleo es redondo con un tipo de cromatina granular gruesa. Normalmente no existe nucleolo. Hay una pequeña cantidad de citoplasma azul oscuro, a menudo con una zona clara perinuclear prominente. Cada prorubricito se divide para formar dos rubricitos. El rubricito es más pequeño que el prorubricito. El núcleo continua siendo redondo, y la cromatina granular gruesa es mas densa en comparacion con las prime-ras fases. Hay una pequeña cantidad de citoplasma azul oscuro, aunque algunos de los rubricitos más maduros tienen un citoplasma azulrojizo. En la fase de rubricito hay dos divisiones: los rubricitos se transforman al madurar en metarubricitos. El metarubricito es más pequeño que el rubricito. El núcleo es redondo o ligeramente oval, esta situado en el centro excéntricamente y tiene una cromatina muy condensada. Hay una cantidad moderada de citoplasma azul o azul-rojizo. A partir de la fase de metarubricito, no hay ninguna división posterior de las células, únicamente maduración. El núcleo picnotico altamente condensado del metarubricito es expulsado de la célula, y esta célula se convierte en un policromatcifilo. Los policromatofilos son células redondas sin núcleo y tienen un citoplasma azulado. Al madurar el policromatofilo, se vuelve menos azul y mas rojo hasta convertirse en un eritrocito maduro. Los eritrocitos maduros tienen características morfológicas dependiente de las especie, y que se describen en el Capitulo 2.

6

HEMATOPOYESIS

GRANULOPOYESIS La granulopoyesis se muestra en la figura 1.7 y lamina 2. En la medula ósea, hay tres tipos de granulocitos, que incluyen células de las líneas de neutrofilos, eosinofilos y basofilos. Las células de la línea de los neutrófilos son el tipo predominante de granurocitos presentes y su desarrollo se describe en primer lugar. El primer precursor de granulocito reconocible en la medula ósea es el mieloblasto. Es una célula grande con un núcleo redondo u oval con una cromatina finamente granular y uno o mas nucleolos prominentes. La cantidad de citoplasma es pequeña o moderada y azul. Cada mieloblasto se divide para formar dos promielocitos. Los promielocitos se parecen a los mieloblastos excepto en que pueden no tener nucleolos y pueden tener una zona perinuclear clara dentro del citoplasma. El rasgo distintivo de los promielocitos es la presencia de múltiples gránulos muy pequeños de color rosado o purpureo en el citoplasma; se les conoce como gránulos primarios. Los promielocitos se dividen para producir mielocitos. El mielocito es mas pequeño que los primeros precursores y tiene un núcleo redondo u oval o ligeramente dentado y con una cromatina granular de fina a moderada. Estas células tienen cantidades moderadas de citoplasma azul. En esta fase, dejan de producirse los gránulos primarios y se forman en ese momento gránulos secundarios. Estos gránulos secundarios son mas gran-des que los gránulos primarios.

En los mielocitos neutrofilos, los gránulos secundarios son de color rosa claro y son muy dificiles de reconocer con el microscopio óptico. El mielocito sufre dos divisiones y la progenie resultante madura y se transforma en metamielocitos. A partir de la fase del metamielocito, las células ya no se dividen. El metamielocito es mas pequeño que el mielocito y tiene un núcleo con forma de riñón. La cromatina es moderadamente granular y mas espesa y densa que la del mielocito. El citoplasma es azul y contiene gránulos primarios y secundarios. Ambos tipos de gránulos en el metamielocito y en las fases subsiguientes de desarrollo no son fácilmente visibles al microscopio. Los metamielocitos se transforman en neutrofilos en banda. Los neutrofilos en banda son redondos y más pequeños que los metamielocitos, tienen núcleos con la forma de herradura y cantidades moderadas de citoplasma azul o azul claro. El neutrófilos en banda madurara y se convertirá en un neutrofilo segmentado, que es una célula pequeña con un citoplasma que va del azul muy claro al rosa y un núcleo segmentado. La cromatina nuclear es gruesa, granular y densa. Los eosinofilos y los basofilos maduros y sus precursores aparecen en poca cantidad en la medula ósea normal. La producción de dichas células es similar a la de los neutrófilos y, por tanto, solo se describen las diferencias principales (figura 1.1). El desarrollo es idéntico hasta la fase de mielocito, que es cuando los mielocitos eosi-

HEMATOPOYESIS 7 nofilos y basofilos pueden distinguirse de los mielocitos neutrofilos por el color de los gránulos secundarios. Los mielocitos eosinofilos y basofilos contienen, respectivamente, gránulos secundarios de color rojizo a rojizo-anaranjado y purpureo. Los metamielocitos eosinofilos y basofilos y los metamielocitos en banda pueden reconocerse también mediante la presencia única de los gránulos secundarios. La última fase de desarrollo es el eosinofilo y el basofilo maduros. El eosinofilo es, a menudo, ligeramente mas grande que el neutrofilo maduro, y el núcleo no esta segmentado de manera tan estrecha. El citoplasma contiene gránulos rojizos a rojizo-anaranjados. El basofilo maduro es una célula redonda que es ligeramente más grande que el neutrófilos, con un núcleo segmentado con cromatina condensada. El citoplasma es de color purpura claro y puede contener gránulos. En el Capitulo 5 figuran, dependientes de la especie animal, algunos rasgos únicos de los eosinofilos y basofilos maduros.

MONOCITOPOYESIS Los precursores de los monocitos surgen de células madres, que son precursores comunes para ambas células de las líneas de los granulocitos y monocitos. En la figura 1.1 se puede apreciar el desarrollo del monocito. En la medula ósea normal, aparecen poquísimas células de la familia de los monocitos. Los monoblastos son los primeros precursores reconocibles microscópicamente en la medula ósea, aunque sea imposible diferenciarlos de los mieloblastos. Los monoblastos dan lugar a los promonocitos. Un promonocito es una célula grande con un núcleo oval, a veces dentado con un tipo de cromatina reticular (parecida a una red) o en forma de encaje. Estas células tienen cantidades pequeñas y moderadas de citoplasma azul y puede resultar difícil distinguirlas de los mielocitos o metamielocitos neutrofilos. Los promonocitos dan origen a los monocitos, que son mas grandes que los neutrofilos segmentados. El núcleo de los monocitos tiene múltiples muescas. La cromatina nuclear tiene áreas de condensación pero tiene una forma de encaje o reticular en comparación con el tipo de cromatina condensada del neutrofilo maduro. El citoplasma es moderado en lo que se refiere a la cantidad y es típicamente azul-gris, a menudo con múltiples vacuolas discretas.

MEGACARIOCITOPOYESIS Y PRODUCCION DE PLAQUETAS La megacariocitopoyesis es única comparada con el desarrollo de las células sanguíneas restantes y su descripcion aparece en la figura 1.1. Los megacarioblastos son los primeros precursores, morfológicamente reconocibles, de la línea de los megacariocitos en la medula ósea, pero puede resultar imposible diferenciarlos

de otras células basticas. El megacarioblasto es una célula grande con un solo núcleo redondo y un nucleolo prominente. Esta célula se diferencia en promegacariocito, que es más grande que el megacarioblasto y que tiene un núcleo multilobulado con un citoplasma agranular azul oscuro. Del promegacariocito surge el megacariocito (figura 1.8), que se puede distinguir con facilidad en la medula ósea a causa de su gran tamaño (normalmente de 100 a 200 |im). Esta célula grande tiene un gran núcleo multilobulado y abundante citoplasma granular. Las plaquetas se forman en el citoplasma de megacariodtos mediante la formacion de una estructura que se conoce como proplaqueta. La proplaqueta se fragmenta en múltiples plaquetas. Las plaquetas resultantes son células pequeñas con forma discoidal que no tienen nucleos y que tienen un citoplasma rosa pálido que, algunas veces, contiene gránulos inconfundibles de color purpura.

LlNFOPOYESIS Los linfocitos surgen del mismo precursor de célula madre común como lo hacen el resto de las otras células de la medula ósea (figura 1.1). Las múltiples fases de diferenciacion de linfocitos en la medula ósea no pueden reconocerse microscópicamente, pero existen dos tipos principales de linfocitos presentes en la sangre periferica: linfocitos B y T. Estas dos células parecen idénticas y no pueden diferenciarse basándose únicamente en la morfología, siendo sus funciones completamente diferentes. En la medula ósea aparecen cantidades reduddas de linfocitos pequeños y escasos linfocitos medianos y grandes (figura 1.9) El numero exacto de linfocitos en la medula ósea depende de la especie.

Figura 1.8. Megacariocito. El megacariocito es la célula grande del centra con un núcleo irregular multilobulado y abundante citoplasma granular. Frotis de medula ósea canina. Objetivo 50x.

8 HEMATOPOYESIS mente granular con algunas áreas de condensación. El núcleo del linfocito grande tiene normalmente un nucleolo y se le conoce como linfoblasto. Ambos tipos de células tienen pequeñas o moderadas cantidades de citoplasma de color azul claro. Además de los linfocitos, pueden verse pequeñas cantidades de células plasmáticas en la medula ósea (figura 1.10). Estas células son la fase final de diferenciación de

los linfocitos B y son redondas con núcleos redondas situados excéntricamente. La cromatina nuclear esta muy condensada y espesa con áreas claras en medio. Los plasmocitos tienen cantidades moderadas de citoplasma azul oscuro con una zona clara perinuclear prominente.

OTRAS CÉLULAS DE LA MEDULA ÓSEA Macrófago Los macrófagos de la medula ósea aparecen en pequeñas cantidades (figura 1.11). Estas células son grandes y tienen un núcleo oval o dentado. La cromatina nuclear es reticular o con forma de red. Las cantidades de citoplasma azul, que pueden ser moderadas o abundantes, son a menudo muy espumosas y pueden contener vacuolas múltiples de tamaños variados. A menudo, dentro de estas células pueden encontrarse restos fagocitados o pigmento de hierro, conocido como hemosiderina. En general, la hemosiderina no se identifica en la medula ósea normal de gato.

Figura 1.9. Linfocitos. Las dos células redondas mas pequeñas (centro izquierda) que son ligeramente mas grandes que los eritrocitos, con núcleos redondos u ovalados y pequeñas cantidades de citoplasma azul claro, son linfocitos pequeños. La célula mas grande del centra es un precursor del granulocito neutrofilo. La célula redonda (encima del precursor del granulocito) con un núcleo redondo, cromatina muy condensada y un borde de citoplasma azul oscuro, es un rubricito. Frotis de medula ósea felina. Objetivo lOOx.

Figura 1.10. Plasmocitos. Las tres células (centro) con núcleos redondos, situados excéntricamente, con cromatina gruesa densa y una cantidad moderada de citoplasma azul oscuro con zonas perinucleares claras, son plasmocitos. Las células restantes son principalmente precursores de granulocitos. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

Osteoclasto Pocas veces se encuentran osteoblastos en frotis de medula ósea. Los osteoblastos son similares en tamaño a los megacariocitos y estos dos tipos de células se confunden a menudo (figura 1.12). Los osteoblastos tienen núcleos múltiples individuales, redondos u ovales. En cambio, el núcleo del megacariocito maduro es multilobulado. El citoplasma del osteoclasto es granular y su color es azul claro o rojo.

HEMATOPOYESIS

9

Osteoblasto

Mastocito

Pueden encontrarse pequeñas cantidades de osteoblastos en la medula ósea normal. El tamaño de dichas células es muy similar al del macrófago y la morfología es algo similar a la del plasmocito, incluido un núcleo redondo situado excéntricamente y una zona clara perinuclear destacada (figura 1.13). El núcleo tiene una cromatina granular, normalmente con un único nucléolo prominente. El citoplasma es azul claro. Por el contrario, el plasmocito es mas pequeño de tamaño y la cromatina nuclear es mucho mas condensada sin ningún nucléolo prominente.

Los mastocitos pueden aparecer en cantidades muy pequeñas en la medula ósea. Estas células son redondas con un núcleo redondo situado en el centro (figura 1.14). Estas células se reconocen fácilmente por los gránulos pequeños de color purpura que llenan el citoplasma. A menudo en dichas células la granularidad es tan grande que llega a esconder el núcleo. Los mastocitos aparecen a menudo en partículas intactas de medula ósea.

Figura 1.11. Macrófago. La célula grande (centro derecha) con citoplasma abundante lleno de vacuolas y un núcleo redondo es un macrófago. Los gránulos rojizo-pardos del citoplasma son compatibles con hemosiderina. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

Figura 1.13. Osteoblastos. Las células nucleadas con abundante citoplasma azul (centro) que forman un circulo son osteoblastos. Estas células se parecen a los plasmocitos: sin embargo, son mas grandes que los plasmocitos y la cromatina nuclear es menos gruesa. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

Figura 1.12. Osteoclasto. La célula muy grande (centro) con múltiples núcleos individuales, redondos u ovalados y citoplasma granular es un osteoclasto. La gran área clara en el cuadrante inferior derecho es una gota de grasa, que esta dentando parcialmente el osteoclasto. Frotis de medula ósea canina. Objetivo 50x.

Figura 1.14. Mastocito. La célula (centro) con abundantes gránulos citoplasmáticos de color purpura es un mastocito. Los gránulos casi oscurecen el núcleo redondo. Una gota de grasa (estructura redonda clara) esta dentando parcialmente el lado derecho de la célula. Frotis de medula ósea canina. Objetivo lOOx.

LAMINA 1. Desarrollo de los Eritrocitos Rubriblasto El rubriblasto es una célula grande y redonda con un núcleo grande y redondo., una cromatina gruesa granular y un nucleolo. Esta célula tiene pequeñas cantidades de citoplasma azul oscuro.

Prorubricito El prorubricito es una célula grande y redonda con un núcleo redondo con un tipo de cromatina gruesa granular. Esta célula carece normalmente de nucleolo. Hay una pequeña cantidad de citoplasma azul oscuro y, a menudo, una zona clara perinuclear destacada.

Rubricito El rubricito es una célula redonda con un núcleo redondo situado en el centro; es más pequeña que el prorubricito. La cromatina gruesa granular es mas condensada en comparación con las primeras fases de desarrollo y aparecen áreas claras irregulares entre los grumos de cromatina. El citoplasma varía del azul oscuro al azul-rojizo. Los primeros rubricitos, normalmente tienen un citoplasma mas azulado, y los últimos rubricitos se tiñen de forma mas rojiza al aumentar la cantidad de hemoglobina.

Metarubricito El metarubricito es más pequeño que el rubricito. El núcleo es redondo a oval, normalmente situado ligeramente excéntrico, y tiene una cromatina muy condensada. Hay cantidades pequeñas a moderadas de citoplasma azul o azul-rojizo. Los metarubricito, con citoplasma más rojizo contienen más hemoglobina.

Policromatofilo El policromatofilo no tiene núcleo y el citoplasma es azul o azul-rojizo. A medida que el policromatofilo madura se vuelve menos azul y mas rojizo a causa de las cantidades mayores de hemoglobina.

Eritrocito El eritrocito no tiene núcleo y el citoplasma es rojizo o rojizo-anaranjado. La palidez central que aparece aquí es debida a la forma discoidal bicóncava de las células.

10

LAMINA 2 Desarrollo de los Leucocitos Mieloblasto El mieloblasto es una célula grande, redonda u oval con un núcleo redondo u oval con un tipo de cromatina finamente punteada y normalmente con un nucleolo destacado o nucleolos múltiples. Hay una cantidad pequeña o moderada de citoplasma azul y ningún granulo citoplasmático destacado. Promielocito El promielocito es una célula grande, redonda u oval, con un núcleo redondo u oval. El tipo de cromatina nuclear es finamente granular. Puede aparecer o no un nucleolo o nucleolos múltiples. A menudo aparece una zona perinuclear clara pero en este caso no. La cantidad moderada de citoplasma es azul y contiene múltiples gránulos finos de color rosa o purpura que son gránulos primarios. Mielocito neutrofilo El mielocito neutrofilo es una célula redonda más pequeña que el mieloblasto y el progranulocito. El núcleo es redondo u oval y puede contener una única muesca. El tipo de cromatina es finamente o moderadamente granular. No aparecen nucleolos. Las cantidades moderadas de citoplasma azul contienen múltiples gránulos secundarios, llamados también gránulos específicos. Estos gránulos secundarios son de color rosa para la línea de los neutrofilos y resultan difíciles de ver. Los gránulos secundarios para la línea de los eosinofilos y basofilos son generalmente rojizos y purpúreos, respectivamente.

Metamielocito neutrófilos El metamielocito neutrófilos es una célula redonda con un núcleo en forma de riñón. La cromatina es moderadamente granular y mas condensada que la del mielocito. Las cantidades moderadas de citoplasma azul contienen gránulos secundarios que son difíciles de ver. Los gránulos secundarios de los metamielocitos eosinofilos y basofilos son normalmente rojizos y purpura, respectivamente.

Neutrofilo en banda El neutrófilos en banda es una célula redonda con un núcleo en forma de herradura. Las membranas del núcleo pueden tener lados paralelos aunque pueden aceptarse ligeras muescas. El citoplasma es azul o azul claro y contiene gránulos secundarios. Estos gránulos son difíciles de ver en el neutrófilos en banda. Los gránulos secundarios del eosinofilo en banda y del basofilo en banda son generalmente rojizos y purpúreos, respectivamente.

Neutrofilo segmentado El neutrófilos segmentado es una célula pequeña, redonda, con un núcleo único que tiene múltiples segmentaciones. La cromatina nuclear esta muy condensada. Existe una cantidad moderada de citoplasma azul claro o rosa.

11

CAPITULO DOS

MORFOLOGIA NORMAL DEL ERITROCITO Los rasgos morfológicos de los eritrocitos maduros de perros, gatos, caballos y rumiantes son generalmente muy parecidos por lo que se refiere a la ausencia de nucleos, la coloración rojiza o rojizo-anaranjada y el hecho que sean generalmente células con forma discoidal bicóncava. Las mayores diferencias se encuentran en el tamaño de los eritrocitos y el grado de palidez central. Clasificados de mayor a menor tamaño están los eritrocitos de perro, gato, caballo, vaca, oveja y cabra. La palidez central es el área de coloración mas clara en el centro de la célula, debida a una estrecha asociacion de las membranas en esa parte (figura 2.1). Los eritrocito de perro tienen la palidez central más destacada. En gatos, caballos y rumiantes la palidez central no destaca. A diferencia de lo que ocurre en otras especies do-mesticas, los eritrocitos de las llamas sanas son bastante diferentes morfológicamente. Aunque carezcan de núcleos y se tifian de rojo o rojo-anaranjado, son pequeños discos elípticos que carecen de forma bicóncava y de palidez central. La tabla 2.1 resume los rasgos morfológicos y las figuras 2.2-2.8 muestran microfotografías de eritrocitos normales de las especies domesticas comunes. Otros dos rasgos morfológicos que pueden presentarse en animales sanos son las pilas de moneda y la anisocitosis. Las pilas de moneda son filas de eritrocitos apilados uno encima de otro (figura 3.8). Este cambio puede observarse mejor en áreas más gruesas de frotis de sangre, conocidas como el cuerpo central de la preparacion. Las pilas de moneda sobresalen especialmen-te en caballos sanos, pero aparecen también en gatos, y en mucha menos escala en perros. La formación de pilas de moneda tiene que ver con las diferencias de cargas en la superficie del eritrocito, de forma que cambios en estas cargas pueden originar un aumento de la formación de pilas de moneda. En una enfermedad inflamatoria, existen, a menudo, niveles altos de globulinas en la sangre que se traducen en cambios de las cargas de proteína, y de este modo aumenta la formación de pilas de moneda en la mayoría de los animales. En las llamas y la especie bovina, hay generalmente una ausencia de pilas de moneda en estados sanos y de enfermedad. La anisocitosis se define como una varia-don del tamaño de los eritrocitos. La anisocitosis apare-ce principalmente en gatos y vacas sanas (figuras 2.3 y 2.5).

Figura 2.1. Representación grafica de un eritrocito de un perro sano. Observe que la zona de palidez central se debe a una estrecha aposicion de las membranas y a una cantidad disminuida de hemoglobina en esta zona.

Tabla 2.1 Rasgos morfológicos de eritrocitos normales

Fuente: Adaptado de Jain, Nemi C. 1986. Schalm's Veterinary Hematology, 4r edition. Philadelphia: Lea & Febiger. * Puesto que estas células no son redondas, se.especifica la anchuura y la longitud aproximadas de las células.

13

Figura 2.2. Eritrocitos caninos. La mayoría de las células son de tamaño similar y tienen una palidez central destacada. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 2.5. Eritrocitos de vaca. Existe una ligera variación en el tamaño de estas células (anisocitosis) y tienen normalmente una palidez central limitada. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 2.3. Eritrocitos felinos. Estas células son más pequeñas que los eritrocitos de perro, existe una ligera variación de tamaño (anisocitosis) y tienen una palidez central limitada. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 2.6. Eritrocitos de oveja. Observe el tamaño muy pequeño de estas células, al compararlo con los eritrocitos del perro, y su palidez central limitada. Existe también una ligera variación de tamaño (anisocitosis) y forma (poiquilocitosis) en estas células. Frotis de sangre ovina; objetivo lOOx.

Figura 2.4. Eritrocitos de caballo. Estas células son más pequeñas que los eritrocitos de perro y tienen una palidez central mínima. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 2.7. Eritrocitos de cabra. Obsérvese el tamaño extremadamente pequeño de las células y la palidez central mínima. Es también normal que se produzcan ligeras Variaciones de tamaño (anisocitosis) y forma (poiquilocitosis). Frotis de sangre de cabra; objetivo lOOx.

Figura 2.8. Eritrocitos de llama. Estas células son elípticas y carecen de palidez central. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO TRES

VARIACIONES DE LA MORFOLOGÍA DEL ERITROCITO Las Variaciones de la morfología de los eritrocitos pueden producirse en animales con varias enfermedades y estados fisiopatologicos. Para comprender mejor el desarrollo de estos cambios, se agruparan en cinco categorias: rasgos morfológicos asociados a (1) una respuesta regenerativa, (2) danos inmunomediados, (3) oxidativa, (4) trastornos de membrana / metabólicos, y (5) fragmentación mecánica. Estas categorías no se excluyen mutuamente y los rasgos morfológicos descritos en una categoría pueden encontrarse en múltiples estados fisiológicos o de enfermedad. Se mencionan los estados fisiológicos o de enfermedad mas comunes en los que se observan estos tipos de células, pero estas listas no pretenden ser exhaustivas. Estos cambios se demostraran a menudo mediante microfotografías de frotis de sangre canina, pero la mayoría de estas anormalidades ocurren también en otras especies. Un termino utilizado para describir variaciones en la morfología de los eritrocitos es la poiquilocitosis, que se define como la presencia de eritrocitos de forma anormal en la circulación. Si se puede subclasificar el cambio morfológico presente mediante la utilización de un termino mas especifico, dicho termino debería utilizarse.

Metileno, los policromatofilos se llaman reticulocitos (figura 3.2), y se teñirán de verde-azulado, a medida que maduren los eritrocitos. Además, los policromatofilos tendrán estructuras irregulares en forma de red, conocidas como retículo, dentro de las células. El retículo consiste en grumos irregulares de RNA ribosomal y organelas, tales como las mitocondrias. En la mayoría de las especies existe un único tipo de meticulosito. Sin embargo, en los gatos hay dos tipos de reticulocitos: punctata y agregata (figura 3.3). Los reticulocitos con agregaciones tienen abundante retículo, mientras que los reticulocitos con puntos tienen únicamente unos-cuan-tos puntos de retículo aislados que no se unen. Además de encontrar policromatofilos, otros rasgos que pueden observarse en las anemias regenerativas son los eritrocitos nucleados, el punteado basofilo, la anisocitosis y los cuerpos de Howell-Jolly. No esta absolutamente clara la razón de que los eritrocitos nucleados (figura 3.4) se encuentren en la circulación durante una respuesta regenerativa. Es posible que dichas células se liberen debido a un leve daño estructural de la medula ósea o debido a una demanda mayor de eritrocitos. Cuando la demanda de eritrocitos es grande, la producción se produce en puntos extramedulares tales como el hígado y el bazo, con la emisión potencial subsiguiente a la circulación de eritrocitos nucleados. Cuando los eritrocitos nucleados aparecen sin la presencia de la policromasia adecuada, es posible que exista un daño subyacente en la medula ósea. Un ejemplo clásico de este caso lo ofrece la intoxicación de animales por plomo. El punteado basofilo aparece (figura 3.5) en las preparaciones efectuadas con colorante de Wright, bajo la forma de pequeños puntos azules de tamaño variado en el citoplasma de los eritrocitos. En la mayoría de los casos los puntos son RNA retenido y aparecen normalmente durante la respuesta regenerativa en los rumiantes, pero pueden hacerlo durante la regeneración en otras especies. El punteado basofilo aparece en la intoxicación por plomo puesto que el plomo inhibe una enzima que es importante en la degradación del RNA. Se ha definido previamente la anisocitosis que aparece en la respuesta regenerativa, debido normalmente a la presenta de grandes policromatofilos. Los cuerpos de Howell-Jolly (figura 3.4) son fragmentos restantes de material nuclear presente en los eritrocitos. Su presencia durante una respuesta regenerativa se debe probablemente a la incapacidad de los macrófagos

RESPUESTA REGENERATIVA Las anemias pueden clasificarse en dos categorías principales: no regenerativas y regenerativas. Una anemia no regenerativa se debe a la producción inadecuada de eritrocitos por la medula ósea; los eritrocitos presentes en la circulación a menudo aparecen normales. Por el contrario, una anemia regenerativa es aquella en la que la medula ósea ha respondido a una demanda de eritrocitos produciendo y enviando a la circulación cantidades adecuadas de eritrocitos inmaduros conocidos como policromatofilos (figura 3.1). Estas células tienen un tito-plasma azulado o azul-rojizo y son normalmente un poco más grandes que los eritrocitos maduros. Asimismo, debido a la mayor flexibilidad de dichas células, no siempre adoptan la clásica forma discoidal sino que pueden tener múltiples repliegues interiores y exteriores de las membranas y por ello aparecen como células diana o de barra, que se describen a continuación. Aunque los cromatofilos pueden identificarse en preparaciones realizadas con la tincion de Wright debido a su coloración azulada, pueden identificarse con facilidad tiñiendo una muestra de sangre con nuevo azul de metileno. En las preparaciones teñidas con nuevo azul de 17

18

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Figura 3.1. Policromatofilos. Los eritrocitos de tinte azulado, normalmente mas grandes, son policromatofilos. En la mayoría de los animales, excepto los caballos, los policromatofilos aparecen en gran cantidad en la circulación durante una anemia regenerativa. Ademas, hay una ligera poiquilocitosis y se observan células diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.3. Reticulocitos agregata y punctata. Las dos células (centro izquierda) con material granular agrupado de color azul oscuro en el citoplasma son reticulocitos agregata. Las células con un unico o múltiples puntos pequeños de material azulado son reticulocitos punctata. Las células sin retículo son eritrocitos maduros.. Frotis de sangre felina; tinción de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

Figura 3.2. Reticulocitos. Las cuatro células con material granular agrupado (retículo) de color azul oscuro en el citoplasma son reticulocitos. Las células sin retículo son eritrocitos maduros. Frotis de sangre canina; tinción de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

Figura 3.4. Eritrocitos nucleados y cuerpos de Howell-Jolly. La celula ligeramente azul con un núcleo redondo y cromatina condensada es un eritrocito nucleado (metarubricito). Dos eritrocitos adyacentes tienen Inclusiones citoplasmáticas linicas, pequeñas, redondas y de color purpura; son cuerpos de Howell-Jolly, que son fragmentos de los núcleos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx. .

para eliminar completamente los núcleos de los eritrocitos maduros durante la produccion acelerada. Si los cuerpos de Howell-Jolly aparecen con una falta de policromasia adecuada, entonces debería considerarse

un descenso de los macrófagos, especialmente la funcion macrofagica esplénica. Un animal sano que haya sido esplenectomizado tendra, a menudo., cuerpos de Howell-Jolly en la circulación.

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

19

central significativa en sus eritrocitos normales. Los esferocitos pueden aparecer en cantidades reducidas también cuando existe un daño no inmunomediado en los eritrocitos. La aglutinación (figura 3.7) es una agregación tridimensional desorganizada de eritrocitos, formada normalmente a causa de una interconexión de anticuerpos asociados a la superficie de los eritrocitos. Se ha observado la aglutinación en caballos que estaban siendo tratados con heparina. La aglutinación puede observarse tanto macroscópicamente como microscópicamente y no debe confundirse con la formación de pilas de monedas (figura 3.8) que esta relacionada con las cargas de los eritrocitos. Figura 3.5. Punteado basofilo. El eritrocito (centro) con pequeños puntos múltiples azules es un eritrocito con punteado basofilo. Los tres eritrocitos grandes de tinte azulado son policromatofilos. Hay también Una anisocitosis moderada. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

DAÑO INMUNOMEDIADO Las anormalidades morfológicas de los eritrocitos asodados con procesos inmunomediados dirigidos a los eritrocitos dan como resultado la posibilidad de encontrar esferocitos, aglutinación y células fantasmas. Los esferocitos (figura 3.6) se forman cuando los macrófagos eliminan, pardalmente, anticuerpos unidos a las membranas. A causa de la perdida de la membrana, estas células no pueden retener por mas tiempo su forma discoidal normal y por ello se produce una forma esferica con una falta de palidez central. Estas células se reconocen fácilmente en perros. Los esferocitos son difíciles de reconocer en otras especies debido a la falta de palidez

Figura 3.6. Esferocitos. Las células más pequeñas que carecen de palidez central son esferocitos. Estas células pueden aparecer en cantidades relativamente elevadas en animales con anemia hemolítica inmunomediada. Aparece también un policromatofilo (centro) y un eritrocito (abajo a la derecha) con un cuerpo de HowellJolly. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.7. Aglutinación. Existen varios racimos irregulares de eritrocitos; se trata de una aglutinación. Aparecen por todo el campo, pero hay tres grumos grandes presentes (centro). La aglutinación puede verse en animales con anemia inmunomediada. Frotis de Sangre equina; objetivo 50x.

Figura 3.8. Pilas de monedas. Las cadenas lineales y a veces ramificadas de eritrocitos constituyen las pilas de monedas. En condiciones normales, se detecta de manera mas destacada en caballos; sin embargo, pueden verse pilas de monedas asociadas con enfermedades inflamatorias en la mayor parte de las especies. Frotis de sangre equina; objetivo 50x.

20

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Figura 3.9. Células fantasmas. Los cuatro eritrocitos muy pálidos y pequeños son células fantasmas. Indican una hemolisis intravascular. También son visibles esferocitos, policromatofilos con un gran corpusculo de Howell-Jolly. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.11. Cuerpos de Heinz. El eritrocito (doble flecha) tiene una pequeña protuberancia redondeada en la superficie en la posicion de las 5 de la tarde que es un cuerpo de Heinz. Muchos de los eritrocitos tienen, asimismo, pequeñas estructuras redondas claras en su superficie (flecha) que son también cuerpos de Heinz. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Las células fantasma (figura 3.9), son membranas residuales de eritrocitos que han experimentado una lisis intravascular. Esta lisis puede inducirse añadiendo anticuerpos y complementos a la membrana del eritrocito así como otros mecanismos no inmunitarios.

LESIÓN OXIDATIVA La oxidación de eritrocitos puede producirse en algunos estados de enfermedad, así como con la exposición a algunos fármacos. Esta oxidación y desnaturalización de la hemoglobina en eritrocitos origina la formación de protuberandas en la membrana de los eritrocitos que son a menudo refractiles; se las conoce como cuerpos de Heinz (figuras 3.10 y 3.11) Si los cuerpos Heinz son gran-des, pueden observarse con facilidad en los frotis teñiFigura 3.12. Cuerpos de Heinz. El eritrocito (centra) tiene un cuerpo de Heinz que es la pequeña protuberancia redondeada y de color azul verde claro que hay en la superficie en la position de mediodia. Muchos de los eritrocitos del campo tienen también cuerpos de Heinz, sencillos o a veces múltiples. Aparece también un reticulocito agregata (centro derecha). Frotis de sangre felina; tinción de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

Figura 3.10. Cuerpos de Heinz. Las protuberancias pequeñas redondeadas de la superficie de los eritrocitos (centro) son cuerpos de Heinz. Representan la oxidación y desnaturalización de la hemoglobina. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

dos con la tinción de Wright. Estas estructuras pueden también identificarse utilizando frotis teñidos con nuevo azul de metileno, en las que se colorean de un azulverde claro (figura 3.12). Los cuerpos Heinz se observan con más regularidad en gatos. Otro tipo de célula que aparece a veces en la exposición a los oxidantes es el excentrocito (figura 3.13). Estas células tienen áreas claras de forma de media luna situadas excéntricamente. Esta área clara indica donde las membranas de la célula están estrechamente yuxtapuestas y posiblemente enlazadas debido al dafto de la membrana inducido por el oxidante.

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Figura 3.13. Excentrocitos. Los cuatro eritrocitos (centro) con áreas claras perifericas y hemoglobina desplazada son excentrocitos. Otros están situados en la periferia del campo. Representan la oxidacion de las membranas de los eritrocitos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

21

deros equinocitos se producen asociados a diversos tras-tornos metabólicos tales como las enfermedades renales. Para distinguir los verdaderos equinocitos de la crenacion, hay que extraer y fijar inmediatamente la sangre antes de exponerla al cristal o a un anticoagulante. Las células erizo (figura 3.15) tienen protuberandas múltiples similares a los equinocitos pero son ovales o alargadas. Las células erizo pueden observarse en animales con enfermedades renales. Al contrario de los equinocitos, los acantocitos (figura 3.16), son células con protuberancias múltiples, romas, de forma irregular (de 2 a 10), con aspecto de dedo. Estas células se deben a las alteraciones en la relacion de colesterol y fosfolipidos en las membranas del eritrocito. Los acantocitos se observan normalmente en anima-

TRASTORNOS METABÓLICOS / DE MEMBRANA La exposición de eritrocitos a distintos entornos, tanto in vitro como in vivo, puede originar Variaciones morfológicas de la forma discoidal normal. Una de las Variaciones más comunes observadas es el equinocito. Los equinocitos son células con múltiples puas pequeñas, delicadas, de forma regular distribuidas de modo uniforme alrededor de la membrana del eritrocito. La causa mas común de la presenta de equinocitos es un artefacto in vitro, la crenacion (figura 3.14) que necesita diferenciarse de los verdaderos equinocitos. Los verda-

Figura 3.14. Equinocitos. La mayoría de los eritrocitos tienen pequefias puas uniformes que sobresalen de la superficie. Se trata de equinocitos. La causa mas común de la formación de equinocitos es un artefacto in vitro conocido como crenacion. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.15. Células erizo. Los eritrocitos alargados con múltiples protuberandas cortas y romas en la superficie son células erizo. Estas células pueden observarse en animales con enfermedad renal. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 3.16. Acantocitos. Observe los eritrocitos con múltiples protuberandas de forma irregular en la superficie. Esta anormalidad va asociada a alteraciones de la relación de colesterol y fosfolipidos en la membrana. Estas células pueden observarse en animales con enfermedad hepática. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

22

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

les con enfermedad.es hepáticas y a menudo se detectan en perros con hemangiosarcoma; pueden ser debidos a un trastorno neoplasico del hígado o a una fragmentacion inusual debida a la tortuosidad del sistema vascular neoplasico. Los Acantocitos pueden observarse también asociados con anormalidades lipidicas inducidas por disfunciones renales. Los queratocitos (figura 3.17) son células con dos protuberancias bastante uniformes parecidas a cuernos. Se cree que surgen de un área localizada y definida de la membrana del eritrocito en la cual se forma una vacuola o una "ampolla" que se rompe mas tarde. Las células con estructuras de membrana semejantes a una ampolla que permanecen intactas se conocen normalmente con el nombre de células de ampolla (figura 3.18). Existen varios cambios morfológicos potencialmente significativos asociados con los cambios en la zona de palidez central. Dos tipos de células que originan una acentuación de la palidez central son las células hipocromicas y los torocitos. En las células hipocromicas (figuras 3.19 y 3.20), hay un incremento de la palidez central, y las células se tifien de un rojo mas claro debido a una cantidad reducida de hemoglobina. Como sucede con los eritrocitos normales existe una transición gradual en las células entre las zonas exteriores que tienen un tinte más denso y la zona central de palidez. Las células hipocromicas aparecen en animales con carencias de hierro, ya que el hierro es necesario para la síntesis normal de la hemoglobina. Por el contrario, en los torocitos (figura 3.21), aunque exista una palidez central acentuada, el diámetro de la zona de palidez central normalmente no es tan grande como el de las células hipocromicas, la densidad en conjunto de la coloración roja de la célula es normal y existe una transición brusca

Figura 3.17. Queratocito. La célula con dos protuberancias con aspecto de cuernos (centra) es un queratocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 3.18. Célula de ampolla. La célula con un trozo fino de membrana sobresaliendo de la superficie (centra) es una célula de ampolla. Esta "ampolla" a veces se rompe para formar un queratocito. Aparecen también células hipocromicas. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Entre las zonas exterior y central de la célula. Los torocitos se conocen también con el nombre más popular de células perforadas y son normalmente artefactos de la preparación. Los estomatocitos (figura 3.22) son células cuya palidez central es mas oval o alargada y toma el aspecto de una boca. Si estas células se evalúan en preparaciones de base húmeda, parece que se doblen sobre si mismas en una dirección. Los estomacitos han sido observados en animales con defectos metabólicos de membrana de los eritrocitos, pero pueden aparecer también como artefactos de preparación en áreas mas gruesas de la mis-ma.

Figura 3.19. Células hipocromicas. Aparecen varias células hipocromicas en todo el campo que tienen una palidez central acentuada así como membranas celulares débilmente coloreadas. Este cambio se asocia a menudo con la carencia de hierro. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Figura 3.20. Células hipocromicas. La mayoría de las células que tienen palidez central son células hipocromicas. Observamos una serie de eritrocitos normales de llama que carecen normalmente de palidez central. Este cambio va asociado a menudo a la carencia de hierro. La forma fusiforme de algunas células es un rasgo común adicional en las llamas con carencia de hierro. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

23

Figura 3.22. Estomatocitos. La célula un tanto oval con una palidez central lineal (centro) es un estomatocitos. Aparecen también mu-chas células diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.23. Ovalocitos. Los eritrocitos ovales presentes son ovalocitos. Aparecen en animales con defectos en la membrana del eritrocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx. Figura 3.21. Torocito. La mayoría de las células en el campo son torocitos, conocidos normalmente como células perforadas. Estas células tienen una palidez central destacada con una transición brusca desde el centra pálido hasta la zona exterior de la célula. Pueden parecer mas pequeñas que los eritrocitos normales. La morfologia del Torocito es normalmente un artefacto que aparece como consecuencia de una dispersión anormal de las células en la preparación. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx

Los ovalocitos (figura 3.23), conocidos también como eliptocitos, son células ovales con una zona oval de palidez central. Aparecen en animales con defectos en la membrana del eritrocito. Los leptocitos son células que son mas grandes que los eritrocitos normales maduros y tienen la membrana demasiado delgada que tiende a doblarse fácilmente. Dos tipos de leptocitos incluyen las células diana y las células de barra.

Las células diana (figura 3.24), conocidas también como codocitos, tienen un pliegue redondo exterior de la membrana en mitad de la célula que da a esta el aspecto de diana. Debido a que los policromatofilos son a menudo muy flexibles, suelen tomar el aspecto de una célula diana. La morfología de la célula diana puede considerarse como un cambio no especifico, pero se produce en cantidades elevadas en eritrocitos maduros y debería considerarse la investigación de una posible enfermedad hepática. Las células de barra (figura 3.25), conocidas también como "knizotitos", tienen un pliegue central exterior de la membrana en forma de barra. Las células de barra aparecen a menudo en situaciones similares a las de las células diana.

24

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Estos filamentos pueden escindir los eritrocitos en dos o mas trozos de forma irregular mientras las células atraviesan el sistema vascular. Un estado fisiopatologico frecuente en el cual estos cambios pueden observarse es la coagulacion intravascular diseminada. Los dacriocitos (figura 3.27) son eritrocitos con forma de lagrima. No esta nada claro el proceso de formacion de dichas células, pero este cambio puede representar un tipo de fragmentacion. Pueden observarse en animales con mielofibrosis.

Figura 3.24. Células diana. Muchos de los eritrocitos con aspecto de diana son células diana, conocidas también como codocitos. El área central de las células que se tiñe representa un pliegue exterior de la membrana del eritrocito en esta zona. Estas células aparecen en animales con enfermedades hepáticas o con reticulocitosis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.26. Esquistocitos. El eritrocito de forma irregular (centro) es un esquistocitos, o un fragmento de eritrocito. Hay dos esquistocitos muy pequeños en el cuadrante inferior derecho. Aparecen dos fragmentos mucho mas grandes (parte superior izquierda). Este cambio se relaciona con el daño mecánico del eritrocito. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.25. Célula de barra. La célula (centro) con una porción de membrana con forma de barra biseccionado el área de palidez central es una célula de barra, conocida también como "knizodto". El cambio representa un repliegue exterior de la membrana del eritrocito similar al cambio que se produce en muchas células diana en este campo. Frotis de sangre de canina; objetivo lOOx.

FRAGMENTACIÓN MECÁNICA Los esquistocitos (figura 3.26), conocidos también como "esquizodtos", son fragmentos de eritrocitos. Estos fragmentos surgen del deterioro mecánico de los eritrocitos en la circulación, a menudo debido a anormalidades microvasculares. Una de las anormalidades mas comunes que lleva a la formación de esquistocitos es la presencia de redes de fibrina en el sistema microvascular.

Figura 3.27. Dacriocito. El eritrocito con forma de lagrima (centro) es un dacriocito. Estas células pueden observarse en animales con mielofibrosis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

CAPITULO CUATRO

INCLUSIONES Y PARÁSITOS ERITROCITARIOS Al evaluar los eritrocitos con relación a Inclusiones o parásitos, existen varias estructuras normales y artefactos que confunden, a menudo, los hematólogos con poca experiencia. Algunas de estas estructuras, que fueron definidas en el capitulo tercero, se revisan aquí brevemente. Uno de los artefactos mas comunes que se confunde con parásitos e inclusiones de los eritrocitos es el precipitado de colorante (figura 4.1), que se presenta como un pequeño material granular, de tamaño variable y de color rosa o purpura. Puede aparecer a menudo en eritrocitos así como en el fondo de una preparación; esta generalmente en un piano diferente de enfoque al de los eritrocitos. Esta distribución y la variedad de tamaños ayuda a diferenciar el precipitado de colorante de los verdaderos parásitos del eritrocito. En cambio, el punteado basofilo (agregaciones de KNA retenidas) (figura 4.2) se presenta como gránulos múltiples muy pequeños y redondos de color azul en el citoplasma del eritrocito. Como se indica en el capitulo tercero, este material lo forman en general agregaciones de RNA retenidas en la célula. Resulta difícil distinguir el punteado basofilo de los cuerpos de Pappenheimer, que son pequeños gránulos azules en los eritrocitos. Los cuerpos de Pappenheimer son agregados de hierro en los eritrocitos (figura 4.3). Los eritrocitos nucleados o anucleados que tienen cuerpos de Pappenheimer se conocen como siderocitos o sideroblastos, respectivamente. La única manera de confirmar la presencia de cuerpos de Pappenheimer es mediante la utilización de un coloran-

Figura 4.1. Precipitado de colorante. El material granular purpura de varios tamaños que aparece sobre y entre los eritrocitos es un precipitado de colorante. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.3. Cuerpos de Pappenheimer. Los gránulos pequeños de color azul pálido débilmente visibles, en algunos de los eritrocitos son cuerpos de Pappenheimer. Queda mejor demostrado en los tres eritrocitos que están en fila en el cuadrante inferior derecho. Estas inclusiones se deben a la acumulación de hierro. En cambio, el eritrocito del centro del campo contiene una pequeña estructura redonda de color purpura oscuro que es un cuerpo de HowellJolly. Frotis de sangre canina, revisión de diapositivas de la ASVCP de 1988, por cortesía de J. A. Matthews; objetivo lOOx.

Figura 4.2. Punteado basofilo. Varios eritrocitos tienen pequeños gránulos de color azul pálido y de varios tamaños que son conocidos como punteado basofilo. Queda mejor demostrado en los dos eritrocitos del cuadrante inferior izquierdo. Aparece un metarubricito en el cuadrante superior derecho. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

25

26 INCLUSIONES Y PARASITOS ERITROCITARIOS te especial como el azul de Prusia. Cuando aparecen pequeños gránulos azules en los eritrocitos, es mas probable que sean punteado basofilo que cuerpos de Pappenheimer. Otro artefacto que puede confundirse con parásitos eritrocitarios son los cuerpos refractiles de los eritrocitos. Su formación no esta nada clara. Este material puede tomar varias formas o tamaños pero puede confundirse con parásitos eritrocitarios cuando es de tamaño similar a organismos como Haemobartonella. El rasgo principal utilizado para distinguir este artefacto de un verdadero parasito es que estas estructuras tienen tamaños variados y son refractiles cuando el microscopio se enfoca arriba y abajo (figura 4.4). Finalmente, pueden aparecer plaquetas ocasionalmente superpuestas a los eritrocitos y uno puede creer que se trata de Inclusiones (figura 4.5). Comparando las plaquetas de la parte superior del eritrocito con las plaquetas que aparecen en el resto de la preparación, estas deberían distinguirse de las verdaderas Inclusiones o parásitos del eritrocito. Los cuerpos de Howell-Jolly (figura 4.6) son micronucleos residuales que aparecen en la mayoría de las especies domesticas durante una anemia regenerativa. Estas estructuras se tiñen de purpura oscuro y tienen aproximadamente 1 um de diámetro, aunque pueden ser mas grandes. Normalmente, aparece un único remanente nuclear en un eritrocito. En los rumiantes, los organismos como Anaplasma (figura 4.7) pueden parecer muy similares en tamaño, forma e intensidad de color a los cuerpos de Howell-Jolly. Afortunadamente, el tipo mas común de anaplasmosis se debe a Anaplasma marginale que, como su nombre indica, se encuentra a menudo en la periferia del eritrocito. Aunque los cuerpos de Howell-Jolly pueden aparecer en el margen de la

Figura 4.4. Artefacto refractil. Las estructuras brillantes sin color que aparecen en la superficie de los eritrocitos, redondos u ovales, o de forma irregular y tamaños varios, son artefactos refractiles. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

celula, la mayoría de estas estructuras, se distribuyen de manera mas fortuita en los eritrocitos. Además, en la anaplasmosis aparece, a menudo, mas de un organismo por celula mientras que con los cuerpos de Howell-Jolly, los micronucleos son normalmente únicos. Puesto que la anaplasmosis causa con frecuencia una anemia regenerativa, tanto Anaplasma como los cuerpos de HowellJolly pueden aparecer al mismo tiempo. Pueden aparecer Inclusiones víricas en los eritrocitos (figura 4.8) y en los leucocitos en perros con una infección vírica como el moquillo. Estas Inclusiones son muy variables en tamaño, pero normalmente son mucho mas grandes que los cuerpos de Howell-Jolly. Las inclusiones víricas pueden tener un diámetro de varias micras y

Figura 4.5. Pseudoinclusion en eritrocitos. Una plaqueta superpuesta al eritrocito aparece en el centro del campo. Observe los rasgos similares con las otras plaquetas. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 4.6. Cuerpos de Howell-Jolly. Cuatro eritrocitos tienen inclusiones simples citoplasmáticas pequeñas, redondas, de color purpura oscuro; se trata de cuerpos de Howell-Jolly, que son fragmentos nucleares. También aparecen celulas diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

INCLUSIONES Y PARASITOS ERITROCITARIOS 27 tienen formas muy variadas, redondas u oblongas. Normalmente se tiñen de color rosa o rojo, aunque también pueden ser Inclusiones mas azuladas. No existe ninguna estructura interna real, y la inclusión tiene a menudo una apariencia vítrea suave, pero puede ser granular. Se afirma a menudo que la tinción Diff-Quik® es la preferida para identificar inclusiones víricas. Los parásitos comunes en los eritrocitos caninos son Haemobartonella canis y Babesia canis. H. canis (figura 4.9)

es un parasito epicelular muy pequeño, con un diametro inferior a 1 um, y puede resultar difícil distinguirlo del artefacto de colorante. Tiene forma cocoidal o bacilar y aparece individualmente o en grupos en los eritrocitos. El organismo forma a menudo cadenas sobre la su-

perficie de los eritrocitos. La babesiosis es causada normalmente por Babesia canis (figura 4.10) y se la encuentra principalmente en el sudeste de los Estados Unidos, en América del Sur y América Central, en el sur de Europa, África, Asia y Australia. Este parasito grande, intracelular, de forma piriforme es fácil de reconocer aunque a menudo muy pocas celulas del frotis de sangre contienen organismos. Estos organismos tienen normalmente una anchura de 2.5 a 3 um y una longitud de 4 a 5 um. En la celula pueden aparecer múltiples organismos. B. gibsoni (Estados Unidos, sur de Europa, Asia) causa también enfermedades en perros y es normalmente un organismo mucho mas pequeño y redondo, oval o alargado.

Figura 4.7. Anaplasrm marginale. Las inclusiones citoplasmáticas simples o múltiples, redondas y de color purpura que aparecen en varios eritrocitos son Anaplasmn marginale. Observe que muchos de estos organismos aparecen en la periferia del eritrocito. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 4.9. Haemobartonella canis. Las pequeñísimas estructuras azules de forma cocoidal o bacilar que forman cadenas en varios eritrocitos son Haemobartonella canis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.8. Inclusiones víricas de moquillo. Las estructuras redondas de tamaños diferentes y de color rosa-rojizo que aparecen en cinco de los eritrocitos son inclusiones víricas de moquillo canino. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.10. Babesia canis. Hay dos organismos (Babesia canis) dentro del eritrocito en el centro del campo. Se trata de estructuras piriformes de color azul claro con cuerpos internos de color purpura pobremente definidos. Frotis de sangre canina; colorante DiffQuik®; objetivo lOOx.

28 INCLUSIONES Y PARASLTOS ERITROCITARIOS El parasito mas común del eritrocito de los gatos es Haemobartonella felis (figura 4.11). Este pequeño organismo epicelular de forma cocoidal o bacilar es similar morfologicamente a H. canis. Además, aparecen también formas de anillo. Como sucede con H. canis, puede resultar difícil distinguir H. felis de los precipitados de colorante. Requiere un frotis de sangre de buena calidad, bien teñido, para una identificación precisa. La unión con organismos del exterior de la celula no es muy fuerte, y así los organismos pueden separarse fácilmente. Si se produce una demora en hacer un frotis de sangre recogida con EDTA y secado al aire, los organismos pueden observarse en el fondo de la preparación y no en los eritrocitos. Cytauxzoon felis (figura 4.12) es otro parasito del eritrocito felino Es a menudo de color azul y oval (de 1 a 5 um de diámetro) con una región central clara. A menudo se encuentra en un extremo del ovalo un núcleo purpura, dando al organismo el aspecto de un anillo de sello. Algunos organismos tienen cuerpos de cromatina en ambos extremos, dándole un aspecto de imperdible. Normalmente, estos organismos aparecen en la sangre en cantidades reducidas. La mayoría de los casos se consignaron en Missouri, en el Sur de los Estados Unidos, en América del Sur y América Central, En los rumiantes, Anaplasma (Estados Unidos y áreas tropicales) y Babesia (Norte y Oeste de Europa) son los parásitos mas comunes del eritrocito. En el ganado, la anaplasmosis es a menudo causada por Anaplasma marginale (figura 4.7). Estos organismos miden aproximadamente 1 um de diámetro, tienen forma cocoide, se tiñen de purpura oscuro y se encuentran localizados a menudo en la periferia de los eritrocitos; en cada eritrocito pueden aparecer uno o varios organismos. Como se especifica mas arriba, se debe distinguir estos organismos de los cuerpos de Howell-Jolly. En un animal infectado, muchos eritrocitos pueden contener normalmente el parasito.

Figura 4.11. Haemobartonella felis. Muchos de los eritrocitos tienen pequeños organismos azules simples o múltiples, de forma cocoidal, bacilar o de anillo en su superficie. Estos organismos son Haemobartonella felis. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Otro parasito de los rumiantes, así como de las llamas, es Eperythrozoon (figura 4.13). £. wenyoni (Estados Unidos y África) es un organismo que normalmente infecta al ganado vacuno; E. ovis afecta a las ovejas en todo el mundo. En cuanto a las llamas el numero exacto de especies del organismo no se ha determinado. Tanto en el ganado vacuno como en las llamas, los organismos se asemejan a Haemobartonella felis. Estos organismos pueden aparecer como organismos de forma cocoidal, bacilar o de anillo en la superficie del eritrocito. Miden aproximadamente 0,5 um de diámetro. Aparecen a menudo múltiples organismos en los eritrocitos, y también pueden aparecer en el fondo de la preparación.

Figura 4.12. Cytauxzoon felis. Tres eritrocitos del centra del campo tienen anillos azules, con un único núcleo purpura situado excentricamente. Estos organismos son Cytauxzoon felis. También aparecen unos cuantos eritrocitos adicionales con organismos menos perceptibles. Frotis de sangre felina, cortesía de G.D. Boon; objetivo lOOx.

Figura 4.13. Eperythrozoon. Los pequeños organismos azules, simples o múltiples, con forma cocoidal, bacilar o de anillo de la superficie de estos eritrocitos son Eperythrozoom. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO CINCO

MORFOLOGÍA NORMAL DEL LEUCOCITO NEUTROFILO SEGMENTADO

males pueden tener linfocitos medianos o grandes. Esto sucede especialmente con los rumiantes. A menudo estas células tienen mas citoplasma que los linfocitos pequeños. Además, la cromatina de los núcleos de los rumiantes es a menudo mucho mas acentuada con áreas marcadas de condensación algunas veces. Esto puede provocar la conclusión errónea de que los nucléolos aparecen en dichas células.

Los neutrófilos segmentados son los leucocitos mas comunes en la sangre periferica de todas las especies domesticas comunes, excepto los rumiantes. Los neutrófilos segmentados tienen normalmente un diámetro de 10 a 12 um y tienen un solo núcleo con varias muescas que son el resultado de la división del núcleo en múltiples lóbulos. Normalmente, hay de 3 a 5 lóbulos o segmentos por célula. El tipo de cromatina del núcleo consiste en áreas muy oscuras y condensadas entremezcladas con pequeñas áreas claras. El citoplasma se tiñe ligeramente de azul o rosa según el tipo y la calidad de la tinción utilizada. A veces, en el citoplasma pueden aparecer gránulos rosados confusos. Los neutrófilos de las distintas especies son similares. La principal excepción es que el citoplasma de los neutrófilos bovinos se tiñe a menudo de un rosa mas intenso en comparacion con el de otras especies. Asimismo, en los caballos los segmentos del raideo no suelen ser muy perceptibles.

MONOCITO Los monocitos están ausentes o presentes en cantidades reducidas en la sangre periférica y son muy similares en todas las especies domesticas comunes. Estas células tienen normalmente un diámetro de 15 a 20 |im, y los núcleos pueden tener formas diversas: ovales, ovales con una única muesca (forma de riñon), o con muescas múltiples y lóbulos. La cromatina nuclear tiene un aspecto finamente granular o en forma de encaje con solo unas pocas áreas de condensación. La cantidad moderada de citoplasma es normalmente azul-gris y puede tener vacuolas múltiples discretas de varios tamaños.

NEUTROFILO EN BANDA Los neutrófilos en banda en la sangre periférica pueden aparecer o no en cantidades reducidas. Los neutrófilos en banda se parecen a los neutrófilos segmentados excepto en que los núcleos tienen forma de banda. Clasicamente, las membranas del núcleo son paralelas de manera que el núcleo tiene una anchura constante. Debido a que los neutrófilos en banda son un estado de la diferenciación gradual hacia la forma de neutrofilo segmentado, es posible que se observen ligeras muescas nucleares.

EOSINOFILO Los eosinofilos están presentes en cantidades reducidas o ausentes en los animales sanos. Estas células son normalmente similares en tamaño a los neutrófilos o ligeramente mas grandes. Los núcleos son muy similares a los de los neutrófilos puesto que están segmentados, pero los segmentos a menudo no están tan bien definidos. El citoplasma se tiñe de azul pálido y tiene múltiples gránulos rojizos o rojizo-anaranjados. La cantidad y las formas de los gránulos son muy diversas en la mayoría de las especies domesticas comunes. Los gránulos del eosinofilo de perro son redondos y muy variables en tamaño y numero. Asimismo, aparecen a menudo en el citoplasma múltiples vacuolas de tamaños variados. Los gránulos del eosinofilo felino tienen forma de bacilo y normalmente llenan el citoplasma. Los eosinofilos de caballo tienen grandes gránulos redondos, ovales u oblongos que llenan el citoplasma y a veces enmascaran el núcleo. Los eosinofilos de los rumiantes tienen pequeños gránulos redondos, completamente uniformes que normalmente llenan el citoplasma. Los eosinofilos de llama tienen gránulos pequeños redondos, ovales u oblongos. El bajo numero de gránulos no vena igualmente el citoplasma.

LlNFOCITO Los linfocitos son el segundo tipo de célula mas común en la sangre periférica de la mayoría de las especies domesticas y son el tipo de célula predominante de los rumiantes. Normalmente, estas células son redondas, ligeramente mas pequeñas que los neutrófilos y tienen raideos redondos u ovales y a veces ligeramente dentados. El tipo de cromatina consiste en áreas vítreas, suaves, entremezcladas con áreas mas densas o en forma de mancha. Aparece una pequeña cantidad de citoplasma azul claro. Algunos linfocitos pueden tener en el citoplasma múltiples gránulos pequeños de color rosa-purpura. Además de estos linfocitos pequeños, muchos ani-

29

30

MORFOLOGIA NORMAL DEL LEUCOCITO

BASOFILO Los basofilos aparecen raramente en la sangre periférica de todas las especies domesticas comunes. Se ven con mas frecuencia en el caballo. Los basofilos son semejantes en tamaño o ligeramente mas grandes que los neutrófilos y el citoplasma es purpura claro. El núcleo se halla segmentado pero a menudo no llega al grado de los neutrófilos segmentados. En los basofilos caninos a veces pueden aparecer pequeñas cantidades de granu-

los citoplasmáticos pequeños, redondos y de color purpura. La presencia o ausencia de gránulos puede depender del tipo de colorante utilizado. Los basofilos felinos contienen gránulos pequeños imperceptibles, redondos y de un azul lavanda. Tanto los basofilos de vaca como los de caballo tienen varios gránulos pequeños bien te-nidos de color purpura en el citoplasma. Los basofilos de llama se asemejan mucho a los basofilos de vaca o caballo. Las figuras 5.1-5.30 muestran los leucocitos normales de las especies domesticas comunes.

Figura 5.1. Neutrofilo segmentado. La célula con el núcleo segmentado y citoplasma rosado es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.4. Eosinofilo. La célula con un núcleo poco segmentado y múltiples gránulos redondos y rojizos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.2. Linfocito pequeño. La célula pequeña con un núcleo redondo, en position central y con un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeño. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.5. Basofilo. La célula con el núcleo con poca segmentación y citoplasma de color purpura claro con una pequeña cantidad de pequeños y discretos gránulos purpura es un basofilo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.3. Monocito. La célula grande con un núcleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y múltiples y discretas vacuolas es un monocito. Observe que el núcleo no esta tan claramente segmentado como en los neutrofilos maduros. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.6. Basofilo. La célula con el núcleo pobremente segmentado y citoplasma de color purpura claro es un basofilo. Sin gránulos perceptibles, puede resultar difícil distinguir estas células de los neutrófilos tóxicos o de los monocitos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.7. Neutrofilo segmentado. La célula con un núcleo segmentado y un citoplasma rosa pálido es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.10. Eosinofilo. La célula con un núcleo segmentado y múltiples gránulos rojizos con forma de bacilos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.8. Linfocito pequeño. La célula pequeña con un núcleo redondo u oval en position central y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeño. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.11. Basofilo. La célula con un núcleo segmentado y gránulos redondos de color purpura poco definidos en el citoplasma es un basofilo. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.9. Monocito. La célula grande con un núcleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y múltiples y discretas vacuolas citoplasmáticas es un monocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.12. Neutrofilo segmentado y basofilo. La célula en la parte inferior izquierda es un neutrofilo segmentado, y la de la parte superior derecha es un basofilo. Observe el tamaño algo mayor del basofilo así como los gránulos redondos del citoplasma de color purpura claro, poco definidos. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.13. Neutrofilo segmentado. La célula con un núcleo segmentado y un citoplasma azul claro o rosa es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.16. Eosinofilo. La célula con un núcleo bilobulado y grandes gránulos rojizos redondos u ovalados en el citoplasma es un eosinofilo. Observe que los gránulos están enmascarando parte del núcleo. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.14. Linfocito pequeño. La célula pequeña con un núcleo redondo y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeño. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.17. Basofilo. La célula con un núcleo bilobulado y numerosos gránulos citoplasmáticos pequeños de color purpura es un basofilo. Observe que los gránulos están enmascarando parte del núcleo. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.15. Monocito. La célula grande con un núcleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y múltiples y discretas vacuolas citoplasmáticas es un monocito. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.18. Linfocito grande. La gran célula redonda con un núcleo oval y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito grande. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.19. Neutrofilo segmentado. La célula con un núcleo segmentado y un citoplasma rosa pálido es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.22. Eosinofilo. La célula con un núcleo alargado y abundantes gránulos pequeños, redondos y rojizos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.20. Linfocito pequeño. La célula pequeña con un núcleo redondo u oval y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeño. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5. 23. Basofilo. La célula con un núcleo segmentado y numerosos gránulos pequeños de color de purpura en el citoplasma es un basofilo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.21. Monocito. La célula grande con un núcleo profundamente dentado y citoplasma azul-gris es un monocito.

Figura 5.24. Linfocito grande. La célula con un núcleo redondo o ligeramente dentado con pequeñas cantidades de citoplasma azul claro es un linfocito grande. Observe la cromatina nuclear acentuada que se ve a menudo en linfocitos bovinos normales. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

falta de vacuolas; no todos los monocitos contienen vacuolas. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx. Observe la

Figura 5.25. Neutrofilo segmentado. Las dos células con núcleos segmentados y un citoplasma granular azul claro o rosa son neutrófilos segmentados. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.28. Eosinofilo. La célula con un núcleo en forma de banda y cantidades reducidas de gránulos pequeños, rojizos, redondos u oblongos poco definidos en el citoplasma es un eosinofilo. A menudo los eosinofilos de llama tienen cantidades reducidas de gránulos citoplasmáticos. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.26. Linfocito pequeño. La célula pequeña con un núcleo redondo y una pequeña cantidad de citoplasma azul claro es un linfocito pequeño. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.29. Basofilo. La célula con un núcleo con poca segmentación y múltiples gránulos citoplasmáticos pequeños de color purpura es un basofilo. Los gránulos enmascaran parcialmente el núcleo. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.27. Monocito. La célula grande con un núcleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y múltiples y discretas vacuolas citoplasmáticas es un monocito. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.30. Eosinofilo. La célula con un núcleo bilobulado y múltiples gránulos rojizos, redondos es un eosinofilo bien granulado. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO SEIS

VARIACIONES DE LA MORFOLOGÍA DEL LEUCOCITO GRANULOCITOS

macion, pueden aparecer granulocitos neutrófilos en la sangre con un grupo de cambios morfológicos conocidos como toxicidad o cambios tóxicos. Estos rasgos aparecen a menudo cuando existe desviación a la izquierda. Los tres rasgos principales de toxicidad que se pueden observar incluyen la basofilia incrementada, la vacuolizacion y la presenta de cuerpos de Dohle en el citoplasma. La basofilia del citoplasma se debe a una mayor cantidad de RNA ribosomal (figuras 6.3-6.5). Se cree que la vacuolizacion del citoplasma se debe a lisosomas prominentes (figuras 6.6-6.7). Los cuerpos de Dohle son pequeñas partículas de forma irregular, azulgrises en el citoplasma (figura 6.8). Son agregaciones laminares de retículo endoplasmatico rugoso. Debería tenerse en cuenta que la mayoría de los cuerpos de Dohle en gatos y caballos son comunes durante la inflamación y por ello no se les considera un signo tan grave de toxicidad en comparación con las otras especies. Según el grado y origen de la inflamación, pueden aparecer uno o mas rasgos de toxicidad. Una causa de toxicidad grave habitual es la endotoxemia. Además de los tres rasgos mencionados anteriormente, otro cambio morfológico que se puede observar en los neutrófilos tóxicos es la granulación toxica, que consiste en la presencia de gránulos pequeños múltiples de color purpura en el citoplasma de la célula. Estos gránulos son probablemente gránulos primarios prominentes.

Un cambio común que puede observarse en animales con una inflamación es la presencia de un numero mayor de Granulocitos neutrófilos inmaduros en la circuladon. Se conoce como desviación a la izquierda. Normalmente, una desviación a la izquierda incluye cantidades mayores de neutrófilos en banda (figura 6.1), pero tambien puede incluir metamielocitos, mielocitos y, muy raras veces, promielocitos y mieloblastos. Los neutrófilos en banda, tal como se ha descrito anteriormente, tienen núcleos hiposegmentados. Normalmente, la cromatina del neutrofilo en banda es menos condensada que la de los neutrófilos segmentados maduros. En cambio, en la anomalía de Pelger-Huet, que se ha estudiado en perros y gatos, existe un defecto que causa la hiposegmentacion de los granulocitos (figura 6.2) y provoca la aparición de una falsa desviación a la izquierda. Esta condición es extremadamente rara pero se puede distinguir de una desviación a la izquierda verdadera mediante las características de la cromatina nuclear. En la anomalía de Pelger-Huet, aunque las células estén hiposegmentadas, la cromatina esta muy condensada como sucede con un neutrofilo normalmente segmentado. La anomalía pasajera pseudo-Pelger-Huet se ha descrito también en algunas enfermedades. En todas las especies domesticas, durante la infla-

Figura 6.2. Anomalía de Pelger-Huet. El neutrofilo hiposegmentado con un tipo de cromatina muy densa es típico de la anomalía de Pelger-Huet. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.1. Neutrófilos en banda. Las dos células nucleadas (derecha) son neutrófilos en banda y la célula de la parte inferior izquierda es un neutrofilo poco segmentado pero mas maduro. Todas estas células son toxicas, basadas en el color azul mas intenso y la vacuolizacion del citoplasma. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

37

38

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO

Figura 6.3. Neutrofilo segmentado normal. Observe el citoplasma de color rosa pálido en comparación con el citoplasma azul de los neutrófilos tóxicos en las figuras 6.4 y 6.5. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.5. Basofilia citoplasmática moderada o marcada. El neutrofilo poco segmentado del centro del campo tiene una toxicidad que va de moderada a marcada indicada por la presencia de citoplasma azul oscuro, la vacuolizacion del citoplasma y los cuerpos de Dohle. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.4. Basofilia citoplasmática suave a moderada. El neutrofilo segmentado en el centro del campo tiene una toxicidad suave a moderada indicada por la presencia de citoplasma azul y cuerpos de Dohle. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.6. Vacuolizacion citoplasmática suave. Existe una vacuolizacion suave del citoplasma del neutrofilo pobremente segmentado del centro del campo. Aparece también ligero o moderado citoplasma azul y cuerpos de Dohle, lo que indica, además, una toxicidad moderada. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

No se trata de un hallazgo común en las especies domesticas pero puede, alguna vez, encontrarse en caballos. Se debe distinguir la granulación toxica de las Inclusiones en los neutrófilos que aparecen en gatos birmanos sanos y en animales con enfermedades de almacenamiento lisosomal. Otro cambio morfológico poco usual que puede observarse en animales con inflamación es la presencia de neutrófilos gigantes. La medula osea produce y emite estas celulas con mayor rapidez y, por consiguiente, la maduración no se ha producido, de ahí su mayor tamafio. Los neutrófilos gigantes pueden ser también un sig-

no de mielodisplasia, descrita en el Capitulo 9. Otros cambios diversos que pueden observarse en los granulocitos son la hipersegmentacion neutrofila, los gránulos eosinofilos de varios tamaños, y la degranulacion eosinofila. La hipersegmentacion puede observarse en todas las especies y se la define como neutrófilos con mas de 5 segmentos o lóbulos (figura 6.9). Este cambio se debe normalmente a la retención de la celula en la circulación por mas tiempo de lo normal, pero puede observarse también cuando los frotis de sangre no se hacen inmediatamente después de que la sangre haya sido extraída. La hipersegmentacion de los neu-

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO

Figura 6.7. Vacuolizacion citoplasmática marcada. La celula de la derecha es un neutrofilo en banda. La celula del centre, es un metamielocito. La celula de la izquierda es un linfocito. Tanto el neutrofilo en banda como el metamielocito muestran signos de una toxicidad marcada debida a la vacuolizacion citoplasmática y al citoplasma azul. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx

39

Figura 6.9. Neutrofilo hipersegmentado. El núcleo del neutrofilo del centro del campo tiene siete lóbulos. Se considera hipersegmentada una celula con cinco o mas lóbulos nucleares. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

rasgos distintivos de los eosinofilos degranulados son que dichas celulas son mas grandes que los neutrófilos y que tienen a menudo vacuolas múltiples de tamaño variado en el citoplasma (figura 6.11). Los gránulos eosinofilos pueden aparecer en cantidades reducidas o estar completamente ausentes en dichas celulas.

Figura 6.8. Cuerpo de Dohle. La agregación irregular de material azul en la posición de las 12 en el citoplasma del neutrofilo segmentado (centro) es un cuerpo de Dohle. También aparece una basofilia moderada y vacuolizacion citoplasmática. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

trofilos puede producirse en caniches con macrocitosis eritrocitica y en schnauzers gigantes con deficiencia de vitamina Bp. Una variación marcada del tamaño de los gránulos eosinofilos ocurre principalmente en perros (figura 6.10). Pueden aparecer algunas celulas con unos cuantos gránulos mas grandes y una cantidad variable de vacuolas. La degranulacion de los eosinofilos puede observarse en todas las especies pero es mas visible en los perros. Aunque pueda producirse en cualquier raza, los galgos tienen a menudo eosinofilos degranulados. Se considera normalmente a dichas celulas como neutrófilos. Los

40

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO

AGRANULOCITOS

Figura 6.10. Eosinofilos con gránulos grandes de diversos tamaños. La celula nucleada (centro) es un eosinofilo con gránulos grandes rojizos de tamaños diversos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.11. Eosinofilo degranulado. La celula del centro del campo con un núcleo bilobulado unido por un filamento delgado y vacuolas múltiples de varios tamaños pobremente definidas es un eosinofilo degranulado de galgo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Los mayores cambios morfológicos diferentes que ocurren en los agranulocitos son las Variaciones en morfologia de los linfocitos. Los linfocitos reactivos, conocidos también como inmunocitos, son normalmente linfocitos con citoplasma azul oscuro y cantidades de citoplasma posiblemente incrementadas (figuras 6.12-6.14). Estas celulas pueden tener también una destacada zona clara perinuclear. Cantidades pequeñas de linfocitos reactivos pueden aparecer en animales sanos pero normalmente se observan en cantidades aumentadas en animales que están estimulados antigénicamente. Las celulas plasmáticas o linfocitos reactivos plasmocitoides aparecen en pocas ocasiones en la sangre periférica. Dichas celulas tienen mucho mas citoplasma que los linfocitos normales o reactivos. El citoplasma es azul oscuro o azul-verde. A menudo existe una destacada zona clara perinuclear. El núcleo es redondo con una condensación marcada de la cromatina en algunas áreas, y clara en otras. Raramente, dichas celulas pueden tener vacuolas múltiples discretas en el citoplasma conocidas como cuerpos de Russell. Linfocito atípico es un termino usado de manera diferente por gente diversa. Nosotros describiremos los linfocitos atipicos como aquellas celulas con una morfologia similar a la de los linfocitos reactivos, pero además del citoplasma azul oscuro y cantidades de citoplasma posiblemente incrementadas, presentan anormalidades nucleares. En comparación con los linfocitos normales en los que el núcleo es redondo o ligeramente dentado, el núcleo de los linfocitos atipicos tiene profundas fisuras y/o múltiples muescas o repliegues interiores (figura 6.15). La presencia de un linfocitos atípico raro puede ir asociada únicamente a un estimulo antigénico. Sin embargo, la presencia en grandes cantidades de estas celulas puede indicar que el animal padece un trastorno linfoproliferativo (consulte el Capitulo 9). Los linfoblastos son linfocitos con núcleos que contienen uno o mas nucléolos (figura 6.16). Estas celulas son normalmente mas grandes que los linfocitos pequefios, aunque puedan aparecer linfoblastos pequeños. El núcleo de un Linfoblastos no solo contiene un nucléolo prominente sino que la cromatina es también mas abierta y finamente punteada en comparación con la del linfocitos pequeño normal. Si los linfoblastos son fáciles de observar en la sangre periférica, es muy probable que el animal tenga un trastorno linfoproliferativo. Debido a la marcada acentuación de la cromatina de los linfocitos grandes bovinos normales, estas celulas pueden confundirse con los linfoblastos. La morfología monocitica normal ha sido anteriormente descrita. La principal varia-don en la morfología monocitica consiste en que algunos monocitos carecen de vacuolas destacadas (figuras 6.17 y 6.18). Esto puede ocurrir en cualquier especie. Cuando estas celulas carecen de vacuolas pueden con-

VARIACIONES DE LA MORFOLOGLA DEL LEUCOCITO

Figura 6.12. Linfocito pequeño normal. Observe el citoplasma azul claro en comparación con el citoplasma azul oscuro de los linfocitos reactivos de las figuras 6.12 y 6.13. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.13. Linfocito reactivo. El citoplasma azul oscuro y la zona clara perinuclear pobremente definida son típicos del linfocito reactivo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.14. Linfocito reactivo. Este linfocito tiene cantidades elevadas de citoplasma azul oscuro, lo que indica reactividad. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

41

Figura 6.15. Linfócitos atípicos. Estas dos celulas (centro) con nucleos profundamente fisurados y citoplasma azul oscuro son linfocitos atipicos. Este animal presentaba un trastorno linfoproliferativo, basado en la presencia de grandes cantidades de linfocitos de morfologia atípica. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.16. Linfoblastos. Las tres celulas mas grandes con núcleos redondos u ovales, nucléolos simples o múltiples y pequeñas cantidades de citoplasma azul son linfoblastos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

42

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO

Figura 6.17. Monocito. La celula grande (centra) con un núcleo profundamente dentado y citoplasma azul-gris sin vacuolas citoplasmáticas es un monocito. Observe la cromatina pálida nuclear, finamente granular, en comparación con la cromatina densa del neutrofilo en banda toxico (parte superior central). Aparece tambien un neutrofilo segmentado toxico (parte inferior izquierda) y metarubricitos (esquinas superior derecha e izquierda). Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.18. Monocito. La celula grande con un núcleo profundamente dentado y citoplasma azul-gris es un monocito. Observe las múltiples y discretas vacuolas citoplasmáticas claras del monocito en comparación con el monocito de la figura 6.17; estas microfotografías son del mismo frotis sanguíneo. Aparece un metarubricito (parte inferior derecha) y un eritrocito con punteado basofilo (parte superior izquierda). Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

fundirse con los neutrófilos enbanda o linfocitos atipicos. En general, si existe alguna duda en la interpretación, se pueden encontrar monocitos mas normales con vacuolas en el frotis sanguíneo, y dichas celulas pueden ser de mucha utilidad para confirmar que las celulas sin

vacuolas son monocitos auténticos. Asimismo, la cromatina del monocito es mas granular o con forma de encaje con algunas áreas de condensación en comparación con la cromatina mas densa del neutrófilos en banda.

CAPITULO SIETE

INCLUSIONES Y PARÁSITOS LEUCOCITARIOS En conjunto, la presencia de Inclusiones y parásitos en los leucocitos es un descubrimiento mucho menos comun que las inclusiones y parásitos en los eritrocitos. Asimismo, aparecen las inclusiones o los parásitos, a menudo, en cantidades extremadamente reducidas. Los gránulos azurofilos, que pueden confundirse con inclusiones víricas o parásitos, aparecen en algunos linfocitos normales. Estos gránulos rosados o purpúreos, normalmente pequeños, de varios tamaños y a menudo múltiples pueden observarse en linfocitos de cualquier especie (figura 7.1). En pocas ocasiones, dichos gránulos pueden ser muy grandes, especialmente en los rumiantes. En la mayoría de los animales sanos, únicamente un pequeño porcentaje de linfocitos son granulados. En las llamas, se ha observado que una alta proporción de linfocitos normales presenta este tipo de gránulos. Podemos encontrar organismos en los leucocitos de los perros con ehrlichiosis. Las mórulas de Ehrlichia pueden tener unas cuantas micras de diámetro. Cada mórula esta constituida por estructuras múltiples, pequeñas, azules o purpureas, de forma cocoidal conocidas como cuerpos elementales. Cuando aparecen mórulas en monocitos o linfocitos, se trata normalmente de Ehrlichia cards, que se encuentra principalmente en áreas tropicales y subtropicales. Las mórulas que aparecen en los neutrófilos o eosinofilos son normalmente de Ehrlichia eioingii (figura 7.2). Se conoce esta forma de ehrlichiosis como ehrlichiosis granulocítica. Es posible encontrar potencialmente inclusiones

víricas de moquillo en perros en todo tipo de leucocitos. Tienen tamaños muy variados y se tifien de rosa o de purpura claro. Estas estructuras irregulares, redondas, ovaladas u oblongas tienen un aspecto que puede ser granular o suavemente vítreo (figura 7.3). Pueden aparecer inclusiones simples o múltiples. Hepatozoon cards aparece normalmente en neutrófilos o monocitos. Han aparecido casos principalmente en los estados de la Costa del Golfo (USA), Francia, Ita-

Figura 7.2. Mórula de Ehrlichia eivingii. El neutrófilos del centra del campo tiene una única mórula citoplasmática. Frotis de un «buffy coat» canino, cortesía de D. Boon; objetivo lOOx.

Figura 7.1. Gránulos azurofilos. El linfocito tiene varios gránulos pequeños de color rosado o purpura adyacentes al núcleo. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 7.3. Inclusiones víricas de moquillo canino. El neutrófilos segmentado del centro del campo tiene destacadas inclusiones citoplasmáticas, redondas, de color purpura claro características del virus del moquillo canino. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx. 43

44

INCLUSIONES Y PARASITOS LEUCOCITARIOS

lia, Oriente Medio y Asia. Los gametocitos de H. canis son organismos grandes, oblongos u ovales, que miden normalmente 5 x 10 um y se tiñen de azul pálido (figura 7.4). Histoplasma capsulatum aparecen en neutrófilos, monocitos y eosinofilos en los Estados Unidos y esporádicamente en otras partes. Se trata de estructuras redondas u ovales de 2 a 4 um de diametro (figura 7.5). Se tiñen de azul claro y contienen material nuclear granular de color rosa o purpura, situado excentricamente. A menudo existe un pequeño halo alrededor del organismo. Pueden aparecer organismos xinicos o múltiples. Las mucopolisacaridosis son un grupo de enfermedades de almacenamiento lisosomal poco frecuentes tanto en gatos como en perros. Se ha dicho que los tipos de mucopolisacaridosis I, VI y VII de gato y el tipo VH de perro presentan gránulos purpura del tamaño de una punta de alfiler en el citoplasma de los neutrófilos (figura 7.6). Los gatos con gangliosidosis GM2, otra enfermedad de almacenamiento lisosomal, tienen también granulacion neutrofila. Las granulaciones también pueden observarse en otros tipos de leucocitos en estos trastornos. La granulación de la enfermedad de almacenamiento lisosomal puede parecerse a la granulación toxica de la que puede distinguirse puesto que no existe normalmente ningún otro tipo de signo de toxicidad en los neutrófilos. Para confirmar el tipo de enfermedad de almacenamiento lisosomal se requiere un test bioquímico. Se ha observado una granulación parecida en neutrófilos de algunos gatos birmanos. Estos gatos, no tienen sig-nos clínicos vinculados normalmente con enfermedades de almacenamiento lisosomal. Algunos tipos de enfermedades de almacenamiento

Figura 7.4. Hepatozoon canis. Dos de los tres neutrófilos del centro del campo tienen estructuras citoplasmáticas únicas, grandes, oblongas con material granular de color purpura situado excéntricamente. Se trata de gametocitos de Hepatozoon canis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

lisosomal, incluyen la enfermedad de Nieman-Pick, la gangliosidosis, la mucopolisacaridosis y la alfamanosidosis descritas en gatos, originan una vacuolizacion de los leucocitos. Estas vacuolas múltiples, pequeñas y discretas se reconocen mas fácilmente en los linfocitos (figura 7.7). En algunas de estas enfermedades de almacenamiento, pueden aparecer gránulos dentro de una zona de vacuolas. Para confirmar y clasificar con precisión el trastorno se necesita la caracterización bioquímica de la deficiencia de erlzima. Deberían examinarse preparaciones de sangre reden extraída ya que la vacuolizacion de los leucocitos normales puede producirse in vitro a lo largo del tiempo. Se ha observado la

Figura 7.5. Histoplasma capsulatum. El monocito/macrófago tiene tres organismos ovales de color azul claro con material granular de color purpura situado excéntricamente. Se trata de Histoplasma capsulatum. Frotis de sangre canina, cola de la preparación; objetivo lOOx.

Figura 7.6. Mucopolisacaridosis tipo VI. El neutrófilos del centro del campo presenta gránulos múltiples, pequeños, de color purpura claro en el citoplasma; es típico de la mucopolisacaridosis tipo VI. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

INCLUSIONES Y PARASITOS LEUCOCITARIOS

45

vacuolizacion de neutrófilos en gatos tras haberles administrado altas dosis de cloranfenicol y fenilbutazona. Otro trastorno hereditario poco común que se presenta en gatos en los que pueden aparecer Inclusiones en el leucocito es el sindrome de Chediak-Higashi (figura 7.8). Los gránulos son normalmente redondos u ovales, con un diametro de 2 um o ligeramente mas grandes. Se tiñen de rosa pálido y pueden aparecer gránulos únicos o múltiples. Las Inclusiones y parásitos en leucocitos de caballo no son frecuentes. Ehrlichia equi (principalmente en los Estados Unidos) se parece a Ehrlichia canis y se puede encontrar en los neutrófilos pero raramente en los eosinofilos. Las inclusiones y parásitos en leucocitos de ganado va-

cuno son también poco usuales. Se ha observado Ehrlichia phagocytophila en el norte y el oeste de Europa. El trastorno hereditario poco frecuente, el sindrome de Chediak-Higashi, ha sido observado en ganado vacuno y se parece a las inclusiones descritas en gatos. La vacuolizacion en la vaca así como en los linfocitos de cordero han sido observados en la enfermedad de almacenamiento lisosomal, conocida como alfamanosidasa adquirida. La disminución de la actividad de la enzima alfamanosidasa se debe a la ingestión de swainsonina que se halla en algunas leguminosas. Se puede efectuar la detecdon de swainsonina en la sangre para confirmar esta enfermedad.

Figura 7.7. Gangliosidosis. El linfocitos del centro del campo tiene múltiples y discretas vacuolas citoplasmáticas de varios tamaños, típicas de algunas enfermedades de almacenamiento lisosomal, incluida la gangliosidosis. El linfocitos de la izquierda presenta una apariencia mas normal. Frotis de sangre felina de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1988; cortesía de S. Dial: objetivo lOOx.

Figura 7.8. Sindrome de Chediak-Higashi. El neutrófilos del centro del campo tiene tres pequeños gránulos citoplasmáticos redondos y rosados típicos del sindrome de Chediak-Higashi. Frotis de sangre felina de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1987; cortesía de M. Menard: objetivo lOOx.

Capítulo OCHO

PLAQUETAS Las plaquetas, conocidas también como trombocitos, son morfológicamente muy similares en las distintas especies, aunque en caballos no se tiñen generalmente con tanta intensidad (figuras 8.1-8.5). Las plaquetas son celulas pequeñas, anucleadas, de forma discoidal, que se tiñen de azul claro y pueden tener múltiples granos finos rosados o purpúreos en el citoplasma. Miden normalmente de 2 a 4 um de diámetro. Algunas veces, si las plaquetas se activan durante el proceso de recogida, pueden tener protuberandas múltiples finas. Si se activa un numero suficiente de estas plaquetas, se fundirán y formaran grandes agregados (figura 8.6). A veces, resulta difícil distinguir las plaquetas individuales en estos agregados. A menudo, y debido a su gran tamaño, se pueden encontrar los agregados de plaquetas en la cola de la preparación. Cuando hay una mayor demanda de plaquetas, la medula osea puede emitir las plaquetas mas grandes. Estas plaquetas mas grandes se conocen como

macroplaquetas o plaquetas gigantes (figura 8.7). normalmente estas plaquetas pueden medir 5 um o incluso mas. Las macroplaquetas aparecen normalmente en muestras de sangre periférica de felinos con independencia del estado de enfermedad; en esta especie este descubrimiento no esta necesariamente ligado a la respuesta de la medula osea a una demanda periférica de plaquetas. Un organismo rickettsial que tiene una afinidad por las plaquetas es Ehrlichia platys. La infección debida a este organismo causa una enfermedad que afecta a los perros principalmente en las zonas del sur y del sudeste de los Estados Unidos y en las zonas tropicales y subtropicales. La morfología de estos organismos es similar a la de las especies de Ehrlichia observadas en los leucocitos. Las mórulas tiene unas cuantas micras de diámetro y están constituidas por pequeñas estructuras múltiples de forma cocoidal, azules o purpuras, conoci-das como cuerpos elementales (figura 8.8).

Figura 8.1. Plaquetas de perro. Las celulas anucleadas pequeñas, redondas u ovaladas, de color azul claro con gránulos citoplasmáticos rosas o purpuras son plaquetas. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 8.2. Plaquetas de gato. Las celulas anucleadas pequeñas, redondas u ovaladas, de color azul claro con gránulos citoplasmáticos rosas o purpuras son plaquetas. Observe el tamaño mas grande de algunas de las plaquetas que aparecen normalmente en gatos. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 8.3. Plaquetas de caballo. Las celulas pequeñas anucleadas, redondas u ovaladas, de color azul claro con gránulos citoplasmáticos rosas o purpuras son plaquetas. Estas celulas normalmente no se tifien tan intensamente en caballos como lo hacen en otras especies. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 8.6. Agregado plaquetar grande. Aparece una agregación grande e irregular de plaquetas (centra). Observe el tamaño de la agregación de plaquetas en comparación con los neutrófilos que también aparecen. Frotis de sangre felina, cola de la preparación; objetivo 50x.

Figura 8.4. Plaquetas de vaca. Las celulas pequeñas anucleadas, redondas u ovaladas, de color azul claro con gránulos citoplasmáticos rosas o purpuras son plaquetas. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 8.7. Macroplaquetas. Aparecen dos plaquetas gigantes o macroplaquetas. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 8.5. Plaquetas de llama. Las celulas pequeñas anucleadas, redondas u ovaladas, de color azul claro con gránulos citoplasmáticos rosas o purpuras son plaquetas. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 8.8. Ehrlichia platys. La plaqueta grande del centra del campo tiene dos Inclusiones pequeñas de color purpura oscuro que son mórulas de Ehrlichia platys. Frotis de sangre canina, de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1986, cortesía de S. Gaunt; objetivo lOOx.

CAPITULO NUEVE

TRASTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS CARACTERISTICAS GENERALES Los animales con trastornos linfoproliferativos y mieloproliferativos tienen una proliferacion crónica de celulas neoplasicas de las series linfoides y mieloides, respectivamente. Cuando la proliferacion neoplasica ocurre en la medula osea y estas celulas se liberan a la circulación, se trata de una leucemia. El diagnostico de una leucemia depende de varios factores diferentes, que incluyen historial, síntomas clínicos y exploración física, así como un examen detallado de la sangre y de la medula osea. Recientemente, el grupo encargado de estudiar la leucemia animal de la American Society of Veterinary Clinical Pathologists (ASVCP) propuso la adaptación del esquema de clasificación trances/americano/ingles de leucemias humanas para utilizarlo en la clasificación de las leucemias mieloides de gatos y perros. El sistema se basa en el reconocimiento de las celulas anormales presentes, así como en el recuento sistemático de los diferentes tipos de celulas presentes en la medula osea. Este esquema de clasificación, aunque sea muy útil, esta fuera del alcance de este atlas y no se utiliza extensamente en el mismo. En cambio, se da el enfoque morfológico básico tanto para la leucemia linfoide como para la mieloide. La discusión de este capitulo se centra en los cambios que se originan en la sangre periférica de animales con leucemia, pero insistimos, este es solamente un factor que hay que tener en cuenta a la hora de reconocer y clasificar las leucemias. El descubrimiento de una anormalidad en la sangre periférica es, a menudo, la primera indicación que pueda existir una leucemia. Con leucemias pobremente diferenciadas, la identificación de un proceso leucemico es a menudo fácil; la dificultad se produce en la clasificación adecuada. En estos casos, es normal utilizar tinciones citoquimicas especiales o inmunofenotipicas para identificar adecuadamente el origen de las celulas neoplasicas. En cambio, en leucemias bien diferencia-das, la serie de la celula resulta fácil de identificar, pero el reto esta en diferenciar el proceso leucemico de una inflamación.

TRASTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Leucemia Linfoide La leucemia linfoide puede aparecer en cualquier especie pero es mas habitual en perros y gatos en comparacion con caballos, vacas y llamas. La leucemia linfoide puede dividirse en dos tipos principales: aguda y cronica. Leucemia linfoide aguda Los animales con leucemia linfoide aguda, conocida también como leucemia linfoblastica aguda, tienen a menudo grandes cantidades de celulas neoplasicas en la circulación, pero la morfologia de dichos linfocitos no es la típica de los que se encuentran en la circulación de los animales sanos. En la leucemia linfoide aguda, el tipo de celula predominante es un linfocito grande de aspecto inmaduro, normalmente un Linfoblastos (figuras 9.1 y 9.2). Leucemia linfoide cronica En la leucemia linfoide cronica, el tipo de celula predominante es un linfocito morfológicamente normal. Estos linfocitos, generalmente se parecen a los linfocitos típicos de tamaño pequeño o mediano presentes en la circulación, pero aparecen en cantidades muy elevadas (figuras 9.3 y 9.4).

Linfosarcoma Los linfoblastos aparecen también en la circulación durante la fase leucémica del linfosarcoma (figura 9.5). El linfosarcoma es un trastorno linfoproliferativo en el cual, generalmente, la proliferacion de linfocitos neoplasicos se inicia en centros primarios que no son la medula osea, tales como los ganglios linfáticos y los tejidos. En algunos casos, la proliferacion de las celulas neoplasicas se extenderá a la medula osea y con posterioridad a la sangre, conduciendo a la fase leucémica del linfosarcoma. A causa de la mayor incidencia de Linfosarcoma respecto a la leucemia linfoide aguda, los linfoblastos circulantes se observan mas frecuentemente en el linfosarcoma.

Figura 9.1. Leucemia linfoide aguda. Aparecen muchos linfocitos grandes, a veces con nucléolos prominentes. Observe el gran tamaño de estas celulas en relación con el neutrófilos normal del centro izquierda del campo. Frotis de sangre canina; objetivo 50x.

Figura 9.4. Leucemia linfóide cronica. Ampliación del frotis de sangre que aparece en la figura 9.3. Observe los cuatro linfocitos de tamaño pequeño a mediano que son normales o ligeramente reactivos en su morfología. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 9.2. Leucemia linfoide aguda. Se trata de una ampliación del frotis de sangre que aparece en la figura 9.1. Aparecen tres linfocitos grandes con múltiples nucléolos prominentes; son linfoblastos. Aparece un neutrófilos normal en la esquina superior derecha. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx,

Figura 9.5. Linfoblastos. Aparecen siete linfocitos grandes, a menudo con nucléolos marcados; son linfoblastos. Este animal se encuentra en la fase leucémica del linfosarcoma. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 9.3. Leucemia linfoide cronica. Aparecen muchos linfocitos de tamano pequeño o mediano en este campo. Hay un neutrófilos segmentado en la esquina superior derecha. Frotis de sangre felina; objetivo 50x.

Figura 9.6. Leucemia linfoide de gránulos grandes. Aparecen linfocitos grandes, a menudo con nucléolos prominentes. Algunas celulas tienen también gránulos citoplasmáticos grandes de color purpura, redondos o irregulares. Frotis de sangre canina, de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1989, cortesía de M. Wellman; objetivo 50x.

TRANSTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

Leucemia linfoide de gránulos grandes Otro trastorno linfoproliferativo raro que es debido a la morfología de los linfocitos es la leucemia linfoide de gránulos grandes (figuras 9.6 y 9.7). Como su nombre indica, dichas celulas tienen gránulos citoplasmáticos grandes de color purpura y de varios tamaños.

Mieloma de plasmocito Finalmente, un trastorno linfoproliferativo en el que la proliferacion neoplasica ocurre principalmente en la medula osea es el mieloma de celulas plasmáticas. Las celulas plasmáticas aparecen muy raramente en la circulación en este trastorno. Las celulas plasmáticas no aparecen normalmente en la circulación en animales con enfermedades inflamatorias, de modo que debería tenerse en cuenta el mieloma de celulas plasmáticas si aparecen en grandes cantidades.

TRASTORNOS MIELOPROLIFERATIVOS Caracteristicas generales Como sucedía con los trastornos linfoproliferativos, los trastornos mieloproliferativos son mas comunes en pequeños animales que en grandes animales. Estos trastornos aparecen con mayor frecuencia en gatos y se asocian, a menudo, con la infección vírica de la leucemia felina. Los trastornos mieloproliferativos implican celulas de las series granulocítica, monocitica, eritrocitica y megacariocítica. Los trastornos mieloproliferativos pueden dividirse en tres categorías principales: sindrome

Figura 9.7. Leucemia linfoide de gránulos grandes. Se trata de una ampliación del frotis de sangre que aparece en la figura 9.6. Todas las celulas nucleadas son linfocitos grandes que tienen a menudo nucléolos prominentes. Dos de estas celulas tienen gránulos citoplasmáticos de color purpura, redondos o de forma irregular. Frotis de sangre canina, de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1989, cortesía de M. Wellman; objetivo lOOx.

51

mielodisplasico, leucemia mieloide aguda y leucemia mieloide cronica. La leucemia mieloide puede ser una proliferacion neoplasica de celulas de una sola serie o bien de múltiples.

Síndrome mielodisplasico El sindrome mielodisplasico aparece a menudo en gatos. El sindrome mielodisplasico es conocido también como preleucemia, ya que los animales con el sindrome mielodisplasico pueden llegar a desarrollar una leucemia mieloide. Aunque todos los animales con sindrome mielodisplasico no terminaran con una leucemia galopante, se trata de una amenaza para la vida de estos. Como sucede con la leucemia, el diagnostico del sindrome mielodisplasico depende de muchos factores que incluyen el historial, los síntomas clínicos, la exploración física, así como un examen detallado de la sangre y de la medula osea. A menudo es necesario un examen repetido de la sangre, varias veces a lo largo del tiempo. Los animales con sindrome mielodisplasico tienen anormalidades en la maduración de uno o mas tipos de celulas de la familia mieloide. Estas anormalidades de maduración se conocen como mielodisplasia. Además, puede aparecer blastocitos en la circulación (figura 9.8). Las celulas con anormalidades de maduración y los blastocitos pueden también aparecer en la sangre periférica de animales con una leucemia mieloide aguda. La diferencia-cion entre estos dos procesos se debe principalmente al numero y al tipo de celulas anormales que aparecen en la sangre y la medula osea. Algunas características mielodisplasicas encontradas en la sangre, se describen a continuación. Cualquier animal con un sindrome

Figura 9.8. Blastocito. En la circulación de animales con el sindrome mielodisplasico pueden aparecer cantidades reducidas de blastocitos. La celula nucleada (centro) con el núcleo redondo situado excéntricamente, un único nucléolo destacado y cantidades moderadas de citoplasma azul es un blastocito de origen probablemente eritrocitico. Aparecen también plaquetas gigantes. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

52

TRANSTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

mielodisplasico o una leucemia mieloide puede tener una o mas de estas características. La mielodisplasia de las celulas de la serie eritrocitica se conoce como diseritropoyesis. Una característica de la diseritropoyesis es la formación de celulas eritroides megaloblasticas. Estas celulas se reconocen por su gran tamaño y la asincronia de maduración del núcleo y del citoplasma. Estas celulas tienen a menudo un citoplasma rojizo-naranja de apariencia madura, lo que es típico de los eritrocitos con su contenido completo de hemoglobina y un gran núcleo de apariencia inmadura con cromatina nuclear no condensada (figura 9.9). La megaloblastosis puede aparecer también en la deficiencia de vitamina B12 y de acido fólico, pero esto se ha documentado muy pocas veces en animales domésticos. Una segunda característica de la diseritropoyesis es la macrocitosis que se caracteriza por un primero elevado de macrocitos, eritrocitos grandes en la circulación (figura 9.10). La macrocitosis aparece normalmente en anemias regenerativas en todos los animales, pero en la mielodisplasia, la macrocitosis ocurre normalmente al mismo tiempo que una anemia no regenerativa. La anemia no regenerativa macrocitica se ha descrito también en el gato con deficiencia de folato. La macrocitosis ocurre en algunos caniches y tienen muy poca trascendencia clínica. Una tercera característica de la diseritropoyesis es la presencia de sideroblastos y siderocitos los cuales, respectivamente, son eritrocitos nucleados o anucleados con un material granular de color azul en el citoplasma. Este material es el hierro y puede ser difícil distinguirlo de la causa común del punteado

Figura 9.9. Eritrocito nucleado, megaloblastico. La celula grande (centro) con un núcleo ovoide ligeramente excéntrico, relativamente inmaduro con cromatina condensada y un citoplasma rojo-azulado es un precursor de un eritrocito megaloblastico. El tamaño gigante y la desincronización en la maduración del citoplasma y del núcleo son características de la diseritropoyesis. También aparecen plaquetas grandes. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

basofilo, que es la acumulación de RNA. Se necesita una tinción con azul de Prusia para confirmar que el material granular es hierro. Otras anormalidades de la diferenciacion de eritrocitos que puede aparecer incluyen la presencia de celulas con núcleos múltiples y formas nucleares anormales (figura 9.11). Se han observado formas nucleares anormales en precursores de eritrocito tras la administracion de vincristina.

Figura 9.10. Macrocito. El eritrocito maduro grande del centro del campo directamente debajo del linfocitos es un macrocito. Observe la similitud de tamaño de esta celula y el linfocitos. Si aparece un numero elevado de macrocitos en un animal anémico con falta de policromatofilos, es una característica de la diseritropoyesis. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 9.11. Forma nuclear anormal. El metarubricito del centro del campo tiene tres fragmentos nucleares picnoticos de varios tamaños. esta es una característica de diseritropoyesis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 9.12. Neutrofilo gigante. El neutrófilos segmentado de la es-quina superior izquierda es mayor que el neutrófilos segmentado adyacente y el metamielocito de la zona inferior. Esto puede ser una disgranulopoyesis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

La mielodisplasia del desarrollo granulocitico se la conoce como disgranulopoyesis. Los cambios nucleares que pueden observarse incluyen híper e hiposegmentacion, así como fragmentación nuclear. Los cambios del citoplasma celular incluyen cantidades reducidas de gránulos o formas de gránulos anormales, que pueden reconocerse mas fácilmente en los eosinofilos y basofilos. Pueden aparecer también neutrófilos gigantes ; sin embargo, pueden observarse neutrófilos aumentados y posiblemente neutrófilos gigantes como un signo de la toxicidad neutrofilica durante una enfermedad inflamatoria (figura 9.12). La mielodisplasia de la producción de plaquetas se conoce como distrombopoyesis. La característica principal que puede aparecer en la sangre periférica es un numero elevado de plaquetas gigantes (figuras 9.13 y 9.14). Estas plaquetas pueden ser hipo o hipergranulares. En gatos, la presencia de cantidades reducidas o moderadas de plaquetas gigantes es normal, independientemente del estado de enfermedad subyacente.

Figura 9.13. Plaquetas gigantes. Aparecen muchas plaquetas gigantes. Debido al primero elevado y al tamaño muy grande de las plaquetas, esto representa distrombopoyesis. Frotis de sangre felina; objetivo 50x.

Figura 9.14. Plaqueta gigante. Ampliación del frotis de sangre mostrado en la figura 9.13. Aparece una plaqueta gigante de forma anormal (centra). Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Leucemia mieloide aguda Leucemia no diferenciada aguda La leucemia mieloide

aguda menos diferenciada es la leucemia aguda no diferenciada. Aparecen en la circulación cantidades elevadas de celulas que son muy difíciles de clasificar según la morfología así como con tinciones citoquimicas. Existe una enfermedad incluida en esta categoría que afecta a los gatos conocida precisamente como reticuloendoteliosis. En esta enfermedad aparecen en la circulación muchos blastocitos y celulas de aspecto inmaduro con algunas de estas celulas que tienen un nucleo redondo colocado excéntricamente con cantidades moderadas de citoplasma azul con o sin gránulos purpura (figura 9.15). La cromatina nuclear puede ser gruesa y similar a las celulas de la serie de los eritrocitos; sin embargo, las características citoplasmáticas son a menudo similares a las de las celulas de la serie de los granulocitos.

Figura 9.15. Leucemia aguda no diferenciada. Aparece una gran celula (centra) con un núcleo redondo u oval excéntrico, cromatina granular gruesa, y cantidades moderadas de citoplasma azul oscuro con gránulos rosa-purpura. Esta celula tiene rasgos de sus precursores eritrocitico y granulociticos. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

54

TRANSTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

Leucemia mieloblastica aguda La leucemia mieloblastica aguda, conocida también como leucemia granulocítica aguda. tiene cantidades elevadas de precursores granulociticos inmaduros en la sangre periférica. Normalmente, aparecen mieloblastos y posiblemente promielocitos en cantidades elevadas (figuras 9.16 y 9.17). Pueden aparecer otras celu-

las granulocítica mas maduras; sin embargo, al contrario de lo que sucede en las enfermedades inflamatorias graves, estos granulocitos mas maduros son minoría. Si unicamente aparecen mieloblastos puede llegar a ser difícil distinguir estas celulas de otros blastocitos tales como linfoblastos o monoblastos. En dichos casos, una tinción citoquimica es esencial para una clasificación precisa. Leucemia monocitica aguda La leucemia monocitica aguda se reconoce por las cantidades elevadas de monocitos así como de precursores de monocitos, sin olvidar los promonocitos y monoblastos, en la circulacion (figuras 9.18 y 9.19). Puede resultar difícil distinguir las leucemias en las que únicamente aparezcan monoblastos de la leucemia mieloblastica aguda o de la leucemia linfocitica aguda. Leucemia mielomonocitica La leucemia mielomonocitica consiste en una proliferacion de los dos tipos de celulas de las series de granulocitos y monocitos. Tiene las características de la leucemia mieloblastica aguda y de la leucemia monocitica aguda.

Figura 9.16. Leucemia mieloblastica aguda (o granulocitica aguda). Aparecen cuatro celulas muy grandes con núcleos redondos o dentados de apariencia inmadura. Sin tinciones citoquimicas, estas celulas de la serie de los granulocitos son difíciles de distinguir de las celulas inmaduras de las series de los linfocitos y de los monocitos. Frotis de sangre felina, de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1985, cortesía de J. T. Blue; objetivo lOOx.

Figura 9.17. Leucemia mieloblastica aguda Otro campo de visión del frotis de sangre mostrado en la figura 9.16. La celula grande del centra tiene un núcleo inmaduro oval y gránulos citoplasmáticos de color rosado. La presencia de gránulos citoplasmáticos similares a los del promielocito normal ayudan a clasificar esta leucemia como de origen granulocitico. La celula mas pequeña de la parte inferior derecha puede ser un componente del proceso leucemico. Frotis de sangre felina, de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1985, cortesía de J. T. Blue; objetivo lOOx.

Eritroleucemia La eritroleucemia, como su nombre indica, es una leucemia de la serie de los eritrocitos y leucocitos. Tanto los precursores de los eritrocitos como de los leucocitos aparecen en la circulación (figuras 9.20 y 9.21). normalmente, aparece una cantidad anormal de precursores tempranos . Esta condición debe distinguir-se de un estado leucoeritroblastico, que es un proceso no neoplasico que ocurre cuando hay una extrema de-manda periférica de eritrocitos y leucocitos. El mejor modo para distinguir estos dos estados al evaluar el frotis de sangre es que en la eritroleucemia se detecta normalmente un numero desproporcionado de precursores de eritrocitos y de leucocitos tempranos en comparación

Figura 9.18. Leucemia monocitica aguda. Las cinco celulas con núcleos profundamente dentados y citoplasma ocasionalmente vacuolado tienen rasgos similares a los monocitos normales. Frotis de sangre canina; objetivo 50x.

TRANSTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

55

con la cantidad de celulas maduras. En cambio, durante una respuesta leucoeritroblastica, aparecen normalmente mas precursores de eritrocitos y leucocitos maduros que celulas inmaduras.

Figura 9.21. Eritroleucemia. Otro campo de visión del frotis de sangre mostrado en la figura 9.20. Aparecen celulas de la serie de los eritrocitos y granulocitos. La presencia de celulas inmaduras de las series de granulocitos y de eritrocitos, el numero disminuido de eritrocitos (anemia) y la falta de policromatofilos y neutrófilos segmentados maduros son rasgos representativos de la eritroleucemia. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 9.19. Leucemia monocitica aguda. Otro campo de visión del frotis de sangre mostrado en la figura 9.18. La celula grande (centro) con un núcleo oval y nucléolos múltiples pobremente perceptibles es un monoblasto. Debido a la presencia de cantidades elevadas de celulas de morfología monocitica como se muestra en la figura 9.18 y monoblastos, representa una leucemia monocitica aguda. Se recomienda el uso de una tinción citoquimica para la confirmación de la serie celular. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Leucemia megacarioblastica

La leucemia megacarioblastica se reconoce por la cantidad elevada de megacarioblastos en la circulación. Como sucede con otras leucemias poco diferenciadas, puede llegar a ser difícil distinguir los megacarioblastos de otros blastocitos atendiendo exclusivamente a la morfología. Se han descrito incrementos o disminuciones del numero de plaquetas así como la presencia de plaquetas gigantes y la hipogranulacion o la hipergranulacion de las plaquetas.

Leucemia mieloide cronica

Figura 9.20. Eritroleucemia. Aparecen tres eritrocitos nucleados en la esquina superior izquierda. Una celula inmadura grande, probablemente un precursor de granulocito temprano aparece en la esquina inferior derecha. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

La leucemia mieloide cronica se reconoce por las grandes cantidades de celulas de la serie de los granulocitos bien diferenciados (neutrófilos, eosinofilos o basofilos). Estos trastornos se denominan según el tipo de celula predominante en la sangre. Por ejemplo, si aparecen principalmente eosinofilos, se trata de una leucemia eosinofilica. En estos casos así como en otras leucemia mieloides crónicas, además de la presencia de celulas maduras, pueden tambien aparecer celulas inmaduras. Esto puede observarse en la leucemia eosinofilica, por lo que pueden aparecer eosinofilos en banda, metamielocitos y mielocitos; sin embargo, predomina ampliamente el tipo de celula madura. Si predominan las celulas de la serie de los neutrófilos, el trastorno se conoce como leucemia granulocítica cronica o mielocitica (figuras 9.22 y 9.23).

56

TRASTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

Figura 9.24. Mielosis eritremica. Aparecen seis eritrocitos nucleados. Este descubrimiento asociado con una bajo numero de eritrocitos (anemia) y una falta de policromasia es característico de la mielosis eritremica. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 9.22. Leucemia granulocitica cronica. Aparecen muchos neutrófilos segmentados. Las cantidades elevadas de neutrófilos, en ausencia de inflamación, presentes en este animal diagnostican una leucemia granulocítica cronica. Frotis de sangre canina; objetivo 50x.

Policitemia vera Una leucemia bien diferenciada de la serie de los eritrocitos se conoce con el nombre de Policitemia vera, en la que no existe generalmente una morfología anormal del eritrocito; solo aparecen en cantidades muy elevadas. Raramente, se han observado tambien recuentos elevados de leucocitos en estos animales. Este hallazgo sugiere una afectación múltiple de series celulares, mas que una única anormalidad eritrocitica. Trombocitemia esencial Una leucemia bien diferenciada de la familia de los megacariocitos se conoce como trombocitemia esencial (figura 9.25). La morfología anormal de las plaquetas como plaquetas gigantes, hipogranulacion e hipergranulacion de las mismas han sido descritos además de la trombocitosis marcada que se observa. Figura 9.23. Leucemia granulocítica cronica. Se trata de una ampliarion del frotis de sangre mostrado en la figura 9.22. Observe la cantidad de neutrófilos que aparecen, la mayoría de los cuales estan hipersegmentados. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Otros Mielosis eritremica La mielosis eritremica ha sido clasificada históricamente como una leucemia de la serie de los eritrocitos. Este trastorno ha sido rebautizado o bien como sindrome mielodisplasico con predominio de eritrocitos o eritroleucemia con predominio de eritrocitos y, principalmente, se presenta en gatos. En este trastorno, aparecen precursores de eritrocitos en la sangre con una falta significativa de policromatofilos (figura 9.24). La mayoría de estas celulas son normalmente metarubricitos y rubricitos, pero pueden aparecer también prorubricitos y rubriblastos.

Figura 9.25. Trombocitosis marcada. Aparecen muchas plaquetas en todo el campo. Esta trombocitosis extrema es típica de la trombocitemia esencial. Frotis de sangre canina de la revisión de diapositivas de la ASVCP de 1987, cortesía de J. G. Zinkl; objetivo lOOx.

TRANSTORNOS LINFOPROLIFERATIVOS Y MIELOPROLIFERATIVOS

Proliferacion neoplasica de mastocitos La proliferacion neoplasica de mastocitos, aunque no sea una verdadera leucemia, puede ocurrir en la medula osea con la emision subsiguiente de dichas celulas a la circulación (figuras 9.26 y 9.27). Esto puede originar que se hallen cantidades elevadas de mastocitos en la circulación, ya sea pobremente granulados o bien granulados. Los mastocitos que aparecen en la circulación (mastocitemia) secundarios a una proliferacion neoplasica deben diferenciarse de los mastocitos de la circulación asociados a una enfermedad inflamatoria. Normalmente, cuando aparecen mastocitos en la circulación después de una enfermedad inflamatoria, las celulas están bien granuladas y aparecen en pequeñas cantidades. Se trata, a menudo, de una respuesta muy transitoria.

Figura 9.26. Mastocitemia. Aparecen tres mastocitos. Si aparece una gran cantidad de mastocitos en la circulación y no existe enfermedad inflamatoria, es probable que se produzca un proceso neoplasico sistémico de mastocitos. Frotis de sangre felina; objetivo 50x.

Figura 9.27. Mastocitemia. Otro campo del frotis de sangre mostrado en la figura 9.26. Aparecen dos mastocitos bien granulados. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

57

CAPITULO DIEZ

DESCUBRIMIENTOS VARIOS Existen varios tipos diferentes de celulas que el principiante no acierta a clasificar con precisión. Estos tipos de celulas quedan contrastadas en este capitulo. Los linfocitos pequeños se confunden a veces con los eritrocitos nucleados, especialmente con los rubricitos (figura 10.1) Estos dos tipos de celulas tienen una relación nuclear o citoplasmática muy alta y núcleos redondos. La principal diferencia es el tipo de cromatina nuclear. Los linfocitos pequeños tienen una cromatina nuclear homogenea, de aspecto vítreo o manchada con algunas áreas de condensación. En cambio, los rubricitos tienen una cromatina nuclear mas gruesa, granular y grumosa. El color del citoplasma puede ser también de mucha ayuda. El citoplasma de los rubricitos va del azul oscuro al azul rojizo, mientras que el citoplasma de los linfocitos pequeños es normalmente de color azul claro pero puede ser azul oscuro si es reactivo. Los linfocitos grandes se confunden, a veces, con los monocitos que no tienen vacuolas en el citoplasma (figura 10.2). Ambas celulas tienen una relación núcleo/ citoplasma moderada. Los núcleos de los linfocitos grandes son normalmente redondos u ovales pero pueden ser dentados. En cambio, los núcleos de los monocitos pueden ser redondos u ovales pero normalmente tienen múltiples muescas. El tipo de cromatina de los linfocitos grandes es mas homogénea en comparación con la

cromatina con aspecto de red y con varias áreas de grumos del monocito. Ambas celulas tienen citoplasma azul; sin embargo, el citoplasma del monocito es normalmente mas azul-grisáceo. Si se observa una celula grande que pueda ser un monocito o un linfocitos, puede ser útil buscar un monocito mas clásico, con vacuolas y comparar esta celula con la celula en cuestión y ver si la cromatina nuclear y el color del citoplasma son similares o diferentes. Los monocitos se confunden a veces con los neutrófilos en banda tóxicos y los metamielocitos. Diferenciar estas celulas es uno de los grandes retos de la identificación celular (figura 10.3). Los monocitos, los neutrófilos en banda tóxicos y los metamielocitos tienen a veces el mismo tamaño con citoplasma azul. El núcleo de los monocitos puede tener la forma de banda o de riñón, similar al núcleo del neutrófilos en banda y del metamielocito, respectivamente. Una de las diferencias principales entre estos tres tipos de celulas esta relacionada con los tipos de cromatina nuclear. La cromatina nuclear del monocito es parecida a un encaje o a una red con algunas áreas de condensación, y la cromatina de las celulas de la serie neutrofilica es mas condensada o en forma de grumos. La presencia de cuerpos de Dohle ayuda también a identificar con precisión la celula como un neutrófilos inmaduro; los cuerpos de Dohle no aparecen en los monocitos. Otros tipos de celula incluyen celulas mancha, picnoticas y mitóticas. Las celulas mancha son solo celulas rotas (figura 10.4), y es imposible identificar con precisión su origen exacto. Normalmente, sin embargo, no tendrán membranas celulares intactas y el citoplasma se pierde; solo aparece cromatina nuclear libre. Estas celulas se conocen también con el nombre de celulas cesta, debido a la delicada dispersión de las hebras de cromatina nuclear. En preparaciones normales pueden aparecer cantidades reducidas de estas celulas. Aparecerán cantidades elevadas si la muestra de sangre es lipemica o, a veces, cuando aparecen cantidades elevadas de celulas neoplasicas, posiblemente mas frágiles. Las celulas que experimenten picnosis, que es un proceso natural de deterioro y muerte celular, tienen una cromatina nuclear muy condensada (figura 10.5). Resulta a menudo imposible explicar el origen de las celulas picnoticas. Los cuerpos nucleares picnoticos pueden experimentar fragmentación, y pueden aparecer muchos trozos pequeños de material nuclear condensado. Las celulas mitóticas son celulas que se están dividiendo y por ello los cromosomas son visibles (figura 10.6). El origen exacto de las celulas mitóticas es a me-

Figura 10.1. Rubricito vs. linfocito. La celula (a la izquierda del centro) con un núcleo redondo y cromatina muy densa y un borde de citoplasma azul-rojizo es un rubricito. La celula (a la derecha del centro) con un núcleo redondo u oval, ligeramente dentado y cromatina nuclear borrosa con algunas áreas de condensación es un linfocito pequeño. Observe que el citoplasma del linfocito es de color azul claro en comparación con el citoplasma azul-rojizo del rubricito. Frotis de sangre canina: objetivo lOOx.

59

60

DESCUBRIMIENTOS VARIOS

Figura 10.2. Linfocito grande. La celula con un núcleo oval y moderada cantidad de citoplasma azul claro es un linfocito grande. Observe que la cromatina es mas homogénea en comparación con la cromatina en forma de red con áreas de condensación de los monocitos de la figura 10.3. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 10.4. Celula mancha. La estructura grande de color purpura pálido y de aspecto de red, del centro derecha del campo es una celula rota o mancha; se trata de cromatina nuclear libre. Aparece un neutrófilos (abajo a la izquierda). Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 10.3. Monocito vs. neutrofilo enbanda tóxico. Las dos celulas nucleadas del cuadrante inferior izquierdo son monocitos. La celula nucleada grande del cuadrante superior derecho es un neutrófilos en banda toxico. Observe que el tipo de cromatina del neutrófilos en banda es mucho mas condensada o mas grumosa en comparación con el tipo de cromatina mas abierto y con aspecto de red del monocito. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 10.5. Celula picnotica. La celula (centro) con citoplasma rosa y cuatro fragmentos nucleares marcadamente condensados es un neutrófilos picnotico. Aparece un neutrófilos segmentado normal a la derecha del neutrófilos picnotico. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

nudo difícil de identificar. No es frecuente observarlas en la circulación periférica pero, si aparecen en cantidades significativas, puede haber un proceso neoplasico. La identificación de celulas depende a menudo de reconocer el color de la celula, lo que a su vez depende del tipo y de la calidad de la tinción utilizada. Una tincion de Wright modificada, habitualmente usada y rapida, es el Diff-Quik®. Con este colorante, el color de las celulas malignas es ligeramente diferente en comparación con el color de las celulas de las microfotografías

mostradas a lo largo de todo el texto, tenidas con la tinción de Wright. Una de las principales diferencias es el color de los eritrocitos. A menudo, los eritrocitos maduros se tiñen de gris-azulado o rojo-pardo con DiffQuik® (figura 10.7). Los policromatofilos pueden resultar de difícil identificación puesto que se tiñen de azul-rojizo o azulado-purpura. El citoplasma de los neutrófilos, tam-bien es a menudo mas azulado, lo que puede confundir con una toxicidad suave. Finalmente, la cromatina de la mayoría de las celulas nucleadas se vuelve a menudo

DESCUBRIMIENTOS VARIOS

61

Figura 10.6. Figura mitótica. La celula azul con un núcleo de forma irregular es una celula que experimenta mitosis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 10.8. Rubricito. La celula del centro derecha del campo es un rubricito. Observe la marcada cromatina grumosa en comparacion con el rubricito de la figura 10.1. Aparecen también policromatofilos (celulas mas grandes y que se tiñen de azul-purpura) y eritrocitos maduros. Frotis de sangre bovina; colorante DiffQuik®; objetivo lOOx.

Figura 10.7. Eritrocitos maduros y policromatofilos. Las celulas azuladas del centro del campo y en la esquina superior izquierda son policromatofilos. Las celulas restantes son eritrocitos maduros y plaquetas. Frotis de sangre bovina; tinción de Diff-Quik®; objetivo lOOx.

Figura 10.9. Microfilaria. La estructura grande y alargada del centro del campo es una Microfilaria. Frotis de sangre canina; objetivo 50x.

mas acentuada o agrupada cuando se utiliza el colorante Diff-Quik® (figura 10.8). Dos organismos extracelulares que pueden aparecer en la sangre son las microfilarias y los tripanosomas. Las microfilarias se reconocen fácilmente gradas a su gran tamaño. Normalmente, miden unos cuantos cientos de micras de longitud y varios de grosor (figura 10.9). Debido a su gran tamaño, los organismos a veces acaban en la cola del frotis de sangre. Las dos microfilarias que se reconocen mas fácilmente son Dirofilaria immitis y

Dipetalonema reconditum, que aparecen muy a menudo

en perros. Algunas características, incluidas la longitud, la forma y el grosor pueden utilizarse para distinguir estos dos tipos distintos de Microfilaria. Estos rasgos se evalúan mejor en preparaciones húmedas o preparaciones fijadas. Generalmente, si aparece una Microfilaria en un frotis de sangre secado al aire, se consignan como mera Microfilaria y se necesitaran otros tests para una clasificación precisa. Raramente se observan tripanosomas en la sangre periférica de los animales, pero

62 DESCUBRIMIENTOS VARIOS su significado varia de un área a otra. De las especies no patógenas ampliamente distribuidas, el Tripanosoma theileri en ganado (figura 10.10) en América del Norte, Oeste de Europa y Australia y T. melophagium en ovejas, son los mas comunes. Los tripanosomas patógenos son parásitos importantes y se pueden detectar en caballos y vacas en zonas tropicales y subtropicales, Tripanosoma cruzi en perros se encuentra principalmente en los Estados Unidos y en América del Sur y América Central. Se trata de grandes estructuras alargadas en forma de cinta, a menudo con extremos afilados. Frecuentemente, presentan una membrana ondulante imperceptible en un costado y una pequeña estructura interna redonda, que se tiñe profundamente, conocida como cinetoplasto. T. theileri mide de 25 a 120 um de longitud. T. cruzi mide de 16 a 20 um de longitud.

Figura 10.10. Tripanosoma theileri. La estructura en forma de cinta con extremos afilados es típica de las especies de tripanosoma. Este espécimen, rodeado por un agregado de plaquetas es típico de T. theileri. Observe la membrana débilmente tenida a lo largo del borde convexo y el delicado flagelo alargado en un extremo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx

APENDICES APENDICE 1: ESQUEMA DE GRADACIÓN SEMICUANTITATIVA PARA LA EVALUACIÓN DE LA MORFOLOGÍA ERITROCITARIA Esquema de gradación Morfología y Especies

1+

2+

3+

4+

Anisocitosis Perro Gato Vaca Caballo

7-15 58 10-20 1-3

16-20 9-15 21-30 4-6

21-29 16-20 31-40 7-10

>30 >20 >40 >10

Policromasia Perro Gato Vaca Caballo

2-7 1-2 2-5 raramente

8-14 3-8 610 raramente

15-29 9-15 11-20 raramente

>30 >15 >20 raramente

Hipocromía Todas las especies

1-10

11-50

51-200

>200

Poiquilocitosis Todas las especies

3-10

11-50

51-200

>200

Células diana Perros únicamente

3-5

6-15

16-30

>30

Esferocitos Todas las especies

1-10

11-50

51-150

>150

Morfología variada (acantocitos, esquistocitos, dacriocitos, cuerpos Heinz, cuerpos Howell-Jolly, etc.) Todas las especies Punteado basofilo Todas las especies

1-2

3-8

9-20

>20

— consignado como se apercibe al observar —

Fuente: Adaptado de la tabla 3 por Weiss, Douglass J. 1984. Evaluación uniforme e informe semicuantitativo de los datos hematológicos en laboratorios de veterinaria. Veterinary Clinical Pathology 13(2):27-31. Permiso otorgado por la Veterinary Practice Publishing Company.

* Se valora la morfología del eritrocito como el promedio de células anormales en la monocapa del frotis utilizando el objetivo lOOx. Al utilizar esta tabla se define una monocapa como un campo microscópico en la que aproximadamente la mitad de los glóbulos rojos están en contacto uno con otro.

63

64

APENDICES

APENDICE 2: ESQUEMA DE GRADACIÓN SEMICUANTITATIVA PARA LA EVALUACIÓN DE LA TOXICIDAD DE LOS NEUTR6FILOS Toxicidad de los neutrófilos* 1+ Basofilia suave 2+ Puede observarse basofilia moderada y/o citoplasma débilmente vacuolada y cuerpos de Dohle 3+ Puede observarse una marcada basofilia y/o citoplasma marcadamente vacuolado y cuerpos de Dohle 4+ Criterio similar al 3+ con membranas nucleares imperceptibles * En gatos y caballos, pueden aparecer los cuerpos de Dohle sin otros signos de toxicidad; si es así, deberá utilizarse la clasificación siguiente: 1+ <10% de neutrófilos contienen cuerpos de Dohle 2+ 10 a 30% de neutrófilos contienen cuerpos de Dohle 3+ >30% de neutrófilos contienen cuerpos de Dohle

GLOSARIO Acantocito Eritrocito con protuberancias irregulares múltiples de varios tamaños en la membrana, debidas a alteraciones de la relación de colesterol y fosfolípidos en la membrana.

Banda, célula en Tipo de leucocito con una membrana nuclear cuyos lados son paralelos, aunque puedan presentar ligeras muescas. Las células en banda pueden pertenecer a la serie de los neutrófilos, eosinofilos o basofilos.

Acido etilendiaminotetraacetico Anticoagulante mas utilizado para la extracción de sangre para un examen hematológico.

Barra, célula de Eritrocito con un repliegue central hacia el exterior en forma de barra. Esta célula se conoce también con el nombre de «knizocito».

Aglutinacion Agregación de eritrocitos debido normal-mente a la interconexion de anticuerpos asociados en la superficie de los eritrocitos.

Basofilia Reacción de una célula a la tinción de Wright que se tiñe de azul el citoplasma; describe también el color del citoplasma de los neutrófilos tóxicos o se refiere a un aumento del numero de basofilos en la circulación.

Agranulocito Leucocito que no contiene gránulos secundarios. Los dos tipos de agranulocitos son linfocitos y monocitos.

Basofílico Color azulado en las preparaciones con tinción de Wright; se refiere también a los basófilos.

Ampolla, célula Eritrocito con una vacuola de membrana.

Basófilo Leucocito de la serie de los granulocitos con un núcleo segmentado, citoplasma púrpura y a menudo gránulos citoplasmáticos del mismo color.

Anemia Condición en la que la concentración de hemoglobina, el valor hematocrito y la cantidad de eritrocitos se encuentran por debajo de los límites normales.

«Buffy coat» Capa de leucocitos y plaquetas que se acumula inmediatamente encima de los eritrocitos en sangre entera centrifugada; tiene un aspecto blanco.

Anemia no regenerativa Anemia en la que no existe una producción adecuada de eritrocitos en la medula ósea.

Célula Smudge Célula con ninguna membrana celular intacta, sino únicamente material de cromatina nuclear libre. Esta célula se conoce también con el nombre de célula de cesta a causa de las delicadas hebras de cromatina nuclear dispersa en forma de cesta.

Anemia regenerativa Anemia en la que existe un aumento en la producción de los eritrocitos en la medula ósea, con la subsiguiente liberación a la circulación periférica.

Citoplasma Zona de la célula con exclusión del núcleo.

Anisocitosis Variación del tamaño de las células; en hematología, se utiliza principalmente para describir Variaciones en el tamaño de los eritrocitos.

Coagulación intravascular diseminada (CID) Estado fisiopatológico que puede desarrollarse a causa de lesiones en las células endoteliales, activación de las plaquetas y activación de la coagulación. Esto produce a menudo graves y anormales hemorragias.

Azurófilicos, gránulos Gránulos del citoplasma que se tiñen de color rosa o rojo-púrpura con la tinción de Wright.

65

66 GLOSARIO Codocito Eritrocito con un repliegue redondo adicional en la membrana, en mitad de la célula, que da a esta el aspecto de una diana. Esta célula se conoce normalmente con el nombre de célula diana. Crenación Artefacto in vitro que origina la formación de eritrocitos con multitud de pequeños puntos finos de forma regular en la membrana de la célula.

Equinocito Eritrocito con pequeñas y múltiples púas delicadas, de forma regular, distribuidas de manera uniforme alrededor de la membrana. La causa mas común de la formación de equinocitos es un artefacto in vitro conocido como Crenación. Eritrocito Glóbulo rojo maduro. Eritropoyesis Producción de eritrocitos.

Cromatina Complejo de DNA y proteínas nucleares. Dacriocito Eritrocito con forma de lágrima que puede observarse en animales con mielofibrosis. Desoxirribonucleico, acido (ADN) Acido nucleico que contiene la información genética básica encontrada en el núcleo de las células. Desviación a la izquierda Incremento en el número de neutrófilos en banda y otras células inmaduras de la serie de los granulocitos en la sangre periférica. Diana, célula Eritrocito con un repliegue extra, redondo, de la membrana en medio de la célula, que da a esta el aspecto de una diana. Esta célula se conoce también con el nombre de codocito. Diff-Quik®. Preparado disponible comercialmente para teñir manualmente preparaciones con un colorante de Wright modificado.

Erizo, célula Eritrocito oval protuberancias múltiples finas.

y

alargado

con

Esferocito Eritrocito de aspecto mas pequeño que carece de palidez central y que, a menudo, es el resultado de una lesión inmunomediada de la célula. Esquistocito Fragmento de forma irregular de un eritrocito. Estomacito Eritrocito con palidez central que tiene forma oval y alargada, y que toma el aspecto de una boca. Excentrocito Eritrocito con un área clara de forma creciente que esta situada excéntricamente. Esta célula se forma debido a daños inducidos por agentes oxidantes sobre las membranas del eritrocito. Fantasma, célula Membrana residual de un eritrocito.

Diseritropoyesis Mielodisplasia de células de la serie de los eritrocitos. Disgranulopoyesis Mielodisplasia de la serie de los granulocitos. Distrombopoyesis Mielodisplasia de las plaquetas. Dohle, cuerpos de Estructura pequeña, redonda o irregular, azul, en el citoplasma de las células de la serie de los neutrófilos. Es una agregación anormal de ARN en la célula y un signo de toxicidad. Eosinófilo Leucocito de la serie de los granulocitos con gránulos rojizos o rojizo-anaranjados en el citoplasma.

Glóbulo blanco (GB) Célula sanguínea nucleada que no contiene hemoglobina. Esta célula se conoce también como leucocito. Los dos tipos principales. de leucocitos son los granulocitos y los agranulocitos. Glóbulo rojo (GR) Célula anucleada que se tiñe de rojo o de rojo-anaranjado con la tinción de Wright. La función principal del glóbulo rojo es transportar oxigeno. Granulocito Leucocito que contiene gránulos citoplasmáticos secundarios, conocidos también como específicos. Los tres tipos diferentes de granulocitos son los neutrófilos, los eosinofilos y los basofilos. Granulopoyesis Producción de granulocitos que incluye células de las series de neutrófilos, basofilos y eosinofilos.

GLOSARIO 67 Heinz, cuerpo de Protuberancia redondeada, a menudo refráctil, de la superficie del eritrocito debido a la oxidación y desnaturalización de la hemoglobina. Hematocrito Porcentaje de eritrocitos en relación al plasma. Hematología Estudio de la sangre.

Linfocito Leucocito de la serie de agranulocitos que se caracteriza por un núcleo redondo y citoplasma azul claro. Existen dos tipos principales: linfocitos B, que se desarrollan en plasmocitos y producen anticuerpos y linfocitos T, que son importantes en la respuesta de inmunidad celular. Linfocito reactivo Linfocito con citoplasma azul oscuro y, algunas veces, una zona clara perinuclear. Asimismo, la célula puede ser mas grande que el típico linfocito pequeño.

Hematopoyesis Producción de células sanguíneas. Hemoglobina Proteína de los eritrocitos que transporta oxigeno.

Linfoproliferativo, trastorno Proliferación neoplásica clónica de células de la serie de los linfocitos. Macrocito Eritrocito que es mas grande de lo normal.

Hemosiderina Forma insoluble del hierro que se presenta como un material granular y globular de color dorado-marrón a negro. Hipocromía Presencia de eritrocitos en la circulación que ha aumentado la palidez central y disminuido la intensidad de coloración de la membrana debido a un reducido contenido de hemoglobina. Hipocrómica, célula Un eritrocito con palidez central aumentada y con intensidad de coloración de la membrana disminuida. Howell-Jolly, cuerpo de Pequeño fragmento de material nuclear residual del eritrocito. Knizocito Eritrocito con un repliegue central en forma de barra. Esta célula se conoce también como una célula en barra. Leptocito Eritrocito que, normalmente, es mas grande con una membrana excesivamente delgada que se dobla fácilmente. Las célula diana y las células de barra son tipos de leptocitos. Leucemia Proliferación neoplásica de células originarias de la medula ósea que, por lo general, se liberan a la sangre. Leucemoide Perteneciente a la presencia de cantidades elevadas de granulocitos neutrófilos en la circulación, a menudo, con muchas formas inmaduras; debido al grado de elevación del recuento de leucocitos, puede confundirse con la leucemia verdadera. Leucocito Glóbulo blanco.

Macrófago Célula fagocítica, grande, encontrada en tejidos tales como la medula ósea; esta célula se desarrolla a partir de un monocito sanguíneo. Mastocito Célula redonda, granulada, encontrada en cantidades reducidas en la medula ósea. Medula ósea Zona central de huesos largos, pianos e irregulares, que es el lugar principal de la hematopoyesis. Medular Perteneciente a la medula ósea. Megacariocito Célula muy grande que produce plaquetas y que se encuentra en la medula ósea. Metamielocito Etapa de desarrollo de los granulocitos entre el mielocito y la célula en banda. Metarubricito Etapa de desarrollo de los eritrocitos entre el rubricito y el policromatofilo. Mieloblasto Célula que es la primera etapa, identificable microscópicamente, del desarrollo de los granulocitos encontrados en la medula ósea. Mielocito Etapa de desarrollo de granulocitos entre el promielocito y el metamielocito. Mielodisplasia Alteraciones de desarrollo y maduración normales de células de la serie mieloide.

68 GLOSARIO

Mielofibrosis Condición en la que la medula ósea tiene tejido conjuntivo fibroso aumentado en diferente grado que desplaza los precursores normales de las ce-lulas sanguíneas. Mieloide Perteneciente a la medula ósea. Más específicamente, este término se utiliza para describir colectivamente las células de las series de granulocitos, eritrocitos, megacariocitos y monocitos. Mieloproliferativo, trastorno Proliferación neoplásica clónica de células de la serie mieloide. Mitótica, célula Célula que experimenta una división; los cromosomas son visibles. Monocito Leucocito de la serie de los agranulocitos que se caracteriza por un núcleo de forma variada y citoplasma azul-gris, que frecuentemente se vacuoliza. Neutrófilo Leucocito de la serie de los granulocitos con un núcleo segmentado y citoplasma rosa o azul palido. Núcleo Estructura esférica central dentro de una célula que contiene ADN, nucléolos y proteínas nucleares. Nucleolo Estructura pequeña, redonda, en los núcleos de las células que contiene ARN y proteína; normalmente se tiñe de azul con la tinción de Wright. Nuevo azul de metileno Colorante utilizado para identificar reticulocitos y para observar de manera mas fácil los cuerpos de Heinz. Osteoblasto Célula de la medula ósea que se encuentra en cantidades reducidas y que es importante para la fabricación de los huesos. Osteoclasto Célula multinucleada muy grande de la medula ósea que es importante para remodelar los huesos. Ovalocito Eritrócito de forma oval. Pappenheimer, cuerpos Inclusiones de hierro en los eritrocitos que se presentan como gránulos de color azul claro con la tinción de Wright.

Perforada, célula Eritrocito con una palidez central acentuada. Esta célula se conoce también como torocito. Picnótica, célula Célula con un núcleo pequeño y cromatina muy condensada. Pilas de moneda Filas lineales organizadas y a veces cadenas ramificadas de eritrocitos. Plaqueta Pequeño fragmento citoplasmático anucleado de megacariocito que aparece en la sangre periférica y que es importante en la hemostasia. Esta célula se conoce también como trombocito. Plasma Fracción liquida de la sangre entera no coagulada. Plasmocito Célula oval con núcleos excéntricos; puede encontrarse en la medula ósea y produce anticuerpos. Poiquilocitosis Presencia en el torrente sanguíneo de eritrocitos de forma anormal. Policromatofilo Eritrocito inmaduro que es normalmente mas grande que un eritrocito maduro y que se tiñe de color azul o azul-rojo con la tinción de Wright. Policromía Presencia de policromatofilos en la sangre. Promielocito Etapa de desarrollo de los granulocitos entre el Mieloblasto y el mielocito. Prorubricito Etapa de desarrollo de los eritrocitos entre el rubriblasto y el rubricito. Punteado basofilo Presencia de cuerpos muy pequeños que se tiñen de azul oscuro en el eritrocito. El punteado se debe normalmente a una acumulación de ARN pero puede ir ligado a la acumulación de hierro. Queratocito Eritrocito con dos protuberancias en forma de cuerno completamente uniformes. Reticular Semejante a una red. Retículo endoplasmatico rugoso Organela citoplasmática importante para la síntesis de las proteínas.

GLOSARIO 69 Reticulocito Eritrocito inmaduro que contiene agregaciones de ARN ribosomal y mitocondrias, que se tiñe con el nuevo azul de metileno. Estas células corresponden a los policromatofilos observados en las preparaciones tenidas con Wright. Ribonucleico, acido (ARN) Acido nucleico que es importante para la síntesis de las proteínas. Rubriblasto Célula que es la primera etapa identificable microscópicamente del desarrollo de los eritrocitos encontrados en la medula ósea. Rubricito Etapa del desarrollo de los eritrocitos entre el prorubricito y el metarubricito. Sideroblasto Eritrocito nucleado que contiene cuerpos de Pappenheimer.

Siderocito Eritrocito anucleado que contiene cuerpos de Pappenheimer. Torocito Eritrocito con una palidez central acentuada. Esta célula se conoce normalmente como célula perforada. Toxicidad Grupo de cambios morfológicos durante la inflamación que pueden aparecer en células de la familia de los neutrófilos. Los tres rasgos principales de toxicidad son la basofilia aumentada, la vacuolizacion y la presencia de cuerpos de Dohle en el citoplasma. Trombocito Pequeño fragmento citoplasmático anucleado de un megacariocito que aparece en la sangre periférica y que es importante en la hemostasia. Esta célula se conoce también como plaqueta.

REFERENCIAS SELECCIONADAS Alleman, A.R. y Harvey, J. W. 1993. The morphologic effects of vincristine sulfate on canine bone marrow cells. Veterinary Clinical Pathology 22(2):33-41. Duncan, J. Robert, Prasse, Keith W.; and Mahaffey, Edward A. 1994. Veterinary Laboratory Medicine: Clinical pathology, 3a ed. Ames: Iowa State University Press. Fox, J.C.; Ewing, S.A.; Buckner, R.G.; Whitenack, D.; y Manley, J.H. 1996. Trypanosoma cruzi infeccion in a dog from Oklahoma. Journal of the American Veterinary Medical Association 189(12): 1583-1584. Fufe, John C; Jezyk, Peter E; Giger, Urs; y Patterson, Donald F. 1989. Inherited selective malabsorption of vitamin B12 in giant schnauzers. Journal of the American Animal hospital Association 25: 533-539. Glenn, Bertis L., y Stair, Ernest L. 1984. Cytauxzoonosis in domestic cats: Report of two cases in Oklahoma, with a review and discussion of the disease. Journal of the American Veterinary Medical Association 184(7): 822-825. Jain, Nemi C. 1986. Schalms Veterinary Hermatology, 4' ed. Philadelphia: Lea and Febiger. Jain, Nemi C. 1993. Essentials of Veterinary hermatology, 4n ed. Philadelphia: Lea and Febiger. Latimer Kenneth S. 1995. Leukocites in health and disease. In Textbook of Veterinary Internal Medicine: Diseases of the Dog and Cat, 4a ed., vol, 2, pp 18921929. Ed. Stephen J. Ettinger y Edward C. Feldman, Philadelphia: W.B. Saunders Company. Myers, S; Wiks, K.; y Giger, U. 1995. Macrocytic anemia caused by naturally-occurring folate-deficiency in the cat. Veterinary Pathology 32(5):547. Reagan, William J. y Revar, Alan H. 1995. Platelet disorders. In Textbook of Veterinary Internal Medicine: Diseases of the Dog and Cat, 4a ed., vol, 2, pp 19641976. Ed. Stephen J. Ettinger y Edward C. Feldman, Philadelphia: W.B. Saunders Company.

Reagan W.J.; Garry, F.; Thrall, M.A.; Colgan, S.; Hutchison, J.; y Weiser, M.G. 1990. The clinicopathologic, light, and scanning electron microscopic features of eperythrozoonosis in four naturally infected llamas. Veterinary Pathology 27:426431. Rich, Lon J. 1976. The Morphology of Canine and Feline Blood Cells, Missouri: Ralston Purina Company. Taboada, Joseph y Merchant, Sandra R. 1995. Protozoal and miscellanous infeccions. In Textbook of Veterinary Internal Medicine: Diseases of the Dog and Cat, 4a ed., vol, 1, pp 384-397. Ed. Stephen J. Ettinger y Edward C. Feldman, Philadelphia: W.B. Saunders Company. Van Houen, D.; Weiser, M.G.; Johnson, L. Y Garry, F. 1992. Reference hematologic values and morphological features of blood cells in healthy adult llamas. American Journal of Veterinary Research 53(10): 17731779. Weiser, M.G. 1995. Erythrocite responses and disorders. In Textbook of Veterinary Internal Medicine: Diseases of the Dog and Cat, 4a ed., vol, 2, pp 1864-1891. Ed. Stephen J. Ettinger y Edward C. Feldman, Philadelphia: W.B. Saunders Company. Weiss, Douglas, J. 1984. Uniform evaluation and semiquantitive reporting of hematologic data in veterinaru laboratories. Veterinary Clinical Pathology 13(2):27-31. Williard, Michael D.; Tvedten, Harold; y Turnwald, Grant H. 1989. Small Animal Clinical Diagnosis by Laboratory Methods. Philadelphia: W.B. Saunders Company.

71

INDICE Los primeros en negrita indican paginas con figuras Acumulaciones de hierro (en eritrocitos), 25, 25 Agranulocitos, Variaciones inmunocitos, 40, 41 linfoblastos, 40, 41 linfocitos atipicos, 40, 41 linfocitos reactivos plasmocitoides, 40, 41 monocitos, 40-41, 41 Agregaciones de ARN retenidas. Consulte Punteado basofilo Alfa-manosidosis, 44-45 Anaplama marginale, 26, 27 Anemia, 17, 18 Anisocitosis, 13, 14 Artefactos refractiles (en eritrocitos) y parasites en eritrocitos, 26, 26 Babesia canis, 27, 27 Babesia gibsoni, 27, 27 Basofilia y toxicidad, 37, 38-39 Basofilos, 30, 31-35 durante la granulopoyesis, 6-7 Carencia de hierro, celulas hipocromicas, 22, 22-23 Celulas ampolla, 22, 22 Celulas barra, leptocitos, 23, 24 Celulas cesta, 59.. Celulas de la medula osea eritropoyesis, 5, 5-6, 10 granulopoyesis, 6-7, 7 linfopoyesis, 3, 7-8 macrofagos, 8, 9 mastocitos, 9, 9 megacariocitopoyesis, 3,7 monocitopoyesis, 3, 7 osteoblastos 9, 9 osteoclastos 8, 9 producción de plaquetas, 3,7 Celulas diana, leptociticas, 23, 24 Celulas fantasma y lisis, 20, 20 Celulas hipocromicas, 22, 22-23 Celulas mancha, 59, 60 Celulas mitóticas, 59-60, 61 Celulas perforadas, 22, 23 Celulas picnoticas, 59, 60 Celulas progenitoras agranulocitos / linfocitos, 3, 3 / monocitos, 3, 3 eritrocitos, 3, 3

granulocitos, 3, 3 megacariocitos, 3, 3 Celulas rotas, 59 Centros medulares, 3 Citauxzoon fells, 28, 28 Coagulación intravascular diseminada y formación de esquistocitos, 24,24 Codocitos, 23, 24 Comparaciones de tipos de celulas monocitos vs. linfocitos, 59, 60 monocitos vs. metamielocitos, 59, 60 monocitos vs. neutrófilos en banda tóxicos 59, 60 rubricitos vs. linfocitos, 59, 59 Crenacion y equinocitos, 21, 21 Cuerpos de Russell en plasmocitos, 40 Daño oxidativo, 20, 20-21 cuerpos de Heinz, 20, 20 formación de excentrocitos, 20, 21 Daño oxidativo en eritrocitos debido a la exposición a drogas, 20, 20 Defectos metabólicos de membrana en eritrocitos y ovalocitos, 23, 23 estomacitos, 22, 23 ovalocitos, 22, 23 Desviación a la izquierda, 37 Desviación falsa a la izquierda, 37 Deterioro inmunitario, 19-20, 19-20 aglutinación, 19, 19 formación de celulas fantasma, 20,20 formación de esferocitos, 19, 19 Dipetalonema reconditum, 61 Dirofilaria immitis, 61-62 Dohle, cuerpos de toxicidad, 37, 38-39 utilización en identificación del tipodecelula,519 Ehrlichia canis, 43, 43 Ehrlichia equi, 45 Ehrlichia ewingii, 43, 43 Ehrlichia phagocytophilia, 45 Ehrlichia platys, 47, 48 Ehrliquiosis canina, 43 Eliptocitos, 23, 23 Enfermedad hepática acantocitos, 21, 21

73

leptocitos, 23, 24 Enfermedad renal y celulas erizo, 21, 21 Enfermedades de almacenamiento lisosomal, 44 enfermedad de Nieman-Pick, 44 gangliosidosis, 44-45 inclusiones neutrofilas en leucocitos, 38 manosidosis, 44-45 mucopolisacaridosis, 44, 44 Enfermedades linfoproliferativas, 40, 41 Envenenamiento por plomo deterioro de la medula osea, 17 punteado basofilo, 17 Eosinofilos, 29, 31-35 granulopoyesis, 6-7 Eperythrozoon ovis, 28 Eperythrozoon wenyoni, 28, 28 Equinocitos, 21, 21 Eritrocitos anisocitosis, 13, 14 desarrollo, 3, 5, 5, 10 especies diferentes, 13, 13-15 morfología, 13, 13-15 parasites, 26-28, 27-28 pilas de moneda, 13, 19 Variaciones morfológicas en daño inmunitario, 19-20, 19-20 alteración membrana/ metabólico, 21-23, 21-24 daño oxidativo, 20, 20-21 fragmentación mecánica, 24,24 respuestas regenerativas, 17-18, 18-19 Eritrocitos, inclusiones, 25-28, 25-28 Eritrocitos, parasites, 25-28, 25-28 Eritropoyesis, desarrollo, 5, 5-6,10 Eritrocitos, rasgos, 4, 5 Esplenectomía y corpúsculos de Howell-Jolly, 18 Esquistocitos, 24, 24 Estomatocitos, 22, 23 Extramedulares, lugares, 3 Fragmentación mecánica (de eritrocitos) dacriocitos, 24, 24

74

Knizocitos, 23, 24

esquistocitos, 24, 24 Fragmentación. Consulte Fragmentación mecánica Gangliosidosis, 44-45 Glóbulos rojos, parasites, 25-28, 27-28 Granulación toxica de neutrófilos, 37-38 Granulocito, desarrollo. Consulte Granulopoyesis Granulocitos neutrófilos y toxicidad, 37-38, 38-39 Granulocitos degranulacion eosinofilica, 38, 39, 40 gránulos eosinofilicos, 38-39, 40 hipersegmentacion neutrofilica, 38-39, 40 Granulopoyesis, 6, 6-7, 11 basofilica, 3, 6-7 eosinofilica, 3, 6-7 mieloblastos, 6 mielocitos, 6 neutrófilos, 6, 6-7, 11 promielocitos, 6 Gránulos azurofilos, 43, 43 Haemobartonella canis, 26-27, 27 Haemobartonella felis, 28, 28 Hemangiosarcoma y acantocitos, 2122, 22 Hematopoyesis eritropoyesis, 5, 5-6, 10 linfopoyesis agranulocitica, 3, 7 megacariocitopoyesis, 3, 7, 7 monocitopoyesis agranulocitica, 3,7 producción de plaquetas, 3, 7, 7 rasgos, 3, 3-5 Heparina aglutinación de eritrocitos, 19, 19 utilización en caballos, 19, 19 Hepatozoon canis, 43-44, 44 Hepatozoonosis, 43 Histoplasma capsulation, 44, 44 Howell-Jolly, corpúsculos de, 17-18,18,26,26 esplenectomía, 18 Inclusiones víricas en el moquillo canino, 43, 43 .: Inclusiones ••- '-•',e r i t r o c it o s, 2 5 - 2 8

leucocitos, 43-45 víricas, 26, 27 lnmunocitos, 40, 41

INDICE

■.-.

' '

Leptocitos celulas barra, 23, 24 celulas diana, 23, 24 Leucemia linfocitica granular, 50-51, 51 Leucemia linfocitica, 49, 50 Leucemia mieloide aguda, 53-55, 5355 Leucemia mieloide cronica, 55, 56 Leucemia, esquemas de clasificacion, 49 Leucocito, inclusiones, 43-45, 43-45 Leucocito, parasites, 43-45, 43-44 Leucocitos basofilo, 30, 31-35 desarrollo, 6, 6-7, 11 eosinofilo, 29, 31-35 linfocito, 29, 31-35 monocito, 29, 31-35 morfología, 29-35, 31-35 morfología de Variaciones, 37-42 neutrofilo segmentado, 29, 31-35 neutrófilos en banda, 6,11, 29 Variaciones en agranulocitos, 40-42, 41-42 granulocitos, 37-39, 37-39 Linfoblastos, 8, 40, 41 Linfocitos atipicos, 40, 41 Linfocitos B, 8, 8 Linfocitos reactivos plasmocitoides. 40,41 Linfocitos T, 8, 8 Linfocitos, 29, 40, 41 reactivos, 40, 41 variación morfológica, 40-42, 41 Linfopoyesis, 7-8 linfocitos B, 8, 8 linfocitos T, 8, 8 Linfosarcoma, 49, 50 Lisis intravascular, 20. 20 Macrofagos en la medula osea, 8, 9 Macroplaquetas, 47, 48 Mastocitos en medula osea, 9, 9 Medula osea, lugares de producción, 3 Megacarioblastos, 7 Megacariocitopoyesis, 3, 7 Megacariocitos, 7, 7 rasgos, 4, 5 Metarubricitos y eritropoyesis 5, 5,10 Microfilaria, 61-62, 61-62 Dipetalonema reconditum, 61-62 Dirofdaria immitis, 61-62 Mieloblastos, 6, 11

granulos primários, 6 metamielocitos, 6, 6, 11 mielocitos neutrófilos, 6, 6,11 morfologia, 6, 6, 11 neutrófilos en banda, 6, 6, 11 neutrófilos segmentados, 6, 6, 11 promielocitos, 6, 6, 11 Mielofibrosis y formación de dacriocitos, 24, 24 Mielosis eritremica, 56, 56 Monoblastos, 7 Monocito, desarrollo. Consulte Monocitopoyesis Monocitopoyesis monoblastos, 7 promonocitos, 7 Monocitos, 7, 29, 31-35, 40-41, 41 Moquillo canino, inclusiones víricas, 26, 27 Mucopolisacaridosis, 44, 44 Neutrofilos en banda, 6,11, 29 Neutrofilos segmentados, 29, 31-35 Neutrofilos, 29, 31-35 granulopoyesis, 6, 6 hipersegmentacion, 38-39, 39 Osteoblastos en medula osea, 9, 9 Osteoclastos en medula osea, 8, 9 Ovalocitos, 23, 23 Palidez central, cambios en eritrocitos, 22, 22-23 Papenheimer, cuerpos de, 25-26, 26 Parasites (en eritrocitos), 26-28 Anaplasma marginale, 26, 27 Babesia canis, 27, 27 Babesia gibsoni, 27, 27 Bovinos Anaplasma marginale, 28, 28 Eperythrozoon wenyoni, 28, 28 Caninos Babesia canis, 27, 27 Babesia gibsoni, 27, 27 Cytauxzoon felis, 28, 28 Eperythrozoon ovis, 28 Eperythrozoon suis, 28 Eperythrozoon wenyoni, 28, 28 Haemobartonella canis, 26-27,27 Felinos Cytauxzoon felis, 28, 28 Haemobartonella canis, 26-27, 27 Haemobartonella felis, 28, 28 Parasites (en leucocitos), 43-45, 43-45

INDICE

75

Bovinos Ehrlichia phagacytophilia, 45 Caninos Ehrlichia cams, 43 Ehrlichia canis, 43 Ehrlichia equi, 45 Ehrlichia equi, 45 Ehrlichia ewingii, 43, 43 Ehrlichia ewingii, 43, 43 Ehrlichia phagacytophilia, 45 Hepatozoon canis, 43-44, 4 Histoplasma capsulatum,

44,44 Trypanosoma cruzi, 62 Equinos Hepatozoon canis, 43-44, 44 Histoplasma capsulatum, 44,44 Parasites eritrocitos, 25-28, 27-28 leucocitos, 43-45, 43-45 sangre periferica, 61-62, 61-62 Pelger-Huet, anomalia de, 37, 37 Plaquetas gigantes, 47, 48 Pilas de moneda, 13, 19 Plaquetas, 7, 47-48, 47-48 inclusiones eritrociticas, 26, 26 Plasmocitos, 8,8 agranulociticos, 40 mieloma, 51 Poiquilocitosis. Consulte Eritrocitos, Variaciones morfológicas en los policromatofilos, 5, 6, 17, 18 desarrollo de eritrocitos, 10 Policitemia vera, 56 Precipitado de colorante, confusion con inclusiones y parasites, 25, 25 Preleucemia. Consulte Sindrome mielodisplasico Production de eritrocitos. Consulte Hematopoyesis Proliferacion neoplasica y mastocitos, 57, 57 Promegacariocitos, 7

Promonocitos, 7 Proplaquetas, 7 Prorubricitos y eritropoyesis, 5, 5,10 Punteado basofilo, 25, 25 respuesta regenerativa, 17, 19 Queratocitos, 22, 22 Respuesta regenerativa, 17-18 anemias, 17, 18 anisocitosis, 17 eritrocito nucleado, 17-18, 18 punteado basofilo, 17,19 Reticulocitos agregata, 17, 18 punctata, 17, 18 Rubriblastos y eritropoyesis, 5, 5,10 Rubricitos y eritropoyesis, 5, 5,10 Sideroblastos, 25 Siderocitos, 25 Sindrome de Chediak-Higashi, felino, 45, 45 Sindrome mielodisplasico, 51-53, 51, 52 Tipos de cromatina nuclear, utilización en la identificación del tipo de celula, 59-62, 60 Torocitos, 22, 23 Toxicidad, rasgos, 37-38, 38-39 Trastornos linfoproliferativos leucemia linfocitica aguda, 49, 50 leucemia linfocitica cronica, 49, 50 leucemia linfocitica granular, 50-51, 51 linfosarcoma, 49, 50 mieloma de plasmacitos, 51 presencia de linfoblastos, 40, 41 Trastornos de membrana/metabólicos, 21-23, 21-24 en la formación de acantocitos, 21,21

en la formación de celulas erizo, 21,21 en la formación de equinocitos. 22. 21 en la formación de estomatocitos. 22. 23 en la formación de leptocitos, 23, 24 en la formación de ovalocitos, 23, 23 en la formación de queratocitos, 22,22 Trastornos mieloproliferativos eritroleucemia, 54-55, 55 leucemia aguda no diferenciada, 53,53 leucemia megacarioblastica, 55 leucemia mieloblastica aguda. 54, 54 leucemia mieloide aguda leucemia mieloide cronica, 55, 56 leucemia mielomonocitica, 54 leucemia monocitica aguda, 54, 55 mielosis eritremica, 56, 56 policitemia vera, 56 proliferacion neoplasica mastocitos, 57, 57 sindrome mielodisplasico, 51-53, 51-52 trombocitemia esencial, 56, 56 Trastornos linfoproliferativos, 49-51, 50-51 mieloproliferativos, 49-57, 51-57 Tripanosomas, 61-62 Trypanosoma cruzi, 62 Trypanosoma melophagium, 62 Trypanosoma theileri, 62, 62 Trombocitemia esencial, 56, 56 Trombocitos, 47-48, 47-48 Trypanosoma cruzi, 62 Trypanosoma melophagium, 62 Trypanosoma theileri, 62, 62 Vacuolizacion y toxicidad, 37, 38-39