Ã.À.ÏÀØÈÍßÍ, Ã.Í.ÍÀÇÀÐÎÂ
ÁÈÎÔÈÇÈ×ÅÑÊÈÅ ÌÅÒÎÄÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Â ÑÓÄÅÁÍÎÉ ÌÅÄÈÖÈÍÅ
Èæåâñê “Ýêñïåðòèçà” 1999
ÏÀØÈÍßÍ Ã.À...
27 downloads
308 Views
1MB Size
Report
This content was uploaded by our users and we assume good faith they have the permission to share this book. If you own the copyright to this book and it is wrongfully on our website, we offer a simple DMCA procedure to remove your content from our site. Start by pressing the button below!
Report copyright / DMCA form
Ã.À.ÏÀØÈÍßÍ, Ã.Í.ÍÀÇÀÐÎÂ
ÁÈÎÔÈÇÈ×ÅÑÊÈÅ ÌÅÒÎÄÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Â ÑÓÄÅÁÍÎÉ ÌÅÄÈÖÈÍÅ
Èæåâñê “Ýêñïåðòèçà” 1999
ÏÀØÈÍßÍ Ã.À. - çàñëóæåííûé äåÿòåëü íàóêè ÐÔ, äîêòîð ìåä. íàóê, ïðîôåññîð ÍÀÇÀÐΠÃ.Í. - êàíäèäàò ìåä. íàóê, äîöåíò
Ïàøèíÿí Ã.À., Íàçàðîâ Ã.Í. Áèîôèçè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ â ñóäåáíîé ìåäèöèíå. – Èæåâñê: “Ýêñïåðòèçà”, 1999.178 ñ.
 êíèãå ïðèâåäåíû äàííûå îá àïðîáàöèè íåêîòîðûõ áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ (ýëåêòðîííûé ïàðàìàãíèòíûé ðåçîíàíñ, õåìèëþìèíåñöåíöèÿ, ýëåêòðîïðîâîäíîñòü, êîìïëåêñíàÿ îòíîñèòåëüíàÿ äèýëåêòðè÷åñêàÿ ïðîíèöàåìîñòü è ïðîâîäèìîñòü, êîýôôèöèåíò ïîëÿðèçàöèè, òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòü è òåïëîïðîâîäíîñòü) ïðè ðåøåíèè ðÿäà íàèáîëåå àêòóàëüíûõ âîïðîñîâ (óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû) íà ýêñïåðèìåíòàëüíîì è ïðàêòè÷åñêîì ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì ìàòåðèàëàõ. Èçëîæåíû ïðàêòè÷åñêèå ðåêîìåíäàöèè ïî ïîäãîòîâêå è èññëåäîâàíèþ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, îöåíêå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ. Êíèãà ïðåäíàçíà÷åíà äëÿ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ ýêñïåðòîâ, ïðåïîäàâàòåëåé êàôåäð ñóäåáíîé ìåäèöèíû, þðèñòîâ.
Èçäàòåëüñêàÿ ëèöåíçèÿ ËÓ ¹ 066 îò 05.04.99 ã. Áåç îáúÿâë.
© Ïàøèíÿí Ã.À., Íàçàðîâ Ã.Í. © “Ýêñïåðòèçà”
ÑÎÄÅÐÆÀÍÈÅ Ââåäåíèå……………………………………….……….......................…4 Ãëàâà 1. Ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà…...6 1.1. Ýëåìåíòû òåîðèè ÝÏÐ………………………………………….....8 1.2. Îáùèå ñâåäåíèÿ î ÝÏÐ-ñïåêòðîñêîïèè…………….......…16 1.3. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â áèîëîãèè…………………….....24 1.4. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â ìåäèöèíå…………………....…36 1.5. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â ñóäåáíîé ìåäèöèíå……...…46 1.5.1. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ ïðè óñòàíîâëåíèè ÄÍÑ…...46 1.5.2. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ ïðè óñòàíîâëåíèè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ òåëåñíûõ ïîâðåæäåíèé.....54 1.6. Ïîäãîòîâêà îáðàçöîâ è èññëåäîâàíèå ìåòîäîì ÝÏÐ....…69 Ãëàâà 2. Ìåòîä õåìèëþìèíåñöåíöèè………………....................75 2.1. Òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè….....76 2.2. Èíòåíñèâíîñòü õåìèëþìèíåñöåíöèè â çàâèñèìîñòè îò íåêîòîðûõ ñîñòîÿíèé îðãàíèçìà………………………………......…81 2.3. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè â ñóäåáíîé ìåäèöèíå……………...….............................................................83 Ãëàâà 3. Ìåòîä èçìåðåíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè………...........116 Ãëàâà 4. Äðóãèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ îðãàíîâ è òêàíåé ÷åëîâåêà è ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ…....................................................................................126 4.1. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè â äèàïàçîíå ñâåðõâûñîêèõ ÷àñòîò…………………………………………............126 4.2. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè áèîëîãè÷åñêîé òêàíè……………………………………………..................140 4.3. Ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ…………………………………………….............152 Çàêëþ÷åíèå………………………………………..............................161 Ëèòåðàòóðà…………………………………………........................….166
Ââåäåíèå
Ñòð. 4 Ââåäåíèå
 ïîñëåäíèå ãîäû ïîâûøåííîå âíèìàíèå ìíîãèõ îòå÷åñòâåííûõ è çàðóáåæíûõ èññëåäîâàòåëåé áûëî îáðàùåíî íà àïðîáàöèþ è âíåäðåíèå â ðàçëè÷íûå ìåäèöèíñêèå ñïåöèàëüíîñòè øèðîêîãî êðóãà ñîâðåìåííûõ ëàáîðàòîðíûõ ìåòîäîâ, îñíîâàííûõ íà äîñòèæåíèÿõ áèîëîãèè, áèîôèçèêè, ìîðôîëîãèè, ìàòåìàòèêè è äðóãèõ íàóê, ñ öåëüþ ðåøåíèÿ ìíîãèõ àêòóàëüíûõ ïðîáëåì.  ñóäåáíîé ìåäèöèíå ê òàêèì íåðåøåííûì ïðîáëåìàì ñëåäóåò îòíåñòè óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, îïðåäåëåíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, â îñîáåííîñòè â ñëó÷àÿõ ãíèëîñòíîé òðàíñôîðìàöèè òðóïà. Îñíîâíûì íåäîñòàòêîì ïðèìåíÿåìûõ â íàñòîÿùåå âðåìÿ ìåòîäîâ ÿâëÿåòñÿ îãðàíè÷åííàÿ èíôîðìàòèâíîñòü èëè íåâîçìîæíîñòü èõ ïðèìåíåíèÿ â îòäàëåííûå ñðîêè, ïðîøåäøèå ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Çíà÷èòåëüíûé èíòåðåñ ïðåäñòàâëÿþò ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ, ïîçâîëÿþùèå îïðåäåëÿòü ôóíêöèîíàëüíîå ñîñòîÿíèå îðãàíîâ è òêàíåé òðóïà íà ìîëåêóëÿðíîì è ñóáìîëåêóëÿðíîì óðîâíå ïðè ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèÿõ. Äëÿ ðåøåíèÿ çàäà÷ ñóäåáíîé ìåäèöèíû íàèáîëåå ïåðñïåêòèâíûìè ÿâëÿþòñÿ áèîôèçè÷åñêèå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè, àêòèâíîãî ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ, íèçêî÷àñòîòíîé ýëåêòðè÷åñêîé ïðîâîäèìîñòè, êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè, êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè, ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà, êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè, ñêîðîñòè ðàñïðîñòðàíåíèÿ òåïëîâîãî èìïóëüñà è äð. Ñ êîíöà 60-õ ãîäîâ â ëèòåðàòóðå ïî ñóäåáíîé ìåäèöèíå âñòðå÷àþòñÿ ïóáëèêàöèè îòå÷åñòâåííûõ ó÷åíûõ ñ ðåçóëüòàòàìè ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé áèîôèçè÷åñêèìè ìåòîäàìè. Íà êàôåäðàõ ñóäåáíîé ìåäèöèíû 2 Ìîñêîâñêîãî ãîñóäàðñòâåííîãî ìåäèöèíñêîãî èíñòèòóòà èì. Í.È.Ïèðîãîâà (íûíå Ðîññèéñêîãî ãîñóäàðñòâåííîãî ìåäèöèíñêîãî óíèâåðñèòåòà) è Ìîñêîâñêîãî ìåäèöèíñêîãî ñòîìàòîëîãè÷åñêîãî èíñòèòóòà ïîä ðóêîâîäñòâîì ïðîôåññîðà Ã.À.Ïàøèíÿíà áûë îñóùåñòâëåí öèêë íàó÷íûõ áèîôèçè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé, çàâåðøèâøèõñÿ óñïåøíîé çàùèòîé 10 êàíäèäàòñêèõ äèññåðòàöèé. Îñíîâíàÿ íàøà çàäà÷à çàêëþ÷àëàñü â îáîáùåíèè ðåçóëüòàòîâ ïðîâåäåííûõ íàó÷íûõ èññëåäîâàíèé è â äåìîíñòðàöèè èõ ïðèìåíåíèÿ â ïðàêòèêå ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû.
Ââåäåíèå
Ñòð. 5
Èñïîëüçîâàíèå áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ ïðè ðåøåíèè çàäà÷ ñóäåáíîé ìåäèöèíû âî ìíîãîì çàâèñèò îò òåõíè÷åñêîé îñíàùåííîñòè è íàëè÷èÿ â ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ ó÷ðåæäåíèÿõ ïîäãîòîâëåííûõ ñïåöèàëèñòîâ, âëàäåþùèõ ýòèìè ìåòîäàìè. Ìîíîãðàôèÿ áóäåò ïîëåçíà ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèì ýêñïåðòàì è ðàáîòíèêàì ïðàâîîõðàíèòåëüíûõ îðãàíîâ. Çà âñå êðèòè÷åñêèå çàìå÷àíèÿ è ïîæåëàíèÿ àâòîðû çàðàíåå ïðèíîñÿò ñâîþ áëàãîäàðíîñòü.
Ãëàâà 1
Ñòð. 6 Ãëàâà 1. ÌÅÒÎÄ ÝËÅÊÒÐÎÍÍÎÃÎ ÏÀÐÀÌÀÃÍÈÒÍÎÃÎ ÐÅÇÎÍÀÍÑÀ.
Áèîôèçè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ íàøëè øèðîêîå ïðèìåíåíèå â êëèíè÷åñêîé è ýêñïåðèìåíòàëüíîé ìåäèöèíå ïðè èçó÷åíèè îðãàíèçìà ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ íà ñèñòåìíîì, îðãàííîì, êëåòî÷íîì è ñóáêëåòî÷íîì óðîâíÿõ. Áóðíîå ðàçâèòèå ôèçèêè è õèìèè çà ïîñëåäíèå ÷åòâåðòü âåêà îòêðûëè íîâûå, ïîèñòèíå íåáûâàëûå âîçìîæíîñòè äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â áèîëîãè÷åñêèõ è ìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèÿõ ôèçè÷åñêèõ è õèìè÷åñêèõ ìåòîäîâ, êîòîðûå ïîçâîëÿëè íàóêàì áèîëîãè÷åñêîãî ïðîôèëÿ ïåðåéòè íà ìîëåêóëÿðíûé óðîâåíü èçó÷åíèÿ æèâîé è ìåðòâîé ìàòåðèè. Ñòðóêòóðà îðãàíè÷åñêèõ ìîëåêóë, èõ áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü è âçàèìîîòíîøåíèÿ ìåæäó íèìè îïðåäåëÿþòñÿ â ïåðâóþ î÷åðåäü êîíôèãóðàöèÿìè ýëåêòðîííûõ îðáèòàëåé è èõ èçìåíåíèÿìè.  ñâÿçè ñ ýòèì ëþáîé ìåòîä, ïîçâîëÿþùèé ïðîíèêíóòü â ïðèðîäó ñòðîåíèÿ ýëåêòðîííûõ îáîëî÷åê, èìååò îñíîâàíèå ñòàòü âàæíûì îðóäèåì áèîëîãè÷åñêîãî è ìåäèöèíñêîãî ýêñïåðèìåíòà. Îñíîâó ìàãíèòîðåçîíàíñíûõ ìåòîäîâ ñîñòàâëÿåò ïîãëîùåíèå ýíåðãèè ýëåêòðîìàãíèòíûõ âîëí ìèêðîâîëíîâîãî è ðàäèî÷àñòîòíîãî äèàïàçîíîâ â ïðèñóòñòâèè âíåøíåãî ïîñòîÿííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ. Ïåðâûå ýêñïåðèìåíòû íà êîíäåíñèðîâàííûõ îáðàçöàõ áûëè âûïîëíåíû Çàâîéñêèì â 1944 ãîäó. Äàëüíåéøåå áûñòðîå ðàçâèòèå ýòè ìåòîäû ïîëó÷èëè áëàãîäàðÿ óñïåõàì, äîñòèãíóòûì â ìèêðîâîëíîâîé òåõíèêå. Îäíèì èç íàèáîëåå øèðîêî ïðèìåíÿåìûõ ìåòîäîâ â áèîõèìè÷åñêèõ è áèîôèçè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ ÿâëÿåòñÿ ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà (ÝÏÐ). Îí õîðîøî çàðåêîìåíäîâàë ñåáÿ ïðè èññëåäîâàíèè áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, ïðîñò â èñïîëíåíèè, òðåáóåò ìàëîé çàòðàòû âðåìåíè è ïðîáû èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà, îáëàäàåò âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ.  50-å ãîäû ìåòîä áûë óæå ïðèìåíåí äëÿ áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé (Áëþìåíôåëüä Ë.À., Êàëìàíñîí Ë.Ý., 1957; Commoner B., Taungend J.F., Pake J., 1954). Ïðè ïîìîùè ÝÏÐ ìîæíî èçó÷àòü ëèøü îáúåêòû, îáëàäàþùèå íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè; òàêîâûìè ÿâëÿþòñÿ ñâîáîä-
Ãëàâà 1
Ñòð. 7
íûå ðàäèêàëû è ñîåäèíåíèÿ, âêëþ÷àþùèå èîíû ïåðåõîäíûõ ìåòàëëîâ (Äàâèä Ð., 1982).  çàâèñèìîñòè îò èçó÷àåìîãî îáúåêòà ìîæíî âûäåëèòü òðè îñíîâíûõ òèïà èññëåäîâàíèé: ∙ àíàëèç ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, â íîðìå ïðèñóòñòâóþùèõ â æèâîì îðãàíèçìå; ∙ èññëåäîâàíèÿ ìåòàëëîïðîòåèäîâ (áåëêîâ, ñîäåðæàùèõ èîíû ìåòàëëîâ, ãëàâíûì îáðàçîì æåëåçà, ìåäè è ðåæå ìàðãàíöà); ∙ èññëåäîâàíèÿ ïàðàìàãíèòíûõ êëåòîê, èñêóññòâåííî ââîäèìûõ â èçó÷àåìóþ ñèñòåìó, ñ òåì, ÷òî áû óñòàíîâèòü ìåõàíèçì ðåàêöèè èëè ìåñòî ñâÿçûâàíèÿ îïðåäåëåííîãî ñîåäèíåíèÿ (íàïðèìåð, âûÿâèòü ïðèðîäó àêòèâíîãî öåíòðà). Ìåòîä ñïèíîâûõ ìåòîê - ñîåäèíåíèÿ, êîòîðûå îáû÷íî ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ðàçëè÷íûå íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû, ÿâëÿåòñÿ ñâîåãî ðîäà ñïîñîáîì “çîíäèðîâàíèÿ” êðóïíûõ ìîëåêóë. Íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåííûìè ìåòêàìè ÿâëÿþòñÿ ñëåäóþùèå (ðèñ. 1):
Ðèñ. 1. (ïîÿñíåíèå â òåêñòå) Ïðè íàëîæåíèè âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ E íàáëþäàåòñÿ ðåçîíàíñíîå ïîãëîùåíèå ýíåðãèè íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè ðàäèêàëà, êîòîðîå ïðîèñõîäèò ïðè ÷àñòîòå v, òàêîé, ÷òî EO=hn=gb BO, ãäå EO - ïîãëîùàåìàÿ ýíåðãèÿ ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ.  ðàñòâîðå âðåìÿ êîððåëÿöèè (îáû÷íî ìåíÿþùååñÿ îò 10-6 äî 10-1 ñ) ñâÿçàíî ñ àáñîëþòíîé òåìïåðàòóðîé è âÿçêîñòüþ ñëåäóþùèì îáðàçîì:
t=
4pha 3 3kT
,
(1)
Ãëàâà 1
Ñòð. 8
ãäå à - ðàäèóñ ìîëåêóëû. Ìåòîäû èñïîëüçîâàíèÿ ìåòîê òàêæå ðàçëè÷àþòñÿ â çàâèñèìîñòè îò îáúåêòîâ èññëåäîâàíèÿ. Äëÿ èçó÷åíèÿ ïåðåõîäîâ ìåæäó ìåçîìîðôíûìè ôàçàìè (êàê ïðàâèëî, äèàìàãíèòíûìè) â íèõ âíåäðÿþò ñïèíîâûå ìåòêè è ñëåäÿò çà ðåçêèìè èçìåíåíèÿìè ñèãíàëà ÝÏÐ, ñîïðîâîæäàþùèìè ôàçîâûå ïåðåõîäû. Ïðè èññëåäîâàíèè ôîñôîëèïèäîâ, íàïðèìåð ëåöèòèíà èëè ôîñôàòèäèëõîëèíà, èõ âìåñòå ñ ìåòêîé ðàñòâîðÿþò â CH3OH èëè â CHCl 3, à çàòåì èñïàðÿþò ðàñòâîðèòåëü, íàíåñÿ ðàñòâîð íà ïîäëîæêó èç äèàìàãíèòíîãî ìàòåðèàëà. Ïðè èññëåäîâàíèè áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí ìåòîä ñïèíîâûõ ìåòîê èñïîëüçóåòñÿ äëÿ èçó÷åíèÿ îäíîãî èç âíóòðèìîëåêóëÿðíûõ ñâîéñòâ óãëåâîäîðîäíûõ öåïî÷åê ìîëåêóë ôîñôîëèïèäîâ, õîòÿ ïðè ïîìîùè ÝÏÐ ìîæíî èññëåäîâàòü è ýòè ìîëåêóëû â öåëîì, ñëåäèòü çà èõ ïðîíèêíîâåíèåì â ìåìáðàíó, ÷òî ïðåäñòàâëÿåò áîëüøîé áèîëîãè÷åñêèé èíòåðåñ. Ïðè èçó÷åíèè ôîðìû ñïåêòðà ÝÏÐ óäàåòñÿ ïîëó÷èòü èíôîðìàöèþ î ñòðîåíèè ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ, î âçàèìîäåéñòâèè èõ ñ îêðóæàþùåé ñðåäîé è î ñàìîé ýòîé ñðåäå. Äëÿ ïðàâèëüíîãî ïîíèìàíèÿ ñóùíîñòè ìåòîäà ÝÏÐ è èíòåðïðåòàöèè ïîëó÷àåìûõ ñ åãî ïîìîùüþ äàííûõ, ìû ïîñ÷èòàëè öåëåñîîáðàçíûì ðàññìîòðåòü íåêîòîðûå ýëåìåíòû òåîðèè âçàèìîäåéñòâèÿ ýëåêòðîíîâ ñ âíåøíèì ìàãíèòíûì ïîëåì. 1.1. Ýëåìåíòû òåîðèè ÝÏÐ ßâëåíèÿ ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà çàêëþ÷àåòñÿ â ðåçîíàíñíîì ïîãëîùåíèè ýíåðãèè ýëåêòðîìàãíèòíîãî èçëó÷åíèÿ â ðàäèî÷àñòîòíîì äèàïàçîíå ÷àñòèöàìè ïàðàìàãíèòíîãî âåùåñòâà ïðè äåéñòâèè íà íåãî ïîñòîÿííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ. Óñòàíîâëåíî, ÷òî íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû ñîäåðæàò áîëüøîå êîëè÷åñòâî áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ, êîòîðûå îáëàäàþò ïàðàìàãíèòíûìè ñâîéñòâàìè. Ñëåäîâàòåëüíî, èõ ó÷àñòèå â áèîõèìè÷åñêèõ ðåàêöèÿõ è èõ ñîñòîÿíèå ìîæåò áûòü èññëåäîâàíî ìåòîäîì ÝÏÐ. Êàæäûé íåñïàðåííûé ýëåêòðîí îáëàäàåò ìàãíèòíûì ìîìåíòîì, ñâÿçàííûì ñî ñïèíîì. Ñïèíîì íàçûâàþò ñîáñòâåííûé ìîìåíò êîëè÷åñòâà äâèæåíèÿ ýëåêòðîíà âîêðóã îñè âðàùåíèÿ. Ïðè íàëîæåíèè ìàãíèòíîãî ïîëÿ (H) íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû ðàñïðåäåëÿþòñÿ ïî äâóì ðàçëè÷íûì ýíåðãåòè÷åñ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 9
êèì óðîâíÿì ñ àíòèïàðàëëåëüíûì íàïðàâëåíèåì ñïèíà. Ïîñêîëüêó íå âñå âåùåñòâà ñîäåðæàò ñîáñòâåííî ïàðàìàãíèòíûå öåíòðû, òî äëÿ ïîëó÷åíèÿ âîçìîæíîñòè èõ èññëåäîâàòü ìåòîäîì ÝÏÐ òàêèå öåíòðû ñòàëè ââîäèòü èçâíå è íàçûâàòü ñïèíîâûìè çîíäàìè èëè ìåòêàìè, à ñàìó óêàçàííóþ òåõíèêó - ìåòîäîì ñïèíîâîãî çîíäà èëè ñïèíîâîé ìåòêè. Ñïèíîâûìè ìåòêàìè ìîæíî ñ÷èòàòü íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû, êîâàëåíòíûìè ñâÿçÿìè õèìè÷åñêè ïðî÷íî ñâÿçàííûå ñ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûìè ìîëåêóëàìè. Åñëè èìååòñÿ ëèøü ôèçè÷åñêîå âçàèìîäåéñòâèå ñ èññëåäóåìûìè ìîëåêóëàìè, òî òàêèå ðàäèêàëû íîñÿò íàçâàíèå ñïèíîâûõ çîíäîâ. Ýëåêòðîíû äâóõ ðàçëè÷íûõ ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé áóäóò îáëàäàòü ðàçëè÷íîé ýíåðãèåé, òàê êàê ïðè îðèåíòàöèè ìàãíèòíîãî ìîìåíòà ïàðàëëåëüíî ìàãíèòíîìó ïîëþ ýíåðãèÿ âçàèìîäåéñòâèÿ óìåíüøàåòñÿ, à ïðè îðèåíòàöèè âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ ïðîèñõîäèò ðàñùåïëåíèå ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé. Åñëè íà îáúåêò, ñîäåðæàùèé íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, ïîìåùåííûé â ñèëüíîå îäíîðîäíîå ìàãíèòíîå ïîëå (H=3000 ýðñòåä), ïîäàòü ýëåêòðîìàãíèòíîå èçëó÷åíèå òàêîé çàäàííîé ÷àñòîòû, ÷òîáû êâàíò ýíåðãèè hn áûë ðàâåí ðàçíîñòè ìåæäó äâóìÿ ýíåðãåòè÷åñêèìè óðîâíÿìè îáåèõ ãðóïï, òî ýòî è áóäåò òàê íàçûâàåìîé ðåçîíàíñíîé ÷àñòîòîé. Çà ñ÷åò ýíåðãèè èçëó÷åíèÿ íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, íàõîäÿùèåñÿ íà íèçêîì ýíåðãåòè÷åñêîì óðîâíå, ïåðåõîäÿò íà áîëåå âûñîêèé ñ îäíîâðåìåííûì èçìåíåíèåì íàïðàâëåíèÿ ñïèíà. Ýòî ïîãëîùåíèå ýíåðãèè ýëåêòðîíàìè ìîæåò áûòü îáíàðóæåíî ïî èçìåíåíèþ ìîùíîñòè ýëåêòðîìàãíèòíîãî èçëó÷åíèÿ, ïðîõîäÿùåãî ÷åðåç ñèñòåìó, è çàðåãèñòðèðîâàíî êàêèì-ëèáî ñïîñîáîì, ïðèíÿòûì â àáñîðáöèîííîé ðàäèîñïåêòðîìåòðèè. Ñïåêòðû ÝÏÐ õàðàêòåðèçóþòñÿ òðåìÿ îñíîâíûìè ïàðàìåòðàìè: èíòåãðàëüíîé èíòåíñèâíîñòüþ, øèðèíîé ëèíèè è äð., gôàêòîðîì ñïåêòðîñêîïè÷åñêîãî ðàñùåïëåíèÿ. Âåùåñòâà, ñîäåðæàùèå íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, ïîãëîùàþò ïàäàþùåå íà íèõ ìèêðîâîëíîâîå èçëó÷åíèå, êîòîðîå ïðîïîðöèîíàëüíî ðàçíèöå “çàñåëåííîñòè” ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé. Ïðè îïðåäåëåííûõ óñëîâèÿõ âåëè÷èíà ïîãëîùåíèÿ ýëåêòðîíîâ çàâèñèò îò èõ êîëè÷åñòâà, ÷òî ïîçâîëÿåò ñóäèòü î êîíöåíòðàöèè íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ â îáðàçöå. Äâå ëèíèè ïîãëîùåíèÿ ñ îäíîé è òîé æå èíòåãðàëüíîé èíòåíñèâíîñòüþ ìîãóò èìåòü ñîâåðøåííî ðàçíóþ ôîðìó: îäíà ìîæåò áûòü ïîëîãîé è “ðàç-
Ãëàâà 1
Ñòð. 10
ìàçàííîé”, äðóãàÿ - óçêîé è àññèìåòðè÷íîé. Òàêèì îáðàçîì, øèðèíà ëèíèè ÿâëÿåòñÿ äîïîëíèòåëüíûì ïàðàìåòðîì, õàðàêòåðèçóþùèì óñëîâèÿ ïîãëîùåíèÿ. Ñóùåñòâóåò äâà âèäà âçàèìîäåéñòâèÿ ýëåêòðîíîâ, îêàçûâàþùèõ íà óøèðåíèå ðåçîíàíñíîé ëèíèè îïðåäåëåííîå âëèÿíèå. Èìè ÿâëÿþòñÿ ñïèí-ðåøåòî÷íîå è ñïèí-ñïèíîâîå âçàèìîäåéñòâèå. Øèðèíà ëèíèè íåïîñðåäñòâåííî îïðåäåëÿåòñÿ ðàçíèöåé ìåæäó ýíåðãåòè÷åñêèìè óðîâíÿìè, çàíèìàåìûõ íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè è, ñëåäîâàòåëüíî, ïîçâîëÿåò ñóäèòü î ðåàëüíûõ âçàèìîäåéñòâèÿõ ýëåêòðîíîâ, êîòîðûå ïðèâîäÿò ê íåèçáåæíîìó “ðàçìàçûâàíèþ” ëèíèè. Äðóãèì âàæíûì ïàðàìåòðîì, õàðàêòåðèçóþùèì ëèíèþ ïîãëîùåíèÿ, ÿâëÿåòñÿ ïîëîæåíèå òî÷êè ìàêñèìàëüíîãî ïîãëîùåíèÿ. Èñõîäÿ èç ôîðìóëû (1):
hn = g b H ,
(2)
î÷åâèäíî, ÷òî åñëè ìèêðîâîëíîâàÿ ÷àñòîòà ïîääåðæèâàåòñÿ ïîñòîÿííîé, òî åäèíñòâåííûìè ïàðàìåòðàìè, êîòîðûå ìîãóò èçìåíÿòü óñëîâèÿ ðåçîíàíñà (1), ÿâëÿþòñÿ íàïðÿæåííîñòü ïðèëîæåííîãî èçâíå ìàãíèòíîãî ïîëÿ (H) è âåëè÷èíà g-ôàêòîðà. Ñëåäîâàòåëüíî, çíà÷åíèå ïîëÿ, ïðè êîòîðîì èìååò ìåñòî ðåçîíàíñ, îïðåäåëÿåò âåëè÷èíó g-ôàêòîðà äëÿ äàííîãî ñâîáîäíîãî íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà èëè íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà, ñâÿçàííîãî ñ àòîìîì èëè ìîëåêóëîé. Òåîðåòè÷åñêè äîêàçàíî, ÷òî âåëè÷èíà g-ôàêòîðà ñâîáîäíîãî íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà ðàâíà 2,0023. Âî ìíîãèõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëàõ, ó êîòîðûõ íåñïàðåííûé ýëåêòðîí âðàùàåòñÿ ïî ñèëüíî äåëîêàëèçîâàííûì îðáèòàëÿì, çíà÷åíèÿ g-ôàêòîðà î÷åíü áëèçêè ê ýòîé âåëè÷èíå, ÷òî óêàçûâàåò íà î÷åíü ñëàáóþ ñâÿçü ñïèíîâîãî è îðáèòàëüíîãî ìîìåíòîâ. Åñëè æå íåñïàðåííûé ýëåêòðîí ñâÿçàí ñ êàêèì-ëèáî àòîìîì èëè ìîëåêóëîé ñèëüíî, òî çíà÷åíèÿ gôàêòîðà áóäóò îòëè÷àòüñÿ îò çíà÷åíèé g-ôàêòîðà ñâîáîäíîãî ýëåêòðîíà. Èçìåðÿÿ âåëè÷èíó g-ôàêòîðà, ìîæíî ïîëó÷àòü ïîäðîáíóþ èíôîðìàöèþ î õàðàêòåðå âíóòðèìîëåêóëÿðíûõ ñâÿçåé. Îïèñàííûå âûøå òðè îñíîâíûõ ïàðàìåòðà, õàðàêòåðèçóþùèå ëèíèè ïîãëîùåíèÿ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ, ïðèìåíèìû, â îñíîâíîì, äëÿ ñèíãëåòíûõ ëèíèé. Áîëüøèíñòâî æå èññëåäîâàíèé, äàþùèõ âîçìîæíîñòü ïîëó÷åíèÿ áîëåå äåòàëüíîé èíôîðìàöèè êàê îá ýíåðãåòè÷åñêîì ñîñòîÿíèè íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ, òàê è îá èõ ëîêàëèçàöèè, îñíîâàíî íà ÿâëåíèè ðàñùåïëåíèÿ ëèíèé ïîãëîùåíèÿ.
Ãëàâà 1
Ñòð. 11
Ñóùåñòâóþò äâà îñíîâíûõ òèïà ðàñùåïëåíèÿ, õàðàêòåðíûõ äëÿ ÝÏÐ. Îáà îíè âàæíû äëÿ èññëåäîâàíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. Ïåðâîå - òîíêîå (“ýëåêòðîííîå”) ðàñùåïëåíèå, âîçíèêàåò â òåõ ñëó÷àÿõ, êîãäà èçó÷àåìàÿ ìîëåêóëà èëè àòîì îáëàäàþò íå îäíèì, à íåñêîëüêèìè íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè; âòîðîå - ñâåðõòîíêîå ðàñùåïëåíèå íàáëþäàåòñÿ ïðè âçàèìîäåéñòâèè íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ ñ ìàãíèòíûì ìîìåíòîâ ÿäåð, íàõîäÿùèõñÿ â ïðåäåëàõ åãî îðáèòàëè. Íåñïàðåííûé ýëåêòðîí NO-ãðóïïû çîíäà íàõîäèòñÿ íà 2ðîðáèòàëè. Íàëè÷èå ñïèíîâîãî ìîìåíòà ó ýëåêòðîíà ïðèâîäèò ê âîçäåéñòâèþ ìàãíèòíîãî ìîìåíòà, ñðåäíåå çíà÷åíèå êîòîðîãî îïðåäåëÿåòñÿ:
r r m e gbH(S) ,
(3)
ãäå S - âåêòîð ñïèíîâîãî óãëîâîãî ìîìåíòà ýëåêòðîíà; g - ôàêòîð ñïåêòðîñêîïè÷åñêîãî ðàñùåïëåíèÿ; b - ìàãíåòîí Áîðà. Åñëè ïðèëîæèòü ïîñòîÿííîå ìàãíèòíîå ïîëå H èçâíå, òî îíî âçàèìîäåéñòâóåò ñ ìàãíèòíûì ìîìåíòîì ýëåêòðîíà. Ýíåðãèÿ ýòîãî âçàèìîäåéñòâèÿ îïèñûâàåòñÿ Ãàìèëüòîíèàíîì:
r r H = H × me ,
(4)
Ñîãëàñíî êâàíòîâîé òåîðèè, îðèåíòàöèè ñïèíà ýëåêòðîíà êâàíòîâàíû, ò.å. åãî ïðîåêöèè íà ëþáîå íàïðàâëåíèå, êîòîðîå çàäàåòñÿ âíåøíèì ìàãíèòíûì ïîëåì, ìîãóò èìåòü òîëüêî äèñêðåòíûå çíà÷åíèÿ. Åñëè ïðèíÿòü íàïðàâëåíèå ïîëÿ H çà îñü Z ëàáîðàòîðíîé ñèñòåìû êîîðäèíàò, òî îñü Z â ýòîì ñëó÷àå áóäåò ÿâëÿòüñÿ íàïðàâëåíèåì êâàíòîâàíèÿ ýëåêòðîííîãî ñïèíà S. Êàæäîé ïðîåêöèè ñïèíà ñîîòâåòñòâóåò îïðåäåëåííîå çíà÷åíèå ýíåðãèè. Òîãäà, ïðèíèìàÿ âî âíèìàíèå ôîðìóëû, èìååì:
æ 1ö 1 E ç + ÷ = gb H , è 2ø 2
(5)
è
1 æ 1ö E ç - ÷ = - gb H , 2 è 2ø
(6)
Ãëàâà 1
Ñòð. 12
Ïîä äåéñòâèåì ïåðåìåííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ, ïåðïåíäèêóëÿðíîãî ïîëþ H, ìåæäó âåðõíèì è íèæíèì ýíåðãåòè÷åñêèìè óðîâíÿìè, áóäóò íàáëþäàòüñÿ ïåðåõîäû, ñîïðîâîæäàþùèåñÿ ïåðåîðèåíòàöèåé ýëåêòðîííîãî ñïèíà. Ïðè ýòîì ÷àñòîòà ïåðåìåííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ äîëæíà ñîîòâåòñòâîâàòü ýíåðãèè ïåðåõîäà:
æ hn = Eç + è
1ö æ 1ö ÷ - Eç - ÷ , 2ø è 2ø
hn = gbH ,
(7) (8)
ãäå h - ïîñòîÿííàÿ Ïëàíêà, b - ìàãíåòîí Áîðà. Ïîñëåäíåå óðàâíåíèå îïðåäåëÿåò óñëîâèå ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Âåðîÿòíîñòü èíäóöèðîâàííûõ ïåðåõîäîâ ñ íèæíåãî óðîâíÿ íà âåðõíèé è, íàîáîðîò, ðàâíû. Îäíàêî, ïîãëîùåíèå ìèêðîâîëí â èññëåäóåìûõ ïðåïàðàòàõ âñå æå èìååò ìåñòî. Ýòî îáúÿñíÿåòñÿ òåì, ÷òî â óñëîâèÿõ òåðìîäèíàìè÷åñêîãî ðàâíîâåñèÿ íà íèæíåì óðîâíå, â ñîîòâåòñòâèè ñ ðàñïðåäåëåíèåì Áîëüöìàíà, âñåãäà íàõîäèòñÿ áîëüøå ýëåêòðîíîâ, ÷åì íà âåðõíåì. Ìèêðîâîëíîâîå èçëó÷åíèå ñòðåìèòñÿ âûðîâíÿòü íàñåëåííîñòè ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé, íî ýòîìó ïðåïÿòñòâóþò áåçèçëó÷àòåëüíûå ïåðåõîäû ýëåêòðîíîâ íà íèæíèå óðîâíè, êîòîðûå ïåðåäàþò ñâîþ ýíåðãèþ òåïëîâûì êîëåáàíèÿì ðåøåòêè (ñïèí-ðåøåòî÷íàÿ ðåëàêñàöèÿ), à òàêæå âçàèìîäåéñòâèÿ ýëåêòðîíîâ, ïîñðåäñòâîì êîòîðûõ èõ ñïèíû îáìåíèâàþòñÿ ýíåðãèåé (ñïèí-ñïèíîâàÿ ðåëàêñàöèÿ).  îáîèõ ñëó÷àÿõ ïðîèñõîäèò óìåíüøåíèå æèçíè ñïèíîâûõ ñîñòîÿíèé, ÷òî ïðèâîäèò ê óøèðåíèþ ëèíèè ðåçîíàíñíîãî ïîãëîùåíèÿ.  íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëàõ ýëåêòðîííûé ñïèí ïî äèïîëüäèïîëüíîìó ìåõàíèçìó ýôôåêòèâíî ðåàãèðóåò ñ ÿäåðíûì ñïèíîì àçîòà J=1, ïðîåêöèÿ êîòîðîãî íà îñü êâàíòîâàíèÿ, çàäàþùåé íàïðàâëåíèå âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ, îïðåäåëÿåòñÿ ñîîòâåòñòâóþùèìè âåëè÷èíàìè ìàãíèòíûõ êâàíòîâûõ ÷èñåë m11=±,0.  ýòîì ñëó÷àå ñ ìàãíèòíûì ìîìåíòîì ýëåêòðîíà áóäóò âçàèìîäåéñòâîâàòü åùå òðè ëîêàëüíûõ ìàãíèòíûõ ïîëÿ. Ýíåðãèÿ òàêîãî ñâåðõòîíêîãî âçàèìîäåéñòâèÿ (ÑÒÂ) õàðàêòåðèçóåòñÿ àíèçîòðîïíîé êîíñòàíòîé, êîòîðàÿ çàâèñèò îò íàïðàâëåíèÿ âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ, îòíîñèòåëüíî NO-ãðóïïû
Ãëàâà 1
Ñòð. 13
ðàäèêàëà. Ýòî ïðèâîäèò ê ïîÿâëåíèþ òðåõ ëèíèé ðàçðåøåííûõ ýëåêòðîíîâ ïåðåõîäîâ, ÷òî îïðåäåëÿåò ðàñùåïëåíèå ëèíèé ðåçîíàíñíîãî ïîãëîùåíèÿ (ðèñ. 2). Òàêèì îáðàçîì, â ñïåêòðàõ ÝÏÐ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ âìåñòî îäíîé ëèíèè ïîãëîùåíèÿ âîçíèêàþò òðè ëèíèè ðàâíîé èíòåíñèâíîñòè, ñîîòâåòñòâóþùèå ðàçëè÷íûì îðèåíòàöèÿì ÿäåðíîãî ñïèíà àçîòà.
Ðèñ. 2. (ïîÿñíåíèå â òåêñòå) Ñóùåñòâóþò ñïîñîáû, ïîçâîëÿþùèå ïî ñîîòíîøåíèþ øèðèíû ýòèõ òðåõ ëèíèé, ïî ïîëîæåíèþ íà îñè íàïðÿæåííîñòè ìàãíèòíîãî ïîëÿ è ïî çàâèñèìîñòè îò ìîùíîñòè ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ ðàññ÷èòûâàòü âðåìåíà êîððåëÿöèè ìåòîê â ïðåäåëàõ îò 10-11 äî 10-13 ñ.  ñëó÷àÿõ, êîãäà ìåòêà ñâÿçàíà ñ áåëêîì íå æåñòêî, èçìåíåíèå âðåìåíè êîððåëÿöèè NO-ãðóïïû ìîæåò îòðàæàòü èçìåíåíèå êîíôîðìàöèè áåëêà â îáëàñòè ïðèñîåäèíåíèÿ ìåòêè. Èññëåäîâàíèå ðåàêöèè ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ â íàòèâíûõ òêàíÿõ èìååò çíà÷èòåëüíûå òðóäíîñòè äëÿ äàëüíåéøåé ðàñøèôðîâêè äàííûõ. Ïîýòîìó äëÿ ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèé ïîäîáíîãî ðîäà ÷àùå ïðèìåíÿþò èñêóññòâåííî ñîçäàííûå ñðåäû. Àñêîðáàò íàòðèÿ âîññòàíàâëèâàåò íèòðîêñèëüíûå ãðóïïû äî äèàìàãíèòíûõ ïðîäóêòîâ, ïðåäïîëîæèòåëüíî äî ãèäðîêñèëàìèíîâ. Ñêîðîñòü âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëîâ çàâèñèò îò íàëè÷èÿ òîãî èëè èíîãî ìàãíèòíîãî îêðóæåíèÿ. Ýòîò ìåòîä áûë èñïîëüçîâàí ïðè èçó÷åíèè äèôôóçèè ôîñôîëèïèäîâ èç âíóòðåííåãî ìîíîñëîÿ áèñëîéíûõ ìîëåêóë âî âíåøíèé ìîíîñëîé (Kornberg R.D., McConnel H.M., 1971). Ïîäîáíûì îáðàçîì ïî ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëîâ ìîæíî èññëåäîâàòü ñêîðîñòü ïðîíèêíîâåíèÿ èîíà àñêîðáàòà â îðèåíòèðîâàííûå áèñëîè ôîñôîëèïèäîâ, ñîäåðæàùèå ñïèíîâûå çîíäû, è îöåíèâàòü îòíîñèòåëüíóþ ãëóáèíó ïîãðóæåíèÿ â áèñëîé íèòðîêñèëüíûõ ôðàã-
Ãëàâà 1
Ñòð. 14
ìåíòîâ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Äëÿ äàííîãî ñïèíîâîãî çîíäà îòíîñèòåëüíûå çíà÷åíèÿ ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñëóæàò èíäèêàòîðàìè ïðîíèöàåìîñòè áèñëîÿ â ðàçíûõ óñëîâèÿõ (Butler K.W., Pharm J., 1976; Schreier-Mucello S., Marsh D.,. Smith J.C.P, 1976). Íå òîëüêî àñêîðáàò (Kornberg R.D., McConnell H.M., 1971) è ãëþòàòèîí (Morrisett J.D., Droll H.R., 1969) ñïîñîáíû âîññòàíàâëèâàòü íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû, ÷òî ïðèâîäèò ê ïîòåðå ïàðàìàãíåòèçìà. Ýòèì ñâîéñòâîì îáëàäàþò è íåêîòîðûå ôåðìåíòû. Òàê, êèíåòèêà âîññòàíîâëåíèÿ ñïèí-ìå÷åííîãî ôîñôàòà è 5-äîêñèëñòåàðèíîâîé êèñëîòû ìèêðîñîìàëüíûìè ìåìáðàíàìè, ñîäåðæàùèìè ãèäðîêñèëèðóþùóþ ôåðìåíòíóþ ñèñòåìó èç öèòîõðîìà P450 è öèòîõðîì P450-ðåäóêòàçû, áûëà èçó÷åíà Ñòèðîì è Ñàêìàíîì (Stier, Sackman E., 1973). Èññëåäîâàíèÿ, ïðîâîäèìûå ñ ïîìîùüþ ñïèíîâûõ ìåòîê ñî âðåìåí ïåðâûõ ðàáîò Ìàê-Êîííåëëà è ñîòð. (Ziebling D.R., McConnell H.M., 1965; Wood D.E., McConnell H.M., 1962), áëàãîäàðÿ èõ âûñîêîé ýôôåêòèâíîñòè è ìåòîäè÷åñêîé ïðîñòîòå ñòàëè îäíèì èç îñíîâíûõ èíñòðóìåíòîâ èññëåäîâàíèÿ áèîïîëèìåðîâ è ìåìáðàí. Îñíîâíûå óñèëèÿ ìåòîäà ñïèíîâûõ ìåòîê íàïðàâëåíû â îñíîâíîì íà ðåøåíèå ôóíäàìåíòàëüíûõ âîïðîñîâ ôåðìåíòàòèâíîãî êàòàëèçà è ôèçè÷åñêîé õèìèè áåëêîâ. Ìåòîä ïîçâîëÿåò èññëåäîâàòü òîïîãðàôèþ áåëêîâîé ïîâåðõíîñòè, èíôîðìàöèîííûå ïåðåõîäû, ëîêàëüíóþ ïîäâèæíîñòü è ìèêðîâÿçêîñòü áåëêîâîé ìàòðèöû, ñòðîåíèå è äèíàìèêó àêòèâíûõ öåíòðîâ. Ñïèí ïðè ëþáîì êâàíòîâîì ÷èñëå n âñåãäà îïðåäåëÿåòñÿ âûðàæåíèåì
(h / 2p)
n ( n + 1) . Ïðè ýòîì ïîëíûé óãëîâîé ìî-
ìåíò êîëåáëåòñÿ âîêðóã íåêîòîðîé ôèêñèðîâàííîé îñè òàê, ÷òî åãî óñðåäíåííàÿ ïî âðåìåíè ñîñòàâëÿþùàÿ âäîëü ýòîé îñè ðàâíà ( h / 2 p) × n , à ïåðïåíäèêóëÿðíàÿ ê îñè ñîñòàâëÿþùàÿ â ðåçóëüòàòå óñðåäíåíèÿ îáðàùàåòñÿ â íóëü.  êàæäûé ìîìåíò âðåìåíè ñîñòîÿíèå íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà îïðåäåëÿåòñÿ ïðîåêöèåé MS åãî ñïèíà íà ýòó îñü è õàðàêòåðèçóåòñÿ âåëè÷èíîé MS= +1/2 èëè -1/2 äëÿ îäíîãî íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà â çàâèñèìîñòè îò îðèåíòàöèè ïîëíîãî óãëîâîãî ìîìåíòà. Äëÿ õàðàêòåðèñòèêè íåñêîëüêèõ íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ íóæíà îáùàÿ êîîðäèíàòíàÿ îñü, êîòîðàÿ ìîæåò áûòü ïðè íàëè÷èè âíåøíåãî ìàãíèòíîãî èëè ýëåêòðè÷åñêîãî ïîëÿ. Ñïèíû íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ, îáëàäàþùèõ îäèíàêîâîé ýíåð-
Ãëàâà 1
Ñòð. 15
ãèåé, îðèåíòèðîâàíû ñëó÷àéíûì îáðàçîì. Ïðè íàëè÷èè âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ âîçíèêàåò îáùàÿ êîîðäèíàòíàÿ îñü, âîêðóã êîòîðîé âñå ýëåêòðîíû íà÷íóò êîëåáàòüñÿ òàê, ÷òî ïðîåêöèÿ èõ ñïèíà íà ýòó îñü - MS áóäåò ðàâíà ëèáî +1/2, ëèáî -1/2. Ýòî åäèíñòâåííûå âîçìîæíûå ñîñòîÿíèÿ, ïîä÷èíÿþùèåñÿ çàêîíó êâàíòîâàíèÿ, êîòîðûé ðàçðåøàåò òîëüêî êâàíòîâûå ñîñòîÿíèÿ ñ ðàçíèöåé èõ ÷èñåë íà îäíó åäèíèöó. Ïðè íàëîæåíèè âíåøíåãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû ðàçäåëÿòñÿ íà äâå ãðóïïû.  îäíîé - ñïèíû ýëåêòðîíîâ áóäóò îðèåíòèðîâàíû ïàðàëëåëüíî íàïðàâëåíèþ ïîëÿ, à â äðóãîé - àíòèïàðàëëåëüíî. Ýíåðãèÿ èõ áóäåò ðàçíîé, òàê êàê ïðè îðèåíòàöèè ìàãíèòíîãî ìîìåíòà ïàðàëëåëüíî ìàãíèòíîìó ïîëþ ýíåðãèÿ ýëåêòðîíà óìåíüøèòñÿ, à ïðè îðèåíòàöèè åãî â îáðàòíîì íàïðàâëåíèè - âîçðàñòàåò. Òàêèì îáðàçîì, ýëåêòðîíû ðàçáèâàþòñÿ íà äâå ãðóïïû, îáëàäàþùèå ðàçíûìè ýíåðãèÿìè - ïðîèñõîäèò ðàñùåïëåíèå ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé. Íà ýòîì ïðèíöèïå è îñíîâàí ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Ñïèíîâûå çîíäû ÿâëÿþòñÿ àêòèâíûìè àêöåïòîðàìè ýëåêòðîíîâ. Äëÿ çàâåðøåíèÿ ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ íåîáõîäèìû ïðîòîíû.  ñðåäå, ñîäåðæàùåé ïðîòîíû, ðîëü âîññòàíîâèòåëÿ ìîãóò èãðàòü ëþáûå ñîåäèíåíèÿ ñ äîñòàòî÷íî âûñîêèì âîññòàíîâèòåëüíûì ïîòåíöèàëîì: ìóðàâüèíàÿ êèñëîòà, ãèäðàçèí, ãèäðîõèíîí, ñîåäèíåíèÿ ñ ñóëüôãèäðèëüíûìè ãðóïïàìè è äð. Ñïèíîâûå çîíäû âîññòàíàâëèâàþòñÿ äî ïðîñòðàíñòâåííî çàòðóäíåííûõ N-ãèäðîêñèëàìèíîâ, íå äàþùèõ âêëàä â ñïåêòð ÝÏÐ. Ñêîðîñòü âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà òåì ìåíüøå, ÷åì äëèííåé åãî óãëåâîäîðîäíûé “õâîñò”, ÷òî, ïî-âèäèìîìó, ñâÿçàíî ñ ìåíüøåé ïîäâèæíîñòüþ ðàäèêàëîâ ñ äëèííîé óãëåâîäîðîäíîé öåïüþ. Âðàùàòåëüíàÿ òðàíñëÿöèîííàÿ ïîäâèæíîñòü ñïèíîâûõ çîíäîâ, èçìåðåííàÿ ñ ïîìîùüþ òåõíèêè ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà, äàåò èíôîðìàöèþ î ñòðóêòóðå, êîíôîðìàöèîííîé äèíàìèêå, ìèêðîðåëüåôå è òîïîëîãèè èññëåäóåìûõ îáúåêòîâ. Ïî ìíåíèþ Áîððà è Êîøëàíäà (Burr M., Koshland D.J., 1964), òàêàÿ ðåïîðòåðíàÿ ãðóïïà äîëæíà îáëàäàòü ñëåäóþùèìè ñâîéñòâàìè: 1. Îíà äîëæíà, áóäó÷è ââåäåííîé â îïðåäåëåííûå ó÷àñòêè èçó÷àåìîé ñèñòåìû, ñîîáùèòü ïî èçìåíåíèþ ñîáñòâåííîé ñòðóêòóðû î õàðàêòåðå åå îêðóæåíèè.
Ãëàâà 1
Ñòð. 16
2. Åå ðåãèñòðèðóåìûå ñâîéñòâà äîëæíû áûòü óíèêàëüíûìè èëè ðåçêî îòëè÷àòüñÿ îò ñâîéñòâ èññëåäóåìîé ñèñòåìû. 3. Ðåïîðòåðíàÿ ãðóïïà íå äîëæíà îêàçûâàòü âëèÿíèå íà èçó÷àåìóþ ñèñòåìó, íî ñîîáùàòü î âñåõ åå èçìåíåíèÿõ.  íàñòîÿùåå âðåìÿ ïîëó÷àþò ðàñïðîñòðàíåíèå ðàçíîîáðàçíûå íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû ñ íàñûùåííûìè óãëåâîäîðîäíûìè öåïÿìè ëþáîé äëèíû. Ïðè íàëè÷èè ó ðåàãèðóþùåé ìîëåêóëû äâóõ è áîëåå ðåàêöèîííûõ ãðóïï ðåàêöèè áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè ïðèâîäÿò ê ñîåäèíåíèÿì ðàäèêàëîâ ìåæäó ñîáîé è ñ îáðàçîâàíèåì áèðàäèêàëîâ è ïîëèðàäèêàëîâ. Ïðàêòè÷åñêàÿ âîçìîæíîñòü ïðîâåäåíèÿ ðåàêöèè áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè îïðåäåëÿåòñÿ ñêîðîñòüþ ïðîõîæäåíèÿ â ðåàêöèîííîé ñìåñè ïàðàëëåëüíûõ ðåàêöèé. Èç êîíêóðåíòíûõ ðåàêöèé îñíîâíûìè ÿâëÿþòñÿ ðåàêöèè ñ íàñûùåííîé ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòüþ. Òàê, íàïðèìåð, õëîðèñòûé âîäîðîä, îáðàçóþùèéñÿ ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñïèðò-ðàäèêàëà ñ õëîðàíãèäðèäîì äèêàðáîíîâûõ æèðíûõ êèñëîò ñïîñîáåí âûçûâàòü ðåàêöèþ äèñïðîïîðöèîíèðîâàíèÿ ìåæäó ðàäèêàëàìè, ïðèâîäÿùóþ ê îáðàçîâàíèþ íå ïàðàìàãíèòíûõ ïðîäóêòîâ (Ðîçàíöåâ Ý.Ã., 1970). 1.2. Îáùèå ñâåäåíèÿ î ÝÏÐ-ñïåêòðîñêîïèè Ìåòîä ÝÏÐ äàåò âîçìîæíîñòü ðåãèñòðèðîâàòü ñ ïîìîùüþ ýëåêòðîííûõ óñòðîéñòâ óìåíüøåíèå ìîùíîñòè ýëåêòðîííîãî ñâåðõ ÷àñòîòíîãî èçëó÷åíèÿ (ñàíòèìåòðîâûå è ìèëëèìåòðîâûå ðàäèîâîëíû), ïîäàâàåìîãî íà âåùåñòâî, ïîìåùåííîå â îäíîðîäíîå ìàãíèòíîå ïîëå îïðåäåëåííîé íàïðÿæåííîñòè. Óìåíüøåíèå ìîùíîñòè ïðîõîäÿùèõ ÷åðåç èññëåäóåìûé îáðàçåö ðàäèîâîëí îáóñëîâëåí ïîãëîùåíèåì ÷àñòè ýíåðãèè èçëó÷åíèÿ ýëåêòðîíàìè âåùåñòâà. Îäíàêî íå âñå ýëåêòðîíû ìîãóò áûòü èññëåäîâàíû ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ. Îí ìîæåò áûòü ïðèìåíåí òîëüêî ê õèìè÷åñêèì ñèñòåìàì, ñîäåðæàùèì ýëåêòðîíû ñ íåêîìïåíñèðîâàííûìè ñïèíîâûìè ìîìåíòàìè, ãäå, êàê ïðàâèëî, ñîäåðæèòñÿ íå÷åòíîå êîëè÷åñòâî ýëåêòðîíîâ. Òàêèì îáðàçîì, ÝÏÐ-ñïåêòðîñêîïèÿ èìååò òî ïðåèìóùåñòâî, ÷òî òîëüêî ïàðàìàãíèòíûå ìîëåêóëû (èëè ÷àñòèöû ñ íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè) â îáðàçöå ìîãóò âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè âíåøíèìè ïîëÿìè â óñëîâèÿõ ðåçîíàíñà.
Ãëàâà 1
Ñòð. 17
Ìåòîä äàåò âîçìîæíîñòü âûÿâèòü íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû äàæå ïðè íåçíà÷èòåëüíîé èõ êîíöåíòðàöèè â ëþáîì âåùåñòâå, íå èçìåíÿÿ åãî, îõàðàêòåðèçîâàòü èõ ýíåðãåòè÷åñêîå ñîñòîÿíèå è ëîêàëèçàöèþ. Äëÿ ðåãèñòðàöèè ñèãíàëà ÝÏÐ íåîáõîäèìî ñëåäóþùåå: ∙ ñîçäàòü îäíîðîäíîå ìàãíèòíîå ïîëå, äîñòàòî÷íî âûñîêîé íàïðÿæåííîñòè; ∙ èìåòü ìîíîõðîìàòè÷åñêîå ìèêðîâîëíîâîå ýëåêòðîìàãíèòíîå èçëó÷åíèå; ∙ ñêîíöåíòðèðîâàòü ýòî èçëó÷åíèå íà îáðàçöå, ïîëó÷åííûé ñèãíàë ïðîäåòåêòèðîâàòü, óñèëèòü è çàðåãèñòðèðîâàòü íà ñàìîïèøóùåì óñòðîéñòâå. Çà ñ÷åò ýíåðãèè èçëó÷åíèÿ íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, íàõîäÿùèåñÿ íà áîëåå íèçêîì ýíåðãåòè÷åñêîì óðîâíå, ïåðåõîäÿò íà áîëåå âûñîêèé. Ñîîòâåòñòâåííî ïðîèñõîäèò èçìåíåíèå íàïðàâëåíèÿ ñïèíà. Òàêîå ïîãëîùåíèå ýíåðãèè ýëåêòðîíàìè ïðè ïåðåõîäå íà âåðõíèé óðîâåíü ìîæåò áûòü îáíàðóæåíî ïî èçìåíåíèþ ìîùíîñòè ýëåêòðîìàãíèòíîãî èçëó÷åíèÿ è çàðåãèñòðèðîâàíî êàêèì-ëèáî ñïîñîáîì, ïðèíÿòûì â ðàäèîñïåêòðîñêîïèè. Ðàçíèöà â çàñåëåííîñòè äâóõ óðîâíåé è îïðåäåëÿåò èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ÝÏÐ, ÿâëÿÿñü ïàðàìåòðîì, îïðåäåëÿþùèì ðàáî÷óþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü ðàäèîñïåêòðîìåòðà. Ðàñïðåäåëåíèå ýëåêòðîíîâ íà äâóõ ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíÿõ ìîæíî îïèñàòü âûðàæåíèåì Ìàêñâåëëà-Áîëüöìàíà:
N1 - hn =e N2 kT
,
(9)
ãäå N1 è N2 - ÷èñëî ýëåêòðîíîâ íà âåðõíåì è íèæíåì óðîâíÿõ ñîîòâåòñòâåííî; k - ïîñòîÿííàÿ Áîëüöìàíà; T - òåìïåðàòóðà. Îòñþäà ðàçíèöà ìåæäó N 1 è N2 áóäåò òåì áîëüøå, ÷åì áîëüøå hn, ñëåäîâàòåëüíî, è íàïðÿæåííîñòü ìàãíèòíîãî ïîëÿ H. Ïîýòîìó ÝÏÐ-ñïåêòðîìåòðû äîëæíû ðàáîòàòü ïðè âîçìîæíî áîëåå âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ íàïðÿæåííîñòè ìàãíèòíîãî ïîëÿ è ìèêðîâîëíîâîé ÷àñòîòû (Èíãðåì Ä., 1972; Ðîáåðòñîí Á., 1985). Íà ðèñóíêå 3 ïðèâåäåíà ïðèíöèïèàëüíàÿ ñõåìà óñòðîéñòâà ðàäèîñïåêòðîìåòðà ÝÏÐ ïî Ë. Áåðëèíåðó (1979). Îñíîâíûìè ÷àñòÿìè ýòîãî ïðèáîðà ÿâëÿþòñÿ: êëèñòðîí (èñòî÷íèê ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ), äâîéíîé Ò-ìîñò (èëè ìèêðîâîëíîâûé öèðêóëÿòîð), ðåçîíàòîð, áëîê äåòåêòîðà, óñèëèòåëü è
Ãëàâà 1
Ñòð. 18
çàïèñûâàþùåå óñòðîéñòâî. Êëèñòðîí, ñòàöèîíàðíûé âåíòèëü è ðåãóëèðóþùèé àòòåíþàòîð ÿâëÿþòñÿ èñòî÷íèêàìè ïåðåìåííîãî ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ.
Ðèñ. 3. Ñõåìà ÝÏÐ-ñïåêòðîìåòðà (îñíîâíûå ÷àñòè). (Ë.Áåðëèíåð, 1979). Ñïåêòðîìåòð ñêîíñòðóèðîâàí òàê, ÷òîáû âåëè÷èíû ñîïðîòèâëåíèé ïëå÷ 2 è 4 áûëè õîðîøî ñáàëàíñèðîâàíû è ÷òîáû íà äåòåêòîð íà ïëå÷î 3 ïàäàëà î÷åíü íèçêàÿ ìîùíîñòü.  ðå-
Ãëàâà 1
Ñòð. 19
çîíàòîðå îáðàçåö ðàñïîëîæåí â îáëàñòè ñ âûñîêèì çíà÷åíèåì íàïðÿæåííîñòè ìèêðîâîëíîâîãî ïîëÿ H1. ×àñòîòà êëèñòðîíà â õîäå ýêñïåðèìåíòîâ îñòàåòñÿ ïîñòîÿííîé, à âåëè÷èíà ìàãíèòíîãî ïîëÿ èçìåíÿåòñÿ.  óñëîâèÿõ ðåçîíàíñà îáðàçåö ïîãëîùàåò ìèêðîâîëíîâóþ ýíåðãèþ. Ñîçäàåòñÿ ðàçáàëàíñ ìîñòà, êîòîðûé äåòåêòèðóåòñÿ êàê óâåëè÷åíèå ìîùíîñòè íà ïëå÷å 3, óñèëèâàåòñÿ è âûíîñèòñÿ íà ñàìîïèñåö. Êàòóøêè ìîäóëÿöèè ïðåâðàùàþò ïîñòîÿííûé ñèãíàë â ïåðåìåííîå íàïðÿæåíèå, êîòîðîå ìîæåò óñèëèâàòüñÿ ñ ïîìîùüþ ôàçî÷óâñòâèòåëüíîãî òèòðîâàíèÿ. Ìîäóëÿöèÿ äàåò âîçìîæíîñòü ïðîâîäèòü äîïîëíèòåëüíóþ ðåãóëèðîâêó èíòåíñèâíîñòè ñèãíàëà ÝÏÐ ïóòåì èçìåíåíèÿ åå àìïëèòóäû. Ïðèâîäèì òàêæå ïðèíöèïèàëüíóþ ñõåìó óñòðîéñòâà ðàäèîñïåêòðîìåòðà ÝÏÐ òèïà “Ðóáèí” îòå÷åñòâåííîãî ïðîèçâîäñòâà (ðèñ. 4).
Ðèñ. 4. Ïðèíöèïèàëüíîå óñòðîéñòâî ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí”.  ýòîì ïðèáîðå èñòî÷íèêîì ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ ñëóæèò òàêæå êëèñòðîí, êîòîðûé ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé âàêóóìèðîâàííóþ òðóáêó, ñïîñîáíóþ ãåíåðèðîâàòü ìèêðîâîëíîâûå êîëåáàíèÿ â óçêîì äèàïàçîíå ÷àñòîò. Çàâèñèìîñòü ñíèìàåìîé ìîùíîñòè îò ÷àñòîòû îïèñûâàåò çîíó ãåíåðàöèè êëèñòðîíà. ×àñòîòà ìîíîõðîìàòè÷åñêîãî èçëó÷åíèÿ çàäàåòñÿ íàïðÿæåíèåì, ïðèëîæåííûì ê êëèñòðîíó. Êëèñòðîí ìîæíî ïîäñòðî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 20
èòü íà ëþáóþ ÷àñòîòó â ïðåäåëàõ çîíû. Äëÿ ñòàáèëèçàöèè ÷àñòîòû êëèñòðîíà èìååòñÿ àâòîìàòè÷åñêàÿ ñèñòåìà êîíòðîëÿ ÷àñòîòû. Îò êëèñòðîíà ìèêðîâîëíîâîå èçëó÷åíèå ïî âîëíîâîäó ïîäàåòñÿ â ïîëîñòü ðåçîíàòîðà, ãäå îíî ìàêñèìàëüíî êîíöåíòðèðóåòñÿ. Òàêèì îáðàçîì, íà îáðàçåö ïîäàåòñÿ äîñòàòî÷íî ìîùíîå îñöèëëèðóþùåå ìèêðîâîëíîâîå ìàãíèòíîå ïîëå. Ðåçîíàòîð ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé öåíòðàëüíóþ ÷àñòü ðàäèîñïåêòðîìåòðà. Åãî ðàáîòà ñõîäíà ñ ðàáîòîé àêóñòè÷åñêîãî ðåçîíàòîðà. Îòðàæåíèå çâóêîâûõ âîëí îò ñòåíîê àêóñòè÷åñêîãî ðåçîíàòîðà ïðèâîäèò ê èõ ïîãàøåíèþ â ðåçóëüòàòå èíòåðôåðåíöèè òåõ âîëí, äëÿ êîòîðûõ ïîëîâèíà äëèíû âîëíû íå êðàòíà íè îäíîìó èç ðàçìåðîâ ðåçîíàòîðà. ×àñòîòà, ïðè êîòîðîé ïîëîâèíà äëèíû âîëíû ñîîòâåòñòâóåò îäíîìó èç ðàçìåðîâ ðåçîíàòîðà íàçûâàåòñÿ îñíîâíîé ðåçîíàíñíîé ÷àñòîòîé. Åå ìîæíî ðåãóëèðîâàòü, èçìåðÿÿ âíóòðåííèé îáúåì ðåçîíàòîðà. Îáúåìíûé ðåçîíàòîð ìîæíî âîçáóäèòü òàê, ÷òîáû â íåì ñîçäàëèñü ñòîÿ÷èå âîëíû, êîòîðûå ìîãóò äàòü çíà÷èòåëüíóþ êîíöåíòðàöèþ ýíåðãèè.  ìèêðîâîëíîâîì ðåçîíàòîðå, â îòëè÷èå îò àêóñòè÷åñêîãî, ñëåäóåò ó÷èòûâàòü íàëè÷èå êàê ýëåêòðè÷åñêîãî, òàê è ìàãíèòíîãî ïîëåé.  êà÷åñòâå äåòåêòîðà ÷àùå âñåãî ïðèìåíÿþò êðåìíèåâûé êðèñòàëë, ôóíêöèîíèðóþùèé êàê ìèêðîâîëíîâûé âûïðÿìèòåëü. Îòðèöàòåëüíûì äåéñòâèåì äåòåêòîðà ÿâëÿåòñÿ òî, ÷òî ïðè åãî ðàáîòå ïîÿâëÿåòñÿ áîëüøîå êîëè÷åñòâî íèçêî÷àñòîòíûõ øóìîâ, îòðèöàòåëüíî ñêàçûâàþùèõñÿ íà ðàáîòå ïðèáîðà. Äëÿ èñêëþ÷åíèÿ øóìîâ òðåáóþòñÿ äîâîëüíî ñëîæíûå ïðèåìû. Êà÷åñòâî äåòåêòèðóþùåãî óñòðîéñòâà è ÿâëÿåòñÿ êðèòåðèåì, îïðåäåëÿþùèì âûñîòó êëàññíîñòè ïðèáîðà. Òàêèì îáðàçîì, âåëè÷èíà òîêà, èäóùåãî ÷åðåç äåòåêòîð, ÿâëÿåòñÿ ìåðîé îòðàæåííîé ìîùíîñòè âíóòðè ðåçîíàòîðà â ëþáîé ìîìåíò âðåìåíè. Åñëè âíóòðè ðåçîíàòîðà èìååò ìåñòî ïîãëîùåíèå, òî òîê äåòåêòîðà ñîîòâåòñòâåííî óìåíüøàåòñÿ. Âíåøíåå ìàãíèòíîå ïîëå ñîçäàåòñÿ, êàê ïðàâèëî, ýëåêòðîìàãíèòîì, òàê êàê äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðåçîíàíñà ïîëüçóþòñÿ îáû÷íî èçìåíåíèåì ìàãíèòíîãî ïîëÿ, à íå ÷àñòîòû. Äëÿ èçìåðåíèÿ ïîëÿ â ðàäèîñïåêòðîìåòðèè ïðèáåãàþò ê ìîäóëÿöèîííûì ìåòîäàì, îñíîâàííûì íà ïðèìåíåíèè êîëåáëþùåãîñÿ ìàãíèòíîãî ïîëÿ, ìíîãîêðàòíî ïðîõîäÿùåãî ÷åðåç òî÷êó ðåçîíàíñà.  ðåçóëüòàòå íà äåòåêòîðå ñîçäàþòñÿ íèçêî- è âûñîêî÷àñòîòíûå êîëåáàíèÿ, êîòîðûå ìîæíî óñèëèòü
Ãëàâà 1
Ñòð. 21
ñ ïîìîùüþ îáû÷íûõ ðàäèîñõåì è íàáëþäàòü íà îñöèëëîãðàôå. Ïðîñòåéøàÿ ôîðìà òàêîé ìîäóëÿöèè ïîêàçàíà íà ñõåìå 2 è çàêëþ÷àåòñÿ â òîì, ÷òî íà ìàãíèòíîå ïîëå íàêëàäûâàþò íèçêî÷àñòîòíóþ ðàçâåðòêó, ñîçäàâàåìóþ ìîäóëÿöèîííûìè êàòóøêàìè è ïîäàþò íà âðåìåííóþ ðàçâåðòêó îñöèëëîãðàôà, îäíîâðåìåííî ïîäàâàÿ íà âåðòèêàëüíî îòêëîíÿþùèå ïëàñòèíû óñèëåííûé ñèãíàë äåòåêòîðà.  ðåãèñòðàöèè ñèãíàëîâ îò ïðèáîðà èñïîëüçóþò îñöèëëîãðàô è äâóõêîîðäèíàòíûé ñàìîïèñåö. Ëó÷ îñöèëëîãðàôà è ïåðî ñàìîïèñöà ðàçâîðà÷èâàþò ïî îñè OX ñèíôàçíî ñ ðàçâåðòêîé ìàãíèòíîãî ïîëÿ, à ïî îñè OY ëó÷ è ïåðî îòêëîíÿþòñÿ íàïðÿæåíèåì, ñíÿòûì ñ ñèíõðîííîãî äåòåêòîðà.  êà÷åñòâå îáúåìíîãî ðåçîíàòîðà â ðàäèîñïåêòðîìåòðå “Ðóáèí” ïðèìåíÿåòñÿ öèëèíäðè÷åñêèé îáúåìíûé ðåçîíàòîð ñ òèïîì êîëåáàíèé H011. Èññëåäóåìûé îáðàçåö ïîìåùàþò â ñòåêëÿííîé èëè êâàðöåâîé àìïóëå âäîëü îñè ðåçîíàòîðà, ÷òî ñîîòâåòñòâóåò åãî ðàçìåùåíèþ â ïó÷íîñòè ìàãíèòíîãî ïîëÿ. Ðàáî÷èå õàðàêòåðèñòèêè ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí” ñëåäóþùèå: ðàáî÷àÿ ÷àñòîòà êëèñòðîíà K-54n ðåç =9400 ÌÃö, ÷àñòîòà Â× ìîäóëÿöèè n ìîä=100 êÃö, àìïëèòóäà ìîäóëÿöèè ðåãóëèðóåòñÿ ñòóïåí÷àòî îò 0,01 äî 10 Ãñ, íàïðÿæåííîñòü ìàãíèòíîãî ïîëÿ Ho óñòàíàâëèâàåòñÿ â ïðåäåëàõ îò 2000 äî 7000 Ý, äèàïàçîí ðàçâåðòêè ïîëÿ t=0,1±H óñòàíàâëèâàåòñÿ â ïðåäåëàõ îò 5 äî 1200 Ý, ñêîðîñòü ñâèïèðîâàíèÿ ðåãóëèðóåòñÿ ñòóïåí÷àòî îò 5 äî 500 Ý/ìèí., àòòåíþàòîð ïðåäóñìàòðèâàåò îñëàáëåíèå àìïëèòóäû ñèãíàëà ÝÏÐ îò 100 äî 1%, ïîñòîÿííàÿ âðåìåíè ñàìîïèñöà ðåãóëèðóåòñÿ â ïðåäåëàõ 0,03, 0,01, 1, 3 è 10 ñ. Êîíñòàíòó ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ðàññ÷èòûâàþò ìåòîäîì íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ. Ïîñêîëüêó êîíñòàíòà ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ðàâíà:
æ Aö ÷÷ l n æç Ao ö÷ l n çç A A ø, K= è oø = è t t
(10)
òî ïî ìåòîäó íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ ïîëó÷àþò ôîðìóëó:
Ãëàâà 1
Ñòð. 22
æ æ öö ç å t × l n ç A o ÷÷ ç ÷÷ ç è A i øø è K= , n 2 lnc
(11)
Åñëè â îïûòå ïðîìåæóòêè âðåìåíè èíêóáàöèè ñîñòàâëÿþò 4 ìèí è ðåãèñòðèðóþòñÿ ÷åðåç ÷åòûðå çíà÷åíèÿ àìïëèòóäû â ñðîêè 0, 4, 8 è 12 ìèí; òî ôîðìóëà äëÿ ðàñ÷åòà êîíñòàíòû ñêîðîñòè ïðåîáðàçóåòñÿ ê âèäó:
K = Gl n A o - l n A 1 - 2l n A 2 - 3l n A (c - 1) ,
(12)
ãäå A0, A1, A2 è A3 - çíà÷åíèÿ àìïëèòóä â ñðîêè èíêóáàöèè 0, 4, 8 è 12 ìèí, ñîîòâåòñòâåííî. Ïîãðåøíîñòü â îïðåäåëåíèè çíà÷åíèÿ àìïëèòóäû íå ïðåâûøàåò 0,5%, ÷òî ïðèâîäèò ê íåòî÷íîñòè â îïðåäåëåíèè êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ íå áîëåå 1,5%. Ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ êîíñòàíò äëÿ êàæäîé ñåðèè â îïðåäåëåííîé ãðóïïå íàáëþäåíèé îáðàáàòûâàþò îáùåïðèíÿòûìè ñòàòèñòè÷åñêèìè ìåòîäàìè. Ðàññ÷èòûâàþò ñðåäíåå çíà÷åíèå, ïîãðåøíîñòü ñðåäíåãî. Ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé êîíñòàíò âíóòðè ãðóïï, ìåæäó ñåðèÿìè è ìåæäó ãðóïïàìè ïðîâîäÿò ïî ôîðìóëå:
t=
M1 - M 2 m12 + m22
,
(13)
Ïîëó÷åííîå çíà÷åíèå t ñðàâíèâàþò ñî çíà÷åíèåì äëÿ óðîâíåé 0,05 è 0,01. Äëÿ èññëåäîâàíèÿ ìåòîäîì ÝÏÐ îáû÷íî ïðèìåíÿþò íèòðîêñèëðàäèêàëû, êîòîðûå õàðàêòåðèçóþòñÿ îòíîñèòåëüíîé ñòàáèëüíîñòüþ. Ýòî îáåñïå÷èâàåòñÿ íèçêèì óðîâíåì ýíåðãèè îñíîâíîãî ñîñòîÿíèÿ íèòðîêñèëüíîé ãðóïïû NO (>No-O), ñîäåðæàùåé íåñïàðåííûé ýëåêòðîí, è çàùèòíûì äåéñòâèåì, ñîçäàâàåìûì ìåòèëüíûìè ãðóïïàìè. Ýòè ñîåäèíåíèÿ äàþò ñïåêòðû â âèäå òðåõ óçêèõ, õîðîøî ðàçäåëåííûõ è ëåãêî òðàêòóåìûõ ëèíèé ñâåðõòîíêîé ñòðóêòóðû çà ñ÷åò âçàèìîäåéñòâèÿ íåñïàðåííîãî ýëåêòðîíà ñ ÿäåðíûì ñïèíîì àçîòà.
Ãëàâà 1
Ñòð. 23
Íåñïàðåííûé ýëåêòðîí â ñòàáèëüíûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëàõ ïðàêòè÷åñêè ïîëíîñòüþ ëîêàëèçîâàí íà NO-ãðóïïå ðàäèêàëà. Ïîýòîìó íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû ÿâëÿþòñÿ îäíèì èç íåìíîãèõ êëàññîâ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, êîòîðûå ó÷àñòâóþò â ðåàêöèÿõ áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè. Âîçìîæíîñòü òàêèõ ðåàêöèé îïðåäåëÿåò øèðîêèé àññîðòèìåíò ñïèíîâûõ çîíäîâ è ìåòîê. Ê èñ÷åçíîâåíèþ ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ îïèñàííûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ ïðèâîäÿò ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿîêèñëåíèÿ. Ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ðàäèêàëüíîãî ôðàãìåíòà ïðîòåêàþò ýôôåêòèâíî, êîãäà â ñðåäå ïðèñóòñòâóåò íå òîëüêî äîíîð ýëåêòðîíîâ, íî è äîíîð ïðîòîíîâ: >N o-O+H++e®>N-OH.  ñðåäå, ñîäåðæàùåé ïðîòîíû, äîíîðàìè ýëåêòðîíîâ ìîãóò áûòü ñîåäèíåíèÿ îðãàíè÷åñêîãî è íåîðãàíè÷åñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, îáëàäàþùèå äîñòàòî÷íî âûñîêèì âîññòàíîâèòåëüíûì ïîòåíöèàëîì. Òàêèì ñâîéñòâîì îáëàäàåò ãèäðîõèíîí, ãèäðàçèí, ñîåäèíåíèÿ ñ ñóëüôãèäðèëüíûìè ãðóïïàìè è äðóãèå. Åñëè ðåàêöèÿ âîññòàíîâëåíèÿ ïðîèñõîäèò â âîäíîé ñðåäå, â ðîëè äîíîðîâ ïðîòîíîâ ìîãóò âûñòóïàòü ìîëåêóëû âîäû. Ðåàêöèÿ îêèñëåíèÿ ðàäèêàëüíîãî ôðàãìåíòà ïðîèñõîäèò â ïðèñóòñòâèè äîñòàòî÷íî ñèëüíûõ îêèñëèòåëåé, íàïðèìåð, ãàëîãåíîâ: >No-O+RClo>>N+-OH-RCl. Åñëè â èññëåäóåìîé ñðåäå íàðÿäó ñ íèòðîêñèëüíûìè ïðèñóòñòâóþò äðóãèå àêòèâíûå óãëåâîäîðîäíûå ðàäèêàëû R, âîçíèêøèå â ðåçóëüòàòå äåñòðóêöèè ìîëåêóë âåùåñòâà èëè â ïðîöåññå äðóãèõ ðåàêöèé, òî îíè ìîãóò ðåàãèðîâàòü ñ íèòðîêñèëüíûìè ðàäèêàëàìè: >No-O+Ro>>N+ -H-R.  êà÷åñòâå ñïèíîâûõ çîíäîâ òàêæå ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ïàðàìàãíèòíûå èîíû ïåðåõîäíûõ ìåòàëëîâ, èîíû ëàíòàíîèäîâ è íåêîòîðûå îðãàíè÷åñêèå ðàäèêàëû. Ñïèíîâûé çîíä ÷óâñòâèòåëåí ê òàêèì ñâîéñòâàì îêðóæåíèÿ, êàê ìîëåêóëÿðíîå äâèæåíèå, îðèåíòàöèÿ, ëîêàëüíîå ýëåêòðè÷åñêîå è ìàãíèòíîå ïîëå. Îí ìîæåò ðåãèñòðèðîâàòü ñàìûå íåçíà÷èòåëüíûå èçìåíåíèÿ â áèîëîãè÷åñêèõ ñòðóêòóðàõ ïðè èõ ôóíêöèîíèðîâàíèè èëè ïðè ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèÿõ íà íèõ (Êóçíåöîâ À.Í., 1976).
Ãëàâà 1
Ñòð. 24
1.3. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â áèîëîãèè ÝÏÐ - ýòî î÷åíü ÷óâñòâèòåëüíûé ìåòîä, ïîçâîëÿþùèé ïðîâîäèòü èçìåðåíèÿ ñ äîñòàòî÷íî ìàëûìè êîëè÷åñòâàìè îáðàçöà, êîòîðûé ê òîìó æå íå îáÿçàòåëüíî äîëæåí áûòü ãîìîãåííûì. Ïåðâûå ðàáîòû, ïîñâÿùåííûå èññëåäîâàíèþ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ ìåòîäîì ÝÏÐ, áûëè îïóáëèêîâàíû ïî÷òè ÷åðåç 10 ëåò ïîñëå îòêðûòèÿ ýôôåêòà (Commoner B., Taunsend J.F., Pake J., 1954; Áëþìåíôåëüä À.Í., Êîëìàíñîí À.Ý., 1957).  êà÷åñòâå ïðèìåðà ðàññìîòðèì èññëåäîâàíèå ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ ïå÷åíè êðûñû. Íåáîëüøîé êóñî÷åê ïå÷åíè (íåñêîëüêî ìèëëèãðàììîâ) ïîìåùàþò ñðàçó æå ïîñëå èçúÿòèÿ â æèäêèé àçîò; ýòà ïðîöåäóðà ñïîñîáñòâóåò ïîâûøåíèþ òî÷íîñòè èçìåðåíèé è ïðåäîòâðàùàåò ðàçëîæåíèå òêàíè. Íàáëþäàåìûå ëèíèè ìîæíî èäåíòèôèöèðîâàòü, îïðåäåëèâ g-ôàêòîð: ∙ åñëè g@2, òî â îáðàçöå ïðèñóòñòâóþò ëèáî ñâîáîäíûå ðàäèêàëû, ëèáî èîíû ïåðåõîäíûõ ìåòàëëîâ ñ îðáèòàëüíûì ìîìåíòîì ýëåêòðîíîâ L=0; ∙ åñëè g-ôàêòîð ñèëüíî îòëè÷àåòñÿ îò 2, ýòî ïî÷òè íàâåðíÿêà îçíà÷àåò ÷òî â îáðàçöå èìåþòñÿ èîíû ïåðåõîäíûõ ìåòàëëîâ ñ L¹0. Ïðîâîäÿ áîëåå îáñòîÿòåëüíûå èññëåäîâàíèÿ, îáû÷íî óäàåòñÿ óñòàíîâèòü ëîêàëèçàöèþ è ïðèðîäó èñòî÷íèêà ñèãíàëà. Ëîêàëèçàöèÿ. Òêàíü ãîìîãåíèçèðóþò, ïîäâåðãàþò äèôôåðåíöèàëüíîìó óëüòðàöåíòðèôóãèðîâàíèþ è èññëåäóþò êàæäóþ ôðàêöèþ ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ: ∙ ÿäðà êëåòîê äàþò åäâà ðàçëè÷èìûé ñèãíàë â îáëàñòè g=2; ∙ ïëàçìàòè÷åñêèå ìåìáðàíû íå äàþò íèêàêîãî ñïåêòðà; ∙ íàäîñàäî÷íîé æèäêîñòè ñîîòâåòñòâóåò ñëàáûé ñèãíàë â îáëàñòè g=2; ∙ ìèòîõîíäðèè äàþò íåñêîëüêî ëèíèé, ðàñïîëîæåííûõ â èíòåðâàëå 1,5
Ãëàâà 1
Ñòð. 25
î÷èùåííûõ è èçîëèðîâàííûõ êîìïîíåíòîâ òêàíè, îäíàêî èççà áîëüøîãî èõ ÷èñëà è íåñòàáèëüíîñòè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ ýòîò ïóòü îêàçûâàåòñÿ íåðåàëüíûì, è ïðèõîäèòñÿ îñíîâûâàòüñÿ íà êîñâåííûõ äàííûõ. Ïðè âîññòàíîâëåíèè ìèêðîñîì äèòèîíèòîì íàáëþäàåòñÿ óìåíüøåíèå èíòåíñèâíîñòè âñåõ òðåõ ëèíèé. Ýòî äàåò îñíîâàíèå ïîëàãàòü, ÷òî èñòî÷íèêîì ýòèõ ñèãíàëîâ ñëóæèò îäíî âåùåñòâî (âåðîÿòíîñòü òàêîãî ýôôåêòà äëÿ ñìåñè âåñüìà ìàëà). Èñõîäÿ èç ñïåêòðîâ ïîãëîùåíèÿ, óäàëîñü óñòàíîâèòü íàëè÷èå â ìèêðîñîìàõ äâóõ òèïîâ öèòîõðîìà - P450 è b5. Êðîìå òîãî, áûëî èçâåñòíî, ÷òî ñîäåðæàíèå öèòîõðîìà P450 â òêàíÿõ ïå÷åíè óâåëè÷èâàåòñÿ, åñëè æèâîòíîìó íà ïðîòÿæåíèè íåêîòîðîãî âðåìåíè ââîäèòü ôåíîáàðáèòàë. Îêàçàëîñü, ÷òî èìååòñÿ ÷åòêàÿ êîððåëÿöèÿ ìåæäó ýôôåêòàìè âîçðàñòàíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñèãíàëîâ ÝÏÐ è ïîãëîùåíèÿ, ñ îäíîé ñòîðîíû, è êîëè÷åñòâîì ââåäåííîãî ôåíîáàðáèòàëà - ñ äðóãîé. Òàêèì îáðàçîì, áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî ñèãíàëû ÝÏÐ ìèêðîñîì îáÿçàíû ñâîèì ïðîèñõîæäåíèåì öèòîõðîìó P450. Öèòîõðîì b5 ïðè 77 K äàåò ñëèøêîì øèðîêèé ñèãíàë, ÷òîáû åãî ìîæíî áûëî çàðåãèñòðèðîâàòü â ñïåêòðàõ ÝÏÐ ìèêðîñîì (íàäåæíûå äàííûå óäàåòñÿ ïîëó÷èòü ëèøü ïðè òåìïåðàòóðå æèäêîãî ãåëèÿ, 4 K). Èññëåäîâàíèå ìèòîõîíäðèé ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ ãîðàçäî ñëîæíåå èç-çà áîëüøîãî ÷èñëà ëèíèé â ñïåêòðå. Ïî ýòîé ïðè÷èíå óäàåòñÿ èäåíòèôèöèðîâàòü ëèøü ÷àñòü ñèãíàëîâ ñóììàðíîãî ñïåêòðà ÝÏÐ. Íàïðèìåð, ëèíèÿ ñ g=2,003 ìîæåò áûòü â apriori îòíåñåíà êàê ê ñâîáîäíîìó ðàäèêàëó, òàê è ê èîíó ìåòàëëà. Âðåìÿ ðåëàêñàöèè äëÿ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ çíà÷èòåëüíî áîëüøå, ÷åì äëÿ èîíîâ ìåòàëëîâ. Ñëåäîâàòåëüíî, äëÿ âûÿñíåíèÿ ïðèðîäû ñèãíàëà ñ g~2 íåîáõîäèìî ïðîâîäèòü ýêñïåðèìåíòû ïî íàñûùåíèþ. Äëÿ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëîâ ÝÏÐ ïðîïîðöèîíàëüíà ìîùíîñòè ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ ëèøü ïðè ìàëûõ åå çíà÷åíèÿõ. Äëÿ îáðàçöîâ èç òêàíè ïå÷åíè óìåíüøåíèå ìîùíîñòè âåäåò ê ïðîïîðöèîíàëüíîìó óìåíüøåíèþ èíòåíñèâíîñòè âñåõ ñèãíàëîâ, êðîìå ñèãíàëà ñ g=2,003, êîòîðûé, êðîìå òîãî, ñòàíîâèòñÿ óçêèì è ñèììåòðè÷íûì. Òàêèì îáðàçîì, ýòîò ñèãíàë ìîæíî ïðèïèñàòü ñâîáîäíûì ðàäèêàëàì. Ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ áûëè îáíàðóæåíû ñâîáîäíûå ðàäèêàëû âî ìíîãèõ áèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåìàõ êàê ðàñòèòåëüíîãî, òàê è
Ãëàâà 1
Ñòð. 26
æèâîòíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ. Ê òîìó æå áûëà óñòàíîâëåíà êîððåëÿöèîííàÿ ñâÿçü ìåæäó êîíöåíòðàöèåé ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ è ìåòàáîëè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà, ÷òî ÿâèëîñü ïîäòâåðæäåíèåì âûäâèíóòîãî ðàíåå ïðåäïîëîæåíèÿ îá ó÷àñòèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â ïðîöåññàõ îáìåíà âåùåñòâ. Îäíàêî, îñíîâíîé òðóäíîñòüþ ÿâèëîñü òî, ÷òî ïî ðÿäó ïðè÷èí, ñâÿçàííûõ â îñíîâíîì ñî ñïåöèôèêîé ïðîòåêàíèÿ ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ â áèîëîãè÷åñêèõ òêàíÿõ è âûñîêèõ äèýëåêòðè÷åñêèõ ïîòåðü, íå óäàëîñü îòâåòèòü íà âîïðîñ, êàêèå èìåííî ñâîáîäíûå ðàäèêàëû ó÷àñòâóþò â òåõ èëè èíûõ êîíêðåòíûõ ïðîöåññàõ îáìåíà. Íåñìîòðÿ íà óêàçàííûå òðóäíîñòè, â íåêîòîðûõ îáëàñòÿõ áèîëîãèè ìåòîäîì ÝÏÐ-ñïåêòðîñêîïèè áûëè ïîëó÷åíû èíòåðåñíûå ðåçóëüòàòû. Åùå â ñåðåäèíå 50-õ ãîäîâ â áèîëîãèè âîçíèêëà íåîáõîäèìîñòü â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèÿõ íà óðîâíå ýëåêòðîííûõ ïðîöåññîâ. Âûñêàçûâàëèñü îáîñíîâàííûå ïðåäïîëîæåíèÿ îá ó÷àñòèè â áèîýíåðãåòèêå, ôîòîñèíòåçå, ïåðâè÷íûõ ðàäèîáèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññàõ è â äðóãèõ ðåàêöèÿõ ýëåêòðîíîâ, àòîìîâ, èîíîâ, ôðàãìåíòîâ ìîëåêóë, ñîäåðæàùèõ íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû. Ãëàâíàÿ ïðè÷èíà òàêîãî øèðîêîãî èñïîëüçîâàíèÿ ìåòîäà ÝÏÐ çàêëþ÷àëàñü â ïðîñòîòå àíàëèçà ñïåêòðîâ ñ ïîìîùüþ ìàãíèòíûõ ïàðàìåòðîâ, èõ èíòåðïðåòàöèè íà îñíîâå ìîëåêóëÿðíûõ ñòðóêòóð, âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè ñïåêòðàëüíûõ õàðàêòåðèñòèê ê ýëåêòðîííîìó ðàñïðåäåëåíèþ, ìîëåêóëÿðíîé îðèåíòàöèè, ïðèðîäå îêðóæåíèÿ è ìîëåêóëÿðíûì äâèæåíèÿì. Ñðàçó æå ïðè èñïîëüçîâàíèè ìåòîäà ÝÏÐ â èçó÷åíèè ëèîôèëèçèðîâàííûõ òêàíåé æèâîòíîãî, ðàñòèòåëüíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ è ìèêðîáíûõ êëåòîê áûëî îáíàðóæåíî, ÷òî ïàðàìàãíåòèçìîì îáëàäàþò ïî÷òè âñå áèîëîãè÷åñêèå îáúåêòû (Àæèïà ß.È., 1983). Ê îäíèì èç ïåðâûõ ðàáîò ïî èçó÷åíèþ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ ìåòîäîì ÝÏÐ îòíîñÿòñÿ òàêæå èññëåäîâàíèÿ, ïðîâåäåííûå â ëàáîðàòîðèè Ãîðäè â 1955 ãîäó (Gordy W., Ard W., Shields H., 1955). Äëÿ áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé îñîáûé èíòåðåñ ïðåäñòàâëÿþò ñâîáîäíûå ðàäèêàëû, îáðàçóþùèåñÿ â ïðîöåññå îáû÷íûõ ìåòàáîëè÷åñêèõ ðåàêöèé. Îäíàêî, îòäåëüíûå ðàáîòû íà áèîëîãè÷åñêîì ìàòåðèàëå áûëè ïðîâåäåíû ñ ïðèìåíåíèåì ðåíòãåíîâñêîãî îáëó÷åíèÿ, äåéñòâèþ êîòîðîãî ïîäâåðãàëèñü àìèíîêèñëîòû è áåëêè. Âîçíèêàþùèå ïðè ýòîì
Ãëàâà 1
Ñòð. 27
ñïåêòðû áûëè òùàòåëüíî èçó÷åíû. Àíàëîãè÷íûì îáðàçîì èññëåäîâàíû øåëê-ñûðåö, öèñòåèí, âîëîñû, íîãòè.  ÷àñòíîñòè, ïîëó÷åííûé ñïåêòð øåëêà-ñûðöà ñîñòîÿë èç îäíîãî äóáëåòà, ðàñïîëîæåííîãî ñèììåòðè÷íî îòíîñèòåëüíî g-ôàêòîðà ñâîáîäíîãî ýëåêòðîíà, â îòëè÷èå îò íåãî ñïåêòðû öèñòåèíà è êåðàòèíîâûõ ñòðóêòóð â çíà÷èòåëüíîé ñòåïåíè àññèìåòðè÷íû îòíîñèòåëüíî g-ôàêòîðà ñâîáîäíîãî ýëåêòðîíà. Çíà÷åíèÿ gôàêòîðà ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ âñåãäà î÷åíü áëèçêè ê çíà÷åíèÿì g-ôàêòîðà ñâîáîäíîãî ýëåêòðîíà, òàê êàê ó íèõ ñïèí-îðáèòàëüíàÿ ñâÿçü î÷åíü ìàëà. Îáû÷íî àòîìû êèñëîðîäà è ñåðû ìîãóò äîâîëüíî çíà÷èòåëüíî ñäâèãàòü çíà÷åíèÿ g-ôàêòîðà, åñëè íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû áóäóò ñ íèìè àêòèâíî ðåàãèðîâàòü. Ýòî äàëî âîçìîæíîñòü Ãîðäè, Àðäó è Øèëäñó ïðåäïîëîæèòü, ÷òî íàèáîëåå âåðîÿòíîé àññèìåòðèè ñïåêòðîâ ÝÏÐ öèñòåèíà è êåðàòèíîâ ÿâëÿåòñÿ ìèãðàöèÿ íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ è âàêàíñèé, îáðàçóþùèõñÿ ïîä äåéñòâèåì ðåíòãåíîâñêîãî îáëó÷åíèÿ, íà àòîìû ñåðû è âîäîðîäà ñ ïîñëåäóþùåé ëîêàëèçàöèåé íà ýòèõ àòîìàõ. Äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ â öåëîì ïîäòâåðäèëè ýòè ðåçóëüòàòû (Gordy W., Kusita J., 1960).  ýòîò æå ïåðèîä âðåìåíè áûë âûïîëíåí ðÿä èññëåäîâàíèé ïî èíòåðïðåòàöèè ñïåêòðîâ ÝÏÐ ïðè ðåíòãåíîâñêîì îáëó÷åíèè äèïåïòèäîâ è ïîëèïåïòèäîâ. Ïðîâåäåíû ñèñòåìàòè÷åñêèå èññëåäîâàíèÿ ñòðóêòóðû ìîíîêðèñòàëëîâ áåëêîâ è àìèíîêèñëîò, öåëüþ êîòîðûõ ÿâëÿåòñÿ äàëüíåéøàÿ ðàñøèôðîâêà ñòðîåíèÿ ìîëåêóë áåëêà è ëîêàëèçàöèÿ â íèõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Èññëåäîâàíèÿ ôðàãìåíòîâ è ðàçëè÷íûõ ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé ìîãóò ñëóæèòü èëëþñòðàöèåé ðàçëè÷íûõ ïðàêòè÷åñêèõ ïðèëîæåíèé ÝÏÐ. Ýòî ñâÿçàíî ñ òåì, ÷òî ïðàêòè÷åñêè âñå ôåðìåíòíûå ðåàêöèè ìîæíî îõàðàêòåðèçîâàòü òðåìÿ îñíîâíûìè ñâîéñòâàìè, ðåãèñòðèðóåìûìè ìåòîäîì ÝÏÐ. Áîëüøàÿ ÷àñòü ôåðìåíòîâ ñîäåðæèò â ñâîåé ñòðóêòóðå èîíû ìåòàëëîâ (Fe, Mn, Ca è äð.), êîòîðûå â ïðîöåññå ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé ìåíÿþò ñâîþ âàëåíòíîñòü, ÷òî ÷àñòè÷íî ñâÿçàíî ñ âûñâîáîæäåíèåì íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ â îêðóæåíèè èîíà ìåòàëëà, à ýòî ìîæíî ôèêñèðîâàòü è îõàðàêòåðèçîâàòü ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ. Ìåõàíèçì ôåðìåíòàòèâíîé àêòèâíîñòè ïî ñâîåé ïðèðîäå ÿâëÿåòñÿ êàòàëèòè÷åñêèì, ÷òî èìååò ïðÿìîå îòíîøåíèå ê êèíåòèêå õèìè÷åñêîãî ïðåâðàùåíèÿ. Ìåòîä ÝÏÐ ÿâëÿåòñÿ î÷åíü ïîëåçíûì â ýòîé îáëàñòè, òàê êàê ïîçâîëÿåò
Ãëàâà 1
Ñòð. 28
íåïðåðûâíî ñëåäèòü çà áûñòðûìè èçìåíåíèÿìè êîíöåíòðàöèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, ïðè÷åì îäíîâðåìåííî, ò.å. äàåò âîçìîæíîñòü ñëåäèòü çà ïîñëåäîâàòåëüíîñòüþ ðåàêöèè. Èññëåäîâàíèþ ïîäâåðãàëèñü âñå îñíîâíûå ãðóïïû ôåðìåíòîâ: ãèäðîëèòè÷åñêèå, ôîñôîëèòè÷åñêèå, îêèñëèòåëüíûå (äåãèäðîãåíàçû, îêñèäàçû, îêèñëèòåëüíûå äåçàìèíàçû, ôåðìåíòû, êàòàëèçèðóþùèå ïðèñîåäèíåíèå; ôåðìåíòû, êàòàëèçèðóþùèå ðåàêöèè ïåðåíîñà ãðóïï; èçîìåðèçóþùèå ôåðìåíòû). Íå âäàâàÿñü â ïîäðîáíîñòè äîâîëüíî ñëîæíûõ ìåòîäèê, ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî íà ðàçíûõ ñòàäèÿõ ïðîâåäåíèÿ ýêñïåðèìåíòîâ îñíîâíîå âíèìàíèå ôèêñèðîâàëîñü íà èçó÷åíèå êîíöåíòðàöèé íà÷àëüíûõ è êîíå÷íûõ ïðîäóêòîâ ðåàêöèé (Nuchaelis Z., Menten M.Z., 1913).  ýòèõ èññëåäîâàíèÿõ ÝÏÐ ïðèîáðåòàåò îñîáîå çíà÷åíèå â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî äàåò èíôîðìàöèþ î ïðîìåæóòî÷íûõ ïðîäóêòàõ êàòàëèòè÷åñêèõ ðåàêöèé, òàê êàê îíè îáû÷íî ñîäåðæàò íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû. Ñòðóêòóðà è ìåõàíèçì äåéñòâèÿ áîëüøèíñòâà ôåðìåíòîâ êðàéíå ñëîæåí è ëèøü â íåìíîãèõ ñëó÷àÿõ âûÿñíåí îêîí÷àòåëüíî. Ìíîãèå èç ïðîâîäèìûõ ðàáîò ïî èçó÷åíèþ ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ, ïðèñóòñòâóþùèõ â àêòèâíî ìåòàáîëèçèðóþùèõ îáúåêòàõ, ëèáî âîçíèêàþùèõ ïðè ðàçëè÷íûõ ôèçè÷åñêèõ è õèìè÷åñêèõ âîçäåéñòâèÿõ, ñâÿçàííûõ ñ ïðèìåíåíèåì ìåòîäà ÝÏÐ. Íåñìîòðÿ íà ðàñïðîñòðàíåííîñòü ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ â ïðèðîäå, çíà÷èòåëüíàÿ ÷àñòü áèîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ èõ íå ñîäåðæèò. Òêàíè, èçó÷àåìûå ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ, âñëåäñòâèå ïîãëîùåíèÿ ìàãíèòíîé ýíåðãèè âîäîé, äîëæíû ïîäâåðãàòüñÿ îñîáîé îáðàáîòêå äëÿ èñêëþ÷åíèÿ ýòîãî ôàêòîðà, à íàðóøåíèå íàòèâíîé ñòðóêòóðû âåùåñòâ âíîñèò îïðåäåëåííóþ îøèáêó â ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ.  ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè èìåþòñÿ ìåòîäû è ïîäõîäû, îñíîâàííûå íà èñïîëüçîâàíèè íîâûõ ìîëåêóëÿðíûõ äàò÷èêîâ - ñòàáèëüíûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ, ñâÿçàííûõ êîâàëåíòíî ñ ìàêðîìîëåêóëîé (ñïèíîâûå ìåòêè) èëè ââåäåííûå â ñèñòåìó â âèäå íè÷òîæíûõ ïðèìåñåé (ñïèíîâûå çîíäû). Èçìåíåíèå ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ, ââåäåííûõ â áèîëîãè÷åñêóþ ñèñòåìó, â ðåçóëüòàòå âçàèìîäåéñòâèÿ ñ ïîñëåäíåé, ìîæíî çàðåãèñòðèðîâàòü ñ ïîìîùüþ ìàãíèòíîé ðàäèîñïåêòðîìåòðèè. Ñïèíîâûå çîíäû è ìåòêè ÷åòêî ðåàãèðóþò íà ìàëåéøèå èçìåíåíèÿ ôóíêöèè áèîëîãè÷åñêèõ
Ãëàâà 1
Ñòð. 29
ñòðóêòóð.  ñâÿçè ñ ýòèì äèàïàçîí ïðîâîäèìûõ ñ èõ ïîìîùüþ èññëåäîâàíèé â áèîëîãèè è ìåäèöèíå ðàñøèðÿåòñÿ. Èññëåäîâàíèå ðåàêöèè ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ â íàòèâíûõ òêàíÿõ èìååò çíà÷èòåëüíûå òðóäíîñòè äëÿ äàëüíåéøåé ðàñøèôðîâêè äàííûõ. Ïîýòîìó äëÿ ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèé ïîäîáíîãî ðîäà ÷àùå ïðèìåíÿþòñÿ èñêóññòâåííî ñîçäàííûå ñðåäû. Èçâåñòíî, ÷òî àñêîðáàò íàòðèÿ âîññòàíàâëèâàåò íèòðîêñèëüíûå ãðóïïû äî ìàãíèòíûõ ïðîäóêòîâ, ïðåäïîëîæèòåëüíî äî ãèäðîêñèëàìèíîâ. Ñêîðîñòü âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëîâ çàâèñèò îò íàëè÷èÿ òîãî èëè èíîãî çàùèòíîãî îêðóæåíèÿ. Ýòîò ìåòîä èñïîëüçîâàí äëÿ èçó÷åíèÿ äèôôóçèè ôîñôîëèïèäîâ èç âíóòðåííåãî ìîíîñëîÿ áèñëîéíûõ âåëèêóë âî âíåøíèé ìîíîñëîé (Kornberg R.D., McCannel, H.M., 1971). Ïîäîáíûì îáðàçîì ïî ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ íèòðîêñèëîâ ìîæíî èññëåäîâàòü ñêîðîñòü ïðîíèêíîâåíèÿ èîíà àñêîðáàòà â îðèåíòèðîâàííûå áèñëîè ôîñôîëèïèäîâ, ñîäåðæàùèå ñïèíîâûå çîíäû, è òàêèì îáðàçîì îöåíèâàòü îòíîñèòåëüíóþ ãëóáèíó ïîãðóæåíèÿ â áèñëîé íèòðîêñèëüíûõ ôðàãìåíòîâ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Äëÿ äàííîãî ñïèíîâîãî çîíäà îòíîñèòåëüíûå çíà÷åíèÿ ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñëóæàò èíäèêàòîðàìè ïðîíèöàåìîñòè áèîñëîÿ â ðàçíûõ óðîâíÿõ (Butler K.W., 1975; Scheier-Mucclo S., Marsh D., Smith I.C.P., 1975). Ìåòîäîì íàáëþäåíèÿ çà ñêîðîñòüþ âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ àñêîðáàòîì íàòðèÿ áûëî èçìåðåíî âëèÿíèå êàëüöèÿ è òåòðàêàèíà íà ïðîíèöàåìîñòü ëèïèäíûõ êëåòîê. È êàëüöèé, è òåòðàêàèí ïîâûøàëè ïðîíèöàåìîñòü ëèïèäîâ äëÿ àñêîðáàòà íàòðèÿ ñ ïëåíêàìè èç ëèïèäîâ áåëîãî âåùåñòâà áû÷üèõ ìîçãîâ, ïðè÷åì èõ âîçäåéñòâèå áûëî àääèòèâíûì. Âëèÿíèå êàëüöèÿ è òåòðàêàèíà íà ïðîíèöàåìîñòü èçìåíÿëîñü â çàâèñèìîñòè îò òèïà ëèïèäà, èç êîòîðîãî ãîòîâèëè ïëåíêó. Íå òîëüêî àñêîðáàò (Kornberg R.D., McConnell H.M., 1971) è ãëþòàòèîí (Morrisett J.D., Drott H.B., 1969) ñïîñîáíû âîññòàíàâëèâàòü íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû, ÷òî ïðèâîäèò ê ïîòåðå ïàðàìàãíåòèçìà. Ýòèì ñâîéñòâîì îáëàäàþò è íåêîòîðûå ôåðìåíòû. Òàê, êèíåòèêà âîññòàíîâëåíèÿ ñïèí-ìå÷åííîãî ôîñôàòà è 5-äîêñèëñòåàðèíîâîé êèñëîòû ìèêðîñîìàëüíûìè ìåìáðàíàìè, ñîäåðæàùèìè ãèäðîêñèëèðóþùóþ ôåðìåíòíóþ ñèñòåìó èõ öèòîõðîìà Ð450 è öèòîõðîì Ð450-ðåäóêòàçû, áûëà èçó÷åíà çàðóáåæíûìè èññëåäîâàòåëÿìè (Stier A., Sackmen E.,
Ãëàâà 1
Ñòð. 30
1973). Èññëåäîâàíèÿ, ïðîâîäèìûå ñ ïîìîùüþ ñïèíîâûõ ìåòîê ñî âðåìåí ïåðâûõ ðàáîò Ìàê Êîííåëà è ñîàâò. (Ziebling G.R., McConnel H.M., 1965; Hood D.E., McConnell H.M., 1962), áëàãîäàðÿ èõ âûñîêîé ýôôåêòèâíîñòè è ìåòîäè÷åñêîé ïðîñòîòå ñòàëè îäíèì èç îñíîâíûõ èíñòðóìåíòîâ èññëåäîâàíèÿ áèîïîëèìåðîâ è áèîìåìáðàí. Îñíîâíûå óñèëèÿ ìåòîäà ñïèíîâûõ ìåòîê íàïðàâëåíû íà ðåøåíèå ôóíäàìåíòàëüíûõ âîïðîñîâ ôåðìåíòàòèâíîãî êàòàëèçà è ôèçè÷åñêîé õèìèè áåëêîâ. Ìåòîä ïîçâîëÿåò èññëåäîâàòü òîïîãðàôèþ áåëêîâîé ïîâåðõíîñòè, êîíôîðìàöèîííûå ïåðåõîäû, ëîêàëüíóþ ïîäâèæíîñòü è ìèêðîâÿçêîñòü áåëêîâîé ìàòðèöû, ñòðîåíèå è äèíàìèêó àêòèâíûõ öåíòðîâ. Çíà÷èòåëüíûå óñïåõè áûëè äîñòèãíóòû â èçó÷åíèè ìåòîäîì ÝÏÐ ó÷àñòèÿ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â ïðîöåññàõ áèîñèíòåçà ÀÒÔ è áèîòðàíñôîðìàöèè ýíåðãèè â êëåòêàõ æèâîòíûõ è ðàñòåíèé. Ïîëó÷åíû äàííûå î ìåõàíèçìàõ ôîòîñèíòåçà, ðàäèîëèçà ñëîæíûõ ïîëèìåðîâ. Ìåòîä ñïèíîâûõ çîíäîâ îáÿçàí ñâîèì ïîÿâëåíèåì íà ñâåò óñïåøíûì ðàáîòàì ïî ñèíòåçó ñòàáèëüíûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ. Ñïèíîâûå çîíäû ñëóæàò ñâîåîáðàçíûìè ðåïîðòåðíûìè ãðóïïàìè, êîòîðûå ÷óòêî ðåàãèðóþò íà ìàëåéøèå èçìåíåíèÿ êîíôîðìàöèè ìàêðîìîëåêóë ïðè èõ ôóíêöèîíèðîâàíèè èëè ïðè ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèÿõ íà íèõ. Âðàùàòåëüíàÿ òðàíñëÿöèîííàÿ ïîäâèæíîñòü ñïèíîâûõ çîíäîâ, èçìåðåííàÿ ñ ïîìîùüþ òåõíèêè ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà äàåò èíôîðìàöèþ î ñòðóêòóðå, êîíôîðìàöèîííîé äèíàìèêå, ìèêðîðåëüåôå è òîïîëîãèè èññëåäóåìûõ îáúåêòîâ. Ïî ìíåíèþ M.Burr è D.E.Koshland (1964), òàêàÿ ðåïîðòåðíàÿ ãðóïïà äîëæíà îáëàäàòü ñëåäóþùèìè ñâîéñòâàìè: 1) îíà äîëæíà, áóäó÷è ââåäåííîé â îïðåäåëåííûå ó÷àñòêè èçó÷àåìîé ñèñòåìû, ñîîáùàòü ïî èçìåíåíèþ ñîáñòâåííîé ñòðóêòóðû î õàðàêòåðå åå îêðóæåíèÿ; 2) åå ðåãèñòðèðóåìûå ñâîéñòâà äîëæíû áûòü óíèêàëüíûìè èëè ðåçêî îòëè÷àòüñÿ îò ñâîéñòâ èññëåäóåìîé ñèñòåìû; 3) ðåïîðòåðíàÿ ãðóïïà íå äîëæíà îêàçûâàòü âëèÿíèå íà èçó÷àåìóþ ñèñòåìó, íî ñîîáùàòü î âñåõ åå èçìåíåíèÿõ. Ïåðâûé íèòðîêñèëüíûé ðàäèêàë áûë èçâåñòåí óæå áîëåå 100 ëåò íàçàä êàê íèòðîêñèäèñóëüôîíàò êàëèÿ (ñîëü Ôðåìè): Îíà ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé äîâîëüíî íåñòîéêîå ñîåäèíåíèå, ñîõðàíÿþùååñÿ â îáû÷íûõ óñëîâèÿõ â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ
Ãëàâà 1
Ñòð. 31
ñóòîê. Ïîýòîìó ñîëü Ôðåìè íå ìîãëà áûòü èñïîëüçîâàíà äëÿ ñîçäàíèÿ ìåòîäèê, íî èíîãäà ïðèìåíÿåòñÿ â êà÷åñòâå ñïèíîâîãî çîíäà. Ñîëü Ôðåìè
Õèìè÷åñêèå ñâîéñòâà íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ îïðåäåëÿþò èõ ïîâåäåíèå â èññëåäóåìûõ îáúåêòàõ è ñëóæàò äëÿ ñîçäàíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ ïðèåìîâ ñ èõ ïðèìåíåíèåì. S. Oh ni sh i è H. M.M cC on ne ll ( 19 65) è O .H .O ff it h, H.M.McConnell (1965) óñòàíîâèëè, ÷òî íàèáîëåå óäà÷íûì âèäîì ñïèíîâîãî çîíäà ÿâëÿþòñÿ ñâîáîäíûå ðàäèêàëû, ñîäåðæàùèå ãðóïïó NO â ñîåäèíåíèè ñ òðåòè÷íûìè óãëåâîäîðîäíûìè àòîìàìè, ãäå R1 è R2 - ãðóïïû, ñâÿçûâàþùèå èõ ñ áèîëîãè÷åñêîé ìîëåêóëîé. Ýòè ãðóïïû ìîãóò áûòü ðàçëè÷íûìè, ÷òî ïîçâîëÿåò ñïèí-ìåòêå èçáèðàòåëüíî ïðèêðåïëÿòüñÿ ê îòäåëüíûì ó÷àñòêàì ìîëåêóëû.
Ñâÿçü ìåæäó ñïèí-ìåòêîé è èçó÷àåìîé ìîëåêóëîé ìîæåò áûòü äîñòàòî÷íî æåñòêîé, òàê ÷òî ãðóïïà NO áóäåò íå ïîäâèæíà îòíîñèòåëüíî ñàìîé ìîëåêóëû, èëè ýòà ñâÿçü áóäåò ñëàáîé è ãðóïïà NO ìîæåò äâèãàòüñÿ îòíîñèòåëüíî ñâîáîäíî. Ýòèì äâóì âèäàì ñâÿçåé áóäóò ñîîòâåòñòâîâàòü è ðàçëè÷íûå âèäû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ. ÝÏÐ-ñïåêòðû, ñîäåðæàùèå íå ïîäâèæíûå ãðóïïû NO áóäóò îáëàäàòü øèðîêèìè ëèíèÿìè ïîãëîùåíèÿ, â òî âðåìÿ, êàê ëèíèè ñî ñïåêòðàìè, ïðèáëèæàþùèìèñÿ ïî õàðàêòåðó ê ñïåêòðó ñâîáîäíîé ñïèí-ìåòêè â ðàñòâîðå áóäóò óçêè-
Ãëàâà 1
Ñòð. 32
ìè. Ñëåäîâàòåëüíî, øèðèíà íàáëþäàåìîé ëèíèè ïîãëîùåíèÿ ñâèäåòåëüñòâóåò î ïðèðîäå ñâÿçè ñïèíîâîé ìåòêè, î âíóòðèìîëåêóëÿðíîì äâèæåíèè. Èíûìè ñëîâàìè, ïðàâèëüíî ïîäîáðàííàÿ ìåòêà ìîæåò íåñòè èíôîðìàöèþ ñðàçó î íåñêîëüêèõ ñâîéñòâàõ îêðóæåíèÿ.  íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëàõ íåñïàðåííûé ýëåêòðîí ïðàêòè÷åñêè ïîëíîñòüþ ëîêàëèçîâàí íà NO-ãðóïïå ðàäèêàëà. Íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû ÿâëÿþòñÿ îäíèì èç íåìíîãèõ êëàññîâ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, êîòîðûå ìîæíî ìîäåðíèçèðîâàòü áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè. Âîçìîæíîñòü òàêèõ ðåàêöèé îïðåäåëÿåò øèðîêèé àññîðòèìåíò ñïèíîâûõ çîíäîâ è ìåòîê.  êà÷åñòâå ïðèìåðà ìîæíî ïðèâåñòè ðåàêöèþ ñïèðòðàäèêàë ñ õëîðèäàìè ðàçëè÷íûõ êèñëîò:
 íàñòîÿùåå âðåìÿ ïîëó÷àþò ðàñïðîñòðàíåíèå ðàçíîîáðàçíûå íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû ñ íàñûùåííûìè óãëåâîäîðîäíûìè öåïÿìè ëþáîé äëèíû. Ïðè íàëè÷èè ó ðåàãèðóþùåé ìîëåêóëû äâóõ è áîëåå ðåàêöèîííûõ ãðóïï ðåàêöèè áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè ïðèâîäÿò ê ñîåäèíåíèÿì ðàäèêàëîâ ìåæäó ñîáîé è ñ îáðàçîâàíèåì áèðàäèêàëîâ è ïîëèðàäèêàëîâ. Ïðàêòè÷åñêàÿ âîçìîæíîñòü ïðîâåäåíèÿ ðåàêöèè áåç çàòðàãèâàíèÿ ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòè îïðåäåëÿåòñÿ ñêîðîñòüþ ïðîõîæäåíèÿ â ðåàêöèîííîé ñìåñè ïàðàëëåëüíûõ ðåàêöèé. Èç êîíêóðåíòíûõ ðåàêöèé îñíîâíûìè ÿâëÿþòñÿ ðåàêöèè ñ íàñûùåííîé ñâîáîäíîé âàëåíòíîñòüþ. Òàê, íàïðèìåð, õëîðèñòûé âîäîðîä, îáðàçóþùèéñÿ ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñïèíà-ðàäèêàëà ñ õëîðàíãèäðèäîì äèêàðáîíîâûõ æèðíûõ êèñëîò ñïîñîáåí âûçûâàòü ðåàêöèþ äèñïðîïîðöèîíèðîâàíèÿ ìåæäó ðàäèêàëàìè, ïðèâîäÿùóþ ê îáðàçîâàíèþ íå ïàðàìàãíèòíûõ ïðîäóêòîâ (Ðîçàíöåâ Ý.Ã.).
Ãëàâà 1
Ñòð. 33
Êðîìå ðåàêöèé äèñïðîïîðöèîíèðîâàíèÿ ê èñ÷åçíîâåíèþ ïàðàìàãíåòèçìà íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ ïðèâîäÿò è îáû÷íûå ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ îêèñëåíèÿ. Ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ðàäèêàëüíîãî ôðàãìåíòà äîñòàòî÷íî ýôôåêòèâíû, êîãäà â ñðåäå åñòü íå òîëüêî äîíîð ýëåêòðîíîâ, íî è äîíîð ïðîòîíîâ: >N-Oo+H ++ç®N-OH. Ñïèíîâûå çîíäû ÿâëÿþòñÿ àêòèâíûìè àêöåïòîðàìè ýëåêòðîíîâ. Äëÿ çàâåðøåíèÿ ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ íåîáõîäèìû ïðîòîíû.  ñðåäå, ñîäåðæàùåé ïðîòîíû, ðîëü âîññòàíîâèòåëÿ ìîãóò èãðàòü ëþáûå ñîåäèíåíèÿ ñ äîñòàòî÷íî âûñîêèì âîññòàíîâèòåëüíûì ïîòåíöèàëîì: ìóðàâüèíàÿ êèñëîòà, ãèäðàçèí, ãèäðîõèíîí, ñîåäèíåíèÿ ñ ñóëüôãèäðèëüíûìè ãðóïïàìè è äð. Ñïèíîâûå çîíäû âîññòàíàâëèâàþòñÿ äî ïðîñòðàíñòâåííî çàòðóäíåííûõ N-ãèäðîêñèëàìèíîâ, íå äàþùèõ âêëàä â ñïåêòð ÝÏÐ. Âîññòàíîâëåíèå ñïèíîâûõ çîíäîâ íàáëþäàëè óæå â ðàáîòàõ Â.Ê.Êîëüòîâåðà è ñîàâò. (1968) è A.D.Keith, A.S.Waggoner, O.H.Griffith (1968). Ñêîðîñòü âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà òåì ìåíüøå, ÷åì äëèííåå åãî óãëåâîäîðîäíûé “õâîñò”. Ýòî, ïî-âèäèìîìó, ñâÿçàíî ñ ìåíüøåé ïîäâèæíîñòüþ ðàäèêàëîâ ñ äëèííîé óãëåâîäîðîäíîé öåïüþ. Äëÿ èçó÷åíèÿ ìåìáðàí ïðèìåíÿëèñü ñèñòåìû îðèåíòèðîâàíèÿ ëèïèäîâ. Áèîëîãè÷åñêèå ìåìáðàíû ïðèíèìàþò ïðÿìîå èëè êîñâåííîå ó÷àñòèå ïî÷òè âî âñåõ áèîõèìè÷åñêèõ ïðîöåññàõ. Îíè íå òîëüêî îáðàçóþò áàðüåðû, õàðàêòåðèçóþùèåñÿ ñïåöèôè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòüþ, íî ñàìè ó÷àñòâóþò â ñëîæíûõ õèìè÷åñêèõ ïðåâðàùåíèÿõ, â ÷àñòíîñòè, â ìèòîõîíäðèàëüíûõ ðåàêöèÿõ îêèñëèòåëüíîãî ôîñôîðèëèðîâàíèÿ. Èçó÷èòü ìåõàíèçì ôóíêöèîíèðîâàíèÿ ðàçëè÷íûõ ñèñòåì îðãàíèçìà íåâîçìîæíî áåç çíàíèÿ ñòðóêòóðíî-ôóíêöèîíàëüíûõ ñâÿçåé íà óðîâíå ìåìáðàí. Ñîñòàâ è ìîðôîëîãèÿ áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí ñëîæåí è íåîäíîðîäåí.
Ãëàâà 1
Ñòð. 34
Ãëàâíûì êîìïîíåíòîì áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí ÿâëÿþòñÿ ôîñôîëèïèäû (ôîñôàäèòèëõîëèí, íåéòðàëüíûå ëèïèäû, õîëåñòåðèí è äð.). Ìíîãî÷èñëåííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î íàëè÷èè â ìåìáðàíàõ äâîéíûõ ñëîåâ (áèñëîåâ) ôîñôîëèïèäîâ, íî íåëüçÿ íå ó÷èòûâàòü ïðèñóòñòâèå øèðîêîãî êëàññà äðóãèõ ñòðóêòóð. Ñ÷èòàþò, ÷òî ôîñôîëèïèäíûé áèñëîé ÿâëÿåòñÿ îñíîâíûì êîìïîíåíòîì ìåìáðàííîé ñòðóêòóðû. Ïîýòîìó ïðîâîäèìûå â áèîôèçèêå èññëåäîâàíèÿ ñ öåëüþ èçó÷åíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí áûëè îñóùåñòâëåíû íà ïðîñòûõ ñèñòåìàõ áèñëîåâ ôîñôîëèïèäîâ, íå îñëîæíåííûõ âëèÿíèåì áîëüøîãî ÷èñëà äðóãèõ ôàêòîðîâ ìåìáðàííîé ñòðóêòóðû. Ïðèìåíÿÿ çîíäû íà îñíîâå ðàçëè÷íûõ âåùåñòâ, áûëè ïîëó÷åíû èõ ÝÏÐ-ñïåêòðû, ïðè ðàñøèôðîâêå êîòîðûõ áûëè ïîëó÷åíû èíòåðåñíûå äàííûå î ñòðîåíèè, õèìè÷åñêîé ñòðóêòóðå è áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâàõ ìåìáðàí êëåòîê (Sengupta S., 1972). Ñðåäè ðàáîò, êàñàþùèõñÿ èññëåäîâàíèé áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ ìåòîäîì ñïèíîâûõ çîíäîâ, áîëüøîé èíòåðåñ âûçûâàþò òå, êîòîðûå äàâàëè âîçìîæíîñòü îöåíêè íàðóøåíèÿ îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíûõ ïðîöåññîâ â ïåðåæèâàþùèõ òêàíÿõ. Òàê, Â.Ï. Ðåóòîâ è ñîàâò. (1981) èçó÷àëè âëèÿíèå àñêîðáèíîâîé êèñëîòû, ïîñòóïàþùåé â êðîâü ïðè íèòðèòíîé èíòîêñèêàöèè, íà âîññòàíîâëåíèå íèòðèòíûõ èîíîâ.  êà÷åñòâå ÷óâñòâèòåëüíîãî òåñòà íà àñêîðáèíîâóþ êèñëîòó èñïîëüçîâàëè èìèíîêñèëüíûå ðàäèêàëû, êîòîðûå ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñ íåé ïåðåõîäÿò â íå ïàðàìàãíèòíîå ñîñòîÿíèå â ðåçóëüòàòå ïðèñîåäèíåíèÿ ýëåêòðîíîâ. Èçìåðÿÿ ñêîðîñòü ãèáåëè èìèíîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ â ïëàçìå êðîâè, ñëåäèëè çà ñíèæåíèåì ñîäåðæàíèÿ àñêîðáèíîâîé êèñëîòû, âûäåëÿþùåéñÿ â êðîâü ïîä äåéñòâèåì ðàçëè÷íûõ äîç NaNO2. Èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî çàìåòíîå âëèÿíèå íà èíòåíñèôèêàöèþ ïðîöåññà âîññòàíîâëåíèÿ èîíîâ, àñêîðáèíîâàÿ êèñëîòà îêàçûâàåò ëèøü ïðè ââåäåíèè ýêñòðåìàëüíûõ åå äîç. ß.Þ. Âàëüäìàí, Ë.Ì. Âàéíåð, Î.À. Ãðîìîâà, Â.Â. Ëåõâè÷ (1981) èçó÷àëè ñ ïîìîùüþ ñòàáèëüíûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ ìèêðîñîìàëüíóþ öåïü ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ.  ðàáîòå èñïîëüçîâàíà ñïîñîáíîñòü èìèíîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ àêöåïòèðîâàòü ýëåêòðîí ñ îïðåäåëåííûõ ó÷àñòêîâ ìèêðîñîìàëüíîé öåïè ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ, ÷òî òåñòèðîâàëîñü ïî èñ÷åçíîâåíèþ ñèãíàëà ÝÏÐ. Äëÿ èññëåäîâàíèÿ ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ ñ êëþ÷åâîãî ôðàãìåíòà ìèêðîñîìàëüíîé ñèñòåìû - öè-
Ãëàâà 1
Ñòð. 35
òîõðîìà Ð450 ïðåäëîæåíî èñïîëüçîâàòü ðàäèêàëû, îáëàäàþùèå ñóáñòðàòíûìè ñâîéñòâàìè ïî îòíîøåíèþ ê ýòîìó ôåðìåíòó. Ïîëó÷åíû ðåçóëüòàòû, ñâèäåòåëüñòâóþùèå îá ó÷àñòèè öèòîõðîìà Ð450 â ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ íåêîòîðûõ èìèíîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ.  ðàáîòàõ Ë.Ï. Êàþøèíà è ñîàâò. (1971) îòìå÷åíà ãèáåëü ñïèíîâûõ çîíäîâ â ôîòîîáëó÷åííûõ âîäíûõ ðàñòâîðàõ ñûâîðîòî÷íîãî àëüáóìèíà, òðèïòîôàíà, òèðîçèíà è öèñòåèíà, îáóñëîâëåííàÿ, ïî-âèäèìîìó, ïåðåíîñîì ýëåêòðîíîâ îò ôîòîâîçáóæäåííûõ àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîêèñëîò è öèñòåèíà íà èìèíîêñèë. Àâòîðû íàáëþäàëè âîññòàíîâëåíèå ñïèíîâûõ çîíäîâ â õëîðîïëàñòàõ è ìèòîõîíäðèÿõ.  ñëó÷àÿõ ìèòîõîíäðèé âîññòàíîâëåíèå óñêîðÿëîñü ïîñëå äîáàâëåíèÿ ÀÄÔ è ñóêöèíàòà.  ìèòîõîíäðèàëüíûõ ïðåïàðàòàõ, ñóäÿ ïî ðåçóëüòàòàì ðàáîòû, (ßãóæèíñêèé À.Ñ. è ñîàâò., 1973), èìèíîêñèëüíûå ðàäèêàëû øóíòèðóþò öåïü ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ. Äåéñòâèÿ “ãîðÿ÷èõ” àòîìîâ âîäîðîäà, äðóãèõ ÷àñòèö è ðàçëè÷íûõ âèäîâ èçëó÷åíèÿ íà òàêèå áèîëîãè÷åñêèå îáúåêòû êàê ïîëèìåðû, òèìèí, ÄÍÊ, ïðîèçâîäíûå ïèðèìèäèíà è ïóðèíà, ðàçëè÷íûå àìèíîêèñëîòû ñ ïîñëåäóþùèì îáðàçîâàíèåì â íèõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ èçó÷àëè R.B.Ingalls, Z.A.Wall (1961), I.Cole, W.C.Heller (1965), I.N.Herak, W.Gordy (1965, 1966), ïðè ýòîì áûëè îáíàðóæåíû êàê îäíîòèïíîñòü, òàê è íåêîòîðûå ðàçëè÷èÿ äåéñòâèÿ àòîìîâ âîäîðîäà è ðåíòãåíîâñêîãî îáëó÷åíèÿ íà áèîëîãè÷åñêèé ìàòåðèàë.  êîíå÷íîì èòîãå áûëî âûäåëåíî 3 ãðóïïû: ðåíòãåíîâñêèå ëó÷è, óëüòðàôèîëåòîâûå ëó÷è, “ãîðÿ÷èå” àòîìû âîäîðîäà, ïîä äåéñòâèåì êîòîðûõ ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Ìåòîä ÝÏÐ øèðîêî ïðèìåíÿëñÿ è ïðè èçó÷åíèè ïðîöåññîâ ôîòîñèíòåçà. Çåëåíûå ëèñòüÿ ïîäâåðãàëèñü ëèîôèëèçàöèè è ïîìåùàëè â ðåçîíàòîð ñïåêòðîìåòðà. Çàòåì áûëè èññëåäîâàíû âîäíûå ðàñòâîðû õëîðîïëàñòîâ. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû äàëè îñíîâàíèå ïðåäïîëîæèòü î íàëè÷èè çíà÷èòåëüíîé âçàèìîñâÿçè ìåæäó ïðîöåññîì ôîòîñèíòåçà è îáíàðóæèâàåìûìè íåñïàðåííûìè ýëåêòðîíàìè (Commoner B., Weise I., Tawnen I., 1965; Sego P.B., Pon N.C., Calvin, 1957, 1959; Commoner B., Heise I.I., Zi p B.B., Norbett R.E., Passonneau I.V., Townsend I., 1976). Çíà÷èòåëüíóþ ïîìîùü îêàçàë ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà è ïðè èññëåäîâàíèè òðèïëåòíûõ âîçáóæäåííûõ ñîñòîÿíèé â áåëêàõ (Shiga T., Mason H.S., Maso C., 1966).
Ãëàâà 1
Ñòð. 36
Ìåòîäîì ÝÏÐ áûë èçó÷åí ãåìîãëîáèí è åãî ïðîèçâîäíûå - ñîñòîÿíèå öåíòðàëüíîãî àòîìà æåëåçà ãåìà è ðàñïðåäåëåíèå èõ ýíåðãåòè÷åñêèõ óðîâíåé, à òàêæå ðÿä äðóãèõ, âàæíûõ â áèîëîãè÷åñêîì îòíîøåíèè ìîëåêóë, â êîòîðûõ ñîäåðæèòñÿ æåëåçî, íå âõîäÿùåå â ñîñòàâ ãåìà (Èíãðåì Ä., 1972). Èñïîëüçîâàíèå ìåòîäà ÝÏÐ ñ ïðèìåíåíèåì ñïèíîâûõ ìåòîê ïîçâîëèëî ñîçäàòü ñïèí-ìå÷åíûå áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå ñîåäèíåíèÿ, â òîì ÷èñëå è ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû. Ýòî òàê íàçûâàåìûå ïàðàìàãíèòíûå ìîäåëè áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ (Æäàíîâ Ð.È., 1981). Ââåäåíèå íèòðîêñèëüíîãî ôðàãìåíòà â ëåêàðñòâåííûå âåùåñòâà, íóêëåîòèäû, áåëêè, êîôåðìåíòû, àìèíîêèñëîòû, óãëåâîäû, ëèïèäû è äðóãèå ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå ñîåäèíåíèÿ â îñíîâíîì íå ìåíÿþò èñõîäíûé òèï èõ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè, ÷òî îòêðûâàåò áîëüøèå ïåðñïåêòèâû ïðè èñïîëüçîâàíèè ïàðàìàãíèòíûõ ìîäåëåé â ôàðìàêîëîãèè è êëèíèêå. Íåêîòîðûå èç íèõ, ñèíòåçèðîâàííûå íà îñíîâå âåùåñòâ, äåéñòâóþùèõ íà íåðâíóþ ñèñòåìó, ñòåðîèäíûõ ïðåïàðàòîâ, ôîñôîðîðãàíè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé, àëêàëîèäîâ ïðîõîäèò èñïûòàíèå íà ïðîòèâîîïóõîëåâóþ, íåéðîòðîïíóþ è äðóãèå àêòèâíîñòè. Îòäåëüíûå ïàðàìàãíèòíûå ìîäåëè óæå íàõîäÿò ïðèìåíåíèå â ðÿäå ìåòîäèê äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ â áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòàõ. Òàê, íàïðèìåð, óñïåøíî ïðèìåíåí ñïèí-èììóíîëîãè÷åñêèé ìåòîä, êîòîðûé ïîçâîëÿåò îïðåäåëÿòü â æèäêîñòÿõ îðãàíèçìà êîíöåíòðàöèþ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ (Zeute R.K. è ñîàâò., 1973; Tam I.C., 1978). 1.4. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â ìåäèöèíå Íîâûå ôèçè÷åñêèå è õèìè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ, ïðèìåíÿåìûå áèîëîãàìè è ìåäèêàìè, êàê ïðàâèëî, ÿâëÿëèñü ôàêòîðàìè óñêîðåííîãî ðàçâèòèÿ ýòèõ îáëàñòåé åñòåñòâîçíàíèÿ. Ìíîãèå èç ýòèõ ìåòîäîâ ñòàëè íåïðåìåííûìè ñðåäñòâàìè îáñëåäîâàíèÿ áîëüíûõ â ïîëèêëèíèêàõ è êëèíè÷åñêèõ ñòàöèîíàðàõ, ñëóæàò ïðàêòè÷åñêè öåëÿì ìåäèöèíû â òå÷åíèå ìíîãèõ äåñÿòèëåòèé. Ýòîãî, ê ñîæàëåíèþ, íåëüçÿ ñêàçàòü î ìåòîäå ÝÏÐ, êîòîðûé ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ èçó÷åíèÿ æèäêèõ ñðåä îðãàíèçìà, ïðîäóêòîâ âûäåëåíèÿ îðãàíîâ, îáëàäàþùèõ ýêñêðåòîðíîé ôóíêöèåé (ñëþíû, æåë÷è, ñîêîâ ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû è æåëóäêà, ìîêðîòû, ìî÷è è ò.ï.), âîëîñ, íîã-
Ãëàâà 1
Ñòð. 37
òåé, êóñî÷êîâ òêàíåé, âçÿòûõ ïðè áèîïñèè êîæè, ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê, ïå÷åíè, ëåêàðñòâåííûõ âåùåñòâ ðàçëè÷íîãî ïðîèñõîæäåíèÿ è äåéñòâèÿ, ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ (àíòèáèîòèêîâ, âèòàìèíîâ, ãîðìîíîâ, ìåäèàòîðîâ íåðâíîãî âîçáóæäåíèÿ), âàêöèí, ñûâîðîòîê, êðîâåçàìåíèòåëåé, áîëåçíåòâîðíûõ ìèêðîáîâ, ìèêðîáîâ-ñàïðîôèòîâ, à òàêæå äëÿ èçó÷åíèÿ òêàíåé è îðãàíîâ æèâîòíûõ â áèîõèìè÷åñêîì, ôèçèîëîãè÷åñêîì è ïàòîôèçèîëîãè÷åñêîì ýêñïåðèìåíòàõ. Îòå÷åñòâåííûìè è çàðóáåæíûìè èññëåäîâàòåëÿìè óñòàíîâëåíà ñâÿçü ìåæäó ñîñòîÿíèåì ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ è èíòåíñèâíîñòüþ, à òàêæå õàðàêòåðîì ïðîöåññîâ, ïðîòåêàþùèõ â áèîëîãè÷åñêèõ òêàíÿõ.  ÷àñòíîñòè, îòìå÷åíî èçìåíåíèå êîíöåíòðàöèè ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ è èññëåäóåìûõ ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ïðè èçìåíåíèè íîðìàëüíîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ñîñòîÿíèÿ îðãàíèçìà. Òàê, áûëè ïîëó÷åíû äàííûå, ñâèäåòåëüñòâóþùèå îá ýòîì ôàêòå, ïðè èññëåäîâàíèè çëîêà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèé (Ñàïðèí À.È. è ñîàâò., 1968), ëó÷åâîé áîëåçíè (Ýììàíóýëü Í.Ì., 1966). Îòäåëüíûå ðàáîòû áûëè ïîñâÿùåíû èçó÷åíèþ ñîñòîÿíèÿ äîíîðíî-àêöåïòîðíûõ ïðîöåññîâ (Êðàâöîâ Þ.Ê. è ñîàâò., 1972, 1977; Êî÷åðãèíñêèé Í.Ì. è ñîàâò., 1974). Âàæíóþ ãëàâó â èññëåäîâàíèÿõ, ïðîâåäåííûõ ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ ÿâèëîñü èçó÷åíèå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ è êàíöåðîãåíåçà. Òàê, M.J.Zyons, J.F.Gibson, D.J.E.Ingzam (1958), ïðîâåëè ðÿä ïðåäâàðèòåëüíûõ ýêñïåðèìåíòîâ ïî óñòàíîâëåíèþ ñâÿçè ìåæäó ñîäåðæàíèåì íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ è êàíöåðîãåííîé àêòèâíîñòüþ. Èçó÷àëè ñïåêòðû ÝÏÐ êîíäåíñàòà òàáà÷íîãî äûìà è ïîêàçàëè íàëè÷èå â íåì àêòèâíûõ àãåíòîâ, êîòîðûå ïðè ñîïðèêîñíîâåíèè ñ òêàíüþ ëåãêèõ ìîãóò âñòóïàòü â ðåàêöèè õèìè÷åñêîãî âçàèìîäåéñòâèÿ. Ïðè èññëåäîâàíèè íåêîòîðûõ âåùåñòâ, îáëàäàþùèõ êàíöåðîãåííîé àêòèâíîñòüþ, áûëè îáíàðóæåíû âûñîêèå êîíöåíòðàöèè íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ (Szent-Gyorgi A., Isenberg I., Baird S.Z., 1960). Áûëà óñòàíîâëåíà îïðåäåëåííàÿ çàâèñèìîñòü ìåæäó êîíöåíòðàöèåé ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ è ðîñòîì, ðàñïàäîì, ìåòàñòàçèðîâàíèåì çëîêà÷åñòâåííûõ îïóõîëåé, à òàêæå èçìåíåíèÿìè â ðàçëè÷íûõ òêàíÿõ, èìåþùèìè çëîêà÷åñòâåííûé õàðàêòåð.  ñâÿçè ñ ýòèì ïîÿâèëàñü âîçìîæíîñòü, èñïîëüçóÿ ìåòîä ÝÏÐ, ïðîâåñòè äèôôåðåíöèðîâêó ãîìîëîãè÷íûõ îïóõîëåé, íàõîäÿùèõñÿ íà ðàçíûõ ñòàäèÿõ ðàçâèòèÿ.
Ãëàâà 1
Ñòð. 38
Ïðîöåññ ìàëèãíèçàöèè òêàíè è ðîñò îïóõîëè ñîïðîâîæäàåòñÿ çíà÷èòåëüíûìè êîëè÷åñòâåííûìè èçìåíåíèÿìè ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûõ öåíòðîâ è ïàðàìàãíèòíûõ ìåòàëëîêîìïëåêñîâ, ó÷àñòâóþùèõ è áèîëîãè÷åñêîì îêèñëåíèè êàê â ñâîáîäíîì, òàê è ñâÿçàííîì ñ ïðîöåññàìè ôîñôîðèëèðîâàíèÿ, à òàêæå â ïðîöåññàõ íàêîïëåíèÿ è ðàñõîäà àäåíîçèíòðèôîñôîðíîé êèñëîòû. Ïðè ýòîì ìîæåò áûòü êàê èçáûòî÷íîå îáðàçîâàíèå ïàðàìàãíèòíûõ êîìïëåêñîâ, òàê è óñèëåíèå èõ ðàñïàäà; ïåðåõîä â äðóãèå íåàêòèâíûå èëè âûñîêîàêòèâíûå ïàðàìàãíèòíûå êîìïëåêñû (Áîãäàíîâ Ã.Í. è ñîàâò., 1976; Ýììàíóýëü Í.Ì., 1977; Ñèäîðèí Â.Í., Áåðåãîâñêàÿ Í.Í., 1981). Îäíîé èç ïðè÷èí ìàëîé äîñòóïíîñòè ìåòîäà ÝÏÐ â îáëàñòè ýêñïåðèìåíòàëüíîé è êëèíè÷åñêîé ìåäèöèíû ÿâëÿåòñÿ ñëàáàÿ ïîïóëÿðèçàöèÿ åãî âîçìîæíîñòåé. Âìåñòå ñ òåì ìåòîä ÝÏÐ ìîæåò îêàçàòüñÿ âåñüìà ïîëåçíûì ñïóòíèêîì âðà÷à â åãî äåÿòåëüíîñòè, íà÷èíàÿ ñ äèàãíîñòèêè çàáîëåâàíèé è êîí÷àÿ èõ ëå÷åíèåì è ïðîôèëàêòèêîé. Îá ýòîì ñ óâåðåííîñòüþ ìîæíî ãîâîðèòü ïîòîìó, ÷òî ýòîò ìåòîä â ïîñëåäíèå ãîäû óæå ïîêàçàë ñâîþ ïîëåçíîñòü â ìåäèêî-áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ, õîòÿ ýòè èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëèñü â îñíîâíîì ñïåöèàëèñòàìè íåìåäèöèíñêîãî ïðîôèëÿ. Âíà÷àëå áûëè ïðåäïðèíÿòû ïîïûòêè èçó÷åíèÿ ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ òêàíåé è îðãàíîâ æèâîòíûõ ïðè íåêîòîðûõ ôèçèîëîãè÷åñêèõ è ïàòîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññàõ è ñîñòîÿíèÿõ (ðåôëåêòîðíûõ è äåíåðâàöèîííûõ äèñòðîôèÿõ òêàíåâûõ îáðàçîâàíèé, ðàçëè÷íûõ âèäàõ íàðêîçà, ýïèëåïñèè, àñôèêñèè, ãèïîêñèè, íèòðèòíîé ìåòãåìîãëîáèíåìèè, ãèïîòåðìèè, âîñïàëåíèè, ðàçëè÷íûõ ñòàäèÿõ îíòîãåíåçà, ñòàðåíèè, ãèïåðòèðåîçå, êàñòðàöèè, ïîâûøåííîì ñîäåðæàíèè â îðãàíèçìå ðÿäà ãîðìîíîâ è ò.ï.). Âûâîäû ïî ýòèì ðàáîòàì ñâîäèëèñü ê òîìó, ÷òî äèñòðîôè÷åñêèå èçìåíåíèÿ îðãàíîâ è òêàíåé íåéðîãåííîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, ó÷èòûâàåìûå ïî ìîðôîëîãè÷åñêèì è áèîõèìè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì, ñîïðîâîæäàþòñÿ âûðàæåííûìè ñäâèãàìè â ñîäåðæàíèè â òêàíåâûõ ñòðóêòóðàõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Áûëî âûñêàçàíî ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî ñäâèãè â ñîäåðæàíèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ ïðè íåéðîãåííûõ äèñòðîôèÿõ ÿâëÿþòñÿ ñëåäñòâèåì íàðóøåíèÿ îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíîãî ìåòàáîëèçìà â èññëåäóåìûõ îáúåêòàõ, ò.å. ñëåäñòâèåì íàðóøåíèÿ â ñòàíäàðòíîì çâåíå îáìåíà âåùåñòâ. Ïîäðîáíî áûëà èçó÷åíà êèíåòèêà ñîäåðæà-
Ãëàâà 1
Ñòð. 39
íèÿ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â òêàíÿõ æèâîòíûõ â ïðîöåññå ïîñòíàòàëüíîãî îíòîãåíåçà, âêëþ÷àÿ ïåðèîä ñòàðåíèÿ. Çàòåì, è îñîáåííî â ïîñëåäíèå ãîäû, â ëèòåðàòóðå ñòàëè ïîÿâëÿòüñÿ ðåçóëüòàòû èçó÷åíèÿ ðÿäà äðóãèõ ìåäèêî-áèîëîãè÷åñêèõ è ìåäèöèíñêèõ ïðîáëåì ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ìåòîä ÝÏÐ ìîæåò áûòü óñïåøíî èñïîëüçîâàí ïðè ðåøåíèè âîïðîñîâ, îòíîñÿùèõñÿ ê ìåõàíèçìàì ðåãóëÿöèè ñòðóêòóðû è ôóíêöèé æåëåç âíóòðåííåé ñåêðåöèè â íîðìå è ïðè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ óñëîâèÿõ ñóùåñòâîâàíèÿ îðãàíèçìà, ìåõàíèçìàì âîçäåéñòâèÿ ãîðìîíîâ ñ êëåòêîé, õàðàêòåðó ðåàêöèè íåýíäîêðèííûõ êëåòîê íà ãîðìîíàëüíûå âîçäåéñòâèÿ, áèîñèíòåçó è äàëüíåéøåìó ìåòàáîëèçìó ãîðìîíîâ. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé òêàíåé æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà ìîãóò ïðèâëå÷ü âíèìàíèå âèòàìèíîëîãîâ è ñïåöèàëèñòîâ â îáëàñòè ôèçèîëîãèè òðóäà è ñïîðòà, ãåðîíòîëîãèè è èíôåêöèîííîé ïàòîëîãèè. Òîêñèêîëîãàì ìîãóò áûòü íåáåçûíòåðåñíû äàííûå î òîì, ÷òî ââåäåíèå æèâîòíûì àñêîðáèíîâîé êèñëîòû ïðè íèòðèòíîé ìåòãåìîãëîáèíåìèè ïðèâîäèëî ê ðåçêîìó ñíèæåíèþ èíòåíñèâíîñòè õàðàêòåðíîãî äëÿ ýòîãî ñîñòîÿíèÿ ñèãíàëà ÝÏÐ êðîâè, ÷òî ñâÿçûâàåòñÿ ñ ðàñïàäîì ïîä âëèÿíèåì àñêîðáèíîâîé êèñëîòû íèòðîçèëüíîãî êîìïëåêñà ãåìîâîãî æåëåçà. Ìèêðîáíûå êëåòêè, áëàãîäàðÿ ñâîèì îñîáåííîñòÿì è ìíîãîîáðàçèþ, ïîçâîëèëè ðåøèòü ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ ìíîãèå îáùèå âîïðîñû, îòíîñÿùèåñÿ ê ïàðàìàãíèòíûì ñâîéñòâàì áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ (íàïðèìåð, âèðóëåíòíîñòü ìèêðîîðãàíèçìîâ), ÷òî â îïðåäåëåííîé ìåðå îáóñëîâëèâàåòñÿ îñîáåííîñòÿìè ñâîáîäíî ðàäèêàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ âåùåñòâ, ýêñòðàãèðóåìûõ èç èõ ëèïèäíûõ ôðàêöèé, à èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ÝÏÐ è åãî ôîðìà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñòåïåíè ïàòîãåííîñòè øòàììîâ ìèêðîáîâ â ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ öåëÿõ. Âîçìîæíî, ÷òî àíòèîêñèäàíòû, îêàçûâàþùèå âëèÿíèå íà èíòåíñèâíîñòü îáìåíà ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, íàéäóò ïðèìåíåíèå êàê ñðåäñòâî îñëàáëåíèÿ èëè óñèëåíèÿ âèðóëåíòíîñòè ìèêðîîðãàíèçìîâ. Ìåõàíèçì äåéñòâèÿ ÷óìíîãî òîêñèíà ñâîäèòñÿ ê áëîêèðîâàíèþ ôåðìåíòîâ, îòâåòñòâåííûõ çà âîññòàíîâëåíèå êîôåðìåíòà Q â ìèòîõîíäðèÿõ. Ïðîâåäåíî èññëåäîâàíèå äèôòåðèéíîãî òîêñèíà è àíàòîêñèíà ìåòîäîì ÝÏÐ, áëàãîäàðÿ ÷åìó îòêðûëèñü âîçìîæíîñòè èñïîëüçîâàíèÿ äàííîãî ìåòîäà ïðè àíàëèçå ìåõàíèçìîâ ðàçâèòèÿ òîêñèêî-èíôåêöèîííûõ çàáî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 40
ëåâàíèé. Ìåòîä ÝÏÐ ìîæåò íàéòè ïðèìåíåíèå ïðè èçó÷åíèè ïðîáëåìû ñîõðàíåíèÿ è âîññòàíîâëåíèÿ àêòèâíîñòè ëèîôèëèçèðîâàííûõ ìèêðîáíûõ êëåòîê, ïîçâîëèò óëó÷øèòü êîíòðîëü çà ñîõðàíåíèåì òàêèõ ëèîôèëèçèðîâàííûõ ïðåïàðàòîâ, êàê âàêöèíû, ñûâîðîòêè, êðîâü, êðîâåçàìåíèòåëè, ïèùåâûå ïðîäóêòû.  îáëàñòè èììóíîëîãèè â ðÿäå èññëåäîâàíèé ïðåäïðèíÿòà ïîïûòêà èçó÷èòü ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ àêòèâíûå öåíòðû, ñòðóêòóðíûå èçìåíåíèÿ àíòèòåë è àíòèãåíîâ ïðè îáðàçîâàíèè ñïåöèôè÷åñêîãî êîìïëåêñà. Îòìå÷åíî, ÷òî îáðàçîâàíèå èììóííûõ êîìïëåêñîâ àíòèòåë è àíòèãåíîâ ïðèâîäèò ê èçìåíåíèþ âðåìåíè êîððåëÿöèè ñïèíîâûõ ìåòîê êîâàëåíòíî ñâÿçàííûõ ñ àíòèòåëîì èëè àíòèãåíîì, ÷òî êîìïëåêñîîáðàçîâàíèå àíòèòåë ñ àíòèãåíàìè ñîïðîâîæäàåòñÿ êîíôîðìàöèîííûìè èçìåíåíèÿìè îáîèõ áåëêîâ è â óñëîâèÿõ îáðàçîâàíèÿ ïðåöèïèòàòà, è â åãî îòñóòñòâèè. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïîâåäåíèå è êîíôîðìàöèÿ àíòèòåë çàâèñÿò îò âåëè÷èíû ýëåêòðîñòàòè÷åñêèõ ñèë îòòàëêèâàíèÿ è äðóãèõ ôàêòîðîâ, ÷òî îáðàçîâàíèå èììóííûõ êîìïëåêñîâ àíòèòåë è àíòèãåíîâ âî âñåõ ñëó÷àÿõ ñîïðîâîæäàåòñÿ îäíîòèïíûìè êîíôîðìàöèîííûìè èçìåíåíèÿìè àíòèòåë. Íîðìàëüíûå àíòèòåëà ãðóïï êðîâè ñèñòåìû ÀÂ0 âûçûâàþò â ìåìáðàíàõ ýðèòðîöèòàõ ÷åëîâåêà ñòðóêòóðíóþ ïåðåñòðîéêó, ñîïðÿæåííóþ ñ êîîïåðàòèâíûì ñâÿçûâàíèåì àíòèòåë ñ ðåöåïòîðàìè, îáíàðóæåíî, ÷òî íàèáîëåå çíà÷èòåëüíûå èçìåíåíèÿ ïðîèñõîäÿò â ìåìáðàííûõ áåëêàõ, ïðåæäå âñåãî, â ñïåêòðèíîâîé ñåòè. Äåéñòâèå àíòèòåë ñîïðîâîæäàåòñÿ ôóíêöèîíàëüíûìè ñäâèãàìè â ýðèòðîöèòàõ - àêòèâèðóåòñÿ ïðîöåññ àããëþòèíàöèè è ìîäèôèöèðóåòñÿ êàòàëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü ìåìáðàííî-ñâÿçàííîãî ôåðìåíòà - àöåòèëàìèíýñòåðàçû. Íàêîïëåí áîëüøîé îïûò ïðèìåíåíèÿ èçîëèðîâàííî îáëó÷åííîé óëüòðàôèîëåòîâûì ñâåòîì àóòîêðîâè â êëèíè÷åñêîé è âåòåðèíàðíîé ïðàêòèêå, íî äî ñèõ ïîð íå óñòàíîâëåí ìåõàíèçì åå áèîëîãè÷åñêîãî äåéñòâèÿ. Èñïîëüçóÿ äëÿ óëüòðàôèîëåòîâîãî îáëó÷åíèÿ êðîâü äîíîðà, ñòàáèëèçèðîâàííóþ ãåïàðèíîì èëè íèòðàòîì íàòðèÿ, íàøëè, ÷òî ïðè ìàëûõ äîçàõ îáëó÷åíèÿ, êîòîðûå èñïîëüçóþòñÿ â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå, ôîðìåííûå ýëåìåíòû êðîâè íå ïîäâåðãàþòñÿ çàìåòíîé ôîòîäåñòðóêöèè, ñóùåñòâåííî íå èçìåíÿåòñÿ è ãåìîãëîáèí. Âìåñòå ñ òåì àâòîðàìè óñòàíîâëåíî, ÷òî ïðè äåéñòâèè ïðÿìûõ èëè ñåíñèáèëèçèðîâàííûõ ôîòîïðîöåññîâ îñíîâíûå ôîòîõèìè÷åñ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 41
êèå èçìåíåíèÿ ðàçâèâàþòñÿ â ñûâîðîòêå êðîâè. Ïðè ýòîì ïðîèñõîäèò ðàçðóøåíèå ïåïòèäíûõ ñâÿçåé áåëêîâ ñûâîðîòêè êðîâè. Ïðîìåæóòî÷íûå ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûå ïðîäóêòû ýòèõ ôîòîðåàêöèé ñòàáèëüíû è ëåãêî îáíàðóæèâàþòñÿ ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ.  ìåõàíèçìàõ ôîðìèðîâàíèÿ ðåàêöèè îðãàíèçìà ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ íà äåéñòâèå òîêñè÷åñêèõ âåùåñòâ ýêçîãåííîãî è ýíäîãåííîãî ïðîèñõîæäåíèÿ ïðèíèìàþò ó÷àñòèå âñå óðîâíè îðãàíèçàöèè æèâîé èñòîðèè, â òîì ÷èñëå è ýëåêòðîííîé. Ïîýòîìó ìåòîä ÝÏÐ ñðàâíèòåëüíî áûñòðî íàøåë ïðèìåíåíèå â òîêñèêîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ.  ïåðâûõ ðàáîòàõ òàêîãî ðîäà ïîêàçàíî, ÷òî íå òîëüêî ïîñëåäñòâèÿ îñòðîé èíòîêñèêàöèè ôåíîëîì ó æèâîòíûõ â ýêñïåðèìåíòå, íî è â ðåçóëüòàòå âëèÿíèÿ íåòîêñè÷åñêèõ äîç ýòîãî âåùåñòâà â ïðîèçâîäñòâåííûõ óñëîâèÿõ ó ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ ëþäåé ìîãóò áûòü îáíàðóæåíû ìåòîäîì ÝÏÐ ïðè òåñòèðîâàíèè ñèãíàëîâ ÝÏÐ ýðèòðîöèòîâ. Ïîñêîëüêó ñóùåñòâåííûå ñäâèãè êîíöåíòðàöèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â êîìïîíåíòàõ êðîâè ïðè îòðàâëåíèè ïàðàìè ôåíîëà ïðîÿâëÿþòñÿ ðàíüøå êëèíè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ èíòîêñèêàöèè, ýòîò ïîêàçàòåëü ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ ñàíèòàðíî-ãèãèåíè÷åñêîãî êîíòðîëÿ. Ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ÝÏÐ ïðåäïðèíÿòà ïîïûòêà ðåøèòü âîïðîñ î ñåíñèáèëèçàöèè è àäàïòàöèè æèâûõ îðãàíèçìîâ ïðè âäûõàíèè ïàðîâ ýòèëîâîãî ñïèðòà. Ïðîâåäåíî èññëåäîâàíèå âëèÿíèÿ ýòàíîëà (96%) íà îáðàçîâàíèå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ àñêîðáèíîâîé êèñëîòû, ãàëëîâîé êèñëîòû, ïèðîêàòåõèíà, ãèäðîõèíîíà è õèíîíà â âûñóøåííûõ îáðàçöàõ êðîâè ïîñëå êîíòàêòà ñ êèñëîðîäîì âëàæíîãî âîçäóõà. Äîáàâëåíèå ýòàíîëà ê êîíñåðâèðîâàííîé êðîâè ÷åëîâåêà âûçûâàëî ñíèæåíèå ñèãíàëà ÝÏÐ àñêîðáèíîâîé êèñëîòû â ñðàâíåíèè ñ èñõîäíûì óðîâíåì, íå èçìåíÿëî ñèãíàëà ÝÏÐ ãàëëîâîé êèñëîòû è óñèëèâàëî ñèãíàë ïèðîêàòåõèíà, ãèäðîõèíîíà è õèíîíà. Èçìåíåíèå ñèãíàëà ÝÏÐ ïîä âîçäåéñòâèåì ýòàíîëà, ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, çàâèñèò îò ñîîòíîøåíèÿ êîíöåíòðàöèé àñêîðáèíîâîé êèñëîòû è ôåíîëüíûõ ñîåäèíåíèé â èññëåäóåìîé êðîâè. Îòìå÷åíî, ÷òî ïðè õðîíè÷åñêîì àëêîãîëèçìå íàáëþäàåòñÿ èçìåíåíèå òåêó÷åñòè ìåìáðàí, ïðèâîäÿùåå ê ñíèæåíèþ ñâÿçûâàíèÿ ýòàíîëà, àíåñòåòèêîâ è ðàçëè÷íûõ ãèäðîôîáíûõ ìîëåêóë. Áåíçîë, èìåþùèé áîëüøîå ïðîìûøëåííîå çíà÷åíèå è ñîäåðæàùèéñÿ â îùóòèìûõ êîëè÷åñòâàõ â àòìîñôåðå, îòíî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 42
ñèòñÿ ê ÷èñëó íàèáîëåå òîêñè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé ñðåäè àðîìàòè÷åñêèõ óãëåâîäîðîäîâ. Èçó÷åíî âëèÿíèå áåíçîëà íà ïàðàìàãíèòíûå ñâîéñòâà ïå÷åíè è ãîëîâíîãî ìîçãà æèâîòíûõ. Èññëåäîâàíî òàêæå âëèÿíèå íà ñîäåðæàíèå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â óêàçàííûõ îðãàíàõ êðûñ äèõëîðäèôåíèëòðèõëîðýòàíà. Ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ â îòíîøåíèè í-áóòàíîëà, áîðíîé êèñëîòû, ÷åòûðåõõëîðèñòîãî óãëåðîäà. Íà÷èíàÿ ñ ñåðåäèíû 60-õ ãîäîâ ñòàëè ïîÿâëÿòüñÿ ïóáëèêàöèè, ñîäåðæàùèå ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ òêàíåé æèâîòíûõ, îáðàçóþùèõñÿ ïîñëå ââåäåíèÿ ïîñëåäíèì ðàçëè÷íûìè ñïîñîáàìè íèòðèòîâ è íèòðàòîâ èëè æå ïðè èíêóáàöèè òêàíåé ñ ýòèìè âåùåñòâàìè è îêèñüþ àçîòà. Èíòåðåñ ê ýòèì âåùåñòâàì îáúÿñíÿåòñÿ òåì, ÷òî íèòðèòû ñ äàâíåãî âðåìåíè èçâåñòíû êàê ìåòãåìîãëîáèíîîáðàçîâàòåëè è ìîãóò ïîñòóïàòü â îðãàíèçì ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ ñ ïèùåé, âîäîé è âäûõàåìûì âîçäóõîì. Íèòðàòû ñàìè ïî ñåáå íå ÿâëÿþòñÿ ìåòãåìîãëîáèíîáðàçîâàòåëÿìè, íî, ïîïàäàÿ â æåëóäî÷íî-êèøå÷íûé òðàêò, îíè ïîä âëèÿíèåì íèòðàòðåäóöèðóþùåé ìèêðîôëîðû áûñòðî ïåðåõîäÿò â íèòðèòû, êîòîðûå, âñîñàâøèñü â êðîâü, ïðèâîäÿò ê îáðàçîâàíèþ ìåòãåìîãëîáèíà, êîëè÷åñòâî êîòîðîãî ìîæåò áûñòðî âîçðàñòàòü ïðè íåñîâåðøåíñòâå ôåðìåíòàòèâíîé ñèñòåìû, âîññòàíàâëèâàþùåé ìåòãåìîãëîáèí â ãåìîãëîáèí. Ïðåäïîëàãàåòñÿ è äðóãîé ìåõàíèçì ïîñòóïëåíèÿ íèòðèòîâ â êðîâü ïðè ïîïàäàíèè áîëüøèõ êîëè÷åñòâ íèòðàòîâ ñ ïèùåé. Íèòðàòû â êèøå÷íèêå âñåãäà âîññòàíàâëèâàþòñÿ â íèòðèòû, à íèòðèòû â àììèàê, êîòîðûé çàòåì óäàëÿåòñÿ èç îðãàíèçìà. Ïðè áîëüøîì ïîñòóïëåíèè íèòðàòîâ íèòðèòû íå óñïåâàþò ïîëíîñòüþ ïðåâðàòèòüñÿ â àììèàê, âñàñûâàþòñÿ â êðîâü è ïðèâîäÿò ê ìåòãåìîãëîáèíîáðàçîâàíèþ. Ìåòîäîì ÝÏÐ áûëî äîêàçàíî, ÷òî ãèïîêñèÿ òêàíåé ïðè íèòðèòíîé ìåòãåìîãëîáèíåìèè ñâÿçàíà íå òîëüêî ñ íàðóøåíèåì òðàíñïîðòíîé ôóíêöèè ãåìîãëîáèíà, êàê ïðåäïîëàãàëè â ïðåæíèå ãîäû, íî è ñ áëîêàäîé â êëåòêàõ æåëåçîñîäåðæàùèõ âåùåñòâ, ó÷àñòâóþùèõ â îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíûõ ðåàêöèÿõ. Áëàãîäàðÿ ìåòîäó ÝÏÐ óòî÷íåí ìåõàíèçì òîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ è öèàíèñòûõ ñîåäèíåíèé. Îêàçàëîñü, ÷òî íàñòóïàþùóþ ïðè îòðàâëåíèè öèàíèñòûì êàëèåì ãèïîêñèþ òêàíåé íóæíî èìåíîâàòü íå òîëüêî ÷èñòî òîêñè÷åñêîé, íî è â îïðåäåëåííîé ìåðå öèðêóëÿòîðíîé èëè òî÷íåå, ãèïîêñåìè÷åñêîé, òàê êàê íàðÿ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 43
äó ñ ïîäàâëåíèåì òêàíåâîãî äûõàíèÿ öèàíèäû íàðóøàþò òðàíñïîðòíóþ ôóíêöèþ ýðèòðîöèòîâ ïî îòíîøåíèþ ê êèñëîðîäó. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè íàêîïèëîñü çíà÷èòåëüíîå ÷èñëî ðàáîò, ïîñâÿùåííûõ èçó÷åíèþ ìåòîäîì ÝÏÐ ðÿäà ïàòîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ è ñîñòîÿíèé, ìåõàíèçìîâ çàáîëåâàíèÿ è âûçäîðîâëåíèÿ. Ìåòîä ÝÏÐ áûë èñïîëüçîâàí äëÿ ðåøåíèÿ òàêîãî âàæíîãî âîïðîñà ðàäèîëîãèè, êàê ïðèðîäà ðàçíîé ðàäèî÷óâñòâèòåëüíîñòè êëåòîê æèâîãî îðãàíèçìà, êîòîðóþ ñâîäÿò ê ðàçëè÷íûì ìåõàíèçìàì, â òîì ÷èñëå è ê ðàçëè÷íîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè ê ðàäèàöèè íàñëåäñòâåííîãî àïïàðàòà òåõ èëè èíûõ êëåòîê, ê ðàçëè÷èÿì èõ ðåïàðàöèîííûõ âîçìîæíîñòåé, à òàêæå ê ðàçëè÷íîìó ñîäåðæàíèþ â êëåòêàõ âåùåñòâ, ñïîñîáíûõ èçìåíÿòü ðåàêöèþ êëåòîê íà îáëó÷åíèå, íàïðèìåð, òèîëîâ, áèîãåííûõ àìèíîâ è äð. Ðàçâèòèå òåõíèêè ÝÏÐ ïðèâåëî ó íîâîìó ýòàïó ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà â ðàäèîëîãèè. Äàííûé ìåòîä ñ óñïåõîì ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ ðåøåíèÿ òàêèõ âîïðîñîâ ðàäèîëîãèè, êàê ïðèðîäà ðàäèî÷óâñòâèòåëüíûõ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, êàê âçûñêàíèå íàèáîëåå ýôôåêòèâíûõ ñðåäñòâ çàùèòû êëåòîê îò äåéñòâèÿ îáëó÷åíèÿ èëè íàïðàâëåííîãî ðàäèàöèîííîãî ïîðàæåíèÿ îïóõîëåâûõ êëåòîê è êàê ïîèñê ýôôåêòèâíûõ ðàäèîïðîòåêòîðîâ è ðàäèîñåíñèáèëèçàòîðîâ. Ñðàâíèòåëüíîå èçó÷åíèå ìåòîäîì ÝÏÐ ðåàêöèé íîðìàëüíîé è îïóõîëåâîé êëåòîê íà îáëó÷åíèå ìîæåò äàòü èíôîðìàöèþ î ñïåöèôèêå áèîõèìè÷åñêîãî ñîñòîÿíèÿ òðàíñôîðìèðîâàííûõ êëåòîê. Ïîÿâèëàñü âîçìîæíîñòü ïðèìåíÿòü ìåòîä â äîçèìåòðèè è, îñîáåííî âàæíî, äëÿ èçó÷åíèÿ ïåðâè÷íûõ ìåõàíèçìîâ äåéñòâèÿ äëÿ ìåäèöèíû äîç ðàäèàöèè íà êëåòêè, ñóáêëåòî÷íûå ñòðóêòóðû è âàæíûå ìàêðîìîëåêóëû. Íåðâíî-äèñòðîôè÷åñêèé ïðîöåññ ÿâëÿåòñÿ ñòàíäàðòíîé ðåàêöèåé îðãàíèçìà íà ÷ðåçâû÷àéíûå âîçäåéñòâèÿ, â êîòîðóþ âêëþ÷àþòñÿ ïðàêòè÷åñêè âñå òêàíè, îðãàíû è ñèñòåìû. Îäíàêî âåäóùèì çâåíîì ýòîé ðåàêöèè ñëóæàò ïåðâè÷íûå äèñòðîôè÷åñêèå èçìåíåíèÿ â ÖÍÑ, êîòîðûå ðåãëàìåíòèðóþò è èíòåíñèâíîñòü ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ, ìîðôîëîãè÷åñêèõ è ôóíêöèîíàëüíûõ ñäâèãîâ â îñòàëüíûõ òêàíÿõ, îðãàíàõ è ñèñòåìàõ, ðàçâèâàþùèõñÿ â ðåçóëüòàòå ïàòîëîãè÷åñêèõ ðåôëåêòîðíûõ è ïðÿìûõ ãóìîðàëüíûõ âëèÿíèé íà òêàíåâûå îáðàçîâàíèÿ. Ñ÷èòàåòñÿ îáùåïðèçíàííûì, ÷òî íåïðåìåííûìè è âåäóùèì çâåíîì ìåõàíèçìà ðàçâèòèÿ ëþáîãî ïàòîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà
Ãëàâà 1
Ñòð. 44
ÿâëÿåòñÿ åãî íåðâíî-äèñòðîôè÷åñêèé êîìïîíåíò, êîòîðûé îïðåäåëÿåò òðîôè÷åñêîå ñîñòîÿíèå òêàíè è îðãàíà, ñëåäîâàòåëüíî, èíòåíñèâíîñòü èõ ñïåöèôè÷åñêîé ìåòàáîëè÷åñêîé è ôóíêöèîíàëüíîé ðåàêöèè íà ðàçäðàæèòåëè âíóòðåííåé è âíåøíåé ñðåäû.  óñëîâèÿõ íàðóøåíèÿ òðîôèêè òêàíåé è îðãàíîâ (íåéðîãåííûõ äèñòðîôèé) èíòåíñèâíîñòü ýòèõ ðåàêöèé ìîæåò âûõîäèòü çà ïðåäåëû íîðìàëüíûõ êîëåáàíèé. Ýòè îòêëîíåíèÿ îò íîðìû è ñîñòàâëÿåò ñóùíîñòü ñïåöèôè÷åñêèõ ïàòîëîãè÷åñêèõ èçìåíåíèé ïåðèôåðè÷åñêèõ òêàíåâûõ îáðàçîâàíèé. Ìåòîäîì ÝÏÐ óñòàíîâëåíî, ÷òî äèñòðîôè÷åñêèå èçìåíåíèÿ â ñàìîé íåðâíîé ñèñòåìå è íåéðîãåííûå äèñòðîôèè ïåðèôåðè÷åñêèõ òêàíåé è îðãàíîâ ïðîòåêàþò ïðè íåïðåìåííûõ ìåñòíûõ ñäâèãàõ â îáìåíå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Ìîæíî ñ÷èòàòü, ÷òî ñâîáîäíûå ðàäèêàëû - ýòî íå ñâèäåòåëè è íå ïîáî÷íûå ó÷àñòíèêè, à îáÿçàòåëüíîå ñòàíäàðòíîå çâåíî ìåõàíèçìà íåðâíî-òðîôè÷åñêèõ íàðóøåíèé. Ýòî ñëåäóåò èç òîãî, ÷òî â ëþáîå èçìåíåíèå òðîôèêè òêàíè ïîä âëèÿíèåì íåðâíîãî ñòèìóëà ñîïðîâîæäàåòñÿ ñäâèãàìè ñòàíäàðòíîé áèîõèìè÷åñêîé öåïè êëåòêè, îáåñïå÷èâàþùåé ïðîöåññû áèîëîãè÷åñêîãî îêèñëåíèÿ è îêèñëèòåëüíîãî ôîñôîðèëèðîâàíèÿ. Ïðèíîñèìûå ê êëåòêå èëè îáðàçóþùèåñÿ ïðè åå ïåðâè÷íîì êîíòàêòå ñ ìåäèàòîðàìè ñâîáîäíûå ðàäèêàëû, à òàêæå ïàðàìàãíèòíûå êîìïëåêñû âêëþ÷àþòñÿ â êà÷åñòâå íåïðåìåííîãî êîìïîíåíòà â èíèöèàëüíîå çâåíî ìåõàíèçìà ðàçâèòèÿ íåéðîãåííûõ äèñòðîôèé. Ïîñëåäóþùèå, “âòîðè÷íûå” ñäâèãè êîíöåíòðàöèè ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ â êëåòêå òàêæå èãðàþò ïàòîãåíåòè÷åñêóþ ðîëü. Ìåòîä ÝÏÐ îêàçàëñÿ ïîëåçíûì ïðè èçó÷åíèè âðîæäåííûõ çàáîëåâàíèé ìûøå÷íîé ñèñòåìû ÷åëîâåêà. Ñ ïîìîùüþ ñïèíîâûõ ìåòîê óñòàíîâëåíî, ÷òî ìåìáðàíû ýðèòðîöèòîâ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè áîëüíûõ íàñëåäñòâåííîé ìûøå÷íîé äèñòðîôèåé îáëàäàþò ìåíüøåé âÿçêîñòüþ è, ñëåäîâàòåëüíî, áîëüøåé ïðîíèöàåìîñòüþ, ÷åì ìåìáðàíû ýðèòðîöèòîâ çäîðîâûõ ëþäåé. Ïðè ïîìîùè ñïèíîâîé ìåòêè, êîâàëåíòíî ñâÿçûâàþùåéñÿ ñ áåëêàìè, ïîêàçàíî, ÷òî ñóùåñòâóþò ðàçëè÷èÿ ìåæäó êîíôîðìàöèåé è îðãàíèçàöèåé ìåìáðàííûõ áåëêîâ ýðèòðîöèòîâ â íîðìå è ïðè ìûøå÷íîé äèñòðîôèè ðàçíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ (áîëåçíü Äþøåíà, ìèîòîíè÷åñêàÿ ìûøå÷íàÿ äèñòðîôèÿ). Ðåçóëüòàòû ýòèõ ðàáîò ìîæíî èñïîëüçîâàòü äëÿ ïîèñêîâ ýôôåêòèâíîãî ñïîñîáà ðàííåãî ðàñïîçíàâàíèÿ íàñëåäñòâåííûõ çàáîëåâàíèé ìûøå÷íîé ñèñòåìû.
Ãëàâà 1
Ñòð. 45
Ìåòîä ÝÏÐ øèðîêî ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ èçó÷åíèÿ ñòðóêòóðíîé îðãàíèçàöèè ìåìáðàí ýðèòðîöèòîâ â ãåìàòîëîãèè, èçó÷åíû ïîâåðõíîñòíûå, ïðîìåæóòî÷íûå è ãëóáèííûå ñëîè ìåìáðàí ýðèòðîöèòîâ, à òàêæå èçîëèðîâàííûå ìåìáðàíû òêàíåé ýðèòðîöèòîâ. Ìåòîä ñïèíîâîé ìåòêè ÿâëÿåòñÿ íå òîëüêî ñðåäñòâîì äëÿ èññëåäîâàíèÿ ìåìáðàí, îí ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí ïðè äèàãíîñòèêå íåêîòîðûõ çàáîëåâàíèé êðîâè (õðîíè÷åñêèé ãåìîëèç è äð.). Îòìå÷åíû âîçìîæíîñòè ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà äëÿ õàðàêòåðèñòèêè ñåðîëîãè÷åñêèõ îñîáåííîñòåé ýðèòðîöèòîâ, ïðè èññëåäîâàíèè ïîäãðóïï ëèìôîöèòîâ è äëÿ òåñòèðîâàíèÿ ôóíêöèè òðîìáîöèòîâ. Ñóùåñòâóþò äàííûå îá èñïîëüçîâàíèè ìåòîäà ÝÏÐ ïðè èçó÷åíèè ïðîöåññà ñòàðåíèÿ îòäåëüíûõ êëåòîê êðîâè. Ïðè ïîìîùè ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà èçó÷åíû ìåõàíèçìû äåéñòâèÿ àíòèáèîòèêîâ è çàâèñèìîñòè èõ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè îò õèìè÷åñêîãî ñòðîåíèÿ, äåéñòâèÿ èõ íà ðàçëè÷íûå ýòàïû òðàíñïîðòà ýëåêòðîíîâ ïðè îñóùåñòâëåíèè ðåàêöèé ñâîáîäíîãî äûõàíèÿ, îêèñëèòåëüíîãî ôîñôîðèëèðîâàíèÿ è àíàýðîáíîãî äûõàíèÿ. Ìåòîä ìîæåò áûòü øèðîêî è ýôôåêòèâíî èñïîëüçîâàí ïðè ðåøåíèè ðÿäà âîïðîñîâ âûñîêîãîðíîé è ïîäâîäíîé ôèçèîëîãèè, àâèàöèîííîé è êîñìè÷åñêîé ìåäèöèíû, à òàêæå ïðàêòè÷åñêèõ âîïðîñîâ, îòíîñÿùèõñÿ ê ïàòîëîãèè âíåøíåãî äûõàíèÿ â ñåâåðíûõ ðåãèîíàõ ñòðàíû. Îáíàðóæåíèå íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ â êîæå ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ, äîñòóïíîñòü ýòîé òêàíè äëÿ ðàçëè÷íîãî ðîäà èññëåäîâàíèé ïðè ïîìîùè ïðàêòè÷åñêè áåçîïàñíîãî â äàííîì ñëó÷àå ìåòîäà áèîïñèè, à òàêæå ñïîñîáíîñòè êîæè ÷óòêî ðåàãèðîâàòü íà ðàçëè÷íûå èçìåíåíèÿ âî âíåøíåé è âíóòðåííåé ñðåäàõ îðãàíèçìà ñäâèãàìè â ñîäåðæàíèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ ïîçâîëÿþò ñ÷èòàòü, ÷òî ìåòîä ÝÏÐ íàéäåò â áóäóùåì øèðîêîå ïðèìåíåíèå â ýêñïåðèìåíòàëüíîé è êëèíè÷åñêîé äåðìàòîëîãèè.  íàñòîÿùåå âðåìÿ ìåòîä äàåò õîðîøèå ðåçóëüòàòû â äèàãíîñòèêå ïñîðèàçà, åãî ëå÷åíèå è ïðîôèëàêòèêå, à òàêæå èñïîëüçóåòñÿ äëÿ âûÿñíåíèÿ ìîëåêóëÿðíûõ ìåõàíèçìîâ òåðàïåâòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ïñîðàëåíîâ (ôóðàíîêóìàðèíà), êîòîðûå ïðèìåíÿþò â êëèíèêå êîæíûõ áîëåçíåé ïðè ëå÷åíèè âèòèëèãî è ãíåçäíîé ïëåøèâîñòè. Ïðåäïðèíèìàþòñÿ ïîïûòêè èçó÷èòü ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ ñâîéñòâà ñåðäå÷íîé ìûøöû, èñïûòûâàþùåé íåäîñòàòî÷íîå ñíàáæåíèå êðîâüþ èëè ïîëíîå ïðåêðàùåíèå ïîñòóïëåíèÿ åå ê òîìó èëè èíîìó ó÷àñòêó ìèîêàðäà.
Ãëàâà 1
Ñòð. 46
Ìåòîä ÝÏÐ áûë ïðèìåíåí äëÿ èññëåäîâàíèÿ èøåìè÷åñêîé áîëåçíè ñåðäöà (Êåðèìîâ Ò. è ñîàâò., 1977), àòåðîñêëåðîçà (Àðòåìîâà Ë.Ã. è ñîàâò., 1977).  ýòèõ ðàáîòàõ áûëè èçó÷åíû ñòðóêòóðíûå õàðàêòåðèñòèêè è áåëêîâî-ëèïèäíûå âçàèìîäåéñòâèÿ â êîìïëåêñàõ ëèïîïðîòåèäîâ. Îäíèì èç îñíîâíûõ óñëîâèé ñóùåñòâîâàíèÿ æèâîãî îðãàíèçìà ÿâëÿåòñÿ áåñïåðåáîéíîå ôóíêöèîíèðîâàíèå ñèñòåìû öèðêóëÿöèè æèäêîñòè. Ïóòè ìèêðîöèðêóëÿöèè îáåñïå÷èâàþò ïîñòîÿííûé è äîñòàòî÷íûé ïðèòîê ê òêàíÿì ïèòàòåëüíûõ âåùåñòâ è êèñëîðîäà. Ìèêðîöèðêóëÿöèÿ è ñîñòîÿíèå åå ïóòåé âëèÿþò íà âñå ôèçèîëîãè÷åñêèå îòïðàâëåíèÿ, è, ñëåäîâàòåëüíî, íà õîä ìíîãèõ ïàòîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ (Êóïðèÿíîâ Â.Â., 1969). Îòå÷åñòâåííûìè è çàðóáåæíûìè èññëåäîâàòåëÿìè îòìå÷åíî, ÷òî ñèñòåìà ìèêðîöèðêóëÿöèè ïåðâîé âîâëåêàåòñÿ â ïàòîëîãè÷åñêèé ïðîöåññ ïðè ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèÿõ.  íåé ïðîèñõîäÿò íàèáîëåå çíà÷èòåëüíûå ïåðåñòðîéêè ïðè ýêñòðåìàëüíûõ ñîñòîÿíèÿõ, êîãäà ìîáèëèçóþòñÿ âñå àäàïòèâíûå ìåõàíèçìû äëÿ ïîääåðæàíèÿ è ñîõðàíåíèÿ ãåìîñòàçà è æèçíè îðãàíèçìà (Êóïðèÿíîâ Â.Â., 1976; ×åðíóõ À.Ì., 1980; Zweifach B.W., 1961). Êîìïëåêñíûé ïîäõîä ê èçó÷åíèþ ìèêðîöèðêóëÿöèè ïîçâîëèë îöåíèòü ïîñëåäñòâèÿ èññëåäîâàíèÿ åå íàðóøåíèÿ ïðè ìíîãèõ ïàòîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññàõ (Àëåêñàíäðîâ Ï.Í., 1984). Îæîãîâàÿ áîëåçíü, äàâíî ïðèâëåêàâøàÿ âíèìàíèå êëèíèöèñòîâ è ýêñïåðèìåíòàòîðîâ â ñâÿçè ñî ñëîæíîñòüþ ìåõàíèçìîâ åå ðàçâèòèÿ, âîçíèêàþùèìè îñëîæíåíèÿìè â îðãàíèçìå è òðóäíîñòè ëå÷åíèÿ, òàêæå ÿâèëàñü ïðåäìåòîì èññëåäîâàíèÿ ïðè ïîìîùè ìåòîäà ÝÏÐ. Ïðè îæîãîâîé áîëåçíè ðàçâèâàþòñÿ ãëóáîêèå íàðóøåíèÿ îáìåííûõ ïðîöåññîâ, ïàòîëîãè÷åñêèå íàðóøåíèÿ âî âñåõ òêàíÿõ, îðãàíàõ è ñèñòåìàõ îðãàíèçìà, ÷òî íàõîäèò îòðàæåíèå â èçìåíåíèÿõ ðàçëè÷íûõ ïàðàìåòðîâ êðîâè è äðóãèõ æèäêèõ ñðåä îðãàíèçìà, à òàêæå ýêñêðåòîâ ïîòîâûõ, ñàëüíûõ, ïèùåâàðèòåëüíûõ æåëåç è ïî÷åê. Èññëåäîâàíèþ èçìåíåíèé â ñîñòîÿíèè êîæè è òêàíè ïå÷åíè ïîñëå îæîãîâ ïîñâÿùåíà ðàáîòà Ç.Â.Êóðîïòåâà è ñîàâò. (1981). Àâòîðàìè îáíàðóæåíî, ÷òî ñïåêòðû ÝÏÐ ïå÷åíè êðûñ íà 2, 7 è 18-å ñóòêè ïîñëå îæîãà îáóñëîâëåíû òåìè æå öåíòðàìè, ÷òî è ñïåêòð ÝÏÐ ïå÷åíè â íîðìå. Õàðàêòåðíûì ÿâëÿåòñÿ ñíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè ñèãíàëà ÝÏÐ íà îäíè ñóòêè ñ ïîñëåäóþùèì óâåëè÷åíèåì èõ äî íîðìû.
Ãëàâà 1
Ñòð. 47
1.5. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ â ñóäåáíîé ìåäèöèíå Ðàçâèòèå ïîñìåðòíûõ ïðîöåññîâ â òðóïå ñîïðîâîæäàåòñÿ ðåçêèì íàðóøåíèåì ìåòàáîëèçìà òêàíåé, ïðèâîäÿùèì ê ðàçðóøåíèþ è äåçèíòåãðàöèè êëåòî÷íûõ ñòðóêòóð, èçìåíåíèþ ðàçëè÷íûõ áèîõèìè÷åñêèõ è áèîôèçè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé, â ÷àñòíîñòè, îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíîãî ïîòåíöèàëà òêàíåé. Ñïèíîâûå çîíäû, îáëàäàþùèå ñïîñîáíîñòüþ àêòèâíî âîññòàíàâëèâàòüñÿ, áóäó÷è ââåäåííûìè â ñóáñòðàò, ìîãóò äàòü âàæíóþ èíôîðìàöèþ î ñîñòîÿíèè äîíîðíî-àêöåïòîðíûõ ñâîéñòâ ïîñëåäíåãî, òàê êàê ïðèñîåäèíÿÿ ïðîòîíû òåðÿþò ñâîè ïàðàìàãíèòíûå ñâîéñòâà, ÷òî ìîæíî çàôèêñèðîâàòü ñ ïîìîùüþ ÝÏÐ. Ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ, òàêèì îáðàçîì, ìîæåò èíôîðìèðîâàòü î ñîñòîÿíèè âîññòàíîâèòåëüíûõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ ñóáñòðàòîâ, à, ñëåäîâàòåëüíî, è î ïîñìåðòíûõ èçìåíåíèÿõ äîíîðíî-àêöåïòîðíîãî ñîñòîÿíèÿ. ß.È.Àæèïà (1983) óêàçàë íà âîçìîæíîñòü ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ÝÏÐ ïðè ïðîâåäåíèè íàó÷íûõ èññëåäîâàíèé â îáëàñòè ñóäåáíîé ìåäèöèíû, â ÷àñòíîñòè, ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ ïðè÷èíû è äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ñðîêîâ ïðè÷èíåíèÿ ïîâðåæäåíèé òåëà. 1.5.1. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ ïðè óñòàíîâëåíèè ÄÍÑ Çàìåäëåíèå, à çàòåì è ïðåêðàùåíèå îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíûõ ïðîöåññîâ ïîñëå ñìåðòè äàëè âîçìîæíîñòü ïðåäïîëîæèòü, ÷òî ïîêàçàòåëÿìè âðåìåíè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ìîãóò áûòü ïàðàìåòðû ñïåêòðîâ ÝÏÐ. Îñíîâíûìè íàïðàâëåíèÿìè, ê êîòîðûì ñâîäèòñÿ â íàñòîÿùåå âðåìÿ ïðîáëåìà óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ÿâëÿåòñÿ èçó÷åíèå ïðîöåññîâ, ðàçâèâàþùèõñÿ â òêàíÿõ è îðãàíàõ â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Ðàñêðûòèå ýòèõ ïðîöåññîâ ìîæåò èìåòü íå òîëüêî ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîå çíà÷åíèå, íî, â îñîáåííîñòè â ðàííèå ñðîêè, è äëÿ äàëüíåéøåãî ðàçâèòèÿ ñîâðåìåííîé òðàíñïëàíòîëîãèè. Í.Â.Òûãëèÿí, À.È.Çàáåëüñêèé, Ã.À.Ïàøèíÿí (1978) èññëåäîâàëè çàâèñèìîñòü ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ïå÷åíè êðûñ, ìûøåé è òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ îò ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû, îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Èññëåäîâàíèþ ïîäâåðãàëè êóñî÷êè îðãàíîâ, çàìîðîæåííûå ïðè òåìïåðàòóðå æèä-
Ãëàâà 1
Ñòð. 48
êîãî àçîòà. Ýêñïåðèìåíòû ïîêàçàëè, ÷òî ÝÏÐ-ñïåêòðû êðûñ è ìûøåé êà÷åñòâåííî èäåíòè÷íû. Ðåãèñòðèðîâàëè ñèãíàëû îò ïàðàìàãíèòíûõ öåíòðîâ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, ãåìîâîãî è íåãåìîâîãî æåëåçà, Mn+2, Ìî. Îòëè÷èÿ ñïåêòðîâ ñîñòîÿëè â ðàçëè÷íûõ ñîîòíîøåíèÿõ àìïëèòóä ñèãíàëîâ, ÷òî, ïî-âèäèìîìó, îáúÿñíÿåòñÿ ðàçëè÷íîé èíòåíñèâíîñòüþ îáùåãî îáìåíà è ýíåðãîòðàò ó êðûñ è ìûøåé.  êà÷åñòâå êðèòåðèÿ àâòîðû ïðåäëîæèëè ïðèìåíèòü çàâèñèìîñòü ñèãíàëà ÝÏÐ îò ëþáîãî ïàðàìàãíèòíîãî öåíòðà. Çàâèñèìîñòü ïðåäëîæåííîãî êðèòåðèÿ äëÿ ïå÷åíè òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ îò ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû, ñèíáàòíà àíàëîãè÷íîé çàâèñèìîñòè äëÿ êðûñ â ïåðâûå 18 ÷. ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Òàêèì îáðàçîì, äàííûå ýêñïåðèìåíòà ïîçâîëÿþò, ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, ñ÷èòàòü âîçìîæíûì èñïîëüçîâàíèå â êà÷åñòâå êðèòåðèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ïàðàìåòðàì ÝÏÐ-ñïåêòðà ïå÷åíè îòíîøåíèÿ àìïëèòóäû ñèãíàëà îò èîíîâ Mn +2 c g=2,14 ê àìïëèòóäå ñèãíàëà îò Feãåì ñ g=2,25. À.È.Çàáåëüñêèé (1982) ïðîâåë èññëåäîâàíèå ñ öåëüþ ðàçðàáîòêè íàó÷íî-îáîñíîâàííûõ êðèòåðèåâ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà è ïåðåæèâàþùèõ òêàíÿõ è îðãàíàõ. Îáúåêòàìè èññëåäîâàíèÿ áûëè ïå÷åíü, ãîëîâíîé ìîçã è ïîïåðå÷íî-ïîëîñàòàÿ ìóñêóëàòóðà îò òðóïîâ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ (áåñïîðîäíûõ êðûñ-ñàìöîâ) ÷èñëîì 450. Äëÿ ðåøåíèÿ ïðèíöèïèàëüíîé âîçìîæíîñòè èñïîëüçîâàíèÿ ðåçóëüòàòîâ ýêñïåðèìåíòîâ â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå áûëè òàêæå èçó÷åíû òå æå îðãàíû è òêàíè îò òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ îò îñòðîé ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû. Ðåãèñòðàöèþ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ñïèíîâûõ çîíäîâ ïðîèçâîäèëè íà îòå÷åñòâåííîì ðàäèîñïåêòðîìåòðå “Ðóáèí”. Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ ÷àñòü ðàáîòû ñîñòîÿëà èç äâóõ ñåðèé.  ïåðâîé èññëåäîâàëè ñêîðîñòü âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ, èíêóáèðóåìûõ ñ ãîìîãåíàòàìè ïå÷åíè è ìîçãà â ñðîêè 0, 2, 4, 6, 12, 18, 24, 36 è 48 ÷ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà è ãîìîãåíàòàìè ìûøö â ñðîêè 0, 6, 12 è 24 ÷. Äàëåå êàæäûå ñóòêè â òå÷åíèå ïåðâûõ øåñòè ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Âî âòîðîé ñåðèè èññëåäîâàíèé äëÿ èçó÷åíèÿ âëèÿíèÿ àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè íà èçó÷àåìûå ïàðàìåòðû ýêñïåðèìåíòàëüíûì æèâîòíûì çà 40 ìèí äî çàáîÿ â ïîëîñòü æåëóäêà ââîäèëè 40% ýòàíîë èç ðàñ÷åòà 1 ìë íà 100 ã ìàññû æèâîòíîãî. Èçó÷àåìûå ñðîêè è ìåòîäèêà ïðîâåäåíèÿ ýêñïåðèìåíòà â
Ãëàâà 1
Ñòð. 49
îáåèõ ñåðèÿõ áûëè àíàëîãè÷íûìè.  êà÷åñòâå ñïèíîâîãî çîíäà áûë èñïîëüçîâàí êàïðèëîâûé ýôèð, äàþùèé õàðàêòåðíûé òðèïëåòíûé ÝÏÐ-ñïåêòð. Èçìåíåíèÿ ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ â õîäå ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ïðèâîäèò ê óìåíüøåíèþ àìïëèòóäû âñåõ òðåõ êîìïîíåíòîâ ÝÏÐ-ñïåêòðà çîíäà. Èçìåðåíèþ ïîäâåðãàëè àìïëèòóäó öåíòðàëüíîé êîìïîíåíòû ÝÏÐ-ñïåêòðà ñïèíîâîãî çîíäà, òàê êàê ïî äàííûì àâòîðà, îíà ìåíåå âñåãî ïîäâåðæåíà âëèÿíèþ ôàêòîðîâ, íå ñâÿçàííûõ ñ ïðîâåäåíèåì îïûòà. Æèâîòíûõ çàáèâàëè ïóòåì íàíåñåíèÿ îñòðîé ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû, ïîñëå ÷åãî èõ òðóïû õðàíèëè â òåðìîñòàòå ïðè 18-20îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 40-60%. Îðãàíû è òêàíè îò òðóïîâ æèâîòíûõ áðàëè â ñòðîãî îïðåäåëåííûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà (ñì. âûøå) è â ãåðìåòè÷íûõ àìïóëàõ ïîìåùàëè â õîëîäèëüíèê, ãäå õðàíèëè ïðè -5 îÑ â òå÷åíèå 12 ñóòîê. Íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èññëåäîâàíèåì îðãàíû ðàçìîðàæèâàëè è èç íèõ ãîòîâèëè ãîìîãåíàò â 0,25 Ì ðàñòâîðå ñàõàðîçû. Çàòåì îïðåäåëåííûé îáúåì ãîìîãåíàòà ñìåøèâàëè â îòíîøåíèè 1:1 ñî ñïèðòîâûì ðàñòâîðîì ñïèíîâîãî çîíäà è çàïàèâàëè â òîíêîñòåííóþ ñòåêëÿííóþ àìïóëó, êîòîðóþ ïîìåùàëè â ðåçîíàòîð ðàäèîñïåêòðîìåòðà.  èññëåäîâàíèÿõ òêàíåé ïå÷åíè è ìîçãà ìàòåðèàë áûë íå ìåíåå ÷åì îò 10 òðóïîâ æèâîòíûõ, à ìûøå÷íîé òêàíè - îò 5. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé À.È.Çàáåëüñêîãî ïîêàçàëè, ÷òî èìååòñÿ îïðåäåëåííàÿ äèíàìèêà ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ãîìîãåíàòàìè òêàíåé, çàâèñÿùàÿ îò âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ïðè÷åì, äèíàìèêà íå íîñèò ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíûé õàðàêòåð, à èìååò îáùèé äëÿ òêàíåé ïå÷åíè è ìîçãà âèä, õàðàêòåðèçóþùèéñÿ äâóìÿ ïèêàìè ïîäúåìà è äâóìÿ ïèêàìè ñïàäà àêòèâíîñòè âîññòàíàâëèâàþùèõ ñèñòåì êàê ïðè íàëè÷èè, òàê è â îòñóòñòâèå àëêîãîëÿ â îðãàíèçìå. Íàðÿäó â ýòèì âûÿâëåíû çíà÷èòåëüíûå ðàñõîæäåíèÿ çíà÷åíèé ìàêñèìóìîâ ïèêîâ êàê âî âðåìåííîì àñïåêòå, òàê è â çíà÷åíèÿõ êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Âëèÿíèå àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè ñêàçûâàëîñü â îñíîâíîì â ïåðâûå ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ÷òî âûðàæàëîñü â ñìåùåíèè ïèêîâ àêòèâíîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ è èçìåíåíèÿ çíà÷åíèé êîíñòàíòû êàê òàêîâîé. Èññëåäîâàíèå ìûøå÷íîé òêàíè ïîêàçàëî íàëè÷èå ñîâåðøåííîãî èíûõ ðåçóëü-
Ãëàâà 1
Ñòð. 50
òàòîâ, îòëè÷àþùèõñÿ îò äàííûõ èññëåäîâàíèÿ òêàíåé ïå÷åíè è ìîçãà.  îáåèõ ñåðèÿõ ýêñïåðèìåíòîâ â òå÷åíèå ïåðâûõ òðåõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà àâòîðîì íå áûëè îòìå÷åíû äîñòîâåðíûå èçìåíåíèÿ êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ çîíäà, ÷òî âïåðâûå áûëî âûÿâëåíî íà ÷åòâåðòûå ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.  òå÷åíèå ñëåäóþùèõ ïÿòûõ è øåñòûõ ñóòîê îòìå÷åí äîñòîâåðíî çíà÷èòåëüíûé ðîñò êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà. Òàêóþ äèíàìèêó âîññòàíîâëåíèÿ â òêàíÿõ ïå÷åíè è ìîçãà àâòîð ïûòàëñÿ îáúÿñíèòü ñëåäóþùèìè äàííûìè. Òàê, ïàðàìåòð “Ê”, ïðîïîðöèîíàëüíûé êîíñòàíòå ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà, îòðàæàåò ñîñòîÿíèå ýëåêòðîí-òðèïëåòíûõ öåïåé â ïåðåæèâàþùèõ òêàíÿõ. Åñòåñòâåííî, ÷òî ïðè ïîñìåðòíîé èøåìèè è àíîêñèè ïðîèñõîäèò ðåçêîå íàðóøåíèå ìåòàáîëèçìà òêàíåé è ñâÿçàííîå ñ ýòèì íàðóøåíèå äîíîðíî-àêöåïòîðíîãî ñîñòîÿíèÿ òåõ öåïåé ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ, äëÿ êîòîðûõ êîíå÷íûì ýòàïîì ÿâëÿåòñÿ ñïèíîâûé çîíä. Îäíèì èç ôàêòîðîâ, ïðèâîäÿùèõ ê èçìåíåíèþ êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ìîæåò áûòü îòåê, ïîñêîëüêó íàðàñòàíèå åãî ïðèâîäèò ê óâåëè÷åíèþ ìåæìîëåêóëÿðíûõ ïðîìåæóòêîâ è ê êîíôîðìàöèîííûì èçìåíåíèÿì áåëêîâ, ÷òî ñíèæàåò èõ äîñòóïíîñòü äëÿ ñïèíîâîãî çîíäà. Óâåëè÷åíèå îòåêà ê 6 è 36-òè ÷àñàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà â ñåëåçåíêå è ìèîêàðäå íàáëþäàëè â ñâîèõ èññëåäîâàíèÿõ Â.Í.Âîðîøêî (1975) è Ã.Ì.Ìèðîøíèê (1976). Óâåëè÷åíèå ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ê ÷åòûðåì è øåñòè ÷àñàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ïî-âèäèìîìó, ñâÿçàíî ñ èíòåíñèâíî ïðîòåêàþùèìè â ýòîò ñðîê ïðîöåññàìè ðàñïàäà ìåìáðàí ìèòîõîíäðèé è âûõîäîì ñïåöèôè÷åñêèõ ìèòîõîíäðèàëüíûõ ôåðìåíòîâ, âîññòàíàâëèâàþùèõ ñïèíîâûå çîíäû (Ïîêðîâñêèé À.À. è ñîàâò., 1971). Âòîðè÷íûé ïîäúåì àêòèâíîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ ê êîíöó ïåðâûõ ñóòîê ñâÿçàí, ïî ìíåíèþ àâòîðà, ñ íàðàñòàþùèìè ÿâëåíèÿìè êëåòî÷íîãî ðàñïàäà è óâåëè÷åíèåì êîëè÷åñòâà âîññòàíàâëèâàþùèõ àãåíòîâ. Ñïåöèôè÷åñêàÿ äèíàìèêà ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ, ïîëó÷åííàÿ À.È.Çàáåëüñêèì ïðè èññëåäîâàíèè ãîìîãåíàòîâ ìûøå÷íîé òêàíè, à èìåííî îòñóòñòâèå òàêîâîé â ïåðâûå òðîå ñóòîê è ïîñëåäóþùèé åå ðîñò ñ ÷åòâåðòûõ íà ïÿòûå è øåñòûå ñóòêè ñâÿçàíî, ïî-âèäèìîìó, ñ íèçêèì âîññòàíîâèòåëüíûì ïîòåíöèàëîì ìûøö, çàâèñÿùèì îò èõ ìîðôî-ôóíêöèîíàëüíûõ
Ãëàâà 1
Ñòð. 51
îñîáåííîñòåé è äîâîëüíî ïîçäíî ðàçâèâàþùèìèñÿ ÿâëåíèÿìè àóòîëèçà, äîñòèãàþùèìè íà ÷åòâåðòûå ñóòêè òàêîé ñòåïåíè, ÷òî èõ ìîæíî çàôèêñèðîâàòü ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Ïðè èññëåäîâàíèè òêàíåé îðãàíèçìà, ïîäâåðãíóòîãî ïðèæèçíåííîìó âîçäåéñòâèþ àëêîãîëÿ, àâòîð âûÿâèë äîñòîâåðíûå îòëè÷èÿ îò òêàíåé â îòñóòñòâèå àëêîãîëÿ (P<0,001). Äîñòîâåðíîñòü ðàçëè÷èÿ ñíèæàëàñü ñ óâåëè÷åíèåì âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Âûñîêèé êîýôôèöèåíò ðàçëè÷èÿ êîíñòàíò ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ òêàíüþ ïå÷åíè ïîñëå ïåðâûõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà è êîíñòàíò äðóãèõ èçó÷àåìûõ òêàíåé â èññëåäóåìûå âðåìåííûå ïðîìåæóòêè ïîçâîëèëî àâòîðó ïðåäëîæèòü åãî â êà÷åñòâå äîïîëíèòåëüíîãî êðèòåðèÿ äëÿ ó÷åòà âëèÿíèÿ àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè. Äëÿ ðåøåíèÿ âîïðîñà î ïðèíöèïèàëüíîé âîçìîæíîñòè ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ÝÏÐ â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå, à òàêæå ñ öåëüþ åãî àïðîáàöèè äëÿ íóæä ñóäåáíîé ìåäèöèíû À.È.Çàáåëüñêèé èññëåäîâàë òêàíè ïå÷åíè, ìîçãà è ñêåëåòíîé ìóñêóëàòóðû îò òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ îò îñòðîé ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû, âðåìÿ ñìåðòè êîòîðûõ áûëî çàâåäîìî èçâåñòíî èç ñîïðîâîäèòåëüíûõ äîêóìåíòîâ. Èññëåäîâàíèÿ ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà àâòîð ïðîâîäèë ïî òîé æå ìåòîäèêå, ÷òî è ýêñïåðèìåíòàëüíûé, îäíàêî èçó÷àåìûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà áûëè èíûìè. Ãîìîãåíàòû òêàíåé ïå÷åíè è ìîçãà èññëåäîâàëè ÷åðåç 12, 24, 48, 72, 96, 120 è 144 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè. Êóñî÷êè òêàíåé õðàíèëè äî íà÷àëà èññëåäîâàíèÿ â ãåðìåòè÷åñêè çàêðûòûõ áàíêàõ. Èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè íàëè÷èå äîñòîâåðíîé äèíàìèêè êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ, ïðèíöèïèàëüíî ñõîäíóþ ñ ðåçóëüòàòàìè, ïîëó÷åííûìè ïðè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèÿõ, è õàðàêòåðèçèðóþùóþñÿ òàêæå äâóìÿ ìàêñèìóìàìè ïîäúåìà âîññòàíàâëèâàþùåé àêòèâíîñòè òêàíåé ê 24 è 144-ì ÷àñàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Èññëåäîâàíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè áûëè ïðîâåäåíû â òå æå ñðîêè, ÷òî è ïå÷åíè è ìîçãà. Îäíàêî, â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî ãîìîãåíàòû ìûøå÷íîé òêàíè íå âñòóïàëè â ðåàêöèþ âîññòàíîâëåíèÿ ñî ñïèíîâûìè çîíäàìè âïëîòü äî ïÿòûõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà àâòîðîì áûëè ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ íà 6, 10, 15, 20, 25 è 30-å ñóòêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ðåçóëüòàòû èñ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 52
ñëåäîâàíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè ïîêàçàëè, ÷òî èìååòñÿ äîñòîâåðíûé ðîñò çíà÷åíèé êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ, íà÷èíàÿ ñ øåñòûõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ïî 25-å ñóòêè âêëþ÷èòåëüíî, ïîñëå ÷åãî íàñòóïàë ñïàä ê 30-ì ñóòêàì. Àâòîðîì ïðîäåìîíñòðèðîâàíà ïðèíöèïèàëüíàÿ ñõîæåñòü äèíàìèêè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ â èññëåäîâàíèÿõ, ïðîâåäåííûõ íà òêàíÿõ è îðãàíàõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è âçÿòûõ îò òðóïîâ ëþäåé. Ðàçíèöà çàêëþ÷àëàñü â ñäâèãå ïî âðåìåíè ïèêîâ ìàêñèìàëüíîé àêòèâíîñòè âîññòàíàâëèâàþùèõñÿ ñèñòåì è àáñîëþòíûõ çíà÷åíèé êîíñòàíòû “Ê”. Ýòî ìîæíî áûëî îáúÿñíèòü ðàçëè÷èÿìè èíòåíñèâíîñòè îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíûõ ïðîöåññîâ â òêàíÿõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà è ïî-ðàçíîìó ïðîòåêàþùèìè ïðîöåññàìè ãíèåíèÿ. Òàêèì îáðàçîì, À.È.Çàáåëüñêèé óñòàíîâèë, ÷òî êîíñòàíòà “Ê”, ïðîïîðöèîíàëüíàÿ ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ÿâëÿåòñÿ îáúåêòèâíûì êðèòåðèåì äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ìàêñèìàëüíî òî÷íûõ è íàäåæíûõ ðåçóëüòàòîâ öåëåñîîáðàçíî èññëåäîâàòü ñðàçó íåñêîëüêî îðãàíîâ, ïîñêîëüêó äèíàìèêà êîíñòàíòû ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ íîñèò âîëíîîáðàçíûé õàðàêòåð è âîçìîæíî ñîâïàäåíèå çíà÷åíèé â ðàçëè÷íûå âðåìåííûå ïðîìåæóòêè. Ñëåäóåò ïðîâîäèòü òðåõêðàòíîå èññëåäîâàíèå õðàíÿùèõñÿ îáðàçöîâ ÷åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè äëÿ âûÿñíåíèÿ íàëè÷èÿ ïîëîæèòåëüíîé èëè îòðèöàòåëüíîé äèíàìèêè â ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà, ïîñëå ÷åãî ìîæíî äîñòîâåðíî óñòàíîâèòü íàñòóïëåíèå ñìåðòè ïî êàëèáðîâî÷íûì ãðàôèêàì. Ñîáëþäåíèå ýòîãî óñëîâèÿ ïîçâîëÿåò óñòàíàâëèâàòü ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ïî ãîìîãåíàòàì ïå÷åíè è ìîçãà â òå÷åíèå ïåðâûõ 48 ÷ ñ òî÷íîñòüþ 4-6 ÷ è äàëåå ïî ãîìîãåíàòàì ìûøå÷íîé òêàíè ñ òî÷íîñòüþ äî 24 ÷ â ïåðâûå 5 ñóòîê â ýêñïåðèìåíòå. Äàííûå, ïîëó÷åííûå ïðè èññëåäîâàíèè ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà äàþò îñíîâàíèå ïîëàãàòü î öåëåñîîáðàçíîñòè ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà â ïîçäíèå ñðîêè (äî 30 ñóòîê), ñ òî÷íîñòüþ äî 5 ñóòîê. Íàëè÷èå àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè îêàçûâàåò îïðåäåëåííîå âëèÿíèå íà äèíàìèêó îêèñëèòåëüíî-âîññòàíîâèòåëüíûõ ïðîöåññîâ â ïåðåæèâàþùèõ òêàíÿõ, ÷òî íåîáõîäèìî ó÷èòûâàòü ïðåèìóùåñòâåííî â ïåðâûå ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.
Ãëàâà 1
Ñòð. 53
Ñ ó÷åòîì îòíîñèòåëüíîé ïðîñòîòû ìåòîäèêè, âûñîêîé òî÷íîñòè, à òàêæå âîçìîæíîñòè ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèÿ â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà (äî 30 ñóòîê) À.È.Çàáåëüñêèé ïðèøåë ê âûâîäó, ÷òî ñïîñîá óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ãîìîãåíàòàìè òêàíåé ìîæíî ñ÷èòàòü ïåðñïåêòèâíûì è ðåêîìåíäîâàòü åãî â ýêñïåðòíóþ ïðàêòèêó. Ìåòîä ÝÏÐ áûë òàêæå ïðèìåíåí äðóãèìè èññëåäîâàòåëÿìè ñ öåëüþ ðàçðàáîòêè îáúåêòèâíûõ êðèòåðèåâ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Òàê, Î.À.Àçèçîâà è ñîàâò. (1981) èçó÷àëè èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ÝÏÐ ñ g=2,03, îáóñëîâëåííîãî íèòðîêñèëüíûìè êîìïëåêñàìè, âîçíèêàþùèìè ïðè îáðàáîòêå ïå÷åíè NaNO 2. Èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ÝÏÐ èçìåíÿëàñü â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ÷òî ïîçâîëèëî àâòîðàì âûñêàçàòü ìíåíèå î âîçìîæíîñòè ïðèìåíåíèÿ óêàçàííîãî ìåòîäà ïðè ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì óñòàíîâëåíèè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè â ðàííèå ñðîêè (äî 6 ÷àñîâ). Ðåçóëüòàòû ýòîé ðàáîòû ïîçâîëèëè ïðåäïîëîæèòü, ÷òî îáðàçîâàíèå íèòðîêñèëüíûõ êîìïëåêñîâ ñâÿçàíî ñ ðàçðóøåíèåì ìåìáðàííûõ ñòðóêòóð êëåòîê, èíòåíñèâíî ïðîòåêàþùèì â êëåòêå ÷åðåç 2 ÷ ïîñëå ñìåðòè. Áûëà òàêæå èññëåäîâàíà êèíåòèêà ðåàêöèè ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ ãîìîãåíàòàìè ïå÷åíè â çàâèñèìîñòè îò ñðîêà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, òèïà ñïèíîâîãî çîíäà, òèïà ðàñòâîðèòåëÿ (Òûãëèÿí Í.Â., Ïàøèíÿí Ã.À., Çàáåëüñêèé À.È., 1981). Èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî âîññòàíîâèòåëÿìè â îñíîâíîì ÿâëÿþòñÿ SH-ãðóïïû áåëêîâ. Çàâèñèìîñòü êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè óñòàíîâëåíà êàê èçìåíåíèåì ÷èñëà SH-ãðóïï, òàê è ðàçðóøåíèåì ìåìáðàí ñóáêëåòî÷íûõ îðãàíåëë â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Ïî ìíåíèþ Ã.À.Ïàøèíÿíà è Í.Â.Òûãëèÿíà (1982), íà ñêîðîñòü ïðîöåññîâ àóòîëèçà îêàçûâàåò âëèÿíèå ïðè÷èíà ñìåðòè. Ýòîò ôàêò áûë óñòàíîâëåí ìåòîäîì ÝÏÐ ïðè èññëåäîâàíèè äèíàìèêè ïîñìåðòíîãî àóòîëèçà ïå÷åíè èíòàêòíûõ è àäðåíàëýêòîìèðîâàííûõ æèâîòíûõ. Ó÷èòûâàëè è ïðîäîëæèòåëüíîñòü àãîíàëüíîãî ïåðèîäà. Êàê îáúÿñíèëè àâòîðû, ãîðìîíû íåîäèíàêîâî âëèÿþò íà ìåìáðàíó ñóáêëåòî÷íûõ îðãàíåëë â òå÷åíèå àãîíàëüíîãî ïåðèîäà. Äèíàìèêà ïîñìåðòíîãî àóòîëèçà òêàíåé æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà ìåòîäîì ÝÏÐ áûëà èññëåäîâàíà è â äðóãèõ ðàáîòàõ.
Ãëàâà 1
Ñòð. 54
Âûÿâëåíà ÷åòêàÿ çàâèñèìîñòü ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ òêàíåé îò ñðîêà äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ïðè èçìåíåíèè òåìïåðàòóðû âíåøíåé ñðåäû îò 20 äî 45îÑ õîä ýòîé çàâèñèìîñòè äîñòîâåðíî èçìåíÿëñÿ - ïðîèñõîäèò ñäâèã âî âðåìåíè ýêñòðåìàëüíûõ òî÷åê. Äàííûå ýêñïåðèìåíòîâ ïîçâîëèëè àâòîðàì ñ÷èòàòü, ÷òî ïðîöåññ ïîñìåðòíîãî àóòîëèçà ÿâëÿåòñÿ ôåðìåíòàòèâíûì ïðîöåññîì, çàìåäëÿþùèìñÿ â áëèæàéøèå ñðîêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè èç-çà âîçíèêíîâåíèÿ â òêàíÿõ ãèïîêñè÷åñêèõ óñëîâèé, à â äàëüíåéøåì ðåçêî óñèëèâàþùèìñÿ. Òàêèì îáðàçîì, ïî ìíåíèþ èññëåäîâàòåëåé, ñóùåñòâóåò ïðèíöèïèàëüíàÿ âîçìîæíîñòü ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ÝÏÐ ïðè ðåøåíèè âîïðîñîâ î äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå. 1.5.2. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ÝÏÐ ïðè óñòàíîâëåíèè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ òåëåñíûõ ïîâðåæäåíèé  òå÷åíèå ïîñëåäíåãî äåñÿòèëåòèÿ ïðè ðåøåíèè ïðîáåëû äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû áûë ïðèìåíåí ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà.  ïðàêòèêå ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû ïðè èññëåäîâàíèè òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, íåðåäêî âîçíèêàåò âîïðîñ î ïðèæèçíåííîñòè èëè ïîñìåðòíîñòè ïðè÷èíåíèÿ òåëåñíûõ ïîâðåæäåíèé. Ñ ýòîé òî÷êè çðåíèÿ, öåëåñîîáðàçíûì ïðåäñòàâëÿåòñÿ ðàçâèòèå íîâîãî íàó÷íîãî íàïðàâëåíèÿ, ñâÿçàííîãî ñ ïðèìåíåíèåì ñîâðåìåííûõ áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ îðãàíîâ è òêàíåé ÷åëîâåêà è ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ. Ì.À.Îãàíåñÿí (1984) ñ öåëüþ ýêñïåðòíîé äèàãíîñòèêè äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ìåòîäîì ÝÏÐ èçó÷èë äèíàìèêó ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâüþ ÷åðåç 0, 1, 3, 6, 12 è 24 ÷àñà ïîñëå åå ïðè÷èíåíèÿ. Àâòîð îòìåòèë âëèÿíèå àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè íà äèíàìèêó ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâüþ â óêàçàííûå ñðîêè, à òàêæå âëèÿíèå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íà ïàðàìåòðû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êðîâè. Áûë èñïîëüçîâàí ðàñòâîð ñïèíîâîãî çîíäà íà îñíîâå êàïðèëîâîãî ýôèðà. Ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà â êðîâè èññëåäîâàíà ïóòåì çàïèñè öåíòðàëüíîé êîìïîíåíòû ÝÏÐ - ñïåêòðà çîí-
Ãëàâà 1
Ñòð. 55
äà ñ ïîñëåäóþùèì èçìåðåíèåì åå àìïëèòóäû. Óñòàíîâëåíà äîñòîâåðíàÿ äèíàìèêà ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâüþ â ñðîêè äî 24 ÷ ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, ÷òî ìîæåò áûòü, ïî ìíåíèþ àâòîðà, èñïîëüçîâàíî ïðè äèàãíîñòèêå äàâíîñòè åå âîçíèêíîâåíèÿ. Îòìå÷åíî, ÷òî ñîäåðæàíèå ýòèëîâîãî ñïèðòà â êðîâè äî 2‰ íå îêàçûâàåò ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîãî âëèÿíèÿ íà âåëè÷èíó êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâüþ. Ïðè êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà áîëåå ÷åì 2‰ îòìå÷åíî ñíèæåíèå åå âåëè÷èíû. Ïîêàçàíà âîçìîæíîñòü äèàãíîñòèêè äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ïîâðåæäåíèé â ñðîêè äî 1 è 3-õ ÷àñîâ ïîñëå èõ ïðè÷èíåíèÿ. Ã.Ì. Áóòòàåâà (1986) èçáðàëà â êà÷åñòâå òàêîãî ìåòîäà ýëåêòðîííûé ïàðàìàãíèòíûé ðåçîíàíñ, à îáúåêòàìè èññëåäîâàíèÿ - êðîâåíîñíûå ñîñóäû (àîðòû, ïîäâçäîøíûå, îáùèå ñîííûå, áåäðåííûå, ïîäêëþ÷è÷íûå àðòåðèè), èçúÿòûå îò òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû è äðóãèõ ïðè÷èí. Âðåìÿ ïðè÷èíåíèÿ ïîâðåæäåíèé è íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè áûëè èçâåñòíû èç ìåäèöèíñêèõ äîêóìåíòîâ è ñëåäñòâåííûõ äàííûõ. Âñåãî àâòîð èññëåäîâàëà 115 ñîñóäîâ îò 82 òðóïîâ ëèö îáîåãî ïîëà â âîçðàñòå îò 11 äî 84 ëåò. Ñìåðòü èõ íàñòóïèëà îò îñòðîé êðîâîïîòåðè, ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè, íåñîâìåñòèìûõ ñ æèçíüþ ïîâðåæäåíèé, òðàâìàòè÷åñêîãî øîêà â ðåçóëüòàòå æåëåçíîäîðîæíîé òðàâìû, ïàäåíèÿ ñ âûñîòû, êîëîòî-ðåçàíûõ ðàíåíèé, àâòîìîáèëüíîé òðàâìû. Ó÷èòûâàëè íàëè÷èå è êîëè÷åñòâåííîå ñîäåðæàíèå ýòàíîëà â êðîâè è ìî÷å òðóïîâ. Ñîñóäû ñ îêîëîñîñóäèñòîé êëåò÷àòêîé, ìÿãêèìè òêàíÿìè èçâëåêàëè èç òðóïîâ, ïîìåùàëè â ñòåêëÿííûå áþêñû è õðàíèëè â òå÷åíèå 2 ìåñÿöåâ â îäèíàêîâûõ óñëîâèÿõ ïðè òåìïåðàòóðå âîçäóõà 15-17îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 60-70%. Äëÿ êîíòðîëüíîãî èññëåäîâàíèÿ áðàëè íåïîâðåæäåííóþ ÷àñòü òîãî æå ñîñóäà íà ìàêñèìàëüíîì óäàëåíèè îò ìåñòà òðàâìû èëè ñèììåòðè÷íûé èíòàêòíûé ñîñóä. Óñòàíîâëåíî, ÷òî õðàíåíèå îáðàçöîâ ñîñóäîâ â õîëîäèëüíèêå ïðè 4-6 îÑ â òå÷åíèå 3 ñóòîê íå îêàçûâàåò ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîãî âëèÿíèÿ íà ïàðàìåòðû ñïåêòðîâ ÝÏÐ. Îñíîâíûìè çàäà÷àìè àâòîðà ÿâëÿëèñü óñòàíîâëåíèå âîçìîæíîñòè äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ ñ ó÷åòîì äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíûõ èçìåíåíèé, íàëè÷èÿ àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè è àòåðîñêëåðîòè÷åñêîãî ïîðàæåíèÿ
Ãëàâà 1
Ñòð. 56
ñîñóäîâ. Áûëà ðàçðàáîòàíà ìåòîäèêà ñ ïðèìåíåíèåì ðàçëè÷íûõ íèòðîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ, èñïîëüçîâàíû ãèäðîôîáíûå è ãèäðîôèëüíûå âåùåñòâà, à òàêæå ñïèíîâûå çîíäû íà îñíîâå æèðíîé êèñëîòû. Îòñóòñòâèå êîíêðåòíûõ ðåçóëüòàòîâ çàñòàâèëî àâòîðà íåñêîëüêî èçìåíèòü ìåòîäèêó èññëåäîâàíèÿ è íèòðîêñèëüíûå ðàäèêàëû áûëè çàìåíåíû ïàðàìàãíèòíûìè èîíàìè Mn+2. Èîíû ýòîãî ìåòàëëà â âîäíîì ðàñòâîðå äàëè ñïåêòð ÝÏÐ, õàðàêòåðèçóþùèéñÿ øåñòèêîìïîíåíòíîé ñòðóêòóðîé. Ðàçìåð îáðàçöà ñîñóäîâ (äèàìåòð 12 ìì) áûë îïðåäåëåí ñïåöèàëüíûì êàëèáðîâàííûì ïðèñïîñîáëåíèåì ñ öåëüþ ñòàíäàðòèçàöèè.  ýòîé ìåòîäèêå Ã.Ì.Áóòòàåâà îòêàçàëàñü îò ãîìîãåíèçàöèè èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà. Ìåòîäèêà áûëà çíà÷èòåëüíî óïðîùåíà â òåõíè÷åñêîì îòíîøåíèè, âûïîëíèìà ïðè çàòðàòå íåáîëüøîãî êîëè÷åñòâà øèðîêî äîñòóïíûõ ðåàêòèâîâ. Ïîñìåðòíóþ òðàâìó íàíîñèëè ïóòåì ìíîæåñòâåííîãî (äî 8) ñäàâëåíèÿ òêàíè ñîñóäà áðàíøàìè çàæèìà ÷åðåç 2, 5, 10, 15, 18, 24, 36, 48 ÷ ïîñëå îñòàíîâêè ñåðäöà. Èçìåðåíèÿ ïðîâîäèëè ÷åðåç 12, 24, 36, 48 ÷., 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 13 íåäåëü ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Îáðàçöû ñîñóäîâ ïîìåùàëè â ðàñòâîð -1 MnCl2 â êîëè÷åñòâå 1,5 ìë ñ êîíöåíòðàöèåé ðàñòâîðà 10 Ì íà 30 ìèíóò. Ïî èñòå÷åíèè ýòîãî âðåìåíè ñîñóäû, ïîãëîòèâøèå ÷àñòü ìàðãàíöà, èçâëåêàëè, à ðàñòâîðû èñïîëüçîâàëè äëÿ èçìåðåíèÿ êîíöåíòðàöèè Mn +2 ìåòîäîì ÝÏÐ. Ðàñòâîð íàáèðàëè â ñòåêëÿííûé êàïèëëÿð ñ âíóòðåííèì äèàìåòðîì 0,7 ìì äî îáúåìà 100 ìêë è ïîìåùàëè â ðåçîíàòîð ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí” ÝÏÐ-Â. Çàïèñü ïðîâîäèëè ïðè íàïðÿæåííîñòè ìàãíèòíîãî ïîëÿ H0 3650 Ãñ, äèàïàçîíå ðàçâåðòêè - 1600/1, ñêîðîñòè ðàçâåðòêè 3/200, àìïëèòóäà Â× ìîäóëÿöèè HM 100/1, ïîñòîÿííîé âðåìåíè ñàìîïèñöà - 0,3 ñ, ïàäàþùåé ìîùíîñòè - 2 Ìâò, ìîäóëÿöèè - 10/0,4. Ñèãíàë ðåãèñòðèðîâàëè íà îñöèëëîãðàôå è äâóõêîîðäèíàòíîì ñàìîïèñöå. Öèôðîâûå äàííûå îáðàáîòàíû ìåòîäàìè âàðèàöèîííîé ñòàòèñòèêè. Àíàëèç ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ïîêàçàë, ÷òî ñóììû àìïëèòóä ñïåêòðîâ ÝÏÐ èñõîäíîãî ðàñòâîðà ìàðãàíöà âñåãäà áûëè ìàêñèìàëüíûìè. Ñóììû àìïëèòóä ñïåêòðîâ ÝÏÐ ìàðãàíöà ïîñëå èíêóáàöèè îáðàçöîâ ñîñóäîâ òðàâìèðîâàííûõ ïðèæèçíåííî áûëè ìèíèìàëüíûìè. Ñóììû àìïëèòóä ñïåêòðîâ ÝÏÐ ìàðãàíöà ïîñëå èíêóáàöèè â íèõ îáðàçöîâ ñîñóäîâ ñ ïîñìåðòíîé òðàâìîé áûëè áîëüøå ñóììû àìïëèòóä ñïåêòðîâ ìàðãàíöà ïîñëå èíêóáàöèè â íèõ îáðàçöîâ ñîñóäîâ ñ
Ãëàâà 1
Ñòð. 57
ïðèæèçíåííîé òðàâìîé. Ñóììû àìïëèòóä ñïåêòðîâ ÝÏÐ ðàñòâîðà ìàðãàíöà ïîñëå èíêóáàöèè íåïîâðåæäåííûõ (êîíòðîëüíûõ) ñîñóäîâ âñåãäà áûëè áîëüøå ñóìì àìïëèòóä ñïåêòðîâ ìàðãàíöà ïîñëå èíêóáàöèè îáðàçöîâ ñîñóäîâ ñ ïðèæèçíåííîé è ïîñìåðòíî ïðè÷èíåííîé òðàâìîé. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïîêàçàëè ïðèíöèïèàëüíóþ âîçìîæíîñòü äîñòîâåðíîãî óñòàíîâëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïðè äàâíîñòè ïîñìåðòíûõ èçìåíåíèé äî 48 ÷àñîâ. Çàòåì áûëî èçó÷åíî âëèÿíèå ïîñìåðòíûõ ïðîöåññîâ íà âåëè÷èíû ñïåêòðîâ ÝÏÐ â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà (äî 13 íåäåëü). Âûÿâëåíà äîñòîâåðíàÿ âîçìîæíîñòü äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ ïðè äàâíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà äî 2-õ íåäåëü. Ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà îò 2 äî 13 íåäåëü íåîáõîäèìî ïðîâåäåíèå äâóõ-òðåõêðàòíûõ èçìåðåíèé ïàðàìåòðîâ ñïåêòðîâ ÝÏÐ ñ èíòåðâàëîì â 2 íåäåëè. Ïðè óñòàíîâëåíèè ïðèæèçíåííîñòè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ñ èñïîëüçîâàíèåì óêàçàííîé ìåòîäèêè êàêîé-ëèáî ñóùåñòâåííîé ðàçíèöû â ïîêàçàòåëÿõ íå íàáëþäàåòñÿ ìåæäó ñëó÷àÿìè íàëè÷èÿ è îòñóòñòâèÿ àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè. Àâòîð óñòàíîâèëà, ÷òî êîýôôèöèåíò ñâÿçûâàíèÿ ðàñòâîðà ìàðãàíöà èíòèìîé ñîñóäîâ èìååò ðàçëè÷íóþ âåëè÷èíó äëÿ ïðèæèçíåííî è ïîñìåðòíî ïîâðåæäåííûõ ñîñóäîâ. Ïðèìåíåíèå â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî êîíòðîëÿ ó÷àñòêà íåïîâðåæäåííîãî ñîñóäà èñêëþ÷àåò âëèÿíèå àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè è àòåðîñêëåðîòè÷åñêîãî ïîðàæåíèÿ íà ïàðàìåòðû ñïåêòðîâ ÝÏÐ. Ïîñìåðòíûå ïðîöåññû äàâíîñòüþ äî äâóõ íåäåëü íå îêàçûâàåò ñóùåñòâåííîãî âëèÿíèÿ íà ïàðàìåòðû ñïåêòðîâ ÝÏÐ, à ñëåäîâàòåëüíî è íà âîçìîæíîñòü óñòàíîâëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ïîâðåæäåíèé ñîñóäîâ. Ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà äî òðåõ ìåñÿöåâ ñ öåëüþ óêàçàííîé äèàãíîñòèêè íåîáõîäèìî ïðîâåäåíèå äâóõ-òðåõêðàòíûõ èçìåðåíèé ïàðàìåòðîâ ñïåêòðîâ ÝÏÐ ñ èíòåðâàëîì â 2 íåäåëè. Âîïðîñàì óñòàíîâëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî ïàðàìåòðàì ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ïîñâÿòèë ñâîå íàó÷íîå èññëåäîâàíèå Â.Ë. Ïðîøóòèí (1988). Ðàáîòà âûïîëíåíà íà ïðàêòè÷åñêîì ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì ìàòåðèàëå (67 òðóïîâ ëèö îáîåãî ïîëà â âîçðàñòå îò 9 äî 82 ëåò). Òðè ãðóïïû íàáëþäåíèé âêëþ÷àëè â ñåáÿ òðóïû ëèö (25), óìåðøèõ îò çàáîëåâàíèé ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòîé ñèñòåìû, ïîãèáøèõ íà
Ãëàâà 1
Ñòð. 58
ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ â òå÷åíèå 5-15 ìèíóò îò ðàçëè÷íûõ âèäîâ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû (26) è óìåðøèõ (16) â ëå÷åáíûõ ó÷ðåæäåíèÿõ â ñðîêè 1-4 ÷àñà ïîñëå ïîëó÷åíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé.  êà÷åñòâå îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ áûë èçáðàí êîñòíûé ìîçã, ïîñêîëüêó îòíîñèòåëüíàÿ èçîëèðîâàííîñòü åãî â îðãàíèçìå èñêëþ÷àåò âîçìîæíîå íåáëàãîïðèÿòíîå âëèÿíèå íà íåãî óñëîâèé âíåøíåé ñðåäû. Èññëåäîâàíèå êîñòíîãî ìîçãà ïðîèçâåäåíî ìåòîäîì ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà íà ðàäèîñïåêòðîìåòðå “Ðóáèí”. Èññëåäîâàíèå ñâîéñòâ êîñòíîãî ìîçãà ìåòîäîì ñïèíîâûõ çîíäîâ ïðîèçâîäèëè â ñðîêè: â ïåðâóþ íåäåëþ åæåäíåâíî, çàòåì íà 14, 21, 28 ñóòêè è 810, 12-14, 16-18, 20, 22-24 íåäåëè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Óñòàíîâëåíî, ÷òî õðàíåíèå ïðåïàðàòîâ êîñòíîãî ìîçãà ïðè òåìïåðàòóðå 4-6îÑ â òå÷åíèå òðåõ ñóòîê è ïðè 18-20îÑ â òå÷åíèå 6 ÷àñîâ íå îêàçûâàåò ñóùåñòâåííîãî âëèÿíèÿ íà èçìåíåíèÿ çíà÷åíèé êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì. Àâòîð èñïîëüçîâàë â êà÷åñòâå ñïèíîâîãî çîíäà ñïèðòîâîé ðàñòâîð 1,2,6,6-òåòðàìåòèë-1-êàïðèëîèäïèïåðèäèí-îäèí-îêñèëà. ÝÏÐ-ñïåêòðû ýòîãî çîíäà õàðàêòåðèçóþòñÿ òðèïëåòíîé ôîðìîé. Êîíñòàíòó ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì îïðåäåëÿëè ñîîòíîøåíèåì ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ îáðàçöà ê êîíòðîëþ. Çàïèñü ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êîñòíîãî ìîçãà îñóùåñòâëÿëè íà ÝÏÐ-ñïåêòðîìåòðå “Ðóáèí” ñ ñàìîïèøóùåé ïðèñòàâêîé. Êîñòíûé ìîçã ïîëó÷àëè ïóòåì ïðîìûâàíèÿ åãî ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì èç êðûëüåâ ïîäâçäîøíûõ êîñòåé ñ ïîñëåäóþùåé ñòàíäàðòèçàöèåé íà ñïåêòðîôîòîìåòðå ïðè çàäàííîé äëèíå âîëíû. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ 20 ìêë ñïèíîâîãî çîíäà ñ 10- è 40-ìèíóòíîé èíêóáàöèè ïðîâîäèëè ñíÿòèå ÝÏÐ-ñïåêòîâ. Èññëåäîâàíèå êîñòíîãî ìîçãà 1 è 2-é ãðóïï íàáëþäåíèé ïðîâîäèëè ÷åðåç 24 ÷àñà â òå÷åíèå ïåðâîé íåäåëè, íà 14, 21, 23-è ñóòêè, 8-10, 12-14,16-18, 20, 22-24 íåäåëè; 2-é ãðóïïû - íà 3, 4, 5, 6, 12, 21, 23 è 24 ñóòêè. Ïðè ðåøåíèè âîïðîñà ïðèæèçíåííîñòè òðàâìàòèçàöèè ïðîèçâîäèëè ñðàâíåíèå âåëè÷èí êîíñòàíò ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì 1, 2 è 3-é ñåðèè èññëåäîâàíèé. Îòìå÷åíî, ÷òî âåëè÷èíà êîíñòàíòû 2-é ñåðèè â ïåðèîä 2-28 ñóòîê ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè áîëüøå è äîñòîâåðíî îòëè÷àåòñÿ îò çíà÷åíèé êîíñòàíòû 1-é ñåðèè.  ñâîþ î÷åðåäü âåëè÷èíà êîíñòàíòû 3-é ñåðèè äîñòî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 59
âåðíî îòëè÷àëàñü îò çíà÷åíèé êîíñòàíòû 2-é ñåðèè íà 4, 7, 14, 21 è 28-å ñóòêè, ïðè÷åì ñðåäíèå èõ öèôðîâûå ïîêàçàòåëè áîëüøå òàêîâûõ âî 2-é ñåðèè. Îòñþäà ñëåäîâàëî, ÷òî èíòåíñèâíîñòü òå÷åíèÿ àóòîëèòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ â êîñòíîì ìîçãå 2 è 3-é ñåðèé íàáëþäåíèé çíà÷èòåëüíî ïðåâûøàåò òàêîâûå â 1-é ñåðèè. Ýòî çàâèñèò, ïî-âèäèìîìó, îò ôóíêöèîíàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ êîñòíîãî ìîçãà íà ìîìåíò îñòàíîâêè ñåðäå÷íîé äåÿòåëüíîñòè. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, ýòî îáóñëîâëåíî òåì, ÷òî ó ëèö, óìåðøèõ ñêîðîïîñòèæíî îò çàáîëåâàíèé ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòîé ñèñòåìû, êîñòíûé ìîçã ïðåáûâàåò â ñîñòîÿíèè îòíîñèòåëüíîãî ôóíêöèîíàëüíîãî “ïîêîÿ”, îòñóòñòâóþùåãî â êîñòíîì ìîçãå òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. Ïîñëå ÷ðåçìåðíîãî ìåõàíè÷åñêîãî âîçäåéñòâèÿ íà îðãàíèçì â íåì ðàçâèâàþòñÿ ïîñòàãðåññèâíûå àäàïòèâíûå ðåàêöèè, ñîïðîâîæäàþùèåñÿ íàðóøåíèåì êðîâîîáðàùåíèÿ, òêàíåâîãî äûõàíèÿ, óãëåâîäíîãî, áåëêîâîãî, æèðîâîãî è äðóãèõ îáìåíîâ, ïðèâîäÿùèå ê íàêîïëåíèþ ñàìûõ ðàçíîîáðàçíûõ íåäîîêèñëåííûõ ïðîäóêòîâ, âûðàæåííûì èçìåíåíèåì êëåòî÷íîãî ñîñòàâà ñ èõ ïîëíîöåííîñòüþ, ÷òî ñóùåñòâåííî âëèÿåò íà âåëè÷èíó êîíñòàíòû ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì.  îñíîâå ðàçíèöû çíà÷åíèé êîíñòàíòû 2 è 3-é ñåðèé íàáëþäåíèé ëåæèò âåëè÷èíà âðåìåííîãî èíòåðâàëà ìåæäó ìîìåíòîì ïîëó÷åíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû è îñòàíîâêîé ñåðäå÷íîé äåÿòåëüíîñòè, ÷òî â êîíå÷íîì èòîãå îïðåäåëÿåò óðîâåíü ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè êîñòíîãî ìîçãà. Òàêèì îáðàçîì, â ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà äî 28 ñóòîê ìîæíî, ïî ìíåíèþ àâòîðà, óñòàíàâëèâàòü íå òîëüêî ïðèæèçíåííîñòü, íî è äàâíîñòü ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû.  îñíîâå ýòîãî ëåæàò ðàçíûå ìåõàíèçìû ïàòî- è òàíàòîãåíåçà, à òàêæå ñòåïåíü âûðàæåííîñòè ôóíêöèîíàëüíûõ ïðîöåññîâ â êîñòíîì ìîçãå. Ñðàâíåíèå ïîêàçàòåëåé âåëè÷èí êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì 1 è 2-é ñåðèè íàáëþäåíèé â ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà îò 8 äî 24 íåäåëü ñâèäåòåëüñòâóþò îá èõ äîñòîâåðíîì îòëè÷èè, òîëüêî çíà÷åíèå êîíñòàíòû ñåðèè â ýòîì ïåðèîäå çíà÷èòåëüíî áîëüøå òàêîâûõ 2-é ñåðèè, ò.å. ïðîèñõîäèò ñóùåñòâåííàÿ ïåðåñòðîéêà òå÷åíèÿ àóòîëèòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ â ñðîêè 5-7 íåäåëü. Ýòî ìîæåò áûòü îáóñëîâëåíî “èñòîùåíèåì” êîñòíîãî ìîçãà 2-é ñåðèè íàáëþäåíèé â ðåçóëüòàòå âûñîêîé íà÷àëü-
Ãëàâà 1
Ñòð. 60
íîé ñêîðîñòè òå÷åíèÿ ïîñìåðòíûõ èçìåíåíèé â ïåðâûå 28 ñóòîê ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, âûçâàííîé ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòüþ êîñòíîãî ìîçãà íà “ìîìåíò” ñìåðòè, âñëåäñòâèå çíà÷èòåëüíîãî íàäïîðîãîâîãî åãî ðàçäðàæåíèÿ. Àâòîð ñ÷èòàåò, ÷òî îòêðûâàþòñÿ âîçìîæíîñòè äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â îòäàëåííûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà îò 8 äî 24 íåäåëü. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâóþò î íàëè÷èè ðàçëè÷èé â âåëè÷èíàõ êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì ó ëèö, ïîãèáøèõ íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ îò ðàçëè÷íûõ âèäîâ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, óìåðøèõ â ñðîêè 1-4 ÷àñà ïîñëå èõ ïîëó÷åíèÿ è óìåðøèõ ñêîðîïîñòèæíî îò çàáîëåâàíèé, ïðåèìóùåñòâåííî ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòîé ñèñòåìû. Ýòî ìîæíî èñïîëüçîâàòü â êà÷åñòâå äèôôåðåíöèàëüíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ êðèòåðèåâ óñòàíîâëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû êàê íà ðàííèõ ñðîêàõ èññëåäîâàíèÿ òðóïîâ, òàê è ïðè âûðàæåííîì ãíèëîñòíîì èõ ðàçëîæåíèè. Äëÿ äîñòîâåðíîé äèàãíîñòèêè è óìåíüøåíèÿ âåðîÿòíîñòè âîçìîæíîé îøèáêè àâòîð ðåêîìåíäîâàë ïðîâîäèòü íåîäíîêðàòíîå (2-3 ðàçà) èññëåäîâàíèå êîñòíîãî ìîçãà íà ðàçíûõ ñðîêàõ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Íàëè÷èå ýòàíîëà â êðîâè òðóïà, à òàêæå äàâíîñòü íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íå ïðåïÿòñòâóþò îïðåäåëåíèþ ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â óêàçàííûå ñðîêè, ïðîøåäøèå ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ð.À. Àóøåâ (1990) èñïîëüçîâàë ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà äëÿ èçó÷åíèÿ âîçìîæíîñòåé äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííî è ïîñìåðòíî ïðè÷èíåííûõ ïåðåëîìîâ ðåáåð è äëèííûõ òðóá÷àòûõ êîñòåé.  êà÷åñòâå îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ áûëà èçáðàíà ìûøå÷íàÿ òêàíü èç îáëàñòè ïåðåëîìà ñîîòâåòñòâóþùèõ êîñòåé îò 70 òðóïîâ. Ïåðâóþ ãðóïïó íàáëþäåíèé ñîñòàâèëè 35 òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ îò ðàçëè÷íûõ âèäîâ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, âòîðóþ - 35 òðóïîâ ëèö, óìåðøèõ ïðåèìóùåñòâåííî îò çàáîëåâàíèé ñåðäå÷íîñîñóäèñòîé ñèñòåìû. Ìåòîäîì ÝÏÐ áûë èññëåäîâàí êà÷åñòâåííûé ñîñòàâ ñóáñòðàòà ïî èçìåíåíèþ ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà, ââåäåííîãî èçâíå.  êà÷åñòâå òàêîãî çîíäà ïðèìåíåí ñïèðòîâîé ðàñòâîð 2,2-6,6-òåòðàìåòèë-4-êàïðèëîèëîêñèïèïåðèäèí-1-îêñèëà. Çíà÷åíèÿ ïàðàìåòðà Ê, õàðàêòåðèçóþ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 61
ùåãî ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ìûøå÷íîé òêàíüþ îïðåäåëÿëè ñîîòíîøåíèåì ïàðàìåòðîâ ÝÏÐñïåêòðîâ îáðàçöà ê êîíòðîëþ. Íà òðóïàõ ãðóïïû ñðàâíåíèÿ àâòîð ìîäåëèðîâàíèÿ ïîñìåðòíûå ïåðåëîìû êîñòåé ñ ïîñëåäóþùèì èçúÿòèåì ìûøå÷íîé òêàíè èç îáëàñòè ïåðåëîìà.  îáåèõ èññëåäóåìûõ ãðóïïàõ â êà÷åñòâå êîíòðîëÿ èñïîëüçîâàëè ìûøå÷íóþ òêàíü èç ñèììåòðè÷íîãî ó÷àñòêà ñ öåëüþ èñêëþ÷åíèÿ âëèÿíèÿ ïîëà, âîçðàñòà è àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè.  äàëüíåéøåì ìûøå÷íóþ òêàíü ïîäâåðãàëè ãíèåíèþ â ñòåêëÿííûõ áþêñàõ ïðè 18-20 îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 60-80% â òå÷åíèå òðåõ ìåñÿöåâ. Åæåíåäåëüíî èçìåðÿëè ïàðàìåòðû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ. Ñ ýòîé öåëüþ ãîìîãåíàò ìûøå÷íîé òêàíè ñòàíäàðòèçèðîâàëè ñ ïîìîùüþ ñïåêòðîôîòîìåòðà, ïîñëå äîáàâëåíèÿ 20 ìêë ñïèíîâîãî çîíäà è èíêóáàöèè â òå÷åíèå 10 è 30 ìèíóò ïðîèçâîäèëè çàïèñü ñïåêòðîâ. Âûáîð “íà÷àëà” èññëåäîâàíèÿ, ñîñòàâèâøèé 7-å ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ïî ìíåíèþ àâòîðà, áûë îáóñëîâëåí òåì îáñòîÿòåëüñòâîì, ÷òî ãîìîãåíàò ïîïåðå÷íî-ïîëîñàòîé ìûøå÷íîé òêàíè íà÷èíàåò âîññòàíàâëèâàòü ñïèíîâûå çîíäû ëèøü ê 6-7 ñóòêàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà (Çàáåëüñêèé À.È., 1982). Ð.À. Àóøåâûì (1990) áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî õðàíåíèå ïðåïàðàòîâ ìûøå÷íîé òêàíè ïðè òåìïåðàòóðå âîçäóõà â îáùåé êàìåðå õîëîäèëüíèêà 4-6îÑ â òå÷åíèå òðåõ ñóòîê è ïðè òåìïåðàòóðå 18-20îÑ â òå÷åíèå 12 ÷àñîâ ñóùåñòâåííîãî íå âëèÿåò íà èçìåíåíèå çíà÷åíèé ïàðàìåòðà Ê, õàðàêòåðèçóþùåãî ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ìûøå÷íîé òêàíüþ. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, â óñëîâèÿõ òðàâìû íàðóøåíèå öåëîñòíîñòè êëåòî÷íûõ ñòðóêòóð, â ÷àñòíîñòè ìèîôèáðèëë, âûçûâàåò âûõîä â ìåæêëåòî÷íîå ïðîñòðàíñòâî ôåðìåíòîâ, êîòîðûå ìîãóò îòíîñèòåëüíî äëèòåëüíîå âðåìÿ íàõîäèòüñÿ â ïîâûøåííîì ôóíêöèîíàëüíîì ñîñòîÿíèè.  èíòàêòíîé æå òêàíè ñ ïðåêðàùåíèåì êðîâîîáðàùåíèÿ ïðîèñõîäèò èíàêòèâàöèÿ áîëüøåé ÷àñòè êëåòî÷íûõ ôåðìåíòîâ â âèäó íàðàñòàíèÿ ãèïîêñèè, ïîýòîìó ïðîöåññû àóòîëèçà íå èìåþò òàêîé âûñîêîé íà÷àëüíîé ñêîðîñòè òå÷åíèÿ, êàê â ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííîé ìûøöå, è ëåæàò â îñíîâå ïîëó÷åííîé ðàçíèöû âåëè÷èí êîíñòàíò. Ðåçóëüòàòû ÝÏÐ-èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî âåëè÷èíû ïàðàìåòðà Ê ïðàêòè÷åñêè íå îòëè÷àþòñÿ ìåæäó èíòàêòíîé è ïîñìåðòíî òðàâìèðîâàííîé ìûøå÷íîé òêàíüþ.  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ çíà÷åíèå ïàðàìåòðà Ê äëÿ ìûøå÷íîé òêà-
Ãëàâà 1
Ñòð. 62
íè èç îáëàñòè ïîñìåðòíîãî ïåðåëîìà ïðèáëèæàëàñü ê çíà÷åíèþ ïàðàìåòðà Ê äëÿ ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííîé òêàíè, íî äîñòîâåðíîñòü èõ ðàçëè÷èÿ ñîõðàíÿëàñü. Àâòîð ïîñ÷èòàë, ÷òî ýòîò ôàêò ñâÿçàí ñ âðåìåíåì ïðè÷èíåíèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíîãî ïåðåëîìà: ÷åì ìåíüøå âðåìåíè ïðîõîäèëî ñ “ìîìåíòà” íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè äî ïðè÷èíåíèÿ ïåðåëîìà, òåì áëèæå çíà÷åíèÿ ïàðàìåòðà Ê äëÿ ýòèõ ãðóïï. Ñóùíîñòü ýòîãî ÿâëåíèÿ àâòîð îáúÿñíÿë ïåðåæèâàåìîñòüþ ìûøå÷íîé òêàíè, ñïîñîáíîé íåêîòîðîå âðåìÿ ñîõðàíÿòü îïðåäåëåííûé óðîâåíü áèîõèìè÷åñêèõ ïðîöåññîâ. Ïðîâåäåííàÿ ñòàòèñòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëèëà àâòîðó óñòàíîâèòü, ÷òî ìåæäó çíà÷åíèÿìè ïàðàìåòðà Ê, õàðàêòåðèçóþùåãî ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ìûøå÷íîé òêàíüþ îáåèõ ãðóïï íàáëþäåíèé, èìåþòñÿ äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ. Ýòî äàëî îñíîâàíèå àâòîðó ñ÷èòàòü ðåàëüíûì âîçìîæíîñòü äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè ïðè÷èíåíèÿ ïåðåëîìîâ êîñòåé â ñðîêè îò 1 äî 12 íåäåëü ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Íàëè÷èå ýòàíîëà â êðîâè òðóïà, ïîë, âîçðàñò, à òàêæå äàâíîñòü íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íå ïðåïÿòñòâóåò óêàçàííîé äèàãíîñòèêå. Ì.À. Îãàíåñÿí (1984) ïðîâåë èññëåäîâàíèÿ ïàðàìåòðîâ ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà êðîâè â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â ýêñïåðèìåíòå è ïðè ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì èññëåäîâàíèè òðóïîâ. Ýêñïåðèìåíòàëüíûì æèâîòíûì (êðûñàì-ñàìöàì, ìàññîé 180-200 ã) ïîä ýôèðíûì íàðêîçîì ïðè÷èíÿëè òðàâìó â âèäå ðàçìîçæåíèÿ ìûøö è ïåðåëîìîâ çàäíèõ êîíå÷íîñòåé ïóòåì ðåçêîãî ñæàòèÿ êîíå÷íîñòåé â òèñêàõ ñ òðàâìèðóþùåé ïîâåðõíîñòüþ ïëîùàäüþ 4 ñì2. Òðàâìó íàíîñèëè ïîñëåäîâàòåëüíî íà ïðàâîé, çàòåì íà ëåâîé êîíå÷íîñòÿõ. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó æèâîòíûõ òàêæå ïîäâåðãàëè ýôèðíîìó íàðêîçó â ñðîêè, àíàëîãè÷íûå ýêñïåðèìåíòàëüíûì ãðóïïàì. Çàáîé æèâîòíûõ ïðîâîäèëè ÷åðåç 0, 0,5, 1, 3, 12 è 24 ÷àñîâ ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû.  ýòè æå ñðîêè áûëè çàáèòû æèâîòíûå êîíòðîëüíîé ãðóïïû ïóòåì äåêàïèòàöèè.  êàæäîé âðåìåííîé ãðóïïå èçó÷àëè êðîâü îò 15 ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è îò 15 êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ. Äëÿ èçó÷åíèÿ âëèÿíèÿ ýòàíîëà íà ïàðàìåòðû ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ êðîâè æèâîòíûì (30) ïåðåä ïðè÷èíåíèåì ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû çàäíèõ êîíå÷íîñòåé ÷åðåç ïèùåâîä ââîäèëè àëêîãîëü (40%) â êîëè÷åñòâå 1 ìë íà 100 ã ìàññû. Ïîñëå ââåäåíèÿ àëêîãîëÿ ÷åðåç 30
Ãëàâà 1
Ñòð. 63
ìèíóò æèâîòíûõ òðàâìèðîâàëè è ÷åðåç 1 è 3 ÷àñà çàáèâàëè, èç êðîâè ãîòîâèëè îáðàçöû äëÿ ÝÏÐ-èññëåäîâàíèÿ. Æèâîòíûõ 3-é ýêñïåðèìåíòàëüíîé ãðóïïû (30) ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ñ äàâíîñòüþ 1 è 3 ÷àñà ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà çàáèâàëè, èõ òðóïû õðàíèëè ïðè òåìïåðàòóðå 18-20îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 40-60%. Æèâîòíûõ êîíòðîëüíîé ãðóïïû ïîñëå çàáîÿ õðàíèëè ïðè òåõ æå óñëîâèÿõ îêðóæàþùåé ñðåäû.  ýòîé ñåðèè íàáëþäåíèé èçó÷àëè âëèÿíèå ïîñìåðòíûõ ïðîöåññîâ íà ïàðàìåòðû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ïðè íàëè÷èè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé â ðàçëè÷íîé äàâíîñòüþ. Êðîìå òîãî, èññëåäîâàíû ïàðàìåòðû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êðîâè îò 30 òðóïîâ ëþäåé â âîçðàñòå 20-50 ëåò, ïðè÷èíîé ñìåðòè êîòîðûõ áûëà çàêðûòàÿ ÷åðåïíî-ìîçãîâàÿ òðàâìà ïðè íàëè÷èè ïîâðåæäåíèé êîíå÷íîñòåé ñ ó÷åòîì êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà â êðîâè è äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè (äî 24 ÷àñîâ).  ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé àâòîð óñòàíîâèë, ÷òî ýòàíîë â êîíöåíòðàöèè 1 ìë 40% ðàñòâîðà íà 100 ã ìàññû ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ íå îêàçûâàåò ñóùåñòâåííîãî âëèÿíèÿ íà âåëè÷èíó êîíñòàíòû ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâè. Ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â 1 è 3 ÷àñà ïðè íàëè÷èè è îòñóòñòâèè àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè îíà ïðàêòè÷åñêè íå âëèÿåò íà âåëè÷èíó ñêîðîñòè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Ïðè íàëè÷èè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ñ äàâíîñòüþ 1-3 ÷àñà ïîñìåðòíûå ïðîöåññû äî 24 ÷àñîâ íåñêîëüêî ñíèæàþò âåëè÷èíó êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâè, íî â ïðèíöèïå íå ïðåïÿòñòâóþò âîçìîæíîñòè ýêñïåðòíîé äèàãíîñòèêè äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. Íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå óñòàíîâëåíî, ÷òî â ãðóïïå íàáëþäåíèé ñ äàâíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà - 0 ÷àñîâ ÷åðåç 24 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ÷åòêî âûÿâëÿþòñÿ ñèãíàëû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ (êîíòðîëüíàÿ ãðóïïà). Ïðè äàâíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà - äî 1 ÷àñà îòìå÷åíî ïîâûøåíèå çíà÷åíèé êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Ïðè ñîäåðæàíèè ýòàíîëà â êðîâè äî 2‰ íå âûÿâëåíû ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ âåëè÷èíû êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâè. Ïðè êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà áîëåå 2‰ îòìå÷åíà òåíäåíöèÿ ê ñíèæåíèþ âåëè÷èíû êîíñòàíòû. Òàêèì îáðàçîì, ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ àâòîðîì èññëåäîâàíèé ïîêàçàëè, ÷òî âåëè÷èíà êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè
Ãëàâà 1
Ñòð. 64
âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ ïîçâîëÿåò óñòàíîâèòü äàâíîñòü âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â ñðîêè 0, 1, 3, 6, 12 è 24 ÷àñà; èíòîêñèêàöèÿ àëêîãîëåì ñðåäíåé ñòåïåíè íå îêàçûâàåò ñóùåñòâåííîãî âëèÿíèÿ íà ïàðàìåòðû ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ïðè äèàãíîñòèêå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû; ïàðàìåòðû ÝÏÐñïåêòðîâ â èíòåðâàëå äî 24 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íå èçìåíÿþòñÿ; èìååòñÿ ïðèíöèïèàëüíàÿ âîçìîæíîñòü ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå äëÿ äèàãíîñòèêè äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ñ ó÷åòîì ñðîêîâ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè è àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè. Ð.Á. Óçåíåâà (1986) èññëåäîâàëà ìåòîäîì ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà ïåðèôåðè÷åñêóþ êðîâü èç áåäðåííîé âåíû îò òðóïîâ ëèö, ó êîòîðûõ áûëî óñòàíîâëåíî òî÷íîå âðåìÿ ïîëó÷åíèÿ òðàâìû è íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ïðè÷èíîé ñìåðòè ÿâëÿëèñü ìåõàíè÷åñêèå ïîâðåæäåíèÿ ïðè îòñóòñòâèè âûðàæåííûõ ïðèçíàêîâ íàðóæíîãî è âíóòðåííåãî êðîâîòå÷åíèÿ è ìåõàíè÷åñêàÿ àñôèêñèÿ. Êðîâü áðàëè èç òðóïà è õðàíèëè åå â ñòåêëÿííûõ áþêñàõ ïðè 14-18îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 40-60%. Äëÿ èññëåäîâàíèÿ êðîâü ñìåøèâàëè ñ ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì â ñîîòíîøåíèè 1:5. Íà 1 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ââîäèëè 10 ìêë ñïèíîâîãî çîíäà (ñïèðòîâîãî ðàñòâîðà êàïðèëîâîãî ýôèðà) êîíöåíòðàöèåé 10-2 Ì è ïîñëå 10- è 4-ìèíóòíîé èíêóáàöèè ïðîèçâîäèëè çàïèñü ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êðîâè. Âåñü ìàòåðèàë áûë ðàñïðåäåëåí íà 4 ãðóïïû íàáëþäåíèé: èñõîäíàÿ (êîíòðîëüíàÿ) ãðóïïà - òðóïû 17 ëèö, ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ, ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà 0 ÷àñîâ; ñðàâíèâàåìàÿ ãðóïïà - òðóïû 17 ëèö, ïîãèáøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè; 1-ÿ ãðóïïà - òðóïû 17 ëèö, ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà 1 ÷àñ; 2-ÿ ãðóïïà - òðóïû 17 ëèö, ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà 3 ÷àñà. Èññëåäîâàíèÿ êðîâè ïðîèçâîäèëè â òå÷åíèå 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 21 è 28 ñóòîê ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà. Áàçèðóÿñü íà äàííûõ ëèòåðàòóðû è ñîáñòâåííûõ èññëåäîâàíèÿõ, Ð.Á. Óçåíåâà îòìåòèëà, ÷òî ïðè òðàâìàòè÷åñêîé áîëåçíè, â ÷àñòíîñòè, ïðè òðàâìàòè÷åñêîì øîêå, äèíàìèêà èçìåíåíèé ñèñòåìû êðîâè çàâèñèò îò ñîîòíîøåíèÿ êàòàáîëè÷åñ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 65
êèõ è àíàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, îò òåìïîâ ïðîëèôåðàöèè, äåñòðóêöèè, äèôôåðåíöèðîâêè êëåòîê êîñòíîãî ìîçãà, ðàçðóøåíèÿ êëåòîê êðîâè. Ïðîäóêòû ðàçðóøåíèÿ êëåòîê êðîâè è äðóãèõ òêàíåé ñîçäàþò óñëîâèÿ äëÿ ðåçêîãî ïîâûøåíèÿ óðîâíÿ èììóííûõ êîìïëåêñîâ. Ïðîèñõîäèò óñèëåíèå àíòèîêñèäàíòíîé àêòèâíîñòè è èçìåíåíèå ÷èñëà íåñïàðåííûõ ýëåêòðîíîâ êðîâè, ÷òî, â ñâîþ î÷åðåäü, ïðèâîäèò ê èçìåíåíèÿì ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ.  ðåçóëüòàòå òðàâìû â îðãàíèçìå íàðóøàþòñÿ ïðîöåññû ìåòàáîëèçìà, âñëåäñòâèå ÷åãî óìåíüøàåòñÿ êîíöåíòðàöèÿ êèñëîðîäà, îò êîëè÷åñòâà êîòîðîãî çàâèñèò èíòåíñèâíîñòü ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ. Êîíöåíòðàöèÿ ïðîäóêòîâ èçìåíåííîãî ìåòàáîëèçìà óâåëè÷èâàåòñÿ ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî è ïîñìåðòíîãî ïåðèîäîâ (äî 7 ñóòîê), çàòåì ïîñòåïåííî ñíèæàåòñÿ. Ïðè ñìåðòè îò ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè, ãäå â îñíîâíîì îòñóòñòâóþò ðàçðóøåííûå òðàâìîé òêàíè è îðãàíû, ïîâûøåíèå êîíöåíòðàöèè ïðîäóêòîâ ðàñïàäà êëåòîê íà÷èíàåòñÿ ïîñëå 7 ñóòîê âñëåäñòâèå ïîñòåïåííîãî ðàçðóøåíèÿ öèòîïëàçìàòè÷åñêîé ìåìáðàíû êëåòîê. Ñëåäîâàòåëüíî, èíòåíñèâíîñòü ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ è êîíöåíòðàöèÿ âåùåñòâ, ðåãóëèðóþùèõ ýòîò ïðîöåññ, íàõîäÿòñÿ âî âçàèìíîé çàâèñèìîñòè. Ñ óäëèíåíèåì ñðîêà ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà óâåëè÷èâàåòñÿ êîëè÷åñòâî áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ, âëèÿþùèõ íà áèîôèçè÷åñêèå èçìåíåíèÿ êðîâè, êîòîðûå óäàåòñÿ îáíàðóæèòü ìåòîäîì ýëåêòðîííîãî ìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, èññëåäîâàíèå âåëè÷èí êîíñòàíò ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ ïîçâîëÿåò äîñòîâåðíî óñòàíàâëèâàòü ïðèæèçíåííîñòü è äàâíîñòü âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â ñðîêè 0, 1 è 3 ÷àñà ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ñ ó÷åòîì âëèÿíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà äî 28 ñóòîê. Óñòàíîâëåíî òàêæå, ÷òî êîíöåíòðàöèÿ ýòàíîëà â êðîâè äî 2‰, ïîë è âîçðàñò ïîñòðàäàâøèõ íå îêàçûâàþò äîñòîâåðíîãî âëèÿíèÿ íà èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ (ðèñ. 5). Ïðèâåäåííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î çíà÷èòåëüíîé ïåðñïåêòèâå ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ÝÏÐ ïðè ðåøåíèè êîíêðåòíûõ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ çàäà÷ è äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ìåõà-
Ãëàâà 1
Ñòð. 66
íèçìà ñëîæíûõ ïðîöåññîâ, ïðîõîäÿùèõ â îðãàíàõ è òêàíÿõ îðãàíèçìà ïðè ðàçëè÷íûõ ýíäîãåííûõ è ýêçîãåííûõ âîçäåéñòâèÿõ. Ïî ìíåíèþ ïðèâåäåííûõ èññëåäîâàòåëåé, ìåòîä ÝÏÐ ìîæåò îêàçàòü çíà÷èòåëüíóþ ïîìîùü ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ïîñêîëüêó ïðîöåññû àóòîëèçà íå ïðåïÿòñòâóþò ïîëó÷åíèþ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ (Çàáåëüñêèé À.È., 1982; Òûãëèÿí Í.Â., 1985; Ïàøèíÿí Ã.À., 1988 è äð.).
à
á
Ðèñ. 5. Ñïåêòðû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ èñõîäíîé ãðóïïû è ãðóïïû ñðàâíåíèÿ (1-å ñóòêè). à - ÷åðåç 10 ìèíóò ïîñëå ââåäåíèÿ çîíäà; á - ÷åðåç 40 ìèíóò ïîñëå ââåäåíèÿ çîíäà; - èñõîäíàÿ ãðóïïà; - ãðóïïà ñðàâíåíèÿ.
Ãëàâà 1
Ñòð. 67
Ë.Ã.Êàðàñåâà, Í.Ê.Êóëèêîâ, Â.Â.Ãðîìîâ, Ì.Â.Êèñèí (1978) èçó÷àëè âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîèñõîæäåíèÿ âûñîõøåé êðîâè ìåòîäîì ýëåêòðîííîãî ìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Àâòîðû èññëåäîâàëè êèíåòèêó ãèáåëè êîíöåíòðàöèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ “ñòàðåþùåé” êðîâè ìåòîäîì ÝÏÐ ïî îáùåïðèíÿòîé ìåòîäèêå íà ðàäèîñïåêòðîìåòðå ER-9 ôèðìû “Êàðë Öåéññ” â òðåõñàíòèìåòðîâîì äèàïàçîíå â ìàãíèòíûõ ïîëÿõ îò 700 äî 10000 ýðñòåä. Âòîðóþ ïðîèçâîäíóþ ñèãíàëà ÝÏÐ ðåãèñòðèðîâàëè íà ñàìîïèñöå. Àíàëèòè÷åñêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü ïðèáîðà 1012 ïðè øèðèíå ëèíè 1 ýðñòåä. Èññëåäîâàëè êðîâü ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ ìóæ÷èí 23-30 ëåò, âûñóøåííóþ íà ïðåäìåòíûõ ñòåêëàõ â åñòåñòâåííûõ óñëîâèÿõ (òåìïåðàòóðà 22îÑ, âëàæíîñòü îòíîñèòåëüíàÿ âîçäóõà 80-85%, îñâåùåíèå äíåâíîå). Õðàíèëè â ñðîêè äî 660 ñóòîê. Âûñóøåííàÿ êðîâü ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå, à òàêæå ïðè òåìïåðàòóðå æèäêîãî àçîòà äàâàëà ñëàáî ðàçðåøåííûé ñèãíàë ÝÏÐ ìàëîé èíòåíñèâíîñòè, ïîýòîìó âñå äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè ñ γ -îáëó÷åííûìè îáðàçöàìè êðîâè ïðè òåìïåðàòóðå æèäêîãî àçîòà (77îÊ). Îáëó÷åíèå îáðàçöîâ êðîâè Ñî60 ïðîâîäèëè íà óñòàíîâêå ÃÓÃ-120 ìîùíîñòüþ äîçû 450 ðàä/ñ â èíòåðâàëå ïîãëîùåííûõ äîç 0,54õ106-6,4õ106 ðàä. Àâòîðû òàêæå âûÿñíÿëè âîçìîæíîñòü óñòàíîâëåíèÿ êîððåëÿöèîííîé ñâÿçè ìåæäó “âîçðàñòîì” êðîâè è ñóììàðíîé êîíöåíòðàöèåé ÏÌÖ, îáðàçóþùèõñÿ ïðè γ-ðàäèîëèçå êðîâè. Äëÿ òðåõâàëåíòíîãî æåëåçà, ñîäåðæàùåãîñÿ â ìîëåêóëå ãåìîãëîáèíà, òàêóþ çàâèñèìîñòü óñòàíîâèòü íå óäàëîñü, òàê êàê åãî ñïåêòð êðàéíå ïðîòÿæåí. Îí íàáëþäàëñÿ â îáëàñòè ìàãíèòíûõ ïîëåé 1õ103-3õ103 ýðñòåä è êîððåêòíîå îïðåäåëåíèå êîíöåíòðàöèé ÏÌÖ â ïîëèêðèñòàëëè÷åñêèõ îáðàçöàõ ïðàêòè÷åñêè íå âîçìîæíî. Áûëî èçó÷åíî èçìåíåíèå ñóììàðíîé êîíöåíòðàöèè ÏÌÖ ïðîäóêòîâ ðàäèîëèçà áåëêà êðîâè (g - 2,003) â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè ñóõîé êðîâè. Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëè öåíòðàëüíóþ ÷àñòü ñïåêòðà ÝÏÐ êðîâè, îòâåòñòâåííóþ çà ðàäèêàëû áåëêîâîé ïðèðîäû. Îíà èìååò íåñêîëüêî àñèììåòðè÷íóþ ìíîãîêîìïîíåíòíóþ ñòðóêòóðó ñ âåëè÷èíîé g-ôàêòîðà, ðàâíîé 2,003. Ïîëóøèðèíà öåíòðàëüíîé ëèíèè 16 ýðñòåä, îáùàÿ ïðîòÿæåííîñòü ñïåêòðà 79±1 ýðñòåä. Ñïåêòð ÝÏÐ γ-îáëó÷åííîé êðîâè ïî ñâîèì ðàäèîñïåêòðîñêîïè÷åñêèì õàðàêòåðèñòèêàì àíàëîãè÷åí ñèãíàëàì ÝÏÐ îò îáëó÷åííîãî ãåìîãëîáèíà è äðóãèõ ïîäîáíûõ åìó áåëêîâ. Èññëåäîâàëè âûñóøåííóþ êðîâü 10
Ãëàâà 1
Ñòð. 68
äîíîðîâ, õðàíèâøóþñÿ â òå÷åíèå îäíèõ ñóòîê. Âñå îáðàçöû êðîâè ïðè ïîãëîùåííîé äîçå 0,54õ106 ðàä èìåëè ïðàêòè÷åñêè îäèíàêîâóþ êîíöåíòðàöèþ ÏÌÖ, âåëè÷èíà êîòîðîé êîëåáàëàñü îò 6,6õ1017 1/ã äî 7,0õ1017 1/ã (ñðåäíÿÿ êîíöåíòðàöèÿ 6,8õ1017 1/ã ±10%). Òå æå îáðàçöû õðàíèëè äî 660 ñóòîê.  òå÷åíèå ïåðâîãî ìåñÿöà èññëåäîâàëè êàæäûå òðîå ñóòîê, à çàòåì ÷åðåç 100, 260 è 660 ñóòîê õðàíåíèÿ. Îáëó÷åíèå êðîâè ïðîâîäèëè â èíòåðâàëå ïîãëîùåííûõ äîç îò 0,54õ106 äî 2,5 õ106 ðàä, ò.å. íà ëèíåéíîì ó÷àñòêå êðèâîé íàêîïëåíèÿ. Ñ óâåëè÷åíèåì “âîçðàñòà” êðîâè êîíöåíòðàöèÿ ÏÌÖ íàáëþäàåòñÿ ëèøü íà÷èíàÿ ñ 6-õ ñóòîê õðàíåíèÿ è äî 30 ñóòîê. Ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè ÏÌÖ çà ýòîò ïåðèîä ñîñòàâèëî 35% îò ïåðâîíà÷àëüíîé âåëè÷èíû.  äàëüíåéøåì ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè ÏÌÖ íå îòìå÷àëîñü. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè îáðàçîâàíèÿ ñëåäîâ êðîâè â ïðåäåëàõ 30 ñóòîê ìîæíî ïðèìåíèòü èçâåñòíóþ ôîðìóëó: Ct=C0-Kt, ãäå Ct - êîíöåíòðàöèÿ ÏÌÖ èññëåäóåìîãî îáðàçöà; C0 - íà÷àëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ, t - äàâíîñòü îáðàçîâàíèÿ ñëåäîâ êðîâè; Ê - ïîñòîÿííàÿ, îïðåäåëÿåìàÿ ãðàôè÷åñêè ïî íàêëîíó ïðÿìîé â êîîðäèíàòàõ Ct è t. Îòñþäà äàâíîñòü îáðàçîâàíèÿ ïÿòíà âûñóøåííîé êðîâè:
t=
Co - Ct K
,
(14)
Ð.Á. ×åðíîâà, À.Ì. Ãàðååâ è Í.Â. ×åðíîâ (1994) ïðèìåíèëè ìåòîä ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà äëÿ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. Èññëåäîâàëè ïåðèôåðè÷åñêóþ êðîâü â äèíàìèêå ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà îò îäíîãî ìåñÿöà. Òðóïû ñ èçâåñòíûì âðåìåíåì òðàâìû è íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ïðè÷èíîé ñìåðòè áûëè ìåõàíè÷åñêèå ïîâðåæäåíèÿ â îòñóòñòâèè âûðàæåííûõ ïðèçíàêîâ íàðóæíîãî è âíóòðåííåãî êðîâîòå÷åíèÿ. Áûëè èññëåäîâàíèÿ 3 ãðóïïû íàáëþäåíèé: 1-ÿ ãðóïïà (êîíòðîëüíàÿ) - ñìåðòü íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ (0 ÷àñîâ); 2-ÿ - ìåõàíè÷åñêàÿ òðàâìà ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà - 1 ÷àñ; 3-ÿ - äëèòåëüíîñòü ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ñîñòàâèëà 3 ÷àñà. Èññëåäîâàíèå ïðîâîäèëè â òå÷åíèå 1 ìåñÿöà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Êðîâü (5 ìë) èç áåäðåííîé âåíû õðàíèëè â ñòåêëÿííûõ áþêñàõ ïðè òåìïåðàòóðå 14-18îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 40-60%. Êðîâü ñìåøèâàëè ñ ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì
Ãëàâà 1
Ñòð. 69
1:5. Íà 1 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ââîäèëè 10 ìêë ñïèíîâîãî çîíäà (ñïèðòîâîé ðàñòâîð êàïðèëîâîãî ýôèðà) êîíöåíòðàöèåé 10-2 Ì è ïîñëå 10-è è 40-ìèíóòíîé èíêóáàöèè çàïèñûâàëè ÝÏÐ-ñïåêòðû êðîâè íà îòå÷åñòâåííîì ðàäèîñïåêòðîìåòðå “Ðóáèí”.  ðåçóëüòàòå òðàâìû â îðãàíèçìå íàðóøàþòñÿ ïðîöåññû ìåòàáîëèçìà, âñëåäñòâèå ÷åãî óìåíüøàåòñÿ êîíöåíòðàöèÿ êèñëîðîäà, îò êîëè÷åñòâà êîòîðîãî çàâèñèò èíòåíñèâíîñòü ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ.  èñõîäíîé ãðóïïå íàáëþäåíèé â ïåðâûå òðîå ñóòîê ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè çíà÷åíèÿ âåëè÷èíû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñîñòàâèëè 1,12±0,05, íà 4-5-å ñóòêè 1,37±0,06, íà 6-7-å - 1,6±0,07, ê êîíöó 2-é íåäåëè - 1,4±0,06, ê êîíöó 3-é íåäåëè - 1,2±0,07 è ê êîíöó ìåñÿöà - 1,01±0,06. Äëÿ 2-é è 3-é ãðóïï çíà÷åíèÿ âåëè÷èí ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ ñîñòàâèëè ñîîòâåòñòâåííî: 1,76±0,06 è 1,98±0,05; 2,01±0,05 è 2,22±0,07; 2,28±0,07 è 2,51±0,05; 2,07±0,08 è 2,28±0,05; 1,73±0,06 è 2,21±0,06; 1,49±0,07 è 1,91±0,07. Êîíöåíòðàöèÿ ïðîäóêòîâ èçìåíåííîãî ìåòàáîëèçìà óâåëè÷èâàåòñÿ ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî è ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäîâ (äî 7 ñóòîê), çàòåì ïîñòåïåííî ñíèæàåòñÿ. Ñ óäëèíåíèåì ñðîêà ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà óâåëè÷èâàåòñÿ êîëè÷åñòâî áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ âåùåñòâ â êðîâè, âëèÿþùèõ íà åå áèîôèçè÷åñêèå ñâîéñòâà, ò.å. îòìå÷åíà ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíàÿ çàâèñèìîñòü ìåæäó äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà è çíà÷åíèÿìè âåëè÷èí ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ. Êîíöåíòðàöèÿ ýòàíîëà â êðîâè äî 2‰ íå îêàçûâàåò äîñòîâåðíîãî âëèÿíèÿ íà èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êðîâè. Ïîäòâåðæäåíà âîçìîæíîñòü óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ñ äëèòåëüíîñòüþ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäîâ 0, 1 è 3 ÷àñà ïðè äàâíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà äî 28 ñóòîê ìåòîäîì ÝÏÐ. 1.6. Ïîäãîòîâêà îáðàçöîâ è èññëåäîâàíèå ìåòîäîì ÝÏÐ Êîñòíûé ìîçã. Èç íåïîâðåæäåííîãî êðûëà ïîäâçäîøíîé êîñòè ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì ïîëó÷àþò ïóòåì âûìûâàíèÿ îáðàçöû âçâåñè êîñòíîãî ìîçãà è ïîìåùàþò â ñòåêëÿííûå áþêñû, êîòîðûå òðàíñïîðòèðóþò â ëàáîðàòîðèþ â òåðìîñå, çàïîëíåííîì òîë÷åíûì ëüäîì. Çàòåì îáðàçöû âçâåñè êî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 70
ñòíîãî ìîçãà ñòàíäàðòèçèðóþò íà ìèêðîýëåêòðîôîòîêîëîðèìåòðå (òèïà ÌÊÌÔ-1) äî âåëè÷èíû ïîãëîùåíèÿ ñâåòà 30-40%, ïðè äëèíå ñâåòîâîé âîëíû 520 íì.  ïðåïàðàòû êîñòíîãî ìîçãà äîáàâëÿëè äâà îáúåìíûõ ïðîöåíòà ðàñòâîðà ñïèíîâîãî çîíäà 2,26,6-òåòðàìåòèë-4-êàïðèëîêñèïèïåðèäèí-îäèí-îêñèëà (“êàïðèëîâîãî ýôèðà”) â ýòàíîëå, êîíöåíòðàöèåé 1õ10 -2-1õ10-3 Ì. Ïîñëå èíêóáàöèè â òå÷åíèå 10 è 40 ìèíóò îáðàçöû íàáèðàþò â òîíêîñòåííûé ñòåêëÿííûé êàïèëëÿð îáúåìîì íå ìåíåå 70 ìêë è ïîìåùàþò â ðåçîíàòîð ðàäèîñïåêòðîìåòðà. Âû÷èñëÿþò êîíñòàíòó ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êîñòíûì ìîçãîì è ñîïîñòàâëÿþò åå ñ ãðàôè÷åñêîé çàâèñèìîñòüþ äèíàìèêè êîíñòàíòû â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Äëÿ óìåíüøåíèÿ âåðîÿòíîñòè âîçìîæíîé îøèáêè ïðîèçâîäÿò òðåõêðàòíîå èçó÷åíèå ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êîñòíîãî ìîçãà íà ïðîòÿæåíèè 2-3 âðåìåííûõ èíòåðâàëîâ. Ïðè õðàíåíèè îáðàçöîâ âçâåñè êîñòíîãî ìîçãà ïðè 46îÑ â òå÷åíèå òðåõ ñóòîê è 18-20îÑ â òå÷åíèå 6 ÷àñîâ íå îêàçûâàåòñÿ ñóùåñòâåííîå âëèÿíèå íà èçìåíåíèå ïàðàìåòðîâ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ (Ïðîøóòèí Â.Ë., 1988). Êðîâü. Ïåðèôåðè÷åñêóþ êðîâü áåðóò èç áåäðåííîé âåíû ñ ïîìîùüþ øïðèöà è èíúåêöèîííîé èãëû â êîëè÷åñòâå 0,3 ìë (äëÿ òðåõêðàòíîãî èññëåäîâàíèÿ). Îáðàçöû êðîâè ìîæíî õðàíèòü ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òå÷åíèå 6 ÷àñîâ, à ïðè òåìïåðàòóðå 4îÑ - äî òðåõ ñóòîê áåç èçìåíåíèÿ ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ êðîâè è ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà åå (Óçåíåâà Ð.Á., 1986). Ì.À. Îãàíåñÿí (1984) ðåêîìåíäóåò áðàòü êðîâü èç ïîëîñòè ñåðäöà, ñìåøèâàòü åå ñ ãåïàðèíîì â ðàâíûõ ñîîòíîøåíèÿõ. Ïîëó÷åííóþ ñìåñü ðàçáàâèòü ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì â ñîîòíîøåíèè 2:5, ïîñëå ÷åãî ê ïîëó÷åííîìó ñóáñòðàòó â îáúåìå 1 ìêë äîáàâèòü ðàâíîå êîëè÷åñòâî ðàñòâîðà ñïèíîâîãî çîíäà. Ïîëó÷åííóþ ñìåñü ïîìåùàþò â êâàðöåâóþ àìïóëó è ðåãèñòðèðóþò ÝÏÐ-ñïåêòð ñïèíîâûõ çîíäîâ, ïî êîòîðûì ðàññ÷èòûâàþò êîíñòàíòó ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ. Ïðèãîòîâëåíèå îáðàçöîâ êðîâè ïî äàííîé ìåòîäèêå äàåò ïîãðåøíîñòü â îïðåäåëåíèè êîíñòàíòû ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ äî 0,1%. Çàïèñü ïîêàçàíèé ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí” ïðîèçâîäèëè íà äâóõêîîðäèíàòíîé ñàìîïèøóùåé ïðèñòàâêå. Ïîñòîÿííàÿ òåìïåðàòóðà â ðåçîíàòîðå ðàäèîñïåêòðîìåòðà, êóäà ïî-
Ãëàâà 1
Ñòð. 71
ìåùàþò èññëåäóåìûé îáðàçåö, ïîääåðæèâàåòñÿ ñ ïîìîùüþ òåðìîñòàáèëèçàòîðà “Äèàïàçîí” è ðàâíÿåòñÿ 29îÑ. Ïðîèçâîäÿò ðåãèñòðàöèþ ñèãíàëà ñïèíîâîãî çîíäà, èíêóáèðóåìîãî ñ êðîâüþ. Ïîä äåéñòâèåì èîíîâ âîäîðîäà (áîëüøåé ÷àñòüþ ýòî ñóëüôãèäðèëüíûå ãðóïïû áåëêîâûõ ìîëåêóë) ñïèíîâûå çîíäû âîññòàíàâëèâàþòñÿ ñ îäíîâðåìåííîé ïîòåðåé ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ. Ñêîðîñòü ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà â êðîâè èññëåäóþò ïóòåì ìíîãîêðàòíûõ çàïèñåé öåíòðàëüíîé êîìïîíåíòû ÝÏÐ-ñïåêòðà çîíäà ñ èíòåðâàëîì 60 ñ, ñ ïîñëåäóþùèì èçìåðåíèåì åå àìïëèòóäû (À).  êà÷åñòâå ñïèíîâîãî çîíäà ìîæíî èñïîëüçîâàòü êàïðèëîâûé ýôèð, èìåþùèé õàðàêòåðíóþ òðèïëåòíóþ ñòðóêòóðó ÝÏÐ-ñïåêòðà (ðèñ. 6).
Ðèñ. 6. ÝÏÐ-ñïåêòð êàïðèëîâîãî ýôèðà. Óñëîâèÿ çàïèñè ìîãóò áûòü ïðè èññëåäîâàíèè êðîâè ñëåäóþùèìè: · ïàäàþùàÿ ìîùíîñòü ýëåêòðîìàãíèòíîãî èçëó÷åíèÿ 0,25 ìÂò; · À - àìïëèòóäà ìîäóëÿöèè ðàâíà 1 Ãñ. Èñïîëüçîâàíèå âûñîêèõ ÷àñòîò ìîäóëÿöèè ïðèâîäèò ê äîáàâî÷íîìó óøèðåíèþ ëèíèé ïîãëîùåíèÿ è èñêàæåíèþ ñïåêòðà, ÷òî óìåíüøàåò ðàçðåøàþùóþ ñïîñîáíîñòü ñèñòåìû; · Í - äèàïàçîí ðàçâåðòêè 3150-3200 Ý.
Ãëàâà 1
Ñòð. 72
Ñ öåëüþ îáíàðóæåíèÿ ðåçîíàíñíîãî ïîãëîùåíèÿ â ëþáîé ñèñòåìå, ñîäåðæàùåé íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, íåîáõîäèìî 4 îñíîâíûõ êîìïîíåíòà: à) äëÿ ñîçäàíèÿ ïîñòîÿííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ íóæåí ñèëüíûé ìàãíèò, ñîçäàþùèé ñòàáèëüíîå îäíîðîäíîå ïîñòîÿííîå ìàãíèòíîå ïîëå íàïðÿæåííîñòüþ îêîëî 3000-4000 Ý (åñëè èññëåäîâàíèå âåäóò ïðè äëèíå âîëíû 3,2 ñì); á) èñòî÷íèê ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ, äàþùèé ìîíîõðîìàòè÷åñêèå âîëíû l=3,2 ñì); â) ñïåöèàëüíîå óñòðîéñòâî, â êîòîðîì ïàäàþùàÿ ìîùíîñòü êîíöåíòðèðóåòñÿ íà îáðàçöå, ÷òî ïîçâîëÿåò îáíàðóæèòü åå ïîãëîùåíèå (îáû÷íî ýòî ïîëûé ðåçîíàòîð, ïîìåùàåìûé ìåæäó ïîëþñàìè ìàãíèòà); ã) óñòðîéñòâî äëÿ íåïðåðûâíîé çàïèñè ñïåêòðîâ ÝÏÐ. Ðàáî÷èå õàðàêòåðèñòèêè ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí” ñëåäóþùèå: ðàáî÷àÿ ÷àñòîòà êëèñòðîíà Ê-54, nðåç.=9400 ÌÃö, ÷àñòîòà Â× ìîäóëÿöèè - nìîä.=100 êÃö, íàïðÿæåííîñòü ìàãíèòíîãî ïîëÿ H0, óñòàíàâëèâàåìàÿ â ïðåäåëàõ îò 2000 äî 7000 Ý (ýðñòåä), äèàïàçîí ðàçâåðòêè ïîëÿ t=0,1±H , óñòàíàâëèâàåòñÿ â ïðåäåëàõ îò 5 äî 1200 Ý, ñêîðîñòü ñâèíèðîâàíèÿ ðåãóëèðóåòñÿ ñòóïåí÷àòî îò 5 äî 500 ý/ìèí, àòòåíþàòîð ñèãíàëà ÝÏÐ ïðåäóñìàòðèâàåò îñëàáëåíèå àìïëèòóäû ñèãíàëà îò 100 äî 1%, ïîñòîÿííàÿ âðåìåíè ñàìîïèñöà ðåãóëèðóåòñÿ â ïðåäåëàõ 0,05; 0,01; 1; 10 ñ. Çàïèñü ïîêàçàíèé ðàäèîñïåêòðîìåòðà ïðîèçâîäèòñÿ íà äâóõêîîðäèíàòíîé ñàìîïèøóùåé ïðèñòàâêå.  ðåãèñòðàöèè ñèãíàëîâ îò ïðèáîðà èñïîëüçóåòñÿ îñöèëëîãðàô. Ëó÷ îñöèëëîãðàôà è ïåðî ñàìîïèñöà ðàçâîðà÷èâàåòñÿ ïî îñè ÎÕ ñèíôàçíî ñ ðàçâåðòêîé ìàãíèòíîãî ïîëÿ, à ïî îñè OY ëó÷ èëè ïåðî ñàìîïèñöà îòêëîíÿåòñÿ íàïðÿæåíèåì, ñíÿòûì ñ ñèíõðîííîãî äåòåêòîðà.  êà÷åñòâå ñïèíîâîãî çîíäà èñïîëüçóþò ðàñòâîð ñïèíìå÷åííîãî 2,2-6,6-òåòðàìåòèë-4-êàïðèëîèë-îêñèïèïåðèäèí-îäèí-îêñèëà (êàïðèëîâîãî ýôèðà) â ýòàíîëå. Êîíöåíòðàöèÿ ñïèíîâîãî çîíäà, ðàñòâîðåííîãî â 96% ýòèëîâîì ñïèðòå, íà ïðîòÿæåíèè âñåãî èññëåäîâàíèÿ ðàâíÿåòñÿ ñòðîãî îïðåäåëåííîé âåëè÷èíå 1õ10-2 Ì. Êðîâü è ðàñòâîð òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò, ñìåñü íàáèðàþò â òîíêîñòåííûé ñòåêëÿííûé êàïèëëÿð ñ âíóòðåííèì äèàìåòðîì íå áîëåå 0,5 ìì. Ñìåñü ñïèíìå÷åííîãî ðàñòâîðà â êàïèëëÿðå ñîñòàâëÿåò îáúåì íå áîëåå 40 ìêë. Îäèí êîíåö êàïèëëÿðà çàêðûâàþò êîëïà÷êîì âî èçáåæàíèå ïîòåðè èññëåäóåìîé ñìåñè. Ïîä äåéñòâèåì èîíîâ âîäîðîäà (áîëüøåé ÷àñ-
Ãëàâà 1
Ñòð. 73
òüþ ýòî ñóëüôãèäðèëüíûå ãðóïïû áåëêîâûõ ìîëåêóë) ñïèíîâûå çîíäû âîññòàíàâëèâàþòñÿ ñ îäíîâðåìåííîé ïîòåðåé ïàðàìàãíèòíûõ ñâîéñòâ. Êàê ïîêàçàëè èññëåäîâàíèÿ, öåíòðàëüíàÿ êîìïîíåíòà ÝÏÐ-ñïåêòðîâ èìååò íàèìåíüøèå êîëåáàíèÿ çíà÷åíèé îò âîçäåéñòâèÿ ôàêòîðîâ, íå ñâÿçàííûõ íåïîñðåäñòâåííî ñ ïðîâåäåíèåì ýêñïåðèìåíòà. Óñëîâèÿ çàïèñè ñïåêòðîâ ïîäáèðàþò ýìïèðè÷åñêè ñ âûáîðîì îïòèìàëüíûõ çíà÷åíèé äëÿ ñîêðàùåíèÿ âåëè÷èí ïîìåõ, â ÷àñòíîñòè: · ïàäàþùàÿ ìîùíîñòü ýëåêòðîííîãî èçëó÷åíèÿ - 25 ìÂò. Êîíòðîëü çà èçìåíåíèåì ìîùíîñòè â òå÷åíèå âñåãî âðåìåíè çàïèñè ñïåêòðîâ ïðîèçâîäèòñÿ îáðàçöîì ñòàíäàðòíîãî ìàðãàíöà, êîòîðûé òàêæå ïîìåùàþò â ðåçîíàòîð ïðèáîðà. Âûáîð òàêîãî çíà÷åíèÿ ìîùíîñòè îáóñëîâëåí òåì, ÷òî óâåëè÷åíèå ìîùíîñòè ìîæåò ïðèâåñòè ê òàê íàçûâàåìîìó ÿâëåíèþ íàñûùåíèÿ ïî ìîùíîñòè â ÝÏÐ ïîãëîùåíèÿ, ñóòü êîòîðîãî çàêëþ÷àåòñÿ â ñëåäóþùåì.  ìîëåêóëàõ èññëåäóåìîãî âåùåñòâà ïîä âëèÿíèåì ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ ðåçîíàíñíîé ÷àñòîòû ýëåêòðîíû ñ íèæíåãî ýíåðãåòè÷åñêîãî óðîâíÿ ïåðåõîäÿò íà âåðõíèé ñ ïîãëîùåíèåì ýíåðãèè è îäíîâðåìåííûì èçìåíåíèåì íàïðàâëåíèÿ ñïèíà. Îäíîâðåìåííî ñ ýòèì ïðîöåññîì ïðîèñõîäèò îáðàòíûé, ò.å. âîçâðàùåíèå ýëåêòðîíîâ íà ïðåæíèé óðîâåíü, òàê íàçûâàåìàÿ èíäóöèðîâàííàÿ ýìèññèÿ. Ñóììàðíîå êîëè÷åñòâî ýëåêòðîíîâ íà íèæíåì óðîâíå íåñêîëüêî âûøå, ÷åì íà âåðõíåì, ïîýòîìó ïîãëîùåíèå îáû÷íî ïðåâûøàåò èíäóöèðîâàííóþ ýìèññèþ. Èìåííî ýòîò ïåðåõîä îáóñëîâëèâàåò ðåçîíàíñíîå ïîãëîùåíèå. Î÷åâèäíî, ÷òî åñëè ïåðåõîäû ìåæäó ýíåðãåòè÷åñêèìè óðîâíÿìè ïðîèñõîäÿò òîëüêî ïî îäíîìó ïóòè - ïîãëîùåíèå è èíäóöèðîâàííàÿ ýìèññèÿ, òî êîëè÷åñòâî ýëåêòðîíîâ íà îáîèõ óðîâíÿõ ñðàâíèâàåòñÿ. Êàê òîëüêî ýòî ïðîèçîéäåò, ìèêðîâîëíîâîå ïîãëîùåíèå ïðåêðàòèòñÿ, ñëåäîâàòåëüíî, èñ÷åçíåò ñèãíàë ÝÏÐ. Äàííîå ñîñòîÿíèå è íàçûâàåòñÿ íàñûùåíèåì ïî ìîùíîñòè, êîòîðîå ÿâëÿåòñÿ ôàêòîðîì, ñíèæàþùèì òî÷íîñòü ïîëó÷àåìûõ ðåçóëüòàòîâ. · àìïëèòóäà ìîäóëÿöèè â èññëåäîâàíèÿõ ðàâíÿëàñü 0,4õ10 Ãñ. Èñïîëüçîâàíèå âûñîêèõ ÷àñòîò ìîäóëÿöèè ïðèâîäèò ê äîáàâî÷íîìó óøèðåíèþ ëèíèé ïîãëîùåíèÿ è èñêàæåíèÿ ñïåêòðà, óìåíüøàÿ ðàçðåøàþùóþ ñïîñîáíîñòü ñèñòåìû; · äèàïàçîí ðàçâåðòêè ðàâíÿåòñÿ 3150-3200 Ý;
Ãëàâà 1
Ñòð. 74
· ñêîðîñòü ðàçâåðòêè ìàãíèòíîãî ïîëÿ è ïîñòîÿííàÿ âðåìåíè ðåãèñòðèðóþùåãî óñòðîéñòâà ïîäáèðàþò òàê, ÷òîáû èñêàæåíèå ëèíèé ïîãëîùåíèÿ áûëè ìèíèìàëüíûìè. Èç ïðèâåäåííîãî ñëåäóåò, ÷òî äëÿ òîãî, ÷òîáû â ëþáîé ñèñòåìå, ñîäåðæàùåé íåñïàðåííûå ýëåêòðîíû, ìîæíî áûëî îáíàðóæèòü ðåçîíàíñíîå ïîãëîùåíèå íåîáõîäèìû 4 îñíîâíûõ êîìïîíåíòà: à) äëÿ ñîçäàíèÿ ïîñòîÿííîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ íåîáõîäèì ñèëüíûé ìàãíèò, ñîçäàþùèé ñòàáèëüíîå îäíîðîäíîå ïîñòîÿííîå ìàãíèòíîå ïîëå íàïðÿæåííîñòüþ 3000-4000 Ý (åñëè èññëåäîâàíèÿ âåäóòñÿ íà äëèíå âîëíû 3,2 ñì); á) èñòî÷íèê ìèêðîâîëíîâîãî èçëó÷åíèÿ, èçëó÷àþùèé ìîíîõðîìàòè÷åñêèå âîëíû (l=3,2 ñì); â) ñïåöèàëüíîå óñòðîéñòâî, â êîòîðîì ïàäàþùàÿ ìîùíîñòü êîíöåíòðèðóåòñÿ íà îáðàçöå, ÷òî ïîçâîëÿåò îáíàðóæèòü åå ïîãëîùåíèå â ïîëûé ðåçîíàòîð, ïîìåùàåìûé ìåæäó ïîëþñàìè ìàãíèòà; ã) óñòðîéñòâî äëÿ çàïèñè ñïåêòðîâ ÝÏÐ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 75 Ãëàâà 2. ÌÅÒÎÄ ÕÅÌÈËÞÌÈÍÅÑÖÅÍÖÈÈ
Ýôôåêò ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ áûë âïåðâûå îïèñàí îòå÷åñòâåííûì ó÷åíûì À.Ã.Ãóðâè÷åì â 1934 ãîäó, õîòÿ åùå â äâàäöàòûõ ãîäàõ îí îòìåòèë ñïîñîáíîñòü æèâîé òêàíè ê èçëó÷åíèþ â îïòè÷åñêîé îáëàñòè ýëåêòðîìàãíèòíîãî ñïåêòðà. Îäíàêî, ëèøü â íà÷àëå 60-õ ãîäîâ íà÷àëè àêòèâíî ïðîâîäèòüñÿ èññëåäîâàíèÿ ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé áèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåì, ïîñêîëüêó áèîëîãè÷åñêàÿ íàóêà ïðîÿâèëà èíòåðåñ ê èçó÷åíèþ ÿâëåíèé íà ñóáìîëåêóëÿðíîì, ýëåêòðîííîì óðîâíå (Ðèä Ñ., 1960; Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1965; SaentGyorgyi A., 1941). Âíåäðåíèå â ïðàêòèêó íîâûõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ áûëî îáóñëîâëåíî ïðèìåíåíèåì õåìèëþìèíåñöåíöèè (ÕË). Ïðåèìóùåñòâåííî îòå÷åñòâåííûìè èññëåäîâàòåëÿìè áûëè ñôîðìóëèðîâàíû îñíîâíûå ïîëîæåíèÿ î ðîëè ðàäèêàëüíûõ ïðîöåññîâ â æèâîì îðãàíèçìå. Óñòàíîâëåíî, ÷òî õåìèëþìèíåñöåíöèÿ íàáëþäàåòñÿ ïðè ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíîì ïåðåêèñíîì îêèñëåíèè ëèïèäîâ (ÏÎË) (Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1966, 1972; Íåéôàõ Å.À., 1971; Æóðàâëåâ À.È., 1975; Îëåíåâ Â.È., 1976; Zu G., 1973; Fujita T., 1973; Shoaf A., 1974). Íàó÷íîé øêîëîé Á.Í.Òàðóñîâà (1961-1962) äîêàçàíî íàëè÷èå ÕË â áèîëîãè÷åñêèõ òêàíÿõ, ÷òî ïîçâîëèëî âûñêàçàòü îäíî èç îñíîâíûõ ïîëîæåíèé î òîì, ÷òî ðàçâèòèå öåïíîãî ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíîãî îêèñëåíèÿ â òêàíÿõ ìîæåò áûòü ïàòîãåíåòè÷åñêîé îñíîâíîé íåêîòîðûõ ïàòîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé (Òàðóñîâ Á.Í., 1954, 1962).  ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé À.È.Æóðàâëåâ (1960, 1963, 1968) îòìåòèë, ÷òî ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíîå, íå ôåðìåíòíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ â íîðìå íåïðåðûâíî ïðîèñõîäèò âî âñåõ òêàíÿõ æèâûõ îðãàíèçìîâ è åãî óðîâåíü ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ïîêàçàòåëåé ãîìåîñòàçà. Ðàçëè÷íûå ïàòîëîãè÷åñêèå ñîñòîÿíèÿ ïðèâîäÿò ê èçìåíåíèþ ïðîöåññîâ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ, ïîÿâëåíèþ ðàçëè÷íûõ ïðîäóêòîâ ðåàêöèè è âûñîêîàêòèâíûõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ, âûçûâàþùèõ íåðåäêî íåîáðàòèìûå èçìåíåíèÿ â îðãàíèçìå (Òàðóñîâ Á.Í., 1954, 1961, 1962, 1967; Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1966; Çàêàðÿí À.Å., 1967; Áîíäàðåâ È.Ì. è ñîàâò., 1972; Øàðîâ À.Ï., 1974; Ôåäîðîâ Þ.Ë.,
Ãëàâà 2
Ñòð. 76
1974; Òóðîâåö Ã.Ë., 1974; Æóðàâëåâ À.È., 1975; Êðè÷åâñêàÿ À.À. è ñîàâò., 1976; Demopoulos H., 1973; Toppel A., 1973; Kagan V., 1977; Bernard D., 1977). 2.1. Òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå, âîçíèêàþùåå ïðè õèìè÷åñêèõ ðåàêöèÿõ, íàçûâàþò õåìèëþìèíåñöåíöèåé. Ñóùíîñòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â òîì, ÷òî èîíû Fe2+, äîáàâëåííûå â ñèñòåìó, ñîäåðæàùóþ íåíàñûùåííûå ëèïèäû, íà÷èíàþò îêèñëÿòüñÿ ðàñòâîðåííûì êèñëîðîäîì ñ îáðàçîâàíèåì ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ âîäû (ÎÍ è HO2). Ýòî ïðèâîäèò ê îáðàçîâàíèþ ïåðåêèñåé ëèïèäîâ (ROOH), êîòîðûå ðàçëàãàþòñÿ ïðèñóòñòâóþùèìè â ðàñòâîðå èîíàìè Fe2+ c îáðàçîâàíèåì ñâîáîäíûõ ëèïèäíûõ ðàäèêàëîâ (RO, RO2). Âçàèìîäåéñòâèå ðàäèêàëîâ RO 2 ìåæäó ñîáîé ïðèâîäÿò ê îáðàçîâàíèþ êâàíòà õåìèëþìèíåñöåíöèè. Ýòîò ïðîöåññ èìååò ñàìîóñêîðÿþùèé öåïíîé õàðàêòåð.  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñ÷èòàþò, ÷òî ìåìáðàíû êëåòîê è êëåòî÷íûõ îðãàíåëë ñîñòîÿò èç íåñêîëüêèõ ñëîåâ áåëêà è çàêëþ÷åííîãî ìåæäó íèìè ñëîÿ ëèïèäîâ (Àâöûí À.Ï., Øàõëàìîâ Â.À., 1975; Ãóáàíîâ Í.È. è ñîàâò., 1978). Ïðè÷åì, íà äîëþ ëèïèäîâ ïðèõîäèòñÿ â ñðåäíåì 25-30% ñóõîé ìàññû ìåìáðàí, è îíè â îñíîâíîì ïðåäñòàâëåíû ôîñôîëèïèäàìè (Ëüâîâà Î.Ô., 1967; Mahrla Z. et al, 1974).  ìåìáðàíàõ ìèòîõîíäðèé ôîñôîëèïèäû ïðåäñòàâëÿþò 90% âñåõ ëèïèäîâ, â ýðèòðîöèòàõ îêîëî 60% (Brien J.O., 1967). Âíóòðåííÿÿ ìåìáðàíà ìèòîõîíäðèé ïå÷åíè ñîäåðæèò ìåíüøå ôîñôîëèïèäîâ, ÷åì íàðóæíàÿ (Zevy M. et al, 1967). V.Ski pski (1965) âûÿâèë â ìåìáðàíàõ áîëüøîå êîëè÷åñòâî ñâîáîäíûõ æèðíûõ êèñëîò è î÷åíü ìàëî ãëèöåðèäîâ. Ïî äàííûì G.Gets, W.Bartley (1961), â ôîñôîëèïèäàõ ìèòîõîíäðèé èç âñåõ îñòàòêîâ æèðíûõ êèñëîò 57,7% ïðèõîäèòñÿ íà íåíàñûùåííûå æèðíûå êèñëîòû: îëåèíîâàÿ - 12,2%, ëèíîëåâàÿ 20,6%, àðàõèäîíîâàÿ - 15,4% è ò.ï. Æèðíî-êèñëîòíûé ñîñòàâ ðàçíûõ ôîñôîëèïèäîâ êëåòî÷íûõ ìåìáðàí êà÷åñòâåííî îäèíàêîâ, íî èìåþòñÿ íåêîòîðûå êîëè÷åñòâåííûå ðàçëè÷èÿ. Ñòîëü çíà÷èòåëüíîå êîëè÷åñòâî íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò â ìåìáðàíàõ êëåòîê ñîçäàåò áëàãîïðèÿòíûå óñëîâèÿ äëÿ ïðîòåêàíèÿ ðåàêöèé ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ, îñîáåííî â ñëó÷àÿõ ïàòîëîãèè, êîãäà îñëàáåâàþò ñèñòåìû, ðåãóëèðóþùèå èíòåíñèâíîñòü ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûõ ïðîöåññîâ â îðãàíèçìå.
Ãëàâà 2
Ñòð. 77
Äîñòîèíñòâî ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè çàêëþ÷àåòñÿ â âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè è âîçìîæíîñòè íåïîñðåäñòâåííî ñëåäèòü çà êèíåòèêîé îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ áåç íàðóøåíèÿ ñòðóêòóðû îáúåêòà, â îòëè÷èå îò äðóãèõ ìåòîäîâ, íóæäàþùèõñÿ â ïðåäâàðèòåëüíîé ýêñòðàêöèè ëèïèäîâ (×åðåìñèíà Ç.Ï., 1975; Stainley P., 1972; Seliger H., 1972; Ewets Z., 1976). Îòäåëüíûìè èññëåäîâàíèÿìè äîêàçàíà âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàíèÿ ìåòîäà ñïîíòàííîé ÕË äëÿ îöåíêè èçìåíåíèé, ïðîèñõîäÿùèõ â ìûøå÷íîé òêàíè ïðè ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèÿõ è â óñëîâèÿõ åå ïåðåæèâàíèÿ (Äæàôàðîâ À.È. è ñîàâò., Òàðóñîâ Á.Í. è ñîàâò., 1969, 1975; Ãóñåéíîâ Ò.Ì. è ñîàâò., 1975). Åäèíñòâåííûì çàòðóäíåíèåì èññëåäîâàíèé ìûøå÷íîé òêàíè, ïî ìíåíèþ ïðèâåäåííûõ èññëåäîâàòåëåé, ÿâëÿåòñÿ î÷åíü íèçêèé óðîâåíü ñïîíòàííîãî ñâå÷åíèÿ. Îäíàêî, íàðÿäó ñî ñïîíòàííîé ÕË áèîëîãè÷åñêèõ òêàíåé â íàñòîÿùåå âðåìÿ ïðèìåíÿåòñÿ ðàçðàáîòàííûé â ëàáîðàòîðèè Þ.À.Âëàäèìèðîâà ìåòîä èíäóöèðîâàííîé èîíàìè äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà õåìèëþìèíåñöåíöèè. Îá àêòèâèðóþùåé ðîëè èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà íà ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ è èíòåíñèâíîñòü ÕË èìåþòñÿ ñîîòâåòñòâóþùèå äàííûå â ðÿäå îïóáëèêîâàííûõ ðàáîò (Ñóñëîâà Ò.Á., 1968, 1969; Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1969, 1972, 1973, 1975; Ottolenghi A., 1959; Fujita T. , 1974; Meduski J. et al, 1975; Hodberg J. et al, 1975). Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî íàèáîëåå ïîëíî ïðåäñòàâëåí õîä ðåàêöèé ÏÎË â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ â ïðèñóòñòâèè èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà â ðàáîòàõ Þ.À.Âëàäèìèðîâà è ñîàâò. (1972, 1975), Â.È.Îëåíåâà (1978). Ïðîöåññ îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ ìîëåêóëÿðíûì êèñëîðîäîì ÿâëÿåòñÿ öåïíîé ðåàêöèåé è íà÷èíàåòñÿ òîëüêî â òîì ñëó÷àå, åñëè â ñèñòåìå ïîÿâèòñÿ ñâîáîäíûé ðàäèêàë (Ýìàíóýëü Í.Ì. è ñîàâò., 1961). Òàêèìè ðàäèêàëàìè, èíèöèèðóþùèìè öåïíîå ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ, ìîãóò áûòü ðàäèêàëû âîäû è äðóãèõ âåùåñòâ ïðè äåéñòâèè íà îðãàíèçì ðàçëè÷íûõ ýíäîè ýêçîãåííûõ ôàêòîðîâ.  ÷àñòíîñòè, ê îáðàçîâàíèþ ðàäèêàëîâ â îðãàíèçìå ïðèâîäèò èîíèçèðóþùåå îáëó÷åíèå, êîòîðîãî áûâàåò äîñòàòî÷íî äàæå â ôîíîâûõ êîëè÷åñòâàõ (Òàðóñîâ Á.Í., 1957; Tappel A., 1965; Wills E. et al,1967). Ê òàêîìó æå ýôôåêòó ìîæåò ïðèâåñòè îáëó÷åíèå óëüòðàôèîëåòîâûìè ëó÷àìè (Îäèíîêîâà Ã.Ã. è ñîàâò., 1973; Ðàùóïêèí Ä.È. è ñîàâò., 1977).
Ãëàâà 2
Ñòð. 78
Ïðè àêòèâèðîâàíèè ÏÎË èîíàìè æåëåçà îáðàçóþòñÿ ðàäèêàëû âîäû èëè ïåðåêèñè, êîòîðûå çàòåì ðàçëàãàþòñÿ äî ðàäèêàëîâ âîäû. Ýòè îáðàçîâàâøèåñÿ ðàäèêàëû è äàþò íà÷àëî ðåàêöèè ÏÎË, ðåàãèðóÿ ñ ôîñôîëèïèäàìè ìåìáðàí êëåòîê â îñíîâíîì â ìåñòàõ íàëè÷èÿ äâîéíûõ ñâÿçåé ñ îáðàçîâàíèåì ðàäèêàëîâ æèðíîé êèñëîòû.  ïðèñóòñòâèè êèñëîðîäà ðàäèêàëû àêòèâíî ñ íèì âçàèìîäåéñòâóþò, îáðàçóÿ ïåðåêèñíûå ðàäèêàëû RO2. Îñîáåííîñòü ïåðåêèñíûõ ðàäèêàëîâ ñîñòîèò â òîì, ÷òî îíè ðåàãèðóþò ñ íîâûìè ìîëåêóëàìè íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò ôîñôîëèïèäîâ ñ îáðàçîâàíèåì ãèäðîïåðåêèñåé ROOH è ñâîáîäíîãî ðàäèêàëà R.  äàëüíåéøåì, ÷åðåäîâàíèå ðåàêöèé îáðàçîâàíèÿ ïåðåêèñíûõ ðàäèêàëîâ RO2 è ãèäðîïåðåêèñåé ROOH ïðèâîäèò ê öåïíîìó ñàìîïðîèçâîëüíîìó îêèñëåíèþ, íå òðåáóþùåìó èíèöèèðîâàíèÿ. Ïîýòîìó ýòè ðåàêöèè ïðèíÿòî íàçûâàòü ðåàêöèÿìè ïðîäîëæåíèÿ öåïè. Åñëè áû òàêàÿ öåïü ðåàêöèé ïðîäîëæàëàñü áåñêîíå÷íî, òî ïîÿâëåíèå îäíîãî ðàäèêàëà (à ïðè÷èí äëÿ ýòîãî äîñòàòî÷íî) ïðèâåëî áû ê îêèñëåíèþ âñåõ íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò ôîñôîëèïèäîâ â îðãàíèçìå. Îäíàêî ýòîãî íå ïðîèñõîäèò â âèäó íàëè÷èÿ â îðãàíèçìå ñèñòåì, ïðåïÿòñòâóþùèõ ñàìîïðîèçâîëüíîìó áåñêîíòðîëüíîìó ÏÎË è òåì ñàìûì îáåñïå÷èâàþùèì ãîìåîñòàç. Ê òàêèì âåùåñòâàì îòíîñÿòñÿ àíòèîêñèäàíòû èëè èíãèáèòîðû ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûõ ñîñòîÿíèé. Àíòèîêñèäàíòíûìè ñâîéñòâàìè ìîãóò îáëàäàòü ðàçëè÷íûå ãðóïïû âåùåñòâ: a-òîêîôåðîë (Tappel A., 1965; Kagan V. et al, 1973; Shimada O. et al, 1977), ãîðìîíû (Ãóêàñîâ Â.Ì., Ôåäîðîâ Â.Ê., 1977), èîíû æåëåçà â áîëüøèõ êîíöåíòðàöèÿõ (Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1975). Ýôôåêò äåéñòâèÿ àíòèîêñèäàíòîâ çàêëþ÷àåòñÿ â òîì, ÷òî îíè ðåàãèðóþò ñî ñâîáîäíûìè ðàäèêàëàìè è ïðåïÿòñòâóþò ðàçâèòèþ öåïíîãî õàðàêòåðà ðåàêöèè ÏÎË. Åñëè æå ðåàêöèÿ ïðîäîëæàåòñÿ, òî èîíû äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà, ÿâëÿÿñü èíèöèàòîðàìè ÏÎË, íà÷èíàþò ðàçëàãàòü ãèäðîïåðåêèñè ROOH ñ îáðàçîâàíèåì íîâûõ ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Ýòà ðåàêöèÿ íàçûâàåòñÿ ðåàêöèåé ðàçâåòâëåíèÿ öåïè è ïðèâîäèò ê ëàâèíîîáðàçíîìó íàðàñòàíèþ êîíöåíòðàöèè ïåðåêèñíûõ ðàäèêàëîâ RO 2, êîòîðûå íàõîäÿñü â áîëüøîì êîëè÷åñòâå â ñèñòåìå âçàèìîäåéñòâóþò ìåæäó ñîáîé ñ îáðàçîâàíèåì âîçáóæäåííûõ ìîëåêóë. Âîçáóæäåííûå ìîëåêóëû îáðàçîâàâøèõñÿ âåùåñòâ, ïðèõîäÿ â ñòàöèîíàðíîå ñîñòîÿíèå, âûäåëÿþò ýíåðãèþ â âèäå êâàíòîâ ñâåòà, ïî ðåãèñòðàöèè êîòî-
Ãëàâà 2
Ñòð. 79
ðîãî ñóäÿò î êèíåòèêå ðåàêöèè. Â öåëîì õîä ðåàêöèé ÏÎË â ïðèñóòñòâèè èîíîâ äâóõâàëåòíîãî æåëåçû ìîæíî ïðåäñòàâèòü â âèäå ñëåäóþùåé ñõåìû:
Ìàòåìàòè÷åñêîå ìîäåëèðîâàíèå, ïðîâåäåííîå Þ.À.Âëàäèìèðîâûì (1972, 1975) è Â.È.Îëåíåâûì (1976) äîêàçàëî, ÷òî ïðåäñòàâëåííàÿ ñõåìà ðåàêöèé ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ è êèíåòèêè õåìèëþìèíåñöåíöèè ïîëíîñòüþ ñîâïàäàåò ñ äàííûìè, ïîëó÷åííûìè íà ÝÂÌ. Ðåàêöèÿ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ â ïðèñóòñòâèè èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà ñîïðîâîæäàåòñÿ õåìèëþìèíåñöåíöèåé, êîòîðàÿ èìååò îïðåäåëåííóþ êèíåòèêó ðàçâèòèÿ â çàâèñèìîñòè îò ïðîõîäÿùèõ â åäèíèöó âðåìåíè ïðîöåññîâ â ñèñòåìå. Èçó÷åíèå êèíåòèêè ÕË ïîçâîëÿåò ïîíÿòü ìåõàíèçì ðåàêöèé ÏÎË â òêàíÿõ ïðè ðàçëè÷íûõ ñîñòîÿíèÿõ. Ïðèíÿòî âûäåëÿòü 6 ñòàäèé, êîòîðûå îáîçíà÷åíû íà òèïîâîé êðèâîé ÕË (ïî Âëàäèìèðîâó Þ.À. è ñîàâò., 1974), èçîáðàæåííîé íà ðèñ. 7.
Ãëàâà 2
Ñòð. 80
Ðèñ. 7. 1, 2, 3… 6 ñòàäèè ÕË îêèñëåííîé ëèíîëåíîâîé êèñëîòû. J - èíòåíñèâíîñòü ÕË; t - ëàòåíòíûé ïåðèîä; Fe++ - ìîìåíò ââåäåíèÿ æåëåçà. 1. “Ñïîíòàííîå ñâå÷åíèå”, õàðàêòåðíîå äëÿ ñèñòåì, ñîäåðæàùèõ ëèïèäû, â êîòîðûõ ñàìîïðîèçâîëüíî íà îïðåäåëåííîì óðîâíå èäåò öåïíàÿ ðåàêöèÿ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ. Ýòî ñâå÷åíèå ïî èíòåíñèâíîñòè î÷åíü íèçêîå è êîëè÷åñòâî ãèäðîïåðåêèñåé îñòàåòñÿ íà ïîñòîÿííîì óðîâíå. 2. “Áûñòðàÿ âñïûøêà ñâå÷åíèÿ” íàáëþäàåòñÿ ïðè ââåäåíèè â ñèñòåìó, ñîäåðæàùóþ ãèäðîïåðåêèñè, èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà. Ïðè ýòîì ãèäðîïåðåêèñè áûñòðî ðàçðóøàþòñÿ ñ îáðàçîâàíèåì ïåðåêèñíûõ ðàäèêàëîâ RO 2, äèñïðîïîðöèîíèðîâàíèå êîòîðûõ ñîïðîâîæäàåòñÿ îñâîáîæäåíèåì ýíåðãèè â âèäå êâàíòîâ ñâåòà, ÷òî îòðàæàåòñÿ íà õåìèëþìèíîãðàììå â âèäå ïèêà ñâå÷åíèÿ. 3. “Ñòàäèÿ óãíåòåíèÿ ñâå÷åíèÿ” îáóñëîâëåíà òåì, ÷òî èçáûòîê æåëåçà, êîòîðûé ââîäèòñÿ â ñèñòåìó, íà÷èíàåò ïðîÿâëÿòü ñåáÿ êàê àíòèîêñèäàíò è òîðìîçèò ðåàêöèè ÏÎË, ÷òî ïðèâîäèò ê ñíèæåíèþ êîëè÷åñòâà ðàäèêàëîâ è, ñëåäîâàòåëüíî, ñâå÷åíèÿ. 4. “Ëàòåíòíûé ïåðèîä” - âðåìÿ, â òå÷åíèå êîòîðîãî ïðîèñõîäèò îêèñëåíèå èçáûòêà æåëåçà äî êðèòè÷åñêîãî óðîâíÿ. Îí íà÷èíàåòñÿ ñ ìîìåíòà, êîãäà èñ÷åçíóò âñå ïåðåêèñè, êîòîðûå áûëè â ñèñòåìå, à åñëè èõ íå áûëî, òî ñðàçó ïîñëå ââåäåíèÿ æåëåçà è â ýòîì ñëó÷àå áûñòðîé âñïûøêè íå íàáëþäàåòñÿ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 81
Îêèñëåíèå æåëåçà ïðîèñõîäèò ìîëåêóëÿðíûì êèñëîðîäîì, íàëè÷èå êîòîðîãî íåîáõîäèìî äëÿ ïðîòåêàíèÿ ðåàêöèé. Äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà çàâèñèò îò ñêîðîñòè îêèñëåíèÿ æåëåçà, íà êîòîðóþ áîëüøîå âëèÿíèå îêàçûâàþò ðàçëè÷íûå âåùåñòâà, óñêîðÿþùèå èëè çàìåäëÿþùèå îêèñëåíèå æåëåçà. 5. “Ìåäëåííàÿ âñïûøêà ñâå÷åíèÿ” ðàçâèâàåòñÿ ïîñëå äîñòèæåíèÿ êðèòè÷åñêîé êîíöåíòðàöèè æåëåçà. Ïðè ýòîì íà÷èíàåòñÿ áóðíîå ðàçëîæåíèå ãèäðîïåðåêèñåé â ñèñòåìå è ðåàêöèÿ íà÷èíàåò ïðîòåêàòü ëàâèíîîáðàçíî, ÷òî íà êðèâîé ÕË âûðàæàåòñÿ â âèäå “âñïûøêè” ñâå÷åíèÿ. Íà êèíåòèêó ÕË íà ñòàäèè ìåäëåííîé âñïûøêè áîëüøîå âëèÿíèå îêàçûâàþò àíòèîêñèäàíòû, íàëè÷èå êîòîðûõ ïðèâîäèò ê èçìåíåíèþ ïàðàìåòðîì õåìèëþìèíîãðàììû (Èâàíîâ È.È. è ñîàâò.). Ýêñïåðèìåíòàëüíîå ââåäåíèå àíòèîêñèäàíòîâ â ñèñòåìó ïðèâîäèò ê óìåíüøåíèþ óãëà íàêëîíà è êðèâûå âûòÿãèâàþòñÿ âäîëü îñè àáñöèññ, à ìåäëåííàÿ âñïûøêà ñòàíîâèòñÿ áîëåå ïîëîãîé è íèæå. Âî âðåìÿ ìåäëåííîé âñïûøêè, áóðíî ïðîõîäÿùèå ðåàêöèè öåïíîãî îêèñëåíèÿ ïðèâîäÿò ê áûñòðîìó ðàñõîäîâàíèþ æåëåçà è ïàäåíèþ åãî êîíöåíòðàöèè, ÷òî âûçûâàåò çàìåäëåííîå îáðàçîâàíèå è ïîñòåïåííîå óìåíüøåíèå êîëè÷åñòâà ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ è, êàê ñëåäñòâèå, âåäåò ê çàòóõàíèþ ñâå÷åíèÿ (Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1974; Tappel A., 1959). 6. Ñòàöèîíàðíîå ñâå÷åíèå ñëåäóåò ñðàçó çà ìåäëåííîé âñïûøêîé è îáóñëîâëåíî, ïî-âèäèìîìó, íèçêèì óðîâíåì ðåàêöèé ÏÎË, êîòîðûå ïðîõîäÿò ñ ó÷àñòèåì òðåõâàëåíòíîãî æåëåçà, âîññòàíàâëèâàþùåãîñÿ â êëåòêå äî äâóõâàëåíòíîãî (Ñóñëîâà Ò.Á., 1970; Âëàäèìèðîâ Þ.À., Àð÷àêîâ À.È., 1972). Ïðåäñòàâëåííûé ìåõàíèçì êèíåòèêè ÕË ïîçâîëÿåò âûáðàòü íàèáîëåå îïòèìàëüíûå ïàðàìåòðû äëÿ õàðàêòåðèñòèêè èçó÷àåìûõ ïðîöåññîâ â çàâèñèìîñòè îò çàäà÷, ïîñòàâëåííûõ ïåðåä èññëåäîâàòåëåì. 2.2. Èíòåíñèâíîñòü õåìèëþìèíåñöåíöèè â çàâèñèìîñòè îò íåêîòîðûõ ñîñòîÿíèé îðãàíèçìà Íà èíòåíñèâíîñòü õåìèëþìèíåñöåíöèè âëèÿåò ôèçèîëîãè÷åñêîå ñîñòîÿíèå îðãàíèçìà. Îíà îêàçàëàñü íåîäèíàêîâîé â ìûøöå â ñîñòîÿíèè ïîêîÿ è â ìûøöå ïðè åå ðàçäðàæåíèè è ñîêðàùåíèè (Ôåäèí Â.À., Êàñàòêèí Þ.Í., 1969). Àíàëîãè÷íûå ðåçóëüòàòû, ñâèäåòåëüñòâóþùèå î âîçìîæíîñòè èñïîëü-
Ãëàâà 2
Ñòð. 82
çîâàíèÿ ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè äëÿ èçó÷åíèÿ ñîñòîÿíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè ïðèâåäåíû F.Solio (1975). Àâòîð îáíàðóæèë äîñòîâåðíîå ðàçëè÷èå â ñîäåðæàíèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â äåíåðâèðîâàííîé è èçîëèðîâàííîé ìûøöàõ. Îí òàêæå îòìåòèë, ÷òî íà êîëè÷åñòâî ðàäèêàëîâ áîëüøîå âëèÿíèå îêàçûâàåò òåìïåðàòóðà. Ïðè ïîâûøåíèè äî 40 îÑ äîñòîâåðíî óâåëè÷èâàåòñÿ êîëè÷åñòâî ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ñêåëåòíûõ ìûøö, ïåðåíåñøèõ ñîñòîÿíèå èøåìèè, ïðîâåäåííîãî Þ.Ï.Àðõèïåíêî è ñîàâò. (1977) ïîçâîëèëî èì óñòàíîâèòü, ÷òî ñîäåðæàíèå ïðîäóêòîâ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ â ýòèõ ìûøöàõ óâåëè÷èâàåòñÿ. Èíòåíñèâíîñòü íàêîïëåíèÿ ïðîäóêòîâ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ êîððåëèðóåò ñ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòüþ è ñòðóêòóðíûìè ïîâðåæäåíèÿìè îðãàíà. Àâòîðû ïðèøëè ê âûâîäó, ÷òî â ïîâðåæäåíèè ìåìáðàí ìûøå÷íûõ âîëîêîí ïðè èøåìèè íåìàëîâàæíóþ ðîëü èãðàþò ðåàêöèè ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ. Íàðÿäó ñ ïðèâåäåííûìè, â ðÿäå ðàáîò îòå÷åñòâåííûõ è çàðóáåæíûõ èññëåäîâàòåëåé îòìå÷åíî èçìåíåíèå ðåàêöèé ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ è ñâåðõëàáîãî ñâå÷åíèÿ ïðè ïðèæèçíåííîì ïîâðåæäåíèè òêàíåé. Åùå â 1943 ã. îòå÷åñòâåííûé ó÷åíûé Â.Â.Ëåïåøêèí ñîîáùèë îá îáíàðóæåííîì èì ñâå÷åíèè ïðè ãèáåëè êëåòîê. Ýòî ñâå÷åíèå îí íàçâàë íåêðîáèîòè÷åñêèì. Ïîçäíåå, èñïîëüçóÿ áîëåå ñîâðåìåííûå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ, Â.Â.Ïåðåëûãèí è Á.Í.Òàðóñîâ (1966) îáíàðóæèëè â ìîìåíò ïîâðåæäåíèÿ êëåòêè âñïûøêó ñâå÷åíèÿ, èíòåíñèâíîñòü êîòîðîé óìåíüøàëîñü ïî ìåðå åå ãèáåëè. Àíàëîãè÷íûå äàííûå, ñâèäåòåëüñòâóþùèå î ñíèæåíèè ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ â òêàíÿõ, ïîäâåðãíóòûõ äåéñòâèþ íèçêèõ òåìïåðàòóð, ïîëó÷èëè Â.Ì.Êàñóìîâ è ñîàâò. (1969), Ê.Ì.Öîé è ñîàâò. (1969). Íà îñíîâàíèè ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ óêàçàííûå àâòîðû ïðåäëîæèëè èñïîëüçîâàòü ìåòîä ÕË ïðè îöåíêå æèçíåñïîñîáíîñòè òêàíåé. Ïðè ìåõàíè÷åñêîì ïîâðåæäåíèè ñïèííîãî ìîçãà P.Milri et al (1973) îáíàðóæèëè íàêîïëåíèå ïðîäóêòîâ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ â òðàâìèðîâàííîé òêàíè. Àâòîðû ïðåäïîëîæèëè, ÷òî ýòî íàêîïëåíèå ïðîèñõîäèò çà ñ÷åò àêòèâàöèè ðåàêöèé ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ è ïîñ÷èòàëè åå ïóñêîâûì ìåõàíèçìîì ïàòîëîãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé òðàâìû.
Ãëàâà 2
Ñòð. 83
2.3. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè â ñóäåáíîé ìåäèöèíå Íàðÿäó ñ øèðîêèì ïðèìåíåíèåì ìåòîäà õåìèëþìèíåñöåíöèè ïðè èçó÷åíèè ðàçëè÷íûõ ñîñòîÿíèé áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, áûëè òàêæå âûïîëíåíû îòäåëüíûå èññëåäîâàíèÿ ñ öåëüþ ðàçðåøåíèÿ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ çàäà÷. T.Isacsson, G.Wetermaru (1974) è R.Weber (1966) ïðèìåíèëè ìåòîä õåìèëþìèíåñöåíöèè ïðè èññëåäîâàíèè êðîâè â ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì îòíîøåíèè. Àâòîðû îòìåòèëè åãî âûñîêóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü, ýêñïðåññíîñòü è òî÷íîñòü. Â.Ã.Áàñêàêîâ (1977) â ðåçóëüòàòå èññëåäîâàíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñïåêòðà ýëåêòðîáèîëþìèíåñöåíöèè óñòàíîâëåíî óâåëè÷åíèå åå â ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííîé ìûøå÷íîé òêàíè ïî ñðàâíåíèþ ñ ïîâðåæäåííîé ïîñìåðòíî, à òàêæå çíà÷èòåëüíîå îòëè÷èå ñïåêòðîâ ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííûõ òêàíåé â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè òðàâìàòèçàöèè ïî îòíîøåíèþ êî âðåìåíè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Äèíàìèêà ïîñìåðòíîé òðàâìû íå õàðàêòåðèçîâàëàñü ðåçêèìè îòëè÷èÿìè ñïåêòðàëüíîé êàðòèíû, à áûëà ïîä÷èíåíà îáùèì çàêîíîìåðíîñòÿì ïîñìåðòíîãî èçìåíåíèÿ ìûøö. Àâòîð ïðåäëîæèë ìåòîä ñïåêòðîñêîïèè ýëåêòðîáèîëþìèíåñöåíöèè äëÿ îöåíêè õàðàêòåðà òðàâìàòèçàöèè ìûøå÷íîé òêàíè. Ðàáîòû Þ.Ë.Ìåëüíèêîâà (1970, 1974, 1978) ïîñâÿùåíû èçó÷åíèþ èçìåíåíèé ïàðàìåòðîâ ÕË ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Îïûòû ïðîâåäåíû íà áåëûõ áåñïîðîäíûõ êðûñàõ-ñàìöàõ ìàññîé 200-250 ã. Ãîìîãåíàòû òêàíè ïå÷åíè è ñóñïåíçèè ìèòîõîíäðèé èçãîòàâëèâàëè ïî ïðèâîäèìîé íèæå ìåòîäèêå è èññëåäîâàëè ÷åðåç îïðåäåëåííûå ïåðèîäû âðåìåíè (0, 3, 6, 9, 12 ÷àñîâ) ïîñëå ñìåðòè æèâîòíûõ. Ìåòîäèêà: êóñî÷êè ïå÷åíè (2,0) ïðîìûâàëè îõëàæäåííîé äî 0îÑ ñðåäîé ñëåäóþùåãî ñîñòàâà: 0,25 Ì ñàõàðîçà, ôîñôàòíûé áóôåð 10-2 ì, Ê2ÍÐÎ4, 10-5 Ì ðàñòâîðà ÝÄÒÀ, ðÍ 7,5. Çàòåì êóñî÷åê ïîìåùàëè â îõëàæäåííûé ãîìîãåíèçàòîð è ãîìîãåíèçèðîâàëè äî ïîëó÷åíèÿ îäíîðîäíîé ñìåñè â òå÷åíèå 30 ñ â äâîéíîì îáúåìå ðàñòâîðà ôîñôàòíîãî áóôåðà. Ê 2 ìë åå äîáàâëÿëè 0,2 ìë 10-4 FeSO4, ñëóæèâøåãî êàòàëèçàòîðîì è ïåðåíîñèëè â êþâåòó. Äëÿ èçìåðåíèÿ áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè èñïîëüçîâàëè óñòàíîâêó, ñîñòîÿùóþ èç ôîòîóìíîæèòåëÿ ÔÝÓ-42, óñèëèòåëÿ ïîñòîÿííîãî òîêà, ðÍ-ìåòðà ËÏÓ-01 è ñàìîïèñöà ÏÈ1-02. Èçìåðåíèå ñâå÷åíèÿ ãîìîãåíàòîâ ïðîâîäèëè êàæäóþ ìèíóòó.
Ãëàâà 2
Ñòð. 84
Èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ðàññ÷èòûâàëè ïî ôîðìóëå:
I - IT I C - IT ,
(15)
ãäå I - èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ îáðàçöà; Iò - òåìíîâîé ôîí; Ic - èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ñòàíäàðòíîãî èñòî÷íèêà ñâåòà. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû îáðàáîòàíû ñòàòèñòè÷åñêè è ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 1. Òàáëèöà 1. Èçìåíåíèå ñâå÷åíèÿ ãîìîãåíàòîâ ÷åðåç ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñëå ñìåðòè æèâîòíîãî
Время после смерти (час) 0 3 6
Хемилюминесценция гомогенатов печени крыс х,
х 1%
aх
aх1%
1,22 0,69 0,29
100 56 24
0,084 0,024 0,105
±6,8 ±3,4 ±3,4
õ - ñðåäíåå àðèôìåòè÷åñêîå èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ, aõ - ñðåäíåå êâàäðàòè÷íîå îòêëîíåíèå. Èç òàáëèöû ñëåäóåò, ÷òî èíòåíñèâíîñòü “ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ” îáùèõ ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè çàêîíîìåðíî ïàäàåò â çàâèñèìîñòè îò ñðîêà ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. ×åðåç 9 è 12 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ áûëà íàñòîëüêî ñëàáîé, ÷òî çàðåãèñòðèðîâàòü åãî íå óäàëîñü. Âñåãî àâòîðàì áûëè ïðîâåäåíû 182 èññëåäîâàíèÿ, èç íèõ ñ ãîìîãåíàòàìè ïå÷åíî÷íîé òêàíè - 155 è ñ ñóñïåíçèÿìè ìèòîõîíäðèé - 27. Äèíàìèêà áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè ñóñïåíçèé ìèòîõîíäðèé èìåëà îáùóþ íàïðàâëåííîñòü ñ èçìåíåíèåì ñâå÷åíèÿ îáùèõ ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíî÷íîé òêàíè. Àâòîð óêàçàë, ÷òî äèàãíîñòèêà äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè äîëæíà îñóùåñòâëÿòüñÿ ñ ïîìîùüþ êîìïëåêñà ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ: ãèñòîëîãè÷åñêèõ, ãèñòîõèìè÷åñêèõ, áèîõèìè÷åñêèõ è áèîôèçè÷åñêèõ (îïðåäåëåíèå áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè). Ðåàêöèè ÏÎË â íàñòîÿùåå âðåìÿ ãëóáîêî èçó÷åíû â ìèòîõîíäðèÿõ. Ìåæäó ñâå÷åíèåì ìèòîõîíäðèé è ãîìîãåíàòîâ òêàíåé óñòàíîâëåíà òåñíàÿ ñâÿçü. Îíà îïðåäåëÿåòñÿ òåì, ÷òî
Ãëàâà 2
Ñòð. 85
ñâå÷åíèå ãîìîãåíàòîâ îáóñëîâëåíî òåìè æå ïðîöåññàìè, êîòîðûå õàðàêòåðíû äëÿ èìåþùèõñÿ â íèõ ìèòîõîíäðèÿõ (Âëàäèìèðîâ Þ.À., Ëüâîâà Î.Ô., 1965; Ëüâîâà Î.Ô., 1967). Ïîýòîìó áûëî ðåøåíî èññëåäîâàòü ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå â ãîìîãåíàòå ìûøå÷íîé òêàíè, ïðîñòîòà ïðèãîòîâëåíèÿ êîòîðîãî íàèáîëåå ïðèåìëåìà äëÿ ïðèìåíåíèÿ â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå. Ïîìèìî âíóòðåííåãî ñîñòîÿíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, íà êèíåòèêó ÕË è èíòåíñèâíîñòü ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ áîëüøîå âëèÿíèå îêàçûâàþò ðàçëè÷íûå ýêçîãåííûå ôàêòîðû, îñíîâíûìè èç êîòîðûõ ÿâëÿþòñÿ: ñîñòàâ ñðåäû èíêóáàöèè, êîíöåíòðàöèÿ êèñëîðîäà, ãîìîãåíàòà, æåëåçà, ââîäèìîãî â êþâåòó è äð. Òîëüêî â îïòèìàëüíûõ óñëîâèÿõ, êîãäà âíåøíèå àãåíòû íå ëèìèòèðóþò ïðîöåññ, èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ è êèíåòèêà ÕË áóäóò îïðåäåëÿòüñÿ ñâîéñòâàìè ñàìèõ èññëåäóåìûõ òêàíåé. Ïîýòîìó âûáîð óñëîâèé äëÿ ïðîâåäåíèÿ îïûòîâ èìååò áîëüøîå çíà÷åíèå. Â.Â.Ïðóòîâûõ (1978) ïðè ïîäáîðå óñëîâèé äëÿ èññëåäîâàíèÿ ãîìîãåíàòîâ ìûøö èçó÷èë âëèÿíèå ðàçëè÷íûõ ñðåä èíêóáàöèè íà ïàðàìåòðû ÕË. Ïðè ýòîì îêàçàëîñü, ÷òî êîìïîíåíòû ðàçëè÷íûõ ñðåä âëèÿþò íà êèíåòèêó ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö òàê æå, êàê è íà êèíåòèêó ÕË ìèòîõîíäðèé. Òàê, èñïîëüçîâàíèå ôîñôàòíîé ñðåäû, ñîñòîÿùåé èç 20 ìÌ KH2PO4 è 105 ìÌ KCl, pH 7,4 ïðè òåìïåðàòóðå 20-22îÑ ïðèâîäèëî ê áûñòðîìó çàâåðøåíèþ ðåàêöèé ÏÎË, î ÷åì ñóäèëè ïî êèíåòèêå ÕË. Ïðè ýòîì âñå ñòàäèè ÕË ïðîõîäèëè çà î÷åíü êîðîòêèé ïðîìåæóòîê âðåìåíè, ÷òî âûçûâàëî çàòðóäíåíèÿ îáðàáîòêè ðåçóëüòàòîâ. Äðóãóþ êàðòèíó íàáëþäàëè ïðè èññëåäîâàíèè ãîìîãåíàòà â ñðåäå, ñîñòîÿùåé èç 115 ìÌ KCl è 10 ìÌ ÒÐÈÑ HCl.  ýòîì ñëó÷àå ñòàäèè ÕË áûëè äîâîëüíî ïðîäîëæèòåëüíûìè è òðåáîâàëè çíà÷èòåëüíûõ çàòðàò âðåìåíè äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðåçóëüòàòà. Îñîáåííî çíà÷èòåëüíî çàòÿãèâàëñÿ ëàòåíòíûé ïåðèîä ïðè èññëåäîâàíèè ãîìîãåíàòîâ òðàâìèðîâàííûõ òêàíåé è ñîñòàâëÿë èíîãäà áîëåå 50 ìèíóò. Òàêàÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòü èññëåäîâàíèÿ ïðîáû ïðè íàëè÷èè îäíîé óñòàíîâêè ïî ðåãèñòðàöèè ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé ïðèâîäèëà ê çíà÷èòåëüíîìó ðàçðûâó âî âðåìåíè ìåæäó èññëåäîâàíèåì êîíòðîëüíîé è îïûòíîé ïðîáû ìûøö. Ðàçðûâ âî âðåìåíè èññëåäîâàíèÿ äàâàë çíà÷èòåëüíûé ðàçáðîñ ðåçóëüòàòîâ ïðè îïðåäåëåíèè äàâíîñòè òðàâìû. Àíàëîãè÷íûå äàííûå î âëèÿíèè êîìïîíåíòîâ ñðåäû èíêóáàöèè íà êèíåòèêó ÕË èìåþòñÿ â ðàáîòàõ Ò.Á.Ñóñëîâîé (1970), Þ.À.Âëàäèìèðîâà (1972), êîòî-
Ãëàâà 2
Ñòð. 86
ðûå èññëåäîâàëè âëèÿíèå ïèðî- è îðòîôîñôàòà íà êèíåòèêó ÕË ìèòîõîíäðèé â ïðèñóòñòâèè èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà. Óêàçàííûìè àâòîðàìè áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî ýòè èíãðåäèåíòû àêòèâèðóþò ïðîöåññû ÏÎË çà ñ÷åò áûñòðîãî îêèñëåíèÿ èîíîâ æåëåçà êèñëîðîäîì âîçäóõà è ïðèâîäÿò ê óñèëåíèþ ïðîöåññîâ ðàäèêàëîáðàçîâàíèÿ. Îòìå÷åíî, ÷òî êîíöåíòðàöèÿ ïèðî- è îðòîôîñôàòà íå äîëæíà ïðåâûøàòü 5-10 ìÌ, èíà÷å âîçìîæíî âëèÿíèå ýòèõ âåùåñòâ íà êèíåòèêó ìåäëåííîé âñïûøêè ÕË. Ó÷èòûâàÿ, ÷òî ïàðàìåòðû ìåäëåííîé âñïûøêè áðàëè â êà÷åñòâå îñíîâíûõ ïîêàçàòåëåé èíòåíñèâíîñòè ïðîöåññà ïðè ïîäáîðå óñëîâèé äëÿ èññëåäîâàíèÿ ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö, èñõîäèëè èç äàííûõ ðåêîìåíäàöèé.
Ðèñ. 8. Õåìèëþìèíîãðàììû ãîìîãåíàòîâ ìûøöû æèâîòíûõ â ðàçëè÷íûõ ñðåäàõ èíêóáàöèè ïðè ââåäåíèè 10 -4 Ì äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà t - 20îÑ, ðÍ - 7,4; 1 - ñðåäà, ñîñòîÿùàÿ èç 20 ìÌ KH2PO4 è 105 ìÌ KCl; 2 - ñðåäà, ñîñòîÿùàÿ èç 10 ìÌ ÒÐÈÑ HCl è 115 ìÌ KCl; 3 - ñðåäà ñîäåðæàëà 5 ìÌ ÒÐÈÑ HCl, 5 ìÌ KH2PO4 è 115ìÌ KCl. Fe++ - ìîìåíò ââåäåíèÿ æåëåçà â êþâåòó; Ò.Ò. - òåìíîâîé òîê ÔÝÓ; ØÒ - ìîìåíò îòêðûâàíèÿ øòîðêè ÔÝÓ; J - èíòåíñèâíîñòü ÕË; t - ëàòåíòíûé ïåðèîä; ÑÑ - ñïîíòàííîå ñâå÷åíèå ãîìîãåíàòà.
Ãëàâà 2
Ñòð. 87
Ïåðâîíà÷àëüíûì ýòàïîì èññëåäîâàíèé, ïðîâåäåííûõ Â.Â.Ïðóòîâûõ, ÿâèëñÿ ïîäáîð ñðåäû, ñîñòîÿùåé èç 5 ìÌ KH2PO4; 5 ìÌ ÒÐÈÑ HCl è 115 ìÌ KCl ïðè ðÍ 7,4.  äàííîé ñðåäå ïðîöåññû ïðîòåêàëè ñ óìåðåííîé ñêîðîñòüþ, ðåçóëüòàòû áûëè âîñïðîèçâîäèìû è òðåáîâàëè íåìíîãî âðåìåíè äëÿ ïðîèçâîäñòâà îïûòîâ. Íà ðèñ. 8 ïðåäñòàâëåíû õåìèëþìèíîãðàììû, ïîëó÷åííûå â ðàçëè÷íûõ ñðåäàõ. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî ðåàêöèè ÏÎË è êèíåòèêà ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøå÷íîé òêàíè ðàçâèâàþòñÿ ïî òåì æå ïðèíöèïàì, ÷òî è â ìèòîõîíäðèÿõ. Ïîýòîìó â äàëüíåéøåé ðàáîòå Â.Â.Ïðóòîâûõ ðóêîâîäñòâîâàëñÿ îïûòîì äðóãèõ èññëåäîâàòåëåé, çàíèìàâøèõñÿ èçó÷åíèåì ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûõ ðåàêöèé â áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòàõ ìåòîäîì õåìèëþìèíåñöåíöèè.  ðÿäå ïóáëèêàöèé (Ñóñëîâà Ò.Á.è ñîàâò., 1968, 1969, 1970; Âëàäèìèðîâ Þ.À., 1969; Îëåíåâ Â.È., 1976; Forthmy S. et al, 1964; Ottolenghy A., 1959; Stauff J.et al, 1964; Wills E., 1965; Barnos R. et al, 1972; Fajita T., 1972 è äð) èìåþòñÿ äàííûå, ÷òî ìåòàëëû ñ ïåðåìåííîé âàëåíòíîñòüþ, â ÷àñòíîñòè, èîíû äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà, ïðè èõ îêèñëåíèè ìîãóò áûòü èñòî÷íèêàìè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ è èíèöèèðîâàòü ðåàêöèè ÏÎË. Ïðè ýòîì áîëüøîå çíà÷åíèå èìååò êîíöåíòðàöèÿ æåëåçà, òàê êàê âëèÿåò íà ïðîöåññû ÏÎË è êèíåòèêó ÕË. Ïðîâåäåííûå àâòîðîì ýêñïåðèìåíòû ïî èçó÷åíèþ âëèÿíèÿ ðàçëè÷íûõ êîíöåíòðàöèé äâóõâàëåíòíîãî æåëåçû íà ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö æèâîòíûõ ïîçâîëèëè óñòàíîâèòü, ÷òî îïòèìàëüíîé êîíöåíòðàöèåé ÿâëÿåòñÿ 10 -4 Ì, ïðè êîòîðîé ÷åòêî âûðàæåíû âñå ïåðèîäû â ðàçâèòèè ÕË. Íà êèíåòèêó ÕË è ïðîöåññû ÏÎË âëèÿåò íàëè÷èå â ñèñòåìå êèñëîðîäà. Îáðàçîâàíèå ðàäèêàëîâ, îòâåòñòâåííûõ çà ñâå÷åíèå, ñâÿçàíî òàêæå ñ ïîòðåáëåíèåì áîëüøîãî åãî êîëè÷åñòâà (Âëàäèìèðîâ Þ.À. è ñîàâò., 1964; Êðè÷åâñêàÿ À.À. è ñîàâò., 1976; White H., 1960; Fridovich K., 1975; Winterhalter K. et al, 1976; Steven A. et al, 1977). Ýòè àâòîðû ïðèøëè ê âûâîäó, ÷òî îòñóòñòâèå â ñèñòåìå êèñëîðîäà ïðèâîäèò ê óãíåòåíèþ ïðîöåññîâ ðàäèêàëîîáðàçîâàíèÿ è îñëàáëåíèþ ñâå÷åíèÿ. Â.Â.Ïðóòîâûõ â ñâîåé óñòàíîâêå äëÿ ïîäà÷è êèñëîðîäà â ñèñòåìó èñïîëüçîâàë ôòîðîïëàñòîâóþ ìåøàëêó, ïðèâîäèìóþ â äâèæåíèå ýëåêòðîìîòîðîì, îáîðîòû êîòîðîé áûëè ïîäîáðàíû ýêñïåðèìåíòàëüíî, èñõîäÿ èç òðåáîâàíèé: 1. Íå äîëæíî áûòü ïðè ïîìåøèâàíèè ðàñòâîðà ïóçûðüêîâ ïåíû; 2. Ìèíè-
Ãëàâà 2
Ñòð. 88
ìàëüíûé ðàçáðîñ ðåçóëüòàòîâ ïðè èññëåäîâàíèè íåñêîëüêèõ ïðîá îäíîãî è òîãî æå ãîìîãåíàòà. Íåäîñòàòî÷íîå ïåðåìåøèâàíèå ðàñòâîðà ïðèâîäèò ê èçìåíåíèþ õîäà ðåàêöèé ÏÎË, ÷òî âûçûâàåò èçìåíåíèå êèíåòèêè ÕË. Íåîáõîäèìîñòü íàëè÷èÿ ìåøàëêè îáóñëîâëåíà åùå è òåì, ÷òî ïðè ââåäåíèè â èññëåäóåìóþ ñèñòåìó èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà òðåáóåòñÿ îïòèìàëüíîå ïåðåìåøèâàíèå ðàñòâîðà äëÿ ðàâíîìåðíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ åãî âî âñåì èññëåäóåìîì îáúåìå, ÷òî òàêæå âëèÿåò íà õîä ðåàêöèè ÏÎË è êèíåòèêó ÕË (Øàðîâ À.Ï. è ñîàâò., 1974). Îòìå÷åíî, ÷òî áåç ïåðåìåøèâàíèÿ ðàñòâîðà íàáëþäàåòñÿ èñêàæåííàÿ ìåäëåííàÿ âñïûøêà ÕË çà ñ÷åò äèôôóçíîãî ðàñòâîðåíèÿ êèñëîðîäà âîçäóõà â èññëåäóåìîé ñðåäå.  òî âðåìÿ êàê â âàêóóìå èëè â àòìîñôåðå èíåðòíîãî ãàçà ðåàêöèÿ ÏÎË íå ïðîèñõîäèò è ÕË íå íàáëþäàåòñÿ (Ëüâîâà Î.Ô., 1967).
Ðèñ. 9. Áëîê-ñõåìà óñòàíîâêè äëÿ ðåãèñòðàöèè õåìèëþìèíåñöåíöèè. 1- òåðìîñòàòèðóåìàÿ êþâåòà; 2 - ìåõàíè÷åñêàÿ ìåøàëêà; 3 - ïîëèýòèëåíîâàÿ òðóáêà; 4 - øòîðêà; 5 - ôîòîýëåêòðîííûé óìíîæèòåëü ÔÝÓ-37; 6 - èñòî÷íèê ïèòàíèÿ ÂÑÂ-2; 7 - óñèëèòåëü ïîñòîÿííîãî òîêà ËÏÓ-01; 8 - ñàìîïèñåö ÝÏÏ-09; 9 ñâåòîèçîëèðóþùèé êîæóõ; 10 - êðûøêà óñòàíîâêè.
Ãëàâà 2
Ñòð. 89
Ïåðâûì ýòàïîì ðàáîòû Â.Â.Ïðóòîâûõ ÿâèëîñü èññëåäîâàíèå âëèÿíèÿ äëèòåëüíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû íà ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ. Òðàâìó íàíîñèëè ïóòåì ðåçêîãî ðàçäàâëèâàíèÿ ìûøö áåäðà ñàìöîâ áåëûõ áåñïîðîäíûõ êðûñ ìàññîé 200-250 ã. ñïåöèàëüíûì óñòðîéñòâîì, ïîçâîëÿþùèì îïðåäåëÿòü ñèëó âîçäåéñòâèÿ äèíàìîìåòðîì Ê-49. Ïðè ýòîì ïîâðåæäàëèñü òîëüêî ìûøöû, ñîõðàíÿÿ ñîñóäû è êîñòè êîíå÷íîñòè. Èññëåäîâàíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË ïðîèçâîäèëè ñðàçó æå ïîñëå íàíåñåíèÿ òðàâìû, à òàêæå ÷åðåç 0,5, 1, 3, 6, 12, 18 è 24 ÷àñà. Ñðàçó ïîñëå äåêàïèòàöèè æèâîòíîãî çàáèðàëè òðàâìèðîâàííóþ è êîíòðîëüíóþ ìûøöû. Êîíòðîëåì ñëóæèëà ìûøöà ïðîòèâîïîëîæíîé íåïîâðåæäåííîé êîíå÷íîñòè òîãî æå æèâîòíîãî. Òêàíè ïîìåùàëè â îõëàæäåííûé 0,25 Ì ðàñòâîð ñàõàðîçû (ðÍ 7,4) è ãîìîãåíèçèðîâàëè â ñòåêëÿííîì ãîìîãåíèçàòîðå â ñîîòíîøåíèè 1:10. Âñå îïåðàöèè ïî ïðèãîòîâëåíèþ ãîìîãåíàòîâ ïðîâîäèëè íà õîëîäó ïðè 0-4îÑ.  êà÷åñòâå ñðåäû èíêóáàöèè ñëóæèë ðàñòâîð, ñîñòîÿùèé èç 5 ìÌ ÒÐÈÑ HCl-áóôåðà, 5 ìÌ KH2PO4 è 115 ìÌ KCl ïðè ðÍ 7,4. Èññëåäîâàíèÿ êèíåòèêè ÕË ïðîèçâîäèëè íà óñòàíîâêå äëÿ ðåãèñòðàöèè ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ, áëîê-ñõåìà êîòîðîé ïðåäñòàâëåíà íà ðèñ. 9. Ïåðåä íà÷àëîì ðàáîòû âñå ïðèáîðû ïðîãðåâàëè â òå÷åíèå 30 ìèíóò. Èññëåäîâàíèÿ ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ òêàíåé ïðîèçâîäèëè ñëåäóþùèì îáðàçîì. Îòêðûâàþò êðûøêó óñòàíîâêè (10) è â òåðìîñòàòèðóþùóþ êþâåòó ïîìåùàþò 2,5 ìë áóôåðíîãî ðàñòâîðà è 2,0 ìë ãîìîãåíàòà òêàíè ìûøöû. Çàòåì çàêðûâàþò êðûøêó, âêëþ÷àþò ìåõàíè÷åñêóþ ìåøàëêó (2) è íà÷èíàþò çàïèñü ñèãíàëà. Âíà÷àëå çàïèñûâàþò ðàáîòû ÔÝÓ (5) â òå÷åíèå îäíîé ìèíóòû, çàòåì îòêðûâàþò øòîðêó (4) è ïðîèçâîäÿò çàïèñü ñïîíòàííîãî ñâå÷åíèÿ èññëåäóåìîãî ãîìîãåíàòà â òå÷åíèå îäíîé ìèíóòû. ×åðåç ïîëèýòèëåíîâóþ òðóáêó, êîòîðàÿ âûâåäåíà íàðóæó (3), â êþâåòó ââîäÿò èíèöèàòîð ÏÎË - ðàñòâîð FeSO 4õ7H 2O äî êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 10-4 Ì è äàëåå çàïèñûâàþò êèíåòèêó èíäóöèðóåìîé ÕË äàííîãî îáðàçöà. Ïîñëå óñòàíîâëåíèÿ óðîâíÿ ñòàöèîíàðíîãî ñâå÷åíèÿ çàïèñü ïðåêðàùàþò, çàêðûâàþò øòîðêó (4), âûêëþ÷àþò ìåøàëêó (2). Êþâåòó ïðîìûâàþò äâàæäû äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé è ãîòîâÿò äëÿ ñëåäóþùåãî èçìåðåíèÿ. Ïåðåä íà÷àëîì ðàáîòû óñòàíîâêó êàëèáðóþò ïî ñòàíäàðòíîìó ýòàíîëó, â êà÷åñòâå êî-
Ãëàâà 2
Ñòð. 90
òîðîãî èñïîëüçóþò ðàäèîàêòèâíîå ñòåêëî ÆÑ-9. Äëÿ ýòîãî íà äíî êþâåòû óêëàäûâàþò ýòàëîí è èçìåðÿþò óðîâåíü ñâå÷åíèÿ, êîòîðûé ìîæíî ðåãóëèðîâàòü, èçìåíÿÿ íàïðÿæåíèå, ïîäàâàåìîå íà ÔÝÓ. Äåòåêòîðîì èçëó÷åíèÿ â óñòàíîâêå áûë ÔÝÓ37. Ôîòîóìíîæèòåëü ÷ðåçâû÷àéíî ÷óâñòâèòåëåí ê íåáîëüøèì èçìåíåíèÿì ðåæèìà ïèòàíèÿ: èçìåíåíèå íàïðÿæåíèÿ ïèòàíèÿ íà 1% èçìåíÿåò ÷óâñòâèòåëüíîñòü ôîòîóìíîæèòåëÿ íà ±15% (Âëàäèìèðîâ Þ.À. è ñîàâò., 1974).  ïðèìåíåííîé óñòàíîâêå èñïîëüçîâàëè âûñîêîâîëüòíûé ñòàáèëèçàòîð ÁÑÂ-2, äàþùèé 0,01% íåñòàáèëüíîñòè ïðè êîëåáàíèè íàïðÿæåíèÿ â ñåòè äî 10%.  êà÷åñòâå óñèëèòåëÿ ïîñòîÿííîãî òîêà èñïîëüçîâàëè ëàáîðàòîðíûé ðÍ-ìåòð ËÈÓ-01. Êîíå÷íûé ñèãíàë ðåãèñòðèðîâàëè ïðè ïîìîùè ñàìîïèñöà ÝÏÏ-09 íà äèàãðàììíîé ëåíòå â âèäå êðèâîé - õåìèëþìèíîãðàììû. Äëÿ îöåíêè ðåçóëüòàòîâ áûëè âçÿòû îñíîâíûå ïàðàìåòðû ÕË - äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà è âûñîòà ìåäëåííîé âñïûøêè èëè èíà÷å èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ. Èçìåíåíèÿ ïîêàçàòåëåé, ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòàõ è íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå îöåíèâàëè â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê êîíòðîëþ. Ïîëó÷åííûå öèôðîâûå äàííûå îáðàáàòûâàëè ìåòîäîì âàðèàöèîííîé ñòàòèñòèêè.
Ðèñ. 10. Õåìèëþìèíîãðàììû ìûøö æèâîòíûõ ñ ðàçëè÷íîé äàâíîñòüþ ïðèæèçíåííîé òðàâìû, ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòå. 1- êîíòðîëü; 2 - òðàâìà äàâíîñòüþ 3 ÷àñà; 3 - òðàâìà äàâíîñòüþ 18 ÷àñîâ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 91
Ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòå òèïîâûå õåìèëþìèíîãðàììû ñ ðàçëè÷íûìè ñðîêàìè ïðèæèçíåííîé òðàâìû ìûøö ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 10. Íà õåìèëþìèíîãðàììàõ âèäíî âëèÿíèå äëèòåëüíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû íà ïàðàìåòðû ÕË.  òî æå âðåìÿ èíäèâèäóàëüíûå ðàçëè÷èÿ â ñâå÷åíèè ãîìîãåíàòîâ êîíòðîëüíûõ ìûøö îòäåëüíûõ æèâîòíûõ áûëè íåçíà÷èòåëüíûìè è ñîñòàâëÿëè íå áîëåå 3-5%. Îäíàêî ýòà çàêîíîìåðíîñòü ñîõðàíÿëàñü äëÿ æèâîòíûõ, êîòîðûõ èññëåäîâàëè â îäíîé ñåðèè è íàõîäèëèñü â îäèíàêîâûõ óñëîâèÿõ ïðåáûâàíèÿ. Íà ïàðàìåòðû ÕË îêàçûâàëî âëèÿíèå òàêæå âðåìÿ ãîäà. Òàê, â ëåòíåå âðåìÿ îòìå÷àëîñü íåêîòîðîå ñíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè è óâåëè÷åíèå äëèòåëüíîñòè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ÕË ïî ñðàâíåíèþ ñ æèâîòíûìè, èññëåäîâàííûìè çèìîé. Ýòè èçìåíåíèÿ áûëè âûðàæåíû â ðàâíîé ñòåïåíè êàê â êîíòðîëüíûõ, òàê è â ìûøöàõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ.  ñâÿçè ñ ýòèì ñîîòíîøåíèå îñòàâàëîñü âñåãäà îäíèì è òåì æå ïðè èññëåäîâàíèè òðàâìèðîâàííîé è èíòàêòíîé ìûøö îäíîãî è òîãî æå æèâîòíîãî. Àâòîð ðåøèë ó÷èòûâàòü ïðîöåíòíîå îòíîøåíèå ïîêàçàòåëåé äëÿ êîíå÷íîé îöåíêè âëèÿíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà íà ïàðàìåòðû ÕË, ïðèíèìàÿ ïàðàìåòðû êîíòðîëüíîé ìûøöû çà 100%. Ðåçóëüòàòû îïûòîâ, ïðîâåäåííûõ â óêàçàííûõ èíòåðâàëàõ âðåìåíè ïðèæèçíåííîé òðàâìû ìûøö æèâîòíûõ ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå ¹ 2 (â êàæäîé âðåìåííîé ãðóïïå èññëåäîâàëè ïî 15 æèâîòíûõ). Òàáëèöà 2 Âëèÿíèå äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû íà ïàðàìåòðû ÕË ìûøö æèâîòíûõ. Д авн ость п р и ж и зн ен н ой тр ав м ы (час) К 0 0 ,5 1 3 6 12 18 24
П арам етр ы Х Л И нтенси вн ость (J) M±m % 100 97 ,6 ± 3 ,4 83 ,8 ± 2 ,8 62 ,7 ± 3 ,0 51 ,1 ± 2 ,9 38 ,9 ± 3 ,2 26 ,4 ± 2 ,7 16 ,1 ± 2 ,3 н ет
Л атентн ы й п ер иод (t) M±m % 10 0 9 6 ,8± 3 ,2 6 6 ,0± 3 ,1 7 2 ,6± 2 ,9 5 2 ,8± 3 ,4 5 9 ,4± 2 ,5 8 9 ,1± 3 ,5 1 2 2 ,3 ±3 ,8 -
Ãëàâà 2
Ñòð. 92
Ïî ìàòåìàòè÷åñêîé îáðàáîòêå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ óñòàíîâëåíî, ÷òî èìååòñÿ ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîå ðàçëè÷èå ïîêàçàòåëåé ìåæäó êîíòðîëüíûìè è òðàâìèðîâàííûìè ìûøöàìè. Íàèáîëåå óáåäèòåëüíî íà âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ äëèòåëüíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû óêàçûâàëî èçìåíåíèå èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ ìåäëåííîé âñïûøêè ÕË. Èñïîëüçóÿ ýòîò ïàðàìåòð ìîæíî, ïî ìíåíèþ Â.Â.Ïðóòîâûõ, îïðåäåëèòü äàâíîñòü òðàâìû â ñëó÷àå, åñëè îíà áûëà ïðè÷èíåíà çà 30 ìèíóò äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Íàíåñåíèå ïîâðåæäåíèÿ çà áîëåå äëèòåëüíûé ïåðèîä çàáîÿ ïîêàçàë åùå áîëüøèå ðàçëè÷èÿ îò êîíòðîëÿ. Ïðè ýòîì ñíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ íàèáîëåå âûðàæåíî â ïåðâûå ÷àñû ïåðåæèâàíèÿ òðàâìû è ÷åðåç 3 ÷àñà ñîñòàâëÿåò îêîëî 50% îòíîñèòåëüíî êîíòðîëÿ. Ïðè áîëåå äëèòåëüíûõ ñðîêàõ ïåðåæèâàíèÿ èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ îò 3 äî 24 ÷àñîâ ñíèæàëàñü ìåíåå çíà÷èòåëüíî è íå ñîõðàíÿëàñü âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïîâðåæäåíèÿ â ïðåäåëàõ âðåìåíè, óêàçàííîãî â òàáëèöå. Äèíàìèêà ëàòåíòíîãî ïåðèîäà èìååò ñëîæíóþ õàðàêòåðèñòèêó. Ïðè äàâíîñòè òðàâìû îò 1 äî 6 ÷àñîâ íå áûëî îòìå÷åíî ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîãî ðàçëè÷èÿ ðåçóëüòàòîâ ìåæäó îòäåëüíûìè âðåìåííûìè ïðîìåæóòêàìè ïðè íàëè÷èè åãî ìåæäó ïîñëåäóþùèìè âðåìåííûìè èíòåðâàëàìè è ìåæäó êîíòðîëåì. Ïðèâåäåííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî íàèáîëåå âûðàæåííûå èçìåíåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ íàáëþäàþòñÿ â ïåðâûé ÷àñ ïðèæèçíåííîé òðàâìû. Äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ìîæåò ñëóæèòü âñïîìîãàòåëüíûì ïàðàìåòðîì ïðè îïðåäåëåíèè äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû îò 1 äî 6 ÷àñîâ. Îäíàêî ïðè òðàâìàõ ñ áîëüøåé ïðîäîëæèòåëüíîñòüþ ïåðåæèâàíèÿ (áîëåå 6 ÷àñîâ), êîãäà èçìåíåíèå èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ íåçíà÷èòåëüíî, íàèáîëåå öåííûì ïîêàçàòåëåì ÿâëÿåòñÿ äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà. Òàêèì îáðàçîì, öåëåñîîáðàçíî ïðè îïðåäåëåíèè äàâíîñòè òðàâìû äî îäíîãî ÷àñà ïðîâîäèòü ó÷åò îáîèõ ïàðàìåòðîâ ÕË.  ïåðèîä îò 1 äî 6 ÷àñîâ îñíîâíûì ïîêàçàòåëåì ÿâëÿåòñÿ èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ïðè îðèåíòèðóþùèõ çíà÷åíèÿõ ëàòåíòíîãî ïåðèîäà è ïðè òðàâìàõ äëèòåëüíîñòüþ áîëåå 6 ÷àñîâ îñíîâíûì ïàðàìåòðîì ÿâëÿåòñÿ èçìåíåíèå äëèòåëüíîñòè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ñ ó÷åòîì èíòåíñèâíîñòè ÕË. Íà ðèñ. 11 ïîêàçàíî âëèÿíèå äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû íà ïàðàìåòðû êîíòðîëüíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 93
Ðèñ. 11. Äèíàìèêà ïàðàìåòðîâ ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö â çàâèñèìîñòè îò ñðîêîâ ïðèæèçíåííîé òðàâìû. 1 - ïàðàìåòðû êîíòðîëüíûõ ìûøö; 2 - äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà òðàâìèðîâàííûõ ìûøö; 3 - èíòåíñèâíîñòü òðàâìèðîâàííûõ ìûøö; J - èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ; t - äàâíîñòü ïðèæèçíåííîé òðàâìû. Èç ðèñóíêà âèäíî, ÷òî ïàðàìåòðû ÕË êîíòðîëüíûõ (èíòàêòíûõ) ìûøö ïîñòîÿííû è íå çàâèñÿò îò äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà.  òðàâìèðîâàííûõ òêàíÿõ íàèáîëåå îäíîçíà÷íî èçìåíÿåòñÿ èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ìåäëåííîé âñïûøêè, óìåíüøàÿñü âïëîòü äî 24 ÷àñà ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà. Äèíàìèêà èçìåíåíèÿ ëàòåíòíîãî ïåðèîäà èìååò òåíäåíöèþ ê ñíèæåíèþ ïðè òðàâìå äî òðåõ ÷àñîâ ñ íåáîëüøèì óâåëè÷åíèåì â èíòåðâàëå 1-2 ÷àñà ñ ïîñëåäóþùèì óâåëè÷åíèåì åãî äëèòåëüíîñòè äî 24-õ ÷àñîâ. Óìåíüøåíèå èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ ãîìîãåíàòîâ òðàâìèðîâàííûõ ìûøö, ïî-âèäèìîìó, ñâÿçàíî ñ óãíåòåíèåì ïðîöåññîâ ÏÎË â íèõ, ÷òî ïðèâîäèò ê óìåíüøåíèþ èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ. Âîçìîæíî ýòî ñâÿçàíî ñ ïîòåðåé æèçíåñïîñîáíîñòè òêàíåé è ñíèæåíèåì èíòåíñèâíîñòè îáùåãî óðîâíÿ ðåàêöèé ÏÎË çà ñ÷åò âûäåëåíèÿ êàêèõ-ëèáî âåùåñòâ, âëèÿþùèõ íà õîä ýòèõ ðåàêöèé. Èçìåíåíèå ëàòåíòíîãî ïåðèîäà òàêæå ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî â òðàâìèðîâàííîé ìûøöå ïðîèñõîäÿò ïðîöåññû, âëèÿþùèå íà ÏÎË. Ïðè÷åì âîëíîîáðàçíîå èçìåíåíèå ýòîãî ïàðàìåòðà íàâîäèò íà ìûñëü, ÷òî ê ìîìåíòó èññëåäîâàíèÿ â òðàâìèðîâàííîé ìûøöå ñîäåðæàòñÿ âåùåñòâà, ïî-ðàçíîìó âëèÿþ-
Ãëàâà 2
Ñòð. 94
ùèå íà ïàðàìåòðû ÕË.  ïåðâûå 6 ÷àñîâ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ïðåîáëàäàþò âåùåñòâà, óìåíüøàþùèå äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, à â ïîñëåäóþùåì, íàîáîðîò, - óäëèíÿþùèå åãî. Íà îñíîâàíèè èçëîæåííîãî àâòîð ïðèøåë ê âûâîäó, ÷òî èñïîëüçîâàíèå ìåòîäà ðåãèñòðàöèè ÕË ïîçâîëÿåò ñ äîñòàòî÷íîé ñòåïåíüþ äîñòîâåðíîñòè ðåøàòü âîïðîñ î äëèòåëüíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû ñêåëåòíîé ìóñêóëàòóðû ïóòåì ñîïîñòàâëåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ñ êîíòðîëåì â èíòåðâàëå îò 30 ìèíóò äî 24 ÷àñîâ. Êðîìå òîãî, ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííîãî èññëåäîâàíèÿ äàþò âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàòü ìåòîä ÕË äëÿ äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêè äàâíîñòè òðàâìû ïðè ðåøåíèè âîïðîñà î ïîñëåäîâàòåëüíîñòè íàíåñåíèÿ ïîâðåæäåíèé, ñîïîñòàâëÿÿ ïîêàçàòåëè òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ìåæäó ñîáîé. Òàáëèöà 3 Âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà ïàðàìåòðû õåìèëþìèíåñöåíöèè ãîìîãåíàòîâ ìûøö ñ ðàçëè÷íûìè ñðîêàìè ïðèæèçíåííîé è ïîñìåðòíîé òðàâìû.
Время после смерти (час)
0
12
24
Давность прижизненной и посмертной травмы К 30 мин. до смерти 1 час до смерти 10 мин. после смерти К 30 мин. до смерти 1 час до смерти 10 мин. после смерти К 30 мин. до смерти 1 час до смерти 10 мин. после смерти
Параметры ХЛ
100 83,8±2,8 62,7±3,0
Латентный период M±m % 100 66,0±2,4 72,6±2,8
96,2±2,1 86,4±2,7 43,7±1,9 17,2±2,1
107,6±2,3 117,3±2,9 79,6±2,1 105,7±3,0
75,0±2,3 69,6±2,2 12,3±1,8 нет
128,4±2,6 147,5±3,5 115,2±3,8 -
58,3±2,6
156,8±3,6
Интенсивность M±m %
Ïðèìå÷àíèå.  êàæäîé ãðóïïå èññëåäîâàëîñü ïî 6 æèâîòíûõ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 95
Â.Â.Ïðóòîâûõ èçó÷àë òàêæå âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà êèíåòèêó õåìèëþìèíåñöåíöèè. Îí ïðîâîäèë ñåðèþ îïûòîâ, â êîòîðûõ èññëåäîâàëè âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà ïàðàìåòðû ÕË ãîìîãåíàòîâ êîíòðîëüíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìûøö æèâîòíûõ. Òðàâìó æèâîòíûì íàíîñèëè àíàëîãè÷íûì ñïîñîáîì çà 30 ìèíóò è 1 ÷àñ äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, à òàêæå ÷åðåç 10 ìèíóò ïîñëå íåå. Òðóïû õðàíèëè ïðè òåìïåðàòóðå 22-28îÑ è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 80-90% â êîìíàòíûõ óñëîâèÿõ. Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè ñðàçó ïîñëå çàáîÿ æèâîòíûõ, à òàêæå ÷åðåç 12 è 24 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî îïèñàííîé ìåòîäèêå. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ âëèÿíèÿ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà ïàðàìåòðû ÕË ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 3. Óñòàíîâëåíî, ÷òî â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå ïàðàìåòðû ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö èçìåíÿþòñÿ êàê â òðàâìèðîâàííûõ, òàê è â èíòàêòíûõ ìûøöàõ æèâîòíûõ. Ïðè ýòîì èíòåíñèâíîñòü ÕË ñíèæàåòñÿ ïî ìåðå óâåëè÷åíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ãîðàçäî áûñòðåå â òðàâìèðîâàííûõ, ÷åì â êîíòðîëüíûõ ìûøöàõ, ñ ñîõðàíåíèåì ðàçëè÷èé â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû (ðèñ. 12).
Ðèñ. 12. Âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà èíòåíñèâíîñòü ÕË ìûøö ñ ðàçëè÷íûìè ñðîêàìè òðàâìû. 1 - êîíòðîëü; 2 - ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííàÿ ìûøöà çà 30 ìèíóò äî ñìåðòè; 3 - çà 1 ÷àñ äî ñìåðòè; 4 - ÷åðåç 10 ìèíóò ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè; J - èíòåíñèâíîñòü ÕË; t - ïîñìåðòíûé ïåðèîä.
Ãëàâà 2
Ñòð. 96
Íà ðèñóíêå âèäíî, ÷òî ïðè òðàâìå, íàíåñåííîé çà îäèí ÷àñ äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ñâå÷åíèå â ãîìîãåíàòå íå íàáëþäàåòñÿ ÷åðåç îäíè ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Ïðè äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû 30 ìèíóò ñâå÷åíèå íàáëþäàëîñü ñ ñîõðàíåíèåì äîñòîâåðíîãî ðàçëè÷èÿ ìåæäó òðàâìèðîâàííûìè çà îäèí ÷àñ äî ñìåðòè, êîíòðîëüíûìè è òðàâìèðîâàííûìè ïîñìåðòíî ìûøöàìè. Äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà âî âñåõ ñëó÷àÿõ óâåëè÷èâàëàñü àíàëîãè÷íî èçìåíåíèþ èíòåíñèâíîñòè ÕË (ðèñ.13).
Ðèñóíîê 13. Âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íà äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ÕË ìûøö ñ ðàçëè÷íûìè ñðîêàìè òðàâìû. 1 - êîíòðîëü; 2 - ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííàÿ ìûøöà çà 30 ìèíóò äî ñìåðòè; 3 - çà îäèí ÷àñ äî ñìåðòè; 4 - ÷åðåç 10 ìèíóò ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè; t - äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà; t - ïîñìåðòíûé ïåðèîä. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî, íåñìîòðÿ íà âëèÿíèå ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ ïàðàìåòðîâ ÕË ìûøö, îáíàðóæåííûå ìåæäó òðàâìèðîâàííûìè â ðàçëè÷íûå ñðîêè è êîíòðîëüíûìè, ñîõðàíÿþòñÿ. Ýòî ïî ìíåíèþ Â.Â.Ïðóòîâûõ, äàåò âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàòü ìåòîä ÕË äëÿ äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè (ïîñìåðòíîñòè) è äàâíîñòè òðàâìû ñêåëåòíûõ ìûøö ñ îáÿçàòåëüíûì èññëåäîâàíèåì íåïîâðåæäåííûõ ìûøö òîãî æå æèâîòíîãî.
Ãëàâà 2
Ñòð. 97
Àâòîð ïðîâåë òàêæå èññëåäîâàíèå ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà ìåòîäîì ðåãèñòðàöèè õåìèëþìèíåñöåíöèè. Îäíàêî, âñëåäñòâèå ðàçëè÷íîãî ñîäåðæàíèÿ è ñòðóêòóðû ëèïèäîâ è íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò â òêàíÿõ ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ ïðîöåññû ÏÎË ïðîòåêàþò íåîäèíàêîâî, ÷òî îòðàæàåòñÿ íà êèíåòèêå ÕË. Íåñìîòðÿ íà íåîäíîðîäíîñòü ëèïèäíîãî ñîñòàâà òêàíåé ðàçëè÷íûõ æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà, èìåþòñÿ çíà÷èòåëüíûå ðàçëè÷èÿ â êîëè÷åñòâå îòäåëüíûõ ëèïèäîâ (Deshen Z. et al, 1963; Pallet P. et al, 1973). Âûïîëíåííûå ýêñïåðèìåíòû ïîçâîëèëè ïîäîáðàòü îïòèìàëüíûå óñëîâèÿ, ïðè êîòîðûõ íàáëþäàëàñü ÕË â ãîìîãåíàòàõ ìûøö ÷åëîâåêà, äëÿ ÷åãî àâòîðó ïðèøëîñü â çíà÷èòåëüíîé ìåðå èçìåíÿòü ìåòîäèêó èññëåäîâàíèÿ. Îõëàæäåíèå ÔÝÓ ïðîèçâîäèëè ïðîòî÷íîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé, ÷òî îáåñïå÷èâàëî äîñòàòî÷íî ñòàáèëüíûé ðåæèì ðàáîòû óñòàíîâêè.  êà÷åñòâå ñðåäû èíêóáàöèè ïðèìåíåíà àêòèâíàÿ ôîñôàòíàÿ ñðåäà, ñîñòîÿùàÿ èç 30 ìÌ KH2PO4 è 95 ìÌ KCl ïðè pH 7,4. Êîíå÷íàÿ êîíöåíòðàöèÿ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà â êþâåòå ñîñòàâëÿëà 10 -3 Ì. Ïðîâîäèëè ÓÔîáëó÷åíèå ãîìîãåíàòà ìûøö ÷åëîâåêà ïîëíûì ñïåêòðîì ëàìïû ÏÐÊ-4 â òå÷åíèå òðåõ ìèíóò. Îáúåêòàìè èññëåäîâàíèÿ áûëè òðàâìèðîâàííûå ìûøöû ëþäåé, ïîãèáøèõ íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ (20 ñëó÷àåâ) è ïðîæèâøèõ ïîñëå òðàâìû â ïðåäåëàõ îäíîãî ÷àñà (12 ñëó÷àåâ), à òàêæå ìàòåðèàë, âçÿòûé ïðè ïðîèçâîäñòâå îïåðàòèâíûõ âìåøàòåëüñòâ ïî ïîâîäó ðàçëè÷íûõ òðàâìàòè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé (6 ñëó÷àåâ). Ïàðàìåòðû ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö èññëåäîâàëè íà ïðîòÿæåíèè îäíèõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Íàðÿäó ñ ïðèæèçíåííîé òðàâìîé èññëåäîâàëè ìûøöû, òðàâìèðîâàííûå ÷åðåç 3 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Äëÿ èñêëþ÷åíèÿ ñëó÷àéíûõ âëèÿíèé íà ðåçóëüòàòû îïûòîâ èññëåäîâàíèå êàæäîãî ãîìîãåíàòà ìûøöû ïðîèçâîäèëè äâàæäû. Ðåãèñòðàöèþ ïàðàìåòðîâ ÕË ìûøö òðóïîâ ïðîèçâîäèëè ÷åðåç 3, 6, 12 è 24 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Êðîìå òîãî, èññëåäîâàëè ìûøöû òðóïîâ ñ òàêèìè æå ñðîêàìè òðàâìû, ïîñòóïèâøèå â ìîðã â áîëåå ïîçäíèå ñðîêè îò ìîìåíòà ñìåðòè (32 ñëó÷àÿ, ëèöà, ïîãèáøèå îò òóïîé òðàâìû, â âîçðàñòå 3-70 ëåò). Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 4 è íà ãðàôèêå èçìåíåíèé èíòåíñèâíîñòè ÕË (ðèñ. 14). Êîíå÷íûé ðåçóëüòàò äàí â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê èíòàêòíîé ìûøöå, òàê êàê ó ðàçëè÷íûõ òðóïîâ íàáëþäàëèñü èí-
Ãëàâà 2
Ñòð. 98
äèâèäóàëüíûå êîëåáàíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË. Ñîîòíîøåíèÿ ðåçóëüòàòîâ â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè òðàâìû è ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà âñåãäà îäíîîáðàçíî èçìåíÿëèñü â òðàâìèðîâàííîé è êîíòðîëüíîé ìûøöàõ ðàçëè÷íûõ òðóïîâ.
Ðèñ. 14. Õåìèëþìèíîãðàììû êîíòðîëüíîé (1) è òðàâìèðîâàííîé ïåðåä ñìåðòüþ ìûøöû ÷åëîâåêà ÷åðåç 6 (2) è 12 (3) ÷àñîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.
Ðèñ. 15. Ãðàôèê èçìåíåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ÕË òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ÷åëîâåêà â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. 1 - êîíòðîëüíàÿ ìûøöà; 2 - ìûøöà, òðàâìèðîâàííàÿ ïåðåä ñìåðòüþ; 3 - ìûøöà, òðàâìèðîâàííàÿ çà 1 ÷àñ äî ñìåðòè; 4 - ïîñìåðòíàÿ òðàâìà; J % - èíòåíñèâíîñòü ÕË; t- âðåìÿ ïîñëå ñìåðòè.
Ãëàâà 2
Ñòð. 99
Áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî êèíåòèêà ÕË ãîìîãåíàòîâ ìûøö ÷åëîâåêà íåñêîëüêî îòëè÷àåòñÿ îò òàêîâîé ó ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ. Èíòåíñèâíîñòü ÕË íàðàñòàåò ïîñòåïåííî è çíà÷èòåëüíî áîëüøå, ÷åì â ãîìîãåíàòàõ ìûøö æèâîòíûõ. Íà ðèñ. 15 ïðåäñòàâëåíû òèïîâûå õåìèëþìèíîãðàììû ãîìîãåíàòîâ êîíòðîëüíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ÷åëîâåêà. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà ñ ðàçëè÷íûìè ñðîêàìè ïðèæèçíåííîé è ïîñìåðòíîé òðàâìû ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 4. Òàáëèöà 4 Âëèÿíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè òðàâìû íà ïàðàìåòðû ÕË ìûøö ÷åëîâåêà â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå.
Группа исслед. мышц
Травма перед смертью Травма в пределах 1 часа до смерти. Контроль (интактная мышца) Посмертн. травма
Количество исследуемых трупов
Время после смерти
7 14 11 14 5 8 7 6 12 12 12 12 12 12 12 12
3 6 12 24 3 6 12 24 3 6 12 24 3 6 12 24
Параметры ХЛ в % к контролю ЛатенИнтенсивтный ность период M±m M±m 125,9±3,4 69,5±4,7 139,3±3,3 43,5±2,4 152,2±4,2 28,5±3,0 нет 43,9±5,4 140,6±6,8 20,0±2,2 163,7±4,4 нет нет 100 100 103,5±3,7 102,4±4,8 98,7±4,2 110,2±4,2 99,4±7,2 107,3±5,4 103,2±3,0 97,4±3,4 107,3±3,1 103,0±3,6 102,5±2,2 103,5±2,6 106,0±3,2 114,5±3,5
Ïðèìå÷àíèå. Ïàðàìåòðû ÕË êîíòðîëüíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ïîñìåðòíî ìûøö äàíû äëÿ 12 ñëó÷àåâ, èññëåäîâàííûõ ÷åðåç 3, 6, 12 è 24 ÷àñà ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Äèíàìèêà èíòåíñèâíîñòè ÕË ãîìîãåíàòîâ òðàâìèðîâàííûõ è èíòàêòíûõ ìûøö òðóïîâ ëþäåé ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 16.
Ãëàâà 2
Ñòð. 100
Èç äàííîé òàáëèöû è ãðàôèêà ñëåäóåò, ÷òî â èíòàêòíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ïîñìåðòíî ìûøöàõ èçìåíåíèÿ â ïåðâûå ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà âûðàæåíû íåçíà÷èòåëüíî, ðàçëè÷èÿ ìåæäó íèìè ñòàòèñòè÷åñêè íå äîñòîâåðíû. Èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË â ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííûõ ìûøöàõ çàâèñÿò îò äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà. Òàê, â ñëó÷àå äàâíîñòè òðàâìû â ïðåäåëàõ 1 ÷àñà ê 12 ÷àñàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ñâå÷åíèå â ãîìîãåíàòàõ îòñóòñòâóåò, â òî âðåìÿ êàê ïðè òðàâìå, íàíåñåííîé íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä ñìåðòüþ èñ÷åçíîâåíèå ñâå÷åíèÿ îòìå÷àåòñÿ òîëüêî ê 24 ÷àñàì. Àíàëîãè÷íûå èçìåíåíèÿ íàáëþäàëè è â îòíîøåíèè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, äëèòåëüíîñòü êîòîðîãî óâåëè÷èâàåòñÿ ïðîïîðöèîíàëüíî äàâíîñòè òðàâìû è âðåìåíè, ïðîøåäøåìó îò ìîìåíòà ñìåðòè.
Ðèñ. 16. Õåìèëþìèíîãðàììû (ÕËÃ) èíòàêòíîé ìûøöû è ïðè äîáàâëåíèè ðàçëè÷íûõ ãîìîãåíàòîâ. 1 - ÕËà èíòàêòíîé ìûøöû; 2 - ÕËà ïðè äîáàâëåíèè 0,5 ìë àíàëîãè÷íîãî ãîìîãåíàòà; 3 - ÕËà ïðè äîáàâëåíèè 0,5 ìë ãîìîãåíàòà òðàâìèðîâàííîé ìûøöû; îñòàëüíûå îáîçíà÷åíèÿ êàê íà ðèñóíêå 3. Èññëåäîâàíèå êëèíè÷åñêîãî ìàòåðèàëà ïîêàçàëî, ÷òî ÷åðåç 12 ÷àñîâ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â ãîìîãåíàòàõ òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå íå îáíàðóæèâàëîñü è õåìèëþìèíîãðàììû èìåëè âèä ïðÿìîé ëèíèè. Âñåãî áûëî èññëåäîâàíî 6 ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííûõ ìûøö â èíòåð-
Ãëàâà 2
Ñòð. 101
âàëå îò 12 äî 24 ÷àñîâ, ïðîâåäåíî 20 èññëåäîâàíèé, è íè â îäíîì ñëó÷àå íå áûëî ïîëó÷åíî ðåçóëüòàòîâ, ñâèäåòåëüñòâóþùèõ î íàëè÷èè ñâåðõëàáîãî ñâå÷åíèÿ.  íåñêîëüêèõ ñëó÷àÿõ, êîãäà ïîòåðïåâøèå íàõîäèëèñü â ñòàöèîíàðå â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ÷àñîâ ïåðåä ñìåðòüþ, ñîîòíîøåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË êîíòðîëüíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìûøö çíà÷èòåëüíî ðàçëè÷àëèñü è áûëè âåñüìà âàðèàáåëüíûìè. Ýòî îáóñëîâëåíî, ïî-âèäèìîìó, âëèÿíèåì íà ïàðàìåòðû ÕË ðàçëè÷íûõ ìåäèêàìåíòîçíûõ ïðåïàðàòîâ, ââîäèìûõ áîëüíûì â ïåðèîä èõ ëå÷åíèÿ (Øàðîâ À.Ï., 1974; Êðè÷åâñêèé À.À. è ñîàâò., 1976; Àð÷àêîâ À.È., 1971). Òðàâìà ïðèâîäèò ê íàðóøåíèþ êðîâîñíàáæåíèÿ â ìåñòå åå ïðè÷èíåíèÿ è, ïî-âèäèìîìó, êîíöåíòðàöèÿ ââîäèìûõ â îðãàíèçì âåùåñòâ áóäåò ðàçëè÷íîé â èíòàêòíîé è òðàâìèðîâàííîé ìûøöàõ, ÷òî, âåðîÿòíî, è äàåò ðàçáðîñ ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ. Ïðè èññëåäîâàíèè ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà ó Â.Â.Ïðóòîâûõ âîçíèêëè îïðåäåëåííûå òðóäíîñòè, âûðàæàþùèåñÿ â òîì, ÷òî â ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå èç-çà îáøèðíîñòè ìåñòà òðàâìàòèçàöèè íå âñåãäà áûëà âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàòü â êà÷åñòâå êîíòðîëÿ íåïîâðåæäåííóþ ìûøöó ïðîòèâîïîëîæíîé êîíå÷íîñòè èëè ñèììåòðè÷íîãî ó÷àñòêà òåëà. Ïîäîáíûå ñëó÷àè ÷àñòî âñòðå÷àëèñü ïðè ýêñïåðòèçå òðàíñïîðòíîé òðàâìû è ïàäåíèÿ ñ âûñîòû.  ñâÿçè ñ ýòèì, äëÿ óñòàíîâëåíèÿ âîçìîæíîñòè èñïîëüçîâàíèÿ â êà÷åñòâå êîíòðîëÿ íå òîëüêî îäíîðîäíûõ, à òàêæå è äðóãèõ ìûøö, áûëè èññëåäîâàíû ïàðàìåòðû ÕË ñãèáàòåëåé è ðàçãèáàòåëåé áåäðà è ïëå÷à, ìûøöû ÿãîäè÷íîé îáëàñòè è ãðóäíûå ìûøöû. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî èíòåíñèâíîñòü, äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, à òàêæå êèíåòèêà ÕË ãîìîãåíàòîâ ðàçëè÷íûõ ãðóïï ñêåëåòíîé ìóñêóëàòóðû ïðàêòè÷åñêè íå îòëè÷àëèñü ìåæäó ñîáîé. Ñëåäîâàòåëüíî, â êà÷åñòâå êîíòðîëüíûõ îáðàçöîâ ìîæíî èñïîëüçîâàòü ïðàêòè÷åñêè ëþáóþ ïîïåðå÷íî-ïîëîñàòóþ ñêåëåòíóþ ìûøöó. Ñâîåîáðàçíîå èçìåíåíèå ïàðàìåòðîâ ÕË, âûðàæàþùååñÿ â ñíèæåíèè èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ è óâåëè÷åíèÿ äëèòåëüíîñòè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, ïîçâîëÿåò ïðåäïîëîæèòü, ÷òî â ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííîé ìûøöå ïðîèñõîäÿò ïðîöåññû àêòèâàöèè èëè îáðàçîâàíèÿ âåùåñòâ, óãíåòàþùèõ ÏÎË è ïðèâîäÿùèõ ê èçìåíåíèþ êèíåòèêè ÕË. Äëÿ ðàçðåøåíèÿ ýòîãî âîïðîñà àâòîð ïðîâåë ñåðèþ îïûòîâ, â êîòîðûõ ãîìîãåíàò òðàâìèðîâàííîé ìûøöû äîáàâëÿë ê ãîìîãåíàòó èíòàêòíîé è ïðîèçâîäèë èññëå-
Ãëàâà 2
Ñòð. 102
äîâàíèå êèíåòèêè ÕË. Ñ ýòîé öåëüþ 0,5 ìë ãîìîãåíàòà òðàâìèðîâàííîé ìûøöû, â êîòîðîé íå îòìå÷àëîñü ñâå÷åíèå, ïðèáàâëÿë â êþâåòó, ãäå íàõîäèëñÿ ãîìîãåíàò èíòàêòíîé ìûøöû è ïî ïðèíÿòîé ìåòîäèêå ïðîèçâîäèë ðåãèñòðàöèþ ïàðàìåòðîâ ÕË.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ èññëåäîâàëè âëèÿíèå äîáàâëåíèÿ òàêîãî æå êîëè÷åñòâà ãîìîãåíàòà èíòàêòíîé ìûøöû. Âî âñåõ ñëó÷àÿõ äîáàâëåíèÿ ãîìîãåíàòà òðàâìèðîâàííîé ìûøöû ïðèâîäèëî ê èçìåíåíèþ ïàðàìåòðîâ è êèíåòèêè ÕË èíòàêòíîé ìûøöû. Äîáàâëåíèå æå ãîìîãåíàòà èíòàêòíîé ìûøöû íå âûçûâàëî çíà÷èòåëüíîãî èçìåíåíèÿ êèíåòèêè ÕË. Ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòå õåìèëþìèíîãðàììû ïðåäñòàâëåíû íà ðèñóíêå 16. Èç ðèñóíêà ñëåäóåò, ÷òî äîáàâëåíèå ãîìîãåíàòà òðàâìèðîâàííîé ìûøöû çíà÷èòåëüíî èçìåíÿåò êèíåòèêó ÕË. Ïðè ýòîì óâåëè÷èâàåòñÿ äëèòåëüíîñòü ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, óìåíüøàåòñÿ èíòåíñèâíîñòü íàðàñòàíèÿ ñâå÷åíèÿ è âûñîòà ìåäëåííîé âñïûøêè ÕË. Ñëåäîâàòåëüíî, ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî â ãîìîãåíàòàõ òðàâìèðîâàííûõ ìûøö ñîäåðæàòñÿ âåùåñòâà, âûçûâàþùèå èçìåíåíèå êèíåòèêè ÕË. Ïî ñâîåìó äåéñòâèþ íà êèíåòèêó ÕË îíè âåñüìà ñõîæè ñ àíòèîêñèäàíòàìè, êîòîðûå, èíãèáèðóÿ ïðîöåññû ÏÎË, âûçûâàþò àíàëîãè÷íûå èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË (Øëÿïèíòîõ Â.ß. è ñîàâò., 1966; Ãóñàêîâ Â.Ì. è ñîàâò., 1974; Âëàäèìèðîâ Þ.À. è ñîàâò., 1975).  òðåòüåé ñåðèè îïûòîâ Â.Â.Ïðóòîâûõ èçó÷èë âëèÿíèå äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû íà íàêîïëåíèå ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà â ãîìîãåíàòàõ òðàâìèðîâàííûõ è èíòàêòíûõ ìûøö, à â 4-é ñåðèè - êîëè÷åñòâî ÌÄÀ â ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííûõ ìûøöàõ çà 30 ìèíóò è çà 1 ÷àñ äî, à òàêæå â òðàâìèðîâàííûõ ÷åðåç 10 ìèíóò ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî èñòå÷åíèè 12 è 24 ÷àñîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.  ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé àâòîð óñòàíîâèë, ÷òî ïðèæèçíåííàÿ ìåõàíè÷åñêàÿ òðàâìà ñêåëåòíûõ ìûøö, âîçíèêøàÿ íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä ñìåðòüþ, äîñòîâåðíî îòëè÷àåòñÿ îò ïîñìåðòíîé ïî ïîêàçàòåëÿì ÕË è êîëè÷åñòâó ìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà. Ýòè äàííûå, ïî ìíåíèþ àâòîðà, ìîãóò ñëóæèòü ýêñïåðòíûìè êðèòåðèÿìè ïðè óñòàíîâëåíèè ïðèæèçíåííîñòè èëè ïîñìåðòíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ñêåëåòíûõ ìûøö. Ìåõàíè÷åñêàÿ òðàâìà ñêåëåòíûõ ìûøö, îáðàçîâàííàÿ íåïîñðåäñòâåííî, à òàêæå â ïðåäåëàõ 1 ÷àñà äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, õàðàêòåðèçóåòñÿ äèíàìèêîé ïàðàìåòðîâ ÕË è ÌÄÀ, ïîçâîëÿþùåé óñòàíîâèòü ñðîê åå âîçíèêíîâåíèÿ. Êðè-
Ãëàâà 2
Ñòð. 103
òåðèè ïîêàçàòåëåé ÕË è ÌÄÀ äëÿ îïðåäåëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè îáðàçîâàíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ñêåëåòíûõ ìûøö ñîõðàíÿþò äîêàçàòåëüñòâåííîå çíà÷åíèå â òå÷åíèå îäíèõ ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Ïðè ýêñïåðòèçå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû öåëåñîîáðàçíî èñïîëüçîâàòü ìåòîä ðåãèñòðàöèè ïàðàìåòðîâ õåìèëþìèíåñöåíöèè, èìåþùèé ñàìîñòîÿòåëüíîå äèàãíîñòè÷åñêîå çíà÷åíèå. Ã.À. Ïàøèíÿí, Â.Â. Ïðóòîâûõ, À.À. Ôèëèïïîâ, Í.À. Àðóòþíÿí, Ì.À. Îãàíåñÿí (1982) èçó÷èëè èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ èíäóöèðîâàííîé èîíàìè äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà õåìèëþìèíåñöåíöèè ìûøå÷íîé òêàíè, ïëàçìû êðîâè è ïå÷åíè äëÿ äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé. Èññëåäîâàíèÿ êðîâè ïðîâîäèëè çà 0, 0,5, 1, 3, 6, 12, 18, 24 è 48 ÷àñîâ äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, à òàêæå ÷åðåç 12 è 24 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè. Ìûøöû è ïå÷åíü èçó÷àëè ÷åðåç 6, 12 è 24 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Èíòåíñèâíîñòü ÕË óìåíüøàëàñü â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû.  êîíòðîëüíîé ãðóïïå ïàðàìåòðû ÕË íå èçìåíÿëèñü.  ïîñìåðòíîì ïåðèîäå èíòåíñèâíîñòü ÕË ñíèæàåòñÿ, à â ëàòåíòíûé ïåðèîä óâåëè÷èâàåòñÿ â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè ïðèæèçíåííîé òðàâìû. Í.À. Àðóòþíÿí (1979) ïîñòàâèë çàäà÷ó óñòàíîâèòü, íàñêîëüêî áûñòðî èçìåíÿþòñÿ ïàðàìåòðû ÕË ïå÷åíè ïîñëå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû êîíå÷íîñòåé. Ïðîâåäåíû ýêñïåðèìåíòû íà áåëûõ áåñïîðîäíûõ êðûñàõ-ñàìöàõ ìàññîé 150-200 ã. Òðàâìó íàíîñèëè ñ ïîìîùüþ ñïåöèàëüíîãî óñòðîéñòâà, ïîçâîëÿþùåãî äîçèðîâàòü ñèëó óäàðíîãî âîçäåéñòâèÿ, ïðè÷èíÿÿ ðàçìîçæåíèå ìÿãêèõ òêàíåé, ïåðåëîìû êîñòåé çàäíèõ êîíå÷íîñòåé. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó æèâîòíûõ (áåç ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû) ñîäåðæàëè â èçîëèðîâàííîì ïîìåùåíèè. Æèâîòíûõ äåêàïèòèðîâàëè ñðàçó ïîñëå òðàâìû, ÷åðåç 0, 0,5, 1, 2, 4, 8, 16 è 24 ÷àñà ïîñëå íåå.  òå æå ñðîêè äåêàïèòèðîâàëè êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ.  êàæäîé âðåìåííîé ãðóïïå èçó÷àëè ïå÷åíü 12 ýêñïåðèìåíòàëüíûõ è 12 êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ãîìîãåíàòîâ ôðàãìåíòû ïðàâîé äîëè ïå÷åíè èçìåëü÷àëè ñíà÷àëà â ïðåññå ÷åðåç ñèòî ñ îòâåðñòèÿìè 1 ìì, çàòåì 3 ã åå ãîìîãåíèçèðîâàëè â 12 ìë ðàñòâîðà, ñîäåðæàâøåãî 0,25 Ì ñàõàðîçû è 0,002 Ì ÒÐÈÑ-áóôåðà ïðè ðÍ 7,45 è òåìïåðàòóðå 0-4îÑ. Äàëåå 0,5 ìë ïîëó÷åííîãî ãîìîãåíàòà äîáàâëÿëè ê 3,7 ìë ðàñòâîðà, ñîäåðæàâøåãî 0,110 Ì ÒÐÈÑ-
Ãëàâà 2
Ñòð. 104
áóôåðà ðÍ 7,45 ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. Èîíû æåëåçà èñïîëüçîâàëè â âèäå FeSO 4+H2O. Èçìåðåíèå ÕË ïðîèçâîäèëè ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå ñ ïîìîùüþ óñòàíîâêè äëÿ ðåãèñòðàöèè ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé (Âëàäèìèðîâ Þ.À., Àð÷àêîâ À.È.). Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 5. Èç íåå ñëåäóåò, ÷òî ñ óâåëè÷åíèåì ñðîêà äàâíîñòè òðàâìû ìåíÿþòñÿ 3 îñíîâíûõ ïàðàìåòðà ÕË: àìïëèòóäà ìåäëåííîé âñïûøêè (À), ëàòåíòíûé ïåðèîä (t) è ïîëóøèðèíà ìåäëåííîé âñïûøêè ( Dt). Óæå ÷åðåç 0,5 ÷àñà ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû â ïå÷åíè ïðîèñõîäèò íåêîòîðîå ñíèæåíèå àìïëèòóäû ìåäëåííîé âñïûøêè. ×åðåç îäèí ÷àñ ïîñëå òðàâìû íàáëþäàëîñü çàìåòíîå åå ñíèæåíèå. Ðåçêîå ñíèæåíèå àìïëèòóäû ìåäëåííîé âñïûøêè ïðîèñõîäèò ÷åðåç 4 ÷àñà ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû.  äàëüíåéøåì ïðîèñõîäèò âîññòàíîâëåíèå àìïëèòóäû ìåäëåííîé âñïûøêè â ñðîêè áîëåå 8 ÷àñîâ ïîñëå òðàâìû. ×åðåç 0,5 ÷àñà ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ëàòåíòíûé ïåðèîä ÕË çàìåòíî ñíèæàåòñÿ. Çíà÷èòåëüíîå åãî óâåëè÷åíèå îòìå÷åíî ÷åðåç îäèí ÷àñ ïîñëå òðàâìû.  ýêñïåðèìåíòàëüíîé ãðóïïå æèâîòíûõ ñ äàâíîñòüþ òðàâìû 2 ÷àñà îòìå÷åíî ñíèæåíèå ëàòåíòíîãî ïåðèîäà.  îñòàëüíûå ñðîêè îòìå÷åíî åãî ïîñòîÿííîå óâåëè÷åíèå ïî ñðàâíåíèþ ñî ñðîêàìè ñðàçó ïîñëå òðàâìû, ÷åðåç 0,5 è 2 ÷àñà ïîñëå íåå. Ïðè ñðàâíåíèè ðåçóëüòàòîâ ïîëóøèðèíû ìåäëåííîé âñïûøêè óñòàíîâëåíî, ÷òî â ñðîêè äî 2 ÷àñîâ ïîñëå òðàâìû ïðîèñõîäèò óâåëè÷åíèå öèôðîâûõ ïîêàçàòåëåé. Ïðè òðàâìå ñ äàâíîñòüþ 4 ÷àñà íàáëþäàåòñÿ íåêîòîðîå ñíèæåíèå óêàçàííûõ ïîêàçàòåëåé.  äàëüíåéøåì ÷åðåç 8, 16 è 24 ÷àñà ïîñëå òðàâìû ïîêàçàòåëè ìåäëåííîé âñïûøêè óâåëè÷èâàþòñÿ. Êðèâûå èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË èìåþò ñëîæíûé õàðàêòåð, ïîýòîìó èñïîëüçîâàíèå ëèøü îäíîãî êàêîãî-ëèáî ïàðàìåòðà íåäîñòàòî÷íî. Ïðè ïðèìåíåíèè ìåòîäà ÕË äëÿ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû íåîáõîäèìî èñïîëüçîâàòü 3 îñíîâíûõ ïàðàìåòðà (A, t, Dt), ïîñêîëüêó âî âñåõ èçó÷åííûõ àâòîðîì âðåìåííûõ äèàïàçîíàõ íåò îäèíàêîâûõ êîýôôèöèåíòîâ èõ ñîîòíîøåíèé (òàáë. 5 è 6). Ðåçóëüòàòû ýêñïåðèìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèé áûëè ïðîâåðåíû íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå. Èçó÷åíà ÕË ïå÷åíè ïðè íàëè÷èè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé (17 íàáëþäåíèé) è ïîëó÷åííûå äàííûå ñîïîñòàâëåíû ñ ðåçóëüòàòàìè àíàëîãè÷íûõ èññëåäîâàíèé ïðè ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (5 íàáëþäåíèé).
Èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ õåìèëþìèíåñöåíöèè â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà
Òàáëèöà ¹ 5
Ãëàâà 2 Ñòð. 105
Ãëàâà 2
Ñòð. 106
Èçó÷åíèå ïàðàìåòðîâ ÕË ïå÷åíè èç ýêñïåðòíûõ íàáëþäåíèé ïðîâîäèëè ïðè òåìïåðàòóðå â êþâåòå 50 îÑ.  ñâÿçè ñ ýòèì áûëà ïðèìåíåíà ñèñòåìà îõëàæäåíèÿ ÔÝÓ ïðîòî÷íîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé. Ïàðàìåòðû ÕË èññëåäîâàëè ÷åðåç 6 ÷àñîâ, à òàêæå ïîâòîðíî ÷åðåç 12 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Èññëåäîâàíèå êàæäîãî ãîìîãåíàòà ïå÷åíè ïðîâîäèëè òðèæäû è áðàëè ñðåäíåàðèôìåòè÷åñêèå äàííûå. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïàðàìåòðû ÕË ïå÷åíè èç òðóïîâ ëþäåé íåñêîëüêî îòëè÷àþòñÿ îò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèé. Òàáëèöà 6 Êîýôôèöèåíòû ñîîòíîøåíèé ïàðàìåòðîâ õåìèëþìèíåñöåíöèè â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà.
Длит. посттравм. периода (час) 0 0,5 1 2 4 8 16 24
Коэффициенты соотношений Dt t 0,066 0,079 0,065 0,087 0,054 0,059 0,090 0,092
А t 1,39 1,47 0,75 1,09 0,44 0,60 0,47 0,66
А Dt 21,06 18,64 11,45 12,48 8,22 10,15 5,27 7,26
Dt х100% t 6,63 7,92 6,56 8,75 5,44 5,91 9,048 9,202
D х100% t 139,80 147,80 75,26 109,28 44,77 60,10 47,68 66,88
D х100% t 2106,5 1864,5 1145,6 1248,1 822,3 1015,8 527,0 726,7
Òàêèì îáðàçîì, ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ïîêàçàëè, ÷òî äëÿ ðåøåíèÿ âîïðîñà î äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé, ïî ìíåíèþ àâòîðà, ìîæíî èñïîëüçîâàòü ìåòîä õåìèëþìèíåñöåíöèè, â ÷àñòíîñòè èçìåðåíèÿ åå ïàðàìåòðîâ â ãîìîãåíàòå ïå÷åíè. Ã.À.Ïîïîâ (1965) óñòàíîâèë, ÷òî èíäóöèðîâàííàÿ ïåðåêèñüþ âîäîðîäà ÕË âîäíî-ñîëåâûõ ýêñòðàêòîâ ïå÷åíè êðûñ èìååò ðàçëè÷íóþ èíòåíñèâíîñòü è êèíåòèêó â çàâèñèìîñòè îò ñòåïåíè ðàñïàäà áèîëîãè÷åñêîãî ñóáñòðàòà. Á.Í.Òàðóñîâ è Â.Â.Ïåðåëûãèí (1966) ïîêàçàëè, ÷òî ïðè ïîâðåæäåíèè òêàíåé íàáëþäàåòñÿ ñâå÷åíèå, êîòîðîå ñíèæåíî ó òêàíåé, ïîòåðÿâøèõ æèçíåñïîñîáíîñòü.
Ãëàâà 2
Ñòð. 107
Öåëüþ ðàáîòû Þ.À.Âëàäèìèðîâà, Þ.Ë.Ìåëüíèêîâà è Õ.À.Êåáåäìàãîìåäîâîé (1968) ÿâëÿëîñü âûÿâëåíèå èçìåíåíèé â ÕË ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè è ìîçãà êðûñ ÷åðåç ðàçëè÷íîå âðåìÿ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Îðãàíû èçâëå÷åíû ñðàçó ïîñëå äåêàïèòàöèè æèâîòíîãî. Êóñî÷êè ïå÷åíè (2 ã) è ìîçãà (0,5 ã) ïðîìûâàëè îõëàæäåííîé äî 0îÑ ñðåäîé (0,25 Ì ñàõàðîçà, 10-2 Ì K2HPO4, 5õ10-5 Ì ÝÄÒÀ, pH 7,5. Çàòåì êóñî÷åê ïîìåùàëè â îõëàæäåííûé ãîìîãåíèçàòîð è ãîìîãåíèçèðîâàëè äî ïîëó÷åíèÿ îäíîðîäíîé ñìåñè 30 ñåêóíä â äâîéíîì îáúåìå ñðåäû òîãî æå ñîñòàâà. Ãîìîãåíàò ðàçâîäèëè â äâîéíîì îáúåìå ðàñòâîðà ôîñôàòíîãî áóôåðà (10-2 K2HPO4,5õ10-5 Ì ÝÄÒÀ, pH 7,5) è 2 ìë ðàñòâîðà, êóäà äîáàâëÿëè òàêæå 0,2 ìë 10-4 Ì K2HPO4, 5õ10-5 Ì ÝÄÒÀ, pH 7,5 è 2 ìë ðàñòâîðà, êóäà òàêæå äîáàâëÿëè 0,2 ìë 10-4 Ì FeSO4, êîòîðîå ñëóæèëî êàòàëèçàòîðîì (Þ.À.Âëàäèìèðîâ, 1966), ïåðåíîñèëè â êþâåòó. Îñòàâøóþñÿ ÷àñòü ïå÷åíè è ìîçãà âûäåðæèâàëè â ÷àøêå Ïåòðè ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. Áðàëè êóñî÷êè ÷åðåç 3, 6 è ò.ä ÷àñîâ, ÕË èçìåðÿëè íà ôîòîóìíîæèòåëå ÔÝÓ-42, óñèëèòåëå ïîñòîÿííîãî òîêà, ðÍ-ìåòðà ËÏÓ-01 è ñàìîïèñöå ÏÑI-02. Èçìåðåíèå ñâå÷åíèÿ ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè ïðîâîäèëè êàæäóþ ìèíóòó (ñ÷åò èìïóëüñîâ çà 30 ñ), ìîçãà - çàïèñûâàëè íà ñàìîïèñåö. Òåìíîâîé ôîí (1 îòí. åä.) âûñ÷èòûâàëè èç èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ îáðàçöà (I) è ñòàíäàðòíîãî èñòî÷íèêà ñâåòà óðàíîâîãî ñòåêëà ÆÑ-9 (Iî). Èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ãîìîãåíàòîâ ðàññ÷èòûâàëè ïî ôîðìóëå (15):
I - IT IC - I T Ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (18-20îÑ) ëþìèíåñöåíöèè ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè è ìîçãà ïî÷òè íå áûëî. Ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû äî 37-40îÑ ïðèâîäèëî ê äîâîëüíî ñèëüíîìó ñâå÷åíèþ, êîòîðîå â 30 ðàç ïðåâûøàëî ôîí (ïðè ýòîé òåìïåðàòóðå ïðîâîäèëè âñå èññëåäîâàíèÿ). Ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, ìåòîä ÕË ïîçâîëÿåò óñòàíîâèòü çàêîíîìåðíóþ äèíàìèêó èçìåíåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè è ãîëîâíîãî ìîçãà â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ óìåíüøàåòñÿ ïðèìåðíî âäâîå ÷åðåç 1,5-2 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè â ãîìîãåíàòàõ ìîçãà è ÷åðåç 3 ÷àñà - â ãîìîãåíàòàõ ïå÷åíè.
Ãëàâà 2
Ñòð. 108
Â.À. Ñåðãååâà (1978) èñïîëüçîâàëà ìåòîä õåìèëþìèíåñöåíöèè ìèîêàðäà è ïî÷êè äëÿ ðåøåíèÿ âîïðîñà î äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Áûëî ïðèìåíåíî ñïåöèàëüíîå óñòðîéñòâî, ñîñòîÿùåå èç ÔÝÓ, âûñîêîâîëüòíîãî ñòàáèëèçèðîâàííîãî âûïðÿìèòåëÿ, ðÍ-ìåòðà è ñàìîïèñöà (ÊÑÏ-4). Èññëåäîâàëà áåëûõ áåñïîðîäíûõ êðûñ, êîòîðûì ïðè÷èíÿëè ÷åðåïíîìîçãîâóþ òðàâìó. Òðóïû æèâîòíûõ õðàíèëè ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (18-20îÑ) è îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè 40-60%. Èíòåðâàë èññëåäîâàíèÿ ñîñòàâëÿë 3 ÷àñà, çà èñêëþ÷åíèåì 15è 18-÷àñîâîãî ñðîêà äëÿ ìèîêàðäà è 18-÷àñîâîãî - äëÿ ïî÷êè. Äëÿ âûäåëåíèé ìèòîõîíäðèé áðàëè 1 ã òêàíè (ìûøöû ñåðäöà, ïî÷êè), ãîìîãåíèçèðîâàëè â 10-êðàòíîì îáúåìå ñðåäû (0,25 Ì ñàõàðîçû è 2,5 ìÌ ÒÐÈÑ-áóôåðà, ðÍ 7,4). Öåíòðèôóãèðîâàëè ïðè 6000 îá/ìèíóòó â òå÷åíèå 20 ìèíóò. Ìèòîõîíäðèè îñòàâàëèñü â îñàäêå, ïåðåíîñèëè åãî â ãîìîãåíèçàòîð è ñóñïåíçèðîâàëè ñ ïîìîùüþ ïåñòèêà. Ñóñïåíçèþ äîâîäèëè äî ðàçâåäåíèÿ 1:100 è âíîñèëè â êþâåòó. Çàïèñü îäíîé ïðîáû ïðîèñõîäèëà â òå÷åíèå 20 ìèíóò ïðè âêëþ÷åííîé ìåøàëêå. Çàïèñûâàëè òåìíîâîé òîê, çàòåì ïðè îòêðûòîé øòîðêå ââîäèëè æåëåçî â êîíöåíòðàöèè 5õ10 -2 Ì äëÿ èíèöèèðîâàíèÿ ñâå÷åíèÿ. Ïîñëå ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ðàçâèâàëàñü “ìåäëåííàÿ âñïûøêà”, ïåðåõîäÿùàÿ â ñòàöèîíàðíîå ñâå÷åíèå, êîòîðîå âñåãäà ïðåâûøàëî óðîâåíü ñâå÷åíèÿ â ñóñïåíçèè äî ââåäåíèÿ æåëåçà. Ïîâòîðíîå åãî ââåäåíèå â ïåðèîä ñòàöèîíàðíîãî ñâå÷åíèÿ ïðèâîäèëî ê “áûñòðîé âñïûøêå” ñ ïîñëåäóþùèì çàòóõàíèåì ÕË (äàëüíåéøåå óâåëè÷åíèå êîíöåíòðàöèè æåëåçà äåéñòâóåò â ñèñòåìå êàê îêñèäàíò). Ïîäñ÷èòûâàëè ñâåòîñóììó ñâå÷åíèÿ êàæäîé ïðîáû. Óñòàíîâëåíî, ÷òî èìååòñÿ îïðåäåëåííàÿ êîððåëÿöèÿ äèíàìèêè èçëó÷åíèÿ ñóñïåíçèè ìèòîõîíäðèé è ñòåïåíè ðàçâèòèÿ äåñòðóêòèâíûõ ïðîöåññîâ â ìåìáðàííûõ ñòðóêòóðàõ îðãàíîâ. Íàèâûñøåå ñâå÷åíèå ìèòîõîíäðèé ïî÷êè îòìå÷åíî ñðàçó æå ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, çàòåì ñíèæàåòñÿ ê 3-ì ÷àñàì è îñòàåòñÿ ïðèìåðíî íà òîì æå óðîâíå äî 6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè. èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ ìèîêàðäà íåñêîëüêî íèæå ïîñëå ñìåðòè, ÷åì ïî÷êè, îíà íà÷èíàåò âîçðàñòàòü ê 3-ì ÷àñàì è äîñòèãàåò ìàêñèìóìà ê 6-òè ÷àñàì. Ñïóñòÿ 9-12 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè ñíèæåíèå ÕË è ê 21-24 ÷àñàì íàáëþäàåòñÿ ðåçêîå åå ïàäåíèå. Çàìåòíî óäëèíÿåòñÿ ëàòåíòíûé ïåðèîä ÕË ñ ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè äî 24 ÷àñîâ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 109
Õàðàêòåð èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË ïëàçìû êðîâè òðàâìèðîâàííûõ æèâîòíûõ (êðûñ) ñ öåëüþ ïðèìåíåíèÿ ýòîãî ìåòîäà äëÿ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû èçó÷àëè Ã.À.Ïàøèíÿí è À.À.Ôèëèïïîâ (1981). Íàíîñèëè òðàâìó íèæíèõ êîíå÷íîñòåé ñ ðàçìîçæåíèåì ìÿãêèõ òêàíåé è ïåðåëîìîì êîñòåé. Êðîâü (2 ìë) áðàëè èç ïî÷å÷íîé àðòåðèè â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñëå òðàâìû ïîä ýôèðíûì íàðêîçîì. Êîíòðîëåì ÿâëÿëàñü êðîâü íåòðàâìèðîâàííûõ æèâîòíûõ. Ïëàçìó ãîòîâèëè èç êðîâè, ñòàáèëèçèðîâàííîé êðèñòàëëè÷åñêèì ãåïàðèíîì (0,005 ã íà 1 ìë êðîâè), ýðèòðîöèòû îñàæäàëè öåíòðèôóãèðîâàíèåì ïðè 3000 îá/ìèíóòó â òå÷åíèå 10 ìèíóò. Ñðåäà èíêóáàöèè - ðàñòâîð, ñîñòîÿùèé èç 20 ìÌ KH 2PO4 è 105 ìÌ KCl ïðè pH 7,5.  ñòåêëÿííóþ òåðìîñòàòè÷åñêóþ êþâåòó ïîìåùàëè 9 ìë ñðåäû èíêóáàöèè è 0,5 ìë ïëàçìû.  êà÷åñòâå èíèöèàòîðà ðåàêöèè ïðèìåíÿëè FeSO 4õ7H2O, êîòîðûé ââîäèëè â êþâåòó ïðè íà÷àëüíîé êîíöåíòðàöèè 0,5 ìë 50 ìÌ, êîíå÷íîé - 2,5 ìÌ. Èçìåðåíèÿ ïðîèçâîäèëè ïðè 38îÑ â êþâåòå ñ èñïîëüçîâàíèåì óñòàíîâêè äëÿ ðåãèñòðàöèè ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé (Âëàäèìèðîâ Þ.À., Àð÷àêîâ À.È., 1972). Èñïîëüçîâàëè âåëè÷èíó èíòåíñèâíîñòè (J) è ëàòåíòíûé ïåðèîä (t) ïðè íàëè÷èè òðàâìû êîíå÷íîñòåé ñ äàâíîñòüþ 0, 0,5, 1, 1,5, 2, 4, 6, 12,24 è 48 ÷àñîâ.  ýòè æå ñðîêè èññëåäîâàëè ÕË ïëàçìû êðîâè íåòðàâìèðîâàííûõ æèâîòíûõ. Óñòàíîâëåíî, ÷òî êàæäîé âçÿòîé âðåìåííîé òî÷êå òðàâìû ñîîòâåòñòâóåò îïðåäåëåííûé óðîâåíü èíòåíñèâíîñòè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ñâå÷åíèÿ. Îíè çíà÷èòåëüíî ìåíÿþòñÿ â ïåðâûå 6 ÷àñîâ, à áîëåå âûñîêèé óðîâåíü ñâå÷åíèÿ ïîÿâëÿåòñÿ ïîñëå ýòîãî ïåðèîäà è äîñòèãàåò íàèáîëüøèõ çíà÷åíèé ê 48-è ÷àñàì. Ïîëó÷åííûå äàííûå óêàçûâàþò íà çàâèñèìîñòü ïàðàìåòðîâ ÕË äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà è ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû â äàëüíåéøåì äëÿ âûðàáîòêè êðèòåðèåâ ïðè îïðåäåëåíèè äàâíîñòè òðàâìû ó æèâûõ ëèö. Äèíàìèêó ïàðàìåòðîâ èíäóöèðîâàííîé èîíàìè äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà õåìèëþìèíåñöåíöèè êîæè äëÿ êîíêðåòèçàöèè ñðîêîâ âîçíèêíîâåíèÿ êðîâîïîäòåêîâ èçó÷èë Ã.Â.Àíàíüåâ (1982). Èññëåäîâàíèÿ ïðîâåäåíû â êàøèöåîáðàçíîé ìàññå èçìåëü÷åííîé êîæè òðóïîâ ëþäåé, âçÿòîé èç öåíòðàëüíûõ ó÷àñòêîâ êðîâîïîäòåêîâ ðàçëè÷íîé äàâíîñòè ïðîèñõîæäåíèÿ â ïðåäåëàõ 1-2 ñóòîê ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Êîíòðîëåì ÿâëÿëàñü êîæà, ñèììåòðè÷íàÿ ðàñïîëîæåíèþ êðîâîïîäòåêà ïî-
Ãëàâà 2
Ñòð. 110
âåðõíîñòè òåëà. Ïðîáû ãîòîâèëà â ñîîòíîøåíèè 1:10 íà áóôåðíîì ðàñòâîðå (30 ìÌ KH2PO4, 95 ìÌ õëîðèñòîãî êàëèÿ), êàøèöó îáëó÷àëè ïîëíûì ñïåêòðîì ÓÔË-èçëó÷åíèÿ ëàìïû ÏÐÊ-4 â òå÷åíèå 5 ìèíóò. 1 ìë êàøèöû ïîìåùàëè â òåðìîñòàòè÷åñêóþ êþâåòó ñ 4 ìë áóôåðíîãî ðàñòâîðà. Ïàðàìåòðû ÕË êàøèöû êîæè îïðåäåëÿëè ïðè ïîìîùè óñòàíîâêè äëÿ ðåãèñòðàöèè ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé (ñì. âûøå) ïðè òåìïåðàòóðå 50 îÑ.  êà÷åñòâå îñíîâíûõ ïàðàìåòðîâ ïîëó÷åííûõ õåìèëþìèíîãðàìì ó÷èòûâàëè èíòåíñèâíîñòü áûñòðîé è ìåäëåííîé âñïûøêè, à òàêæå ëàòåíòíûé ïåðèîä ÕË, èçìåðÿåìûé îò ìîìåíòà ââåäåíèÿ ðàñòâîðà çàêèñíîãî ñåðíîêèñëîãî æåëåçà äî ðàçâèòèÿ ìàêñèìóìà ñâå÷åíèÿ. Ïîêàçàòåëè ÕË èíòàêòíîé êîæè ïðèíèìàëè çà 100%. Èññëåäîâàëè 89 îáúåêòîâ êîæè îò 53 òðóïîâ ëþäåé â âîçðàñòå 18-52 ëåò. Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî ïàðàìåòðû ÕË êîæè èç îáëàñòè êðîâîïîäòåêîâ ñóùåñòâåííî îòëè÷àþòñÿ îò íåïîâðåæäåííîé êîæè è èçìåíÿþòñÿ ñ òå÷åíèåì âðåìåíè ïîñëå îáðàçîâàíèÿ êðîâîïîäòåêîâ. Íàèáîëåå ñóùåñòâåííûå èçìåíåíèÿ ÕË îòìå÷åíû â ïåðèîä 2-3 ñóòîê ïîñëå ïîëó÷åíèÿ òðàâìû. Çíà÷èòåëüíîå åå ñíèæåíèå ê ýòîìó ñðîêó èíòåíñèâíîñòè áûñòðîé è ìåäëåííîé âñïûøåê ÕË, à òàêæå óâåëè÷åíèå ëàòåíòíîãî ïåðèîäà ìîæåò áûòü, ïî-âèäèìîìó, îáúÿñíåíî êàê óâåëè÷åíèåì â ýòîò ïåðèîä âðåìåíè â êîæå ãåìîãëîáèíà è åãî ïðîèçâîäíûõ, òàê è íàêîïëåíèåì â òðàâìèðîâàííîé êîæå âåùåñòâ òèïà àíòèîêñèäàíòîâ, âëèÿþùèõ íà ðåàêöèè ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ êîæè.  ïîñëåäóþùèé ïåðèîä âðåìåíè îòìå÷åíî óâåëè÷åíèå èíòåíñèâíîñòè áûñòðîé è ìåäëåííîé âñïûøåê ÕË è îäíîâðåìåííîå ñíèæåíèå äëèòåëüíîñòè ëàòåíòíîãî ïåðèîäà, êîððåëèðóþùåå ñ òå÷åíèåì âðåìåíè ïîñëå îáðàçîâàíèÿ êðîâîïîäòåêà. Ïàðàìåòðû ÕË êðîâîïîäòåêîâ 14-ñóòî÷íîé äàâíîñòè ïî÷òè íå îòëè÷àëèñü îò íåïîâðåæäåííîé êîæè. Òàêèì îáðàçîì, îáíàðóæåííûå èçìåíåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÕË êîæè èç îáëàñòè êðîâîïîäòåêîâ íàõîäÿòñÿ â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè èõ ïðè÷èíåíèÿ. Äèíàìèêà ïîêàçàòåëåé ÕË êîæè ñ ó÷åòîì åå èíäèâèäóàëüíûõ îñîáåííîñòåé ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíî äëÿ ñóæäåíèÿ î äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ êðîâîïîäòåêîâ. Þ.Â.Êîíîâàëîâ è Ë.À.Êóëèêîâà (1983) ïðîâåëè èññëåäîâàíèå ãîìîãåíàòîâ ãîëîâíîãî ìîçãà, ïå÷åíè, ñêåëåòíîé ìûøöû, ïî÷êè, æåë÷è è æèäêîñòè ñòåêëîâèäíîãî òåëà íà êâàíòîìåòðè÷åñêîé óñòàíîâêå ñ ïðèåìíèêîì-äåòåêòîðîì èçëó÷åíèÿ
Ãëàâà 2
Ñòð. 111
áëîêà óìíîæèòåëÿ â âèäå ôîòîýëåêòðè÷åñêîãî óìíîæèòåëÿ ÔÝÓ-39À. Îáúåêòû õðàíèëè ïðè òåìïåðàòóðå 19-20 îÑ. Èõ áðàëè îò òðóïîâ ëþäåé, ïîãèáøèõ îò ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé (15 òðóïîâ).  ýêñïåðèìåíòàëüíîé ñåðèè (10 êðîëèêîâ) ïðè÷èíîé ñìåðòè ÿâëÿëàñü òóïàÿ òðàâìà ãîëîâû. Óñòàíîâëåíî, ÷òî èíòåíñèâíîñòü ñâåðõëàáîãî ñâå÷åíèÿ îáúåêòîâ ðàçëè÷íû, îíà èçìåíÿåòñÿ â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ïîñòåïåííî íàðàñòàåò ê 24-ì ÷àñàì âðåìåíè íàáëþäåíèÿ è óìåíüøàåòñÿ ê 72 ÷àñàì. Èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ â îäèíàêîâûå ñðîêè äëÿ ðàçëè÷íûõ îðãàíîâ íå ñîâïàäàåò ïî öèôðîâûì äàííûì, îäíàêî ñõîäíà äëÿ îäíèõ è òåõ æå îðãàíîâ â êàæäîé ñåðèè íàáëþäåíèé. Íà ñåêöèîííîì ìàòåðèàëå äàæå óñðåäíåííûå äàííûå èìåþò î÷åíü áîëüøîé ðàçáðîñ, íî çàêîíîìåðíî ìåíÿþòñÿ â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ê.Í.Àëûáàåâà (1987) èçó÷èëà õàðàêòåð èçìåíåíèé ïàðàìåòðîâ áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè â ïåðèêàðäèàëüíîé è ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòÿõ òðóïîâ ÷åðåç 6, 12, 18, 24, 36, 48, 60 è 72 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè. Óêàçàííûå îáúåêòû áðàëè îò 102 òðóïîâ ëèö îáîåãî ïîëà, óìåðøèõ â âîçðàñòå îò 17 äî 75 ëåò íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè è ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû â ñî÷åòàíèè ñ äðóãèìè òåëåñíûìè ïîâðåæäåíèÿìè. Ñèíîâèàëüíóþ æèäêîñòü ïîëó÷àëè ïóíêòèðîâàíèåì êîëåííîãî ñóñòàâà èíúåêöèîííîé èãëîé è îòñàñûâàëè øïðèöåì ïî 0,5-1,0 ìë. Ïåðèêàðäèàëüíóþ æèäêîñòü ïîëó÷àëè ÷åðåç íåáîëüøîé ðàçðåç (0,5õ0,5 ñì) ïåðåäíåé ïîâåðõíîñòè îêîëîñåðäå÷íîé ñóìêè îòñàñûâàíèåì â øïðèö 2-3 ìë æèäêîñòè â ìîìåíò âñêðûòèÿ îäíîêðàòíî. Óêàçàííûå æèäêîñòè èññëåäîâàëè â äåíü èçúÿòèÿ èõ èç òðóïà èëè íà ñëåäóþùèé äåíü ïðè óñëîâèè õðàíåíèÿ â áûòîâîì õîëîäèëüíèêå. Ïðè÷åì, ïðîäîëæèòåëüíîñòü õðàíåíèÿ â ýòèõ óñëîâèÿõ íå âëèÿëà íà êîíå÷íûé ðåçóëüòàò èññëåäîâàíèÿ. Èçìåðåíèå ïàðàìåòðîâ áèîõåìèëþìèíèñöåíöèè àâòîð ïðîâîäèëà íà ñïåöèàëüíîé óñòàíîâêå äëÿ ðåãèñòðàöèè èçìåíåíèé èíòåíñèâíîñòè ñâåðõëàáîãî ñâå÷åíèÿ â áèîëîãè÷åñêèõ æèäêîñòÿõ - 1251 Zuminometer Main-Auto Programm, ôèðìû ZKB, Øâåöèÿ. Ïðè èñïîëüçîâàíèè äàííîé óñòàíîâêè â îñíîâå ìåòîäà ëåæèò òàêæå ðåãèñòðàöèÿ èíòåíñèâíîñòè õåìèëþìèíåñöåíöèè - ñïîíòàííî ïðîòåêàþùåãî ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ áèîñóáñòðàòîâ, îáóñëîâëåííîãî ðåàêöèÿìè ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ.
Ãëàâà 2
Ñòð. 112
Ïåðåä íà÷àëîì èññëåäîâàíèÿ èíòåíñèâíîñòè ÕË èçìåðÿëè êîëè÷åñòâåííîå ñîäåðæàíèå ñóáñòðàòà ñâå÷åíèÿ â êàæäîé ïðîáå ïåðèêàðäèàëüíîé è ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè - b-ëèïîïðîòåèäîâ ïî ìåòîäèêå Áóðøòåéíà-Ñàìàÿ (1956). Ïîñëå ýòîãî ñîñòàâèëè ïðîãðàììó äëÿ ðàáîòû íà ëþìèíîìåòðå, â êîòîðîé íàøëè îòðàæåíèå âñå 4 ïàðàìåòðà õåìèëþìèíåñöåíöèè: îáùàÿ ñâåòîñóììà, ïèê ñâå÷åíèÿ, ñêîðîñòü ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ è ðåàêöèÿ ïîñëå ñâå÷åíèÿ äëÿ ïåðèêàðäèàëüíîé è ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòåé. Ïðîãðàììó ïðîâåðÿëè ïåðåä êàæäûì èññëåäîâàíèåì íîâîé ñåðèè ïðîá. Ïîêàçàíèÿ ëþìèíîìåòðà ïîëó÷àëè â âèäå çàïðîãðàììèðîâàííûõ öèôðîâûõ äàííûõ. Äëÿ èçìåðåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ïàðàìåòðîâ ÕË â èçìåðèòåëüíóþ êþâåòó ¹ 1 (ïðîâåðî÷íóþ) çàëèâàëè 1,6 ìë ÷èñòîãî 0,1 Ì ôîñôàòíîãî áóôåðíîãî ðàñòâîðà ïðè ðÍ 7,4 áåç ïðîáû è ïåðåêèñè âîäîðîäà.  ïîñëåäóþùèå êþâåòû ïî ïîðÿäêó íàëèâàëè ïî 0,3 ìë îáðàçöà èññëåäóåìîé æèäêîñòè è ôîñôàòíîãî áóôåðíîãî ðàñòâîðà, à òàêæå ïî 1 ìë 3,3% ðàñòâîðà ïåðåêèñè âîäîðîäà. Ïîñëåäíÿÿ ÿâëÿåòñÿ ñèëüíûì äîíàòîðîì êèñëîðîäà è èíèöèàòîðîì ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ. Êàæäóþ êþâåòó ìàðêèðîâàëè. Ïîñëå çàïîëíåíèÿ êþâåò èõ ïîãðóæàëè â ëþìèíàòîð íà 5 ìèíóò äëÿ èçìåðåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñâå÷åíèÿ â êàæäîé ïðîáå. Çàòåì êþâåòû òùàòåëüíî ïðîìûâàëè äâàæäû äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé è ãîòîâèëè äëÿ î÷åðåäíîãî èçìåðåíèÿ.  ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè â ïåðèêàðäèàëüíîé (äî 48 ÷àñîâ) è ñèíîâèàëüíîé (äî 72 ÷àñîâ) æèäêîñòÿõ óñòàíîâëåíî ñëåäóþùåå.  ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè îáùàÿ ñâåòîñóììà ÕË ïðåòåðïåâàåò óáåäèòåëüíóþ äèíàìèêó ñ óäëèíåíèåì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Òàê, ê íà÷àëó èññëåäîâàíèÿ ÷åðåç 6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè îòìå÷àëîñü åå ìàêñèìàëüíîå çíà÷åíèå: 134,51±1,94 óñë.åä. Ñ óâåëè÷åíèåì âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå ñìåðòè, îáùàÿ ñâåòîñóììà çàìåòíî ñíèæàëàñü. Îñîáåííî ðåçêèé ñïàä íàáëþäàëè ê 24 ÷àñàì 32,83±1,81 óñë.åä., ïîñëå ÷åãî ïðîöåññ ñíèæåíèÿ íåñêîëüêî çàìåäëÿëñÿ è ê 48 ÷àñàì óãàñàë äî 19,15±1,55 óñë.åä. Òàêèì îáðàçîì, ê êîíöó èññëåäîâàíèÿ îáùàÿ ñâåòîñóììà ÕË ñíèçèëàñü â 7 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ èñõîäíûìè äàííûìè. Ýòî ñíèæåíèå ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíî ïî âñåì èññëåäîâàííûì âðåìåííûì èíòåðâàëàì îò 6 äî 48 ÷àñîâ (Ð<0,001, 0,01). Ìàêñèìàëüíîå çíà÷åíèå ïàðàìåòðà ïèêà ñâå÷åíèÿ â ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè óñòàíîâëåíî ê 6 ÷àñàì ïîñëå ñìåðòè,
Ãëàâà 2
Ñòð. 113
îíî ñîñòàâèëî 8,63±0,87 óñë.åä. Ïîñëå ÷åãî íàáëþäàëè áûñòðîå ñíèæåíèå ê 24 ÷àñàì äî 1,29±0,2 óñë.åä. Çàòåì îòíîñèòåëüíî ìåäëåííî ïîíèæàëîñü è ê íà÷àëó âòîðûõ ñóòîê ñîñòàâëÿëî âñåãî 0,88±0,035 óñë.åä. Òàêèì îáðàçîì, çíà÷åíèÿ ïèêà ñâå÷åíèÿ ê 48 ÷àñàì ñíèçèëèñü â 10 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ èñõîäíûìè ïîêàçàòåëÿìè. Ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå íàáëþäàëè â ïåðâûå ñóòêè îò 6 äî 24 ÷àñîâ (Ð<0,01). Ïîñëå 24 ÷àñîâ ðàçëè÷èå îêàçàëîñü íåäîñòîâåðíûì. Ñêîðîñòü ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ, êîòîðàÿ èçìåðÿåòñÿ â óñë.åä./ ìèí., òàêæå ïîêàçàëà îïðåäåëåííóþ äèíàìèêó. Òàê, íàèáîëüøåå çíà÷åíèå ñêîðîñòè ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ ïðèõîäèëîñü íà 6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè - 3,28±0,31 óñë.åä./ìèí. Àíàëîãè÷íî äâóì ïðåäûäóùèì ïàðàìåòðàì, â äàííîì ñëó÷àå ïðîèñõîäèëî ðåçêîå ñíèæåíèå ñêîðîñòè ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ, îñîáåííî âûðàæåííîå â ïåðâûå 24 ÷àñà, êîãäà çíà÷åíèå ñîñòàâëÿåò âñåãî 0,58±0,05 óñë.åä./ìèí. Ïîñëå 24 ÷àñîâ ñíèæåíèå çàìåäëÿåòñÿ è ê 48 ÷àñàì ñïàä äîõîäèò äî 0,30±0,04 óñë.åä./ìèí. Ñëåäîâàòåëüíî, ñêîðîñòü ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ ñíèçèëàñü â 10 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ 6 ÷àñàìè. Ñðàâíåíèå çíà÷åíèé ìåæäó âðåìåííûìè ãðóïïàìè ïîêàçàëî, ÷òî ðàçëè÷èå ìåæäó íèìè ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíî íà âñåì âðåìåííîì ïðîòÿæåíèè îò 6 äî 48 ÷àñîâ (Ð<0,01). Àáñîëþòíûå çíà÷åíèÿ ðåàêöèè ïîñëåñâå÷åíèÿ â ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè íåâåëèêè. Ëèøü ê íà÷àëó èññëåäîâàíèÿ ÷åðåç 6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè îòìå÷åíî ñðàâíèòåëüíî âûñîêîå çíà÷åíèå ðåàêöèè ïîñëåñâå÷åíèÿ - 0,70±0,029 óñë.åä. Ñ óâåëè÷åíèåì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà èíòåíñèâíîñòü ðåàêöèè ïîñëåñâå÷åíèÿ ñíèæàåòñÿ è ñ 24 ÷àñîâ ïðàêòè÷åñêè îñòàåòñÿ íà îäíîì óðîâíå äî 48 ÷àñîâ. Ðàçíèöà ìåæäó ïîêàçàòåëÿìè â 24 è 48 ÷àñîâ ñîñòàâëÿåò âñåãî 0,03 óñë.åä., ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î ñòàáèëèçàöèè ïðîöåññà çà îäíè ñóòêè äî îêîí÷àíèÿ èçìåðÿåìîãî âðåìåíè. Èíòåíñèâíîñòü ðåàêöèè ïîñëå ñâå÷åíèÿ ê 48 ÷àñàì ñíèçèëàñü â 3,5 ðàçà ñðàâíèòåëüíî ñ 6-÷àñîâûì óðîâíåì. Îòìå÷åíî ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîå ðàçëè÷èå â èíòåðâàëàõ 6-12 ÷àñîâ (Ð<0,001) è 18-24 ÷àñà (Ð<0,01); â îñòàëüíûõ èíòåðâàëàõ ðàçëè÷èÿ íåäîñòîâåðíû.  ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè ïàðàìåòð îáùåé ñâåòîñóììû ÕË ïðîÿâèë ÿðêî âûðàæåííóþ äèíàìèêó ñ óâåëè÷åíèåì âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå ñìåðòè. Ìàêñèìóì ñâå÷åíèÿ ïðèõîäèëñÿ íà íà÷àëî èññëåäîâàíèÿ, êîãäà ê 6 ÷àñàì ïîñëå ñìåðòè
Ãëàâà 2
Ñòð. 114
çíà÷åíèå îáùåé ñâåòîñóììû äîñòèãàëî 198,74±7,41 óñë.åä. ×åì áîëüøå âðåìåíè ïðîõîäèò ïîñëå ñìåðòè, òåì ñòðåìèòåëüíåå ïàäàåò îáùàÿ ñâåòîñóììà. Óãàñàíèå ïðîöåññà îñîáåííî çàìåòíî â ïåðâûå 24 ÷àñà; ê ýòîìó ñðîêó ïîêàçàòåëè ñíèçèëèñü â 6 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ 6 ÷àñàìè ïîñëå ñìåðòè. Ïîñëå 24 ÷àñîâ ïîíèæåíèå îáùåé ñâåòîñóììû ïðîòåêàëî îòíîñèòåëüíî ìåäëåííî è ïëàâíî, ê 72 ÷àñàì ñîñòàâëÿëî 9,22±0,34 óñë.åä. Òàêèì îáðàçîì, ê íà÷àëó òðåòüèõ ñóòîê çíà÷åíèÿ îáùåé ñâåòîñóììû â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè óìåíüøèëîñü â 22 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ íà÷àëîì èññëåäîâàíèÿ. Ñíèæåíèå ïàðàìåòðà îáùåé ñâåòîñóììû ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíî ðàçëè÷àåòñÿ ïî âñåì âðåìåííûì èíòåðâàëàì îò 6 äî 72 ÷àñîâ. Ïèê ñâå÷åíèÿ â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè âåäåò ñåáÿ àíàëîãè÷íî îïèñàííûì âûøå. Èç âñåõ åãî ïîêàçàòåëåé ñàìûé áîëüøîé ïðèõîäèëñÿ íà 6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè - 25,14±2,55 óñë.åä. Çàòåì ñëåäîâàëî ðåçêîå ïàäåíèå ïèêà ñâå÷åíèÿ ê 24 ÷àñàì è ñîñòàâèëî 2,49±0,20 óñë.åä. Ïîñëå 24 ÷àñîâ ïèê ñâå÷åíèÿ ïëàâíî ïîíèçèëñÿ äî 36 ÷àñîâ - 1,79±0,50 óñë.åä. è ïîñëå ýòîãî ïðàêòè÷åñêè îñòàâàëñÿ íà îäíîì óðîâíå äî 72 ÷àñîâ. Ê íà÷àëó òðåòüèõ ñóòîê ïèê ñâå÷åíèÿ óìåíüøèëñÿ â 16 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ ïåðâîíà÷àëüíûìè äàííûìè. Âûÿâëåíû ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ â èíòåðâàëàõ 6-12, 1218, 18-24 è 24-36 ÷àñîâ. Ïîñëå 36 ÷àñîâ äîñòîâåðíîå ïîíèæåíèå çíà÷åíèé íå áûëî îòìå÷åíî. Ñêîðîñòü ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè èìåëà ìàêñèìàëüíûå çíà÷åíèÿ â íà÷àëå èññëåäîâàíèÿ (6 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè), ñîñòàâëÿÿ 12,72±4,8 óñë.åä./ìèí. Óæå â ïåðâûå 12 ÷àñîâ ïîñëå ñìåðòè îíà ïîíèçèëàñü â 4 ðàçà. Äàëåå ïðîäîëæàëîñü áûñòðîå ïîíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè, íàèáîëåå ñóùåñòâåííîå äî ïåðèîäà 24-36 ÷àñîâ. Ïîñëå ÷åãî ïðîöåññ ñíèæåíèÿ çàìåäëÿëñÿ è äî 72 ÷àñîâ ñîõðàíÿëñÿ ìèíèìàëüíûé ðàçìàõ êîëåáàíèé îò 0,74±0,031 óñë.åä./ìèí. íà 48 ÷àñîâ, äî 0,51±0,013 óñë.åä./ìèí. ê 72 ÷àñàì.  êîíå÷íîì èòîãå ñêîðîñòü ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè ïîíèçèëàñü â 24 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ 6-÷àñîâûì óðîâíåì ê íà÷àëó òðåòüèõ ñóòîê èññëåäîâàíèÿ. Óñòàíîâëåíî îòñóòñòâèå ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíîãî îòëè÷èÿ âî âñåì èññëåäóåìîì âðåìåííîì ïðîìåæóòêå îò 6 äî 72 ÷àñîâ. Ðåàêöèÿ ïîñëåñâå÷åíèÿ â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè èìåëà íàèáîëüøåå çíà÷åíèå ê 6 ÷àñàì ïîñëå ñìåðòè - 2,69±0,41
Ãëàâà 2
Ñòð. 115
óñë.åä.  ïåðâûå 12 ÷àñîâ ïîêàçàòåëè ýòîãî ïàðàìåòðà ñíèçèëèñü âäâîå äî 1,3±0,18 óñë.åä. Çàìåòíî óìåíüøèëàñü èíòåíñèâíîñòü ðåàêöèè ïîñëåñâå÷åíèÿ äî 24 ÷àñîâ, ïîñëå ÷åãî îòíîñèòåëüíî ïëàâíî çàìåäëèëàñü, âàðüèðóÿ â ñîòûõ äîëÿõ óñëîâíûõ åäèíèö è äî êîíöà èññëåäîâàíèÿ îñòàâàëàñü ïðèáëèçèòåëüíî íà îäíîì óðîâíå. Èíòåíñèâíîñòü îñòàòî÷íîé ëþìèíåñöåíöèè ê 72 ÷àñàì ñíèçèëàñü â 13 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ 6-÷àñîâûì óðîâíåì. Îòìå÷åíû ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ â ïîêàçàòåëÿõ â ñëåäóþùèõ âðåìåííûõ èíòåðâàëàõ: 6-12 ÷àñîâ (Ð<0,01), 48-60 ÷àñîâ (Ð<0,001) è 60-72 ÷àñà (Ð<0,01). Äëÿ êðèâûõ âñåõ ïàðàìåòðîâ õåìèëþìèíåñöåíöèè îò 6 äî 24 ÷àñîâ çàêîíîìåðíà ýêñïîíåíöèàëüíàÿ ðåãðåññèÿ, à ïîñëå 24 ÷àñîâ - ëèíåéíàÿ. Òàêèì îáðàçîì, ïîëó÷åííûå àâòîðîì äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî ñ óâåëè÷åíèåì âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, èíòåíñèâíîñòü ÕË óìåíüøàåòñÿ, Ê.Í.Àëûáàåâà ñîâåðøåííîãî ñïðàâåäëèâî îòìåòèëà, ÷òî ïî îòäåëüíî âçÿòûì ïîêàçàòåëÿì èíòåíñèâíîñòè ïàðàìåòðîâ ÕË îïðåäåëÿòü ñðîêè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî âñåì âðåìåííûì èíòåðâàëàì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà â ïðåäåëàõ 3-5 ñóòîê äîâîëüíî çàòðóäíèòåëüíî.  ñâÿçè ñ ýòèì öåëåñîîáðàçíî èìåòü ñïîñîá êîìïëåêñíîé îöåíêè ïîêàçàòåëåé äëÿ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè.  ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé àâòîð óñòàíîâèëà, ÷òî èíòåíñèâíîñòü áèîõåìèëþìèíåñöåíöèè ïî ÷åòûðåì ïàðàìåòðàì ñóùåñòâåííî ñíèæàåòñÿ. Äîñòîâåðíîå ïîíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè ïàðàìåòðà îáùåé ñâåòîñóììû äëÿ ïåðèêàðäèàëüíîé è ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòåé íàáëþäàëîñü âî âñå âðåìåííûå èíòåðâàëû äî 40 è 72 ÷àñîâ. Ïî ïàðàìåòðó ïèêà ñâå÷åíèÿ â ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè äîñòîâåðíîå ïîíèæåíèå â èíòåðâàëàõ îò 6 äî 24 ÷àñîâ, äëÿ ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè - îò 6 äî 48 ÷àñîâ. Ïî ñêîðîñòè ïàäåíèÿ ñâå÷åíèÿ â ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè - îò 6 äî 48 ÷àñîâ, â ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè - íåäîñòîâåðíî. Ïî ðåàêöèè ïîñëåñâå÷åíèÿ äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå èíòåíñèâíîñòè äëÿ ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè - â èíòåðâàëå 6-12 ÷àñîâ è 18-20 ÷àñîâ, à äëÿ ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòè - îò 6 äî 12 ÷àñîâ, îò 48 äî 72 ÷àñîâ.
Ãëàâà 3
Ñòð. 116 Ãëàâà 3.
ÌÅÒÎÄ ÈÇÌÅÐÅÍÈß ÝËÅÊÒÐÎÏÐÎÂÎÄÍÎÑÒÈ.  áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ äëÿ îöåíêè äåéñòâèÿ ïîâðåæäàþùèõ ôàêòîðîâ øèðîêîå ðàñïðîñòðàíåíèå ïîëó÷èë ìåòîä èçìåðåíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïðè îòìèðàíèè òêàíåé ïðîèñõîäèò èçìåíåíèå íèçêî÷àñòîòíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ (Òàðóñîâ Á.Í., Êîëüáå Î.Ð., 1968; Òðîøèí À.Ñ., Òðîøèíà Â.Ï., 1979). Þ.À.Äìèòðåíêî (1982) èñïîëüçîâàë â ñâîèõ èññëåäîâàíèÿõ äàííûé ìåòîä äëÿ õàðàêòåðèñòèêè ìîðôîôóíêöèîíàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ êîñòíî-ìîçãîâîé òêàíè. Ñ ýòîé öåëüþ èì áûëà ñîáðàíà óñòàíîâêà äëÿ èçìåðåíèÿ ñîïðîòèâëåíèÿ (âåëè÷èíà îáðàòíàÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè). Íà ðèñóíêå 17 ïðåäñòàâëåíà áëîê-ñõåìà ýòîé óñòàíîâêè, êîòîðàÿ ñîñòîèò èç èçìåðèòåëüíîé ÿ÷åéêè (ß) ñ ïëàòèíîâûìè ýëåêòðîäàìè, ãåíåðàòîðà ñòàíäàðòíûõ ïðÿìîóãîëüíûõ èìïóëüñîâ (ÃÈ) òèïà 26-ï è èçìåðèòåëüíîãî ïðèáîðà (ÈÏ) - îñöèëëîãðàôà.
Ðèñ. 17. Áëîê-ñõåìà óñòàíîâêè äëÿ èçìåðåíèÿ ñîïðîòèâëåíèÿ. Àâòîð èññëåäîâàë ðàçíûìè ìåòîäàìè êîñòíûé ìîçã îò 374 òðóïîâ ëèö îáîåãî ïîëà ñ äàâíîñòüþ ñìåðòè íå áîëåå òðåõ ñóòîê. Ïðè÷èíîé ñìåðòè ÿâëÿëèñü òðàâìà, ñêîðîïîñòèæíàÿ ñìåðòü, àñôèêñèÿ, îòðàâëåíèå àëêîãîëåì è åãî ñóððîãàòàìè. Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè â óñëîâèÿõ ìîðãà êàê îäíîêðàòíî, òàê è â äèíàìèêå. Êîñòíûé ìîçã èçâëåêàëè àñïèðàöèîííûì ñïîñîáîì èç êðûëüåâ ïîäâçäîøíûõ êîñòåé òðóïîâ ñ ïîìîùüþ ìîäèôèöèðîâàííîé èãëû Êàññèðñêîãî äëÿ âçÿòèÿ êîñòíîãî ìîçãà. Àñïèðàöèþ ïðîèçâîäèëè â øïðèö “Ðåêîðä” âìå-
Ãëàâà 3
Ñòð. 117
ñòèìîñòüþ 10 ìë ïðè ðàçðÿæåíèè â ïðåäåëàõ 150-200 ìì ðò. ñò. Îáúåì âçâåñè ïðè îäíîêðàòíîì âçÿòèè ìàòåðèàëà ñîñòàâëÿë 1-10 ìë, â çàâèñèìîñòè îò êîëè÷åñòâà äðóãèõ ïðîâîäèìûõ ìåòîäèê. Ýëåêòðîïðîâîäíîñòü èçìåðÿëè âî âçâåñè ýðèòðîöèòîâ è ÿäåðíûõ êëåòîê ïîñëå èõ ôðàêöèîíèðîâàíèÿ. Ðåçóëüòàòû âûðàæàëè â îòíîñèòåëüíûõ åäèíèöàõ, ïîëó÷àåìûõ ïóòåì äåëåíèÿ ñðåäíèõ âåëè÷èí ñîïðîòèâëåíèÿ ñóñïåíçèè êëåòîê êîñòíîãî ìîçãà, èññëåäóåìûõ âðåìåííûõ ïåðèîäîâ íà ñðåäíåå çíà÷åíèå ñîïðîòèâëåíèÿ â èíòåðâàëå 0-4 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè (êîíòðîëü). Âñåãî ïðîâåäåíî 118 èññëåäîâàíèé íà 13 òðóïàõ. Èññëåäîâàíèÿ âûïîëíÿëè â äèíàìèêå â òå÷åíèå 12-72 ÷àñîâ ïîñëå ïîñòóïëåíèÿ òðóïîâ â ìîðã.  òàáëèöå 7 ïðåäñòàâëåíû ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè â òêàíè êîñòíîãî ìîçãà òðóïîâ ëþäåé â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Òàáëèöà 7 Äèíàìèêà ñîïðîòèâëåíèÿ êëåòîê êîñòíîãî ìîçãà â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè.
Статистические показатели
Время наступления смерти (в час)
М±m
P
М±m
P
0-4 4-8 8-12 12-16 16-20 20-24 24-30 30-36 36-48 48-72
1,0±0,11 0,86±0,13 0,75±0,18 0,81±0,10 0,63±0,19 0,56±0,06 0,59±0,20 0,45±0,10 0,37±0,07 0,30±0,13
>0,05 « <0,05 « « « « «
1,0±0,28 1,79±0,42 1,82±0,32 2,05±0,20 2,34±0,42 2,85±0,94 2,48±0,15 2,60±0,34 3,00±0,30 3,61±0,47
<0,05 « « « « « « « «
Миелокарноциты
Эритроциты
Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïî ìåðå óäëèíåíèÿ ñðîêîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ïðîèñõîäèò óìåíüøåíèå ýëåêòðîïðîâîäíîñòè â ñóñïåíçèè ýðèòðîöèòîâ è âîçðàñòàíèå â ñóñïåíçèè ÿäåðíûõ êëåòîê. Õîòÿ è áûëè îòìå÷åíû îïðåäåëåííûå çàêîíîìåðíîñòè â äèíàìèêå ýëåêòðîïðîâîäíîñòè, îòñóòñòâèå äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé ìåæäó èññëåäóåìûìè âðåìåííûìè ïåðèîäàìè ïî-
Ãëàâà 3
Ñòð. 118
çâîëÿåò, ïî ìíåíèþ àâòîðà, îïðåäåëÿòü äàâíîñòü íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ñ òî÷íîñòüþ ±12-24 ÷àñîâ â ïåðâûå òðîå ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Ìíîãèå îòå÷åñòâåííûå èññëåäîâàòåëè (Êåäðîâ À.À., 1949; Øìèíêå Ã.À., 1956; Òàðóñîâ Á.Í., Àíòîíîâ Â.Ô., 1968; Çîðüêèí À.È., 1975; Áóíèí Þ.Í., 1982; Æó÷êîâ À.Â., 1982; Òåíüêîâ À.À., 1988 è äð.) óñïåøíî èñïîëüçîâàëè ìåòîä èçìåðåíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè îðãàíîâ è òêàíåé äëÿ õàðàêòåðèñòèêè ôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ èçó÷åíèÿ èçìåíåíèé, ñâÿçàííûõ ñ èõ ôóíêöèîíàëüíûì ñîñòîÿíèåì. Îäíàêî ýòîò ìåòîä íå ïîëó÷èë øèðîêîãî ïðèìåíåíèÿ â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå èç-çà îòñóòñòâèÿ íàäåæíîé èçìåðèòåëüíîé àïïàðàòóðû è, êàê ñëåäñòâèå, åãî íåäîñòàòî÷íîé èíôîðìàòèâíîñòè. Å.Ñ.Ñààêÿí (1992) èçó÷èë ïîêàçàòåëè ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â ýêñïåðèìåíòå è íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå. Ýêñïåðèìåíòû ïðîâîäèëè íà áåëûõ áåñïîðîäíûõ êðûñàõ-ñàìöàõ ìàññîé 200-250 ã. Æèâîòíûì ïîä ýôèðíûì íàðêîçîì ïðè÷èíÿëè òðàâìó â âèäå ðàçìîçæåíèÿ ìûøö è ïåðåëîìîâ çàäíåé ïðàâîé êîíå÷íîñòè ïóòåì ðåçêîãî ñæàòèÿ êîíå÷íîñòè â òèñêàõ ñ òðàâìèðóþùåé ïîâåðõíîñòüþ 4 ñì 2. Ñèëó ñæàòèÿ ðåãóëèðîâàëè ñ ïîìîùüþ äèíàìîìåòðà. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè æèâîòíûå áåç ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû. Æèâîòíûõ çàáèâàëè ïóòåì äåêàïèòàöèè ÷åðåç 0, 1/2, 6, 12, 24, 48 è 72 ÷àñà ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû.  êàæäîé âðåìåííîé ãðóïïå áûëè ïî 15 ýêñïåðèìåíòàëüíûõ è ïî 15 êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ. Èññëåäîâàíèÿ íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå ïðîâåäåíû íà 5 ãðóïïàõ íàáëþäåíèÿ: 1-ÿ ãðóïïà - 15 òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ íà ìåñòå ïðîèñøåñòâèÿ â áëèæàéøèå 5-15 ìèíóò ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ðàçëè÷íûõ âèäîâ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû (0 ÷àñîâ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà); 2-ÿ ãðóïïà - 14 òðóïîâ ëèö, óìåðøèõ â ïðåäåëàõ 6 ÷àñîâ ïîñëå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû; 3-ÿ ãðóïïà - 16 òðóïîâ ëèö, óìåðøèõ â ëå÷åáíûõ ó÷ðåæäåíèÿõ â ñðîêè äî 12 ÷àñîâ ïîñëå òðàâìû; 4-ÿ ãðóïïà - 12 òðóïîâ ëèö, ñìåðòü êîòîðûõ íàñòóïèëà äî 24 ÷àñîâ ïîñëå òðàâìû; 5-ÿ ãðóïïà - 12 òðóïîâ ëþäåé, óìåðøèõ äî 48 ÷àñîâ ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû. Ïàðàìåòðû ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå èçó÷àëè â ñðîêè 6, 12, 24, 48 è 71 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Äëÿ èçìåðåíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö Å.Ñ.Ñààêÿí íà áàçå Èíñòèòóòà ðàäèîôèçèêè è ýëåêòðîíèêè ÀÍ
Ãëàâà 3
Ñòð. 119
ÐÀ ðàçðàáîòàë óñòðîéñòâî äëÿ äâóõ÷àñòîòíîãî èçìåðåíèÿ ïîëíûõ ñîïðîòèâëåíèé áèîëîãè÷åñêèõ òêàíåé, äåéñòâóþùåå ïðè ìèêðîìîùíîñòíûõ ðåæèìàõ äî 10 ìêÀ ñ âìîíòèðîâàííûì öèôðîâûì òåðìîìåòðîì. Äëÿ èçìåðåíèÿ áûëà âûáðàíà ñèíóñîèäàëüíàÿ ôîðìà íàïðÿæåíèÿ ïðè ÷àñòîòå 40 è 4000 Ãö. Íà ðèñóíêå 18 ïðèâåäåíà ñõåìà óñòðîéñòâà. Óñòðîéñòâî ñîñòîèò èç ãåíåðàòîðà ñèíóñîèäàëüíîãî íàïðÿæåíèÿ (1) ñî ñòàáèëèçèðîâàííîé âåëè÷èíîé âûõîäíîãî íàïðÿæåíèÿ è äâóìÿ ïðîòèâîôàçíûìè âûõîäàìè íàïðÿæåíèÿ, ðåçèñòîðîâ (2 è 3) ñ îäèíàêîâûìè çíà÷åíèÿìè íîìèíàëîâ, ïîñëåäîâàòåëüíî âêëþ÷åííîãî äèôôåðåíöèàëüíîãî óñèëèòåëÿ (4), ñèíõðîííîãî ôèëüòðà ñ äåòåêòîðîì (5), ôèëüòðà íèçêèõ ÷àñòîò (6), ðåãèñòðàòîðà íàïðÿæåíèÿ ïîñòîÿííîãî òîêà (7), çîíäà ñ äâóìÿ ìåõàíè÷åñêèìè ñâÿçàííûìè èãëîâèäíûìè ýëåêòðîäàìè (8), ïåðåêëþ÷àòåëÿ ñ äâóìÿ ïîäâèæíûìè êîíòàêòàìè è ÷åòûðüìÿ íåïîäâèæíûìè êîíòàêòàìè (9), ôàçîâðàùàòåëÿ íà 90î (10), ïåðåêëþ÷àòåëÿ (11) ñ îäíèì ïîäâèæíûì è äâóìÿ íåïîäâèæíûìè êîíòàêòàìè, èñòî÷íèêà íàïðÿæåíèÿ (12), âûõîä êîòîðîãî ñîåäèíåí ñ òîêîçàäàþùèìè âõîäàìè äâóõ èñòî÷íèêîâ òîêà (13 è 14), òèïà ïðåîáðàçîâàòåëåé íàïðÿæåíèÿ - òîê, âûõîäû êîòîðûõ ñîåäèíåíû â îáùèì ïðîâîäîì ÷åðåç ðåçèñòîð (15), ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé ïîñëåäîâàòåëüíî âêëþ÷åííûé ïîñòîÿííûé è ïîäñòðîå÷íûé ðåçèñòîðû, è äàò÷èêà òåìïåðàòóðû (16), âûïîëíåííîãî íà îñíîâå ïîëóïðîâîäíèêîâîãî ð-ï ïåðåõîäà, ñ âûõîäàìè èñòî÷íèêà òîêà. Èñòî÷íèêè òîêà ñîåäèíåíû òàêæå â ñòîêè ïîëåâûõ òðàíçèñòîðîâ (17 è 18), èñòîêè êîòîðûõ ñîåäèíåíû ñ îáùèì ïðîâîäîì, à çàòâîðû ñîåäèíåíû ñ îäíèì èç âûõîäîâ ôîðìèðîâàòåëÿ ïðÿìîóãîëüíûõ èìïóëüñîâ (19), äâà ïðîòèâîôàçíûõ âûõîäà êîòîðîãî ñîåäèíåíû ñ âõîäàìè óïðàâëåíèÿ ñèíõðîííîãî ôèëüòðà ñ ñèíõðîííûì äåòåêòîðîì (5). Ïîäâèæíûå êîíòàêòû ïåðåêëþ÷àòåëÿ (9) ñîåäèíåíû ñ âõîäíûìè äèôôåðåíöèàëüíîãî óñèëèòåëÿ (4), ïåðâûå íåïîäâèæíûå êîíòàêòû ñîåäèíåíû ñî ñòîêàìè ïîëåâûõ òðàíçèñòîðîâ (17 è 18), âòîðûå íåïîäâèæíûå êîíòàêòû ñîåäèíåíû ñ âûõîäàìè ãåíåðàòîðà (1) ÷åðåç ðåçèñòîðû (2 è 3) ñ èãëîâèäíûìè ýëåêòðîäàìè çîíäà (8) - íåïîñðåäñòâåííî. Ïåðåêëþ÷àòåëü (11) ïîäâèæíûì êîíòàêòîì ñîåäèíåí ñ âõîäîì ôîðìèðîâàòåëÿ (19), ïåðâûé íåïîäâèæíûé êîíòàêò ïåðåêëþ÷àòåëÿ (11) ñîåäèíåí ñ âûõîäîì ôàçîâðàùàòåëÿ (10), âòîðîé íåïîäâèæíûé êîíòàêò ñîåäèíåí ñ âõîäîì ôàçîâðàùàòåëÿ è ñ îäíèì èç âûõîäîâ ãåíåðàòîðà (1).
Ãëàâà 3
Ñòð. 120
Ðèñ. 18. Ôóíêöèîíàëüíàÿ ñõåìà óñòðîéñòâà. Ïîñëå èçìåðåíèÿ àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ íà íèçêîé ÷àñòîòå ïðîèçâîäÿòñÿ àíàëîãè÷íûå èçìåðåíèÿ íà âòîðîé, âûñîêîé ÷àñòîòå. Èçìåíåíèå ÷àñòîòû ïðîèçâîäÿò ïåðåêëþ÷àòåëåì ÷àñòîòîçàäàþùèõ ýëåìåíòîâ âíóòðè ãåíåðàòîðà. Âî âðåìÿ èçìåðåíèÿ òåìïåðàòóðû äëÿ ìîäóëÿöèè òîêà ÷åðåç ð-ï ïåðåõîä è îïîðíûé ðåçèñòîð èñïîëüçóåòñÿ îäíà èç ÷àñòîò ãåíåðàòîðà, ïðè êîòîðîé ïðîèçâîäèëàñü êàëèáðîâêà òåðìîìåòðà. Êîíñòðóêòèâíî òåðìîäàò÷èê ðåàëèçîâàí èãëîâèäíîé êîíñòðóêöèåé è êðåïëåíèåì òðàíçèñòîðà íà íàõîäÿùåìñÿ â íåïîñðåäñòâåííîé áëèçîñòè òîðöåâîì êîëüöåâèäíîì êîñîì ñðåçå òðóáêè. Áëàãîäàðÿ ïðèìåíåíèþ âûñîêîèçáèðàòåëüíîé ñèñòåìû ôèëüòðà ñ ñèíõðîííûì äåòåêòîðîì, îáåñïå÷èâàåòñÿ ïîìåõîóñòîé÷èâîñòü èçìåðåíèÿ; íàëè÷èå ôàçîâðàùàòåëÿ íà 90î îáåñïå÷èâàåò âûñîêî÷àñòîòíîå èçìåðåíèå àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîñòàâëÿþùèõ ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ òêàíåé. Ïðèìåíåíèå èãëîâèäíîãî òåðìîùóïà äàåò âîçìîæíîñòü
Ãëàâà 3
Ñòð. 121
áûñòðî è òî÷íî èçìåðÿòü òåìïåðàòóðó ó÷àñòêà, ãäå ïðîâåäåíî èçìåðåíèå ñîñòàâëÿþùèõ ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ. Ðàçðàáîòàííîå óñòðîéñòâî îáåñïå÷èâàåò èçìåðåíèå ñî ñëåäóþùèìè ïàðàìåòðàìè: ∙ ðàáî÷àÿ ÷àñòîòà 40 Ãö è 4000 Ãö; ∙ âåëè÷èíà àêòèâíîãî ñîñòàâëÿþùåãî - 10 Îì - 2 Êîì (òî÷íîñòü ±2%); ∙ ýêâèâàëåíòà ðåàêòèâíîãî ñîñòàâëÿþùåãî - 10 Îì - 2 Êîì (òî÷íîñòü ±2%); ∙ òîê èçìåðåíèÿ â ïðåäåëàõ 10 ìêÀ; ∙ äèàïàçîí èçìåðåíèÿ òåìïåðàòóð (-50îÑ) - (+50îÑ), òî÷íîñòü èçìåðåíèÿ òåìïåðàòóðû ±0,1îÑ. Àâòîð ïîñëå ïðîâåäåíèÿ ýêñïåðèìåíòîâ ïðèøåë ê âûâîäó î öåëåñîîáðàçíîñòè ïðèìåíåíèÿ ýëåêòðîäîâ, èìåþùèõ ôîðìó èãëû ñ æåñòêèì êðåïëåíèåì íà èçîëèðóþùåé îñíîâå. Äèàìåòð ýëåêòðîäîâ 1 è 2 ìì, ðàññòîÿíèå ìåæäó íèìè 5 è 10 ìì, ìàêñèìàëüíàÿ ãëóáèíà ïðîíèêíîâåíèÿ äî 3 ñì. Ïîëó÷åííûé öèôðîâîé ìàòåðèàë ïîäâåðãàëè ñòàòèñòè÷åñêîé îáðàáîòêå. Èçìåðåíèå ïîêàçàòåëåé ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ïîâðåæäåííûõ ñêåëåòíûõ ìûøö, à òàêæå èç ñèììåòðè÷íîé íåïîâðåæäåííîé îáëàñòè (êîíòðîëü) â ýêñïåðèìåíòå ïðîâîäèëè ñðàçó ïîñëå äåêàïèòàöèè, à òàêæå ÷åðåç 6, 12, 24, 48 è 72 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ïîêàçàëè, ÷òî ñàìîå îïòèìàëüíîå ïîëîæåíèå ýëåêòðîäîâ, ïðè êîòîðîì ïîëó÷èëè ìèíèìàëüíûé ðàçáðîñ çíà÷åíèé, ÿâëÿåòñÿ ïîïåðå÷íîå.  ýòîì ñëó÷àå ìûøå÷íàÿ òêàíü íàõîäèòñÿ ìåæäó äâóìÿ ýëåêòðîäàìè (ðàçáðîñ ðåçóëüòàòîâ èçìåðåíèé ñîñòàâëÿåò äî 6 %).  óêàçàííûå ñðîêè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ñ ó÷åòîì äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè àâòîðîì áûëè îïðåäåëåíû àêòèâíîå ñîïðîòèâëåíèå ìûøå÷íîé òêàíè êàê íà íèçêîé (Àí), òàê è íà âûñîêîé (Àâ) ÷àñòîòå, à òàêæå ðåàêòèâíîå cîïðîòèâëåíèå íà íèçêîé (Ðí) è âûñîêîé (Ðâ) ÷àñòîòå è èõ ñîîòíîøåíèå:
Ан Рн и . Ав Рв Íàèáîëåå ñòàáèëüíûå ðåçóëüòàòû áûëè ïîëó÷åíû ïðè èññëåäîâàíèè ñîîòíîøåíèé:
Ан ´ Рн , Ав ´ Рв
(16)
Ãëàâà 3
Ñòð. 122
êîòîðîå â îïðåäåëåííîé ñòåïåíè ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé êîýôôèöèåíò ÷àñòîòíîé äèñïåðñèè (Ê÷ä). Óñòàíîâëåíî, ÷òî àêòèâíîå ñîïðîòèâëåíèå ìûøå÷íîé òêàíè íà íèçêîé ÷àñòîòå (Àí) ïðè òðàâìå ñ äàâíîñòüþ 0 ÷àñîâ (ò.å. ñðàçó ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû) ïðàêòè÷åñêè íå îòëè÷àåòñÿ îò ïîêàçàòåëÿ èíòàêòíîé (íåïîâðåæäåííîé) ìûøå÷íîé òêàíè, â äàëüíåéøåì îòìå÷åíî ñíèæåíèå ýòîãî ïîêàçàòåëÿ. Îäíàêî, äî 12 ÷àñîâ ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ïîêàçàòåëü èìåë áîëüøîé ðàçáðîñ è íîñèë ñòàòèñòè÷åñêè íåäîñòîâåðíûé õàðàêòåð. Çàòåì ïîêàçàòåëü (Àí) èìåë äîñòîâåðíûé õàðàêòåð (òàáë. 8). Ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â 72 ÷àñà îòìå÷åíà òåíäåíöèÿ ê óâåëè÷åíèþ ïîêàçàòåëÿ àêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ íà íèçêîé ÷àñòîòå. Âûðàæåííàÿ äèíàìèêà áûëà âûÿâëåíà ïðè èññëåäîâàíèè ïîêàçàòåëÿ àêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè íà âûñîêîé ÷àñòîòå (Àâ). Ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â 12 ÷àñîâ ïîêàçàòåëü (Àâ) ñíèæàåòñÿ. Áîëåå ðåçêîå ñíèæåíèå íà÷èíàëîñü ÷åðåç 24 ÷àñà ïîñëå òðàâìû, à ÷åðåç 72 ÷àñà íàáëþäàëàñü òåíäåíöèÿ ê ïîâûøåíèþ ïîêàçàòåëÿ Àâ. Èññëåäîâàíèÿ ïàðàìåòðîâ ðåàêòèâíîãî ñîñòàâëÿþùåãî êàê íà íèçêîé (Ðí), òàê è íà âûñîêîé (Ðâ) ÷àñòîòå ïîêàçàëè, ÷òî äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ÿâëÿåòñÿ ðåàëüíîé ïî óêàçàííûì ïàðàìåòðàì. Íàèáîëåå ñòàáèëüíûå ðåçóëüòàòû áûëè ïîëó÷åíû ïðè èññëåäîâàíèè ñîîòíîøåíèÿ:
Ан ´ Рн × (Кчд) . Ав ´ Рв Îòìå÷åí çàêîíîìåðíûé ðîñò ïîêàçàòåëÿ Ê×Ä â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà. Ïî ýòèì ïîêàçàòåëÿì ìîæíî óñòàíîâèòü äàâíîñòü âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé.  ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå âàæíûì ÿâëÿåòñÿ âîïðîñ î ñîõðàííîñòè äèôôåðåíöèàëüíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ êðèòåðèåâ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà. Ñ ýòîé öåëüþ àâòîð ïðîâåë ýêñïåðèìåíòû ïî èçó÷åíèþ âëèÿíèÿ ïîñìåðòíûõ ïðîöåññîâ íà ïîêàçàòåëè ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ïðèâåäåíû â òàáëèöå 8. Èç òàáëèöû ñëåäóåò, ÷òî ïîêàçàòåëè ýëåêòðîïðîâîäíîñòè òðàâìèðîâàííûõ è èíòàêòíûõ ìûøö â äèíàìèêå ïîñìåðòíîãî
Ïàðàìåòðû ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â äèíàìèêå ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà (Ê÷ä:10).
Òàáëèöà 8
Ãëàâà 3 Ñòð. 123
Ãëàâà 3
Ñòð. 124
ïåðèîäà èçìåíÿþòñÿ íåîäèíàêîâî; èìåþò ðàçëè÷íûå çàêîíîìåðíîñòè, ÷òî äàåò âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàòü èõ äëÿ äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû â ïðåäåëàõ äî 72 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Îòìå÷åíî, ÷òî ïðèíöèïèàëüíîé ðàçíèöû ìåæäó äàííûìè, ïîëó÷åííûìè ïðè èññëåäîâàíèè ýêñïåðèìåíòàëüíîãî è ýêñïåðòíîãî ìàòåðèàëà, íå èìååòñÿ. Âñå âûÿâëåííûå â ýêñïåðèìåíòå çàêîíîìåðíîñòè ñîõðàíÿþòñÿ. Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ïàðàìåòðîâ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â äèíàìèêå ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ñ ó÷åòîì äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 9. Òàáëèöà 9 Ïàðàìåòðû ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â äèíàìèêå ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà ñ ó÷åòîì äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Давность наступления смерти (в час) Давность травмы (в час) Контрольная мышца (интактная) Травмированная мышца (давность травмы 0 час) 6 12 24 48
12 M
24 m
M
48 m
M
72 m
M
m
4,88±0,93
5,97±0,95
9,05±1,45
17,5±3,15
6,12±0,83
8,78±1,02
18,75±3,02
20,5±2,52
9,43±0,73 1,98±1,97 14,5±1,95 18,75±2,05
12,75±3,05 13,32±2,05 15,35±1,87 18,95±1,95
16,4±3,35 19,45±2,75 21,45±2,85 23,53±2,75
23,4±2,11 26,54±3,75 29,75±3,95 31,45±3,75
Èç òàáëèöû ñëåäóåò, ÷òî ïðè ñðàâíåíèè ïîêàçàòåëåé ýëåêòðîïðîâîäíîñòè òðàâìèðîâàííûõ è èíòàêòíûõ ìûøö â äèíàìèêå ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà âûÿâëÿþòñÿ îïðåäåëåííûå çàêîíîìåðíîñòè, ïîçâîëÿþùèå îïðåäåëèòü ïðèæèçíåííîñòü è äàâíîñòü ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé. Ïðè èçó÷åíèè ïàðàìåòðîâ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà äî 72 ÷àñîâ èìååòñÿ ðåàëüíàÿ âîçìîæíîñòü äèàãíîñòèêè ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû.
Ãëàâà 3
Ñòð. 125
Òàêèì îáðàçîì, ïî ìíåíèþ àâòîðà, ïî ïîêàçàòåëÿì àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ (íà íèçêîé è âûñîêîé ÷àñòîòå) òðàâìèðîâàííûõ ïðè æèçíè è èíòàêòíûõ ñêåëåòíûõ ìûøö èìååòñÿ ðåàëüíàÿ âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé.  êà÷åñòâå îáúåêòèâíûõ êðèòåðèåâ îïðåäåëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ìîæíî èñïîëüçîâàòü êàê ïîêàçàòåëè ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö, òàê è êîýôôèöèåíòû èõ îòíîøåíèé. Äèíàìèêà ïîêàçàòåëåé àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ è êîýôôèöèåíòîâ èõ îòíîøåíèé ïîçâîëÿåò óñòàíàâëèâàòü äëèòåëüíîñòü ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà â ñðîêè 6, 12, 24 è 48 ÷àñîâ. Íàèáîëåå âûðàæåííàÿ äèíàìèêà âûÿâëåíà ïðè îïðåäåëåíèè ñîîòíîøåíèÿ àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ íà íèçêîé è âûñîêîé ÷àñòîòàõ. Óñòàíîâëåíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ðåàëüíî îñóùåñòâèìî ïî ïîêàçàòåëÿì ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö â ñðîêè äî 72 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, òàê êàê ïîñìåðòíûå ïðîöåññû ñóùåñòâåííî íå âëèÿþò íà ïàðàìåòðû àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè. Îïðåäåëåíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé ïî ïàðàìåòðàì ýëåêòðîïðîâîäíîñòè ñêåëåòíûõ ìûøö íåîáõîäèìî ïðîâîäèòü ñ ó÷åòîì òåìïåðàòóðû òêàíåé è ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ íåïîâðåæäåííûõ ñèììåòðè÷íûõ ó÷àñòêîâ (êîíòðîëü), ÷òî ïîçâîëÿåò â êàæäîì êîíêðåòíîì ñëó÷àå ó÷èòûâàòü âëèÿíèå ðÿäà ýíäîãåííûõ è ýêçîãåííûõ ôàêòîðîâ.
Ãëàâà 4
Ñòð. 126 Ãëàâà 4.
ÄÐÓÃÈÅ ÌÅÒÎÄÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß ÁÈÎÔÈÇÈ×ÅÑÊÈÕ ÑÂÎÉÑÒ ÎÐÃÀÍÎÂ È ÒÊÀÍÅÉ ×ÅËÎÂÅÊÀ È ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ ÆÈÂÎÒÍÛÕ. 4.1. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè â äèàïàçîíå ñâåðõâûñîêèõ ÷àñòîò.  ïîñëåäíèå äåñÿòèëåòèÿ â ñóäåáíîé ìåäèöèíå ïðè èçó÷åíèè ðàçëè÷íûõ àêòóàëüíûõ ïðîáëåì ñòàëè ïðèìåíÿòüñÿ áèîôèçè÷åñêèå ìåòîäû, îñíîâàííûå íà èñïîëüçîâàíèè ïîëåé ñâåðõâûñîêîé ÷àñòîòû (ÑÂ×) äëÿ õàðàêòåðèñòèêè ñîñòîÿíèé îðãàíîâ è òêàíåé òðóïîâ ïî èçìåíåíèþ êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè (ÊÎÄÏ) è ïðîâîäèìîñòè. Îïðåäåëåíèå íà ñâåðõâûñîêèõ ÷àñòîòàõ ýëåêòðè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé ñâÿçàíî ñ íåêîòîðûìè îáùèìè ïàðàìåòðàìè áèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåì (ñîäåðæàíèå âîäû, ñòðóêòóðà ìàêðîìîëåêóë áåëêà, ëèïèäîâ è ò.ï.).  ïðîöåññå ãíèëîñòíîãî ðàñïàäà ýòè êîìïîíåíòû áèîëîãè÷åñêèõ ñîåäèíåíèé ïðåòåðïåâàþò íàèáîëåå ñèëüíûå èçìåíåíèÿ. À.È.Çîðüêèí (1975) èçó÷èë çàêîíîìåðíîñòè â èçìåíåíèÿõ áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ òêàíåé â ïðîöåññå ãíèëîñòíîé òðàíñôîðìàöèè òðóïà, âëèÿíèå íà íèõ íåêîòîðûõ ôàêòîðîâ, à òàêæå èõ âçàèìîîáóñëîâëåííîñòü ñ äèíàìèêîé áåëêîâûõ ôðàêöèé â ðàçëàãàþùèõñÿ îðãàíàõ è òêàíÿõ. Àâòîð èññëåäîâàë ìûøöó äèàôðàãìû, ùèòîâèäíóþ æåëåçó, ïîäêîæíóþ æèðîâóþ êëåò÷àòêó, íåáåðåìåííóþ ìàòêó, ÿè÷êè. Ýòè îðãàíû è òêàíè ðàçëè÷íû íå òîëüêî ïî ñâîèì àíàòîìî-ôèçèîëîãè÷åñêèì îñîáåííîñòÿì, íî è ïî ãëóáèíå èõ ðàñïîëîæåíèÿ â òåëå òðóïà. Áûë èñïîëüçîâàí ìåòîä ñâåðõâûñîêî÷àñòîòíûõ èçìåíåíèé ñ ðåãèñòðàöèåé ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè, êîòîðûå çàâèñÿò îò ñóììàðíîãî ýôôåêòà è îò ðÿäà ôàêòîðîâ: ñòåïåíè ãèäðàòàöèè ìîëåêóë, ýëåêòðè÷åñêîé ñèììåòðèè áåëêîâîé ìîëåêóëû, ãåîìåòðè÷åñêîé ôîðìû è ðàçìåðîâ åå, èçìåíåíèÿ ÷èñëà ïîëÿðíûõ ãðóïï â åäèíèöå îáúåìà. Âåñüìà ñóùåñòâåííûì ÿâëÿåòñÿ òîò ôàêò, ÷òî ýëåêòðè÷åñêèå ñâîéñòâà îáúåêòîâ â äèàïàçîíå ÑÂ× íå çàâèñÿò îò áèîëîãè÷åñêîé ñòðóêòóðû, â îáðàçîâàíèè êîòîðîé ó÷àñòâóþò êëåòêè è êëåòî÷íûå ìåìáðàíû (Øâàí Í.Ð., 1957). Êëåòî÷íûå ìåì-
Ãëàâà 4
Ñòð. 127
áðàíû èìåþò î÷åíü ìàëóþ òîëùèíó è ïîýòîìó îêàçûâàþò íåáîëüøîå âëèÿíèå íà ñîñòàâ êëåòêè. Âñëåäñòâèå ýòîãî åìêîñòü ìåìáðàíû âåëèêà è ñîñòàâëÿåò îêîëî 1 ìêô/ñì2, à åå ðåàêòèâíîå ñîïðîòèâëåíèå íà ÷àñòîòàõ âûøå 100 ÌÃö íàñòîëüêî ìàëî, ÷òî âåëè÷èíà òîêà íå çàâèñèò îò íàëè÷èÿ èëè îòñóòñòâèÿ ýòèõ ìåìáðàí. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, äëÿ öåëåé ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû ìîæíî ñ÷èòàòü, ÷òî áèîëîãè÷åñêàÿ òêàíü ñîñòîèò â óïðîùåííîì âèäå èç ýëåêòðîëèòîâ, ñîäåðæàùèõ ìàêðîìîëåêóëÿðíûå êîìïîíåíòû è ëèïèäû. Ñ ó÷åòîì äîñòîèíñòâ è íåäîñòàòêîâ èìåþùèõñÿ ñïîñîáîâ ðåãèñòðàöèè âåëè÷èí ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè À.È.Çîðüêèí èñïîëüçîâàë ðåçîíàíñíûé ìåòîä èçìåðåíèé â êîàêñèàëüíîì öèëèíäðè÷åñêîì ðåçîíàòîðå 10-ñàíòèìåòðîâîãî äèàïàçîíà ñâåðõâûñîêî÷àñòîòíûõ ðàäèîâîëí. Ýòîò ìåòîä îáëàäàåò ñëåäóþùèìè ïðåèìóùåñòâàìè: 1). âûñîêàÿ äîáðîòíîñòü êîëåáàíèé ïîëÿ ÑÂ×; 2) ïîëíàÿ èçîëÿöèÿ èçìåðèòåëüíîãî ðåçîíàòîðà îò ïîñòîðîííèõ ïîìåõ, âêëþ÷àÿ íàâåäåííûå ýëåêòðè÷åñêèå è ìàãíèòíûå ïîëÿ; 3) äàåò âîçìîæíîñòü èññëåäîâàòü ëþáîé îáúåêò, â òîì ÷èñëå è áèîëîãè÷åñêèé, áåç êàêîé-ëèáî ïðåäâàðèòåëüíîé ôèêñàöèè, îáðàáîòêè è ò.ï.; 4) áûñòðîòà èçìåðåíèé (äëèòåëüíîñòü îäíîãî èçìåðåíèÿ çàíèìàåò íå áîëåå 1-2 ìèíóò); 5). ìàëûé îáúåì èññëåäóåìîãî îáðàçöà (0,05 ñì3). Èçìåðåíèå ýëåêòðè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ (ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè) îñóùåñòâëÿëè íà óñòàíîâêå ÑÂ× 10-ñàíòèìåòðîâîãî äèàïàçîíà ðàäèîâîëí, áëîê-ñõåìà êîòîðîé ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 19. Ðåçîíàòîð â äàííîé óñòàíîâêå ïðåäñòàâëåí ïåðåñòðàèâàåìîé ïîëîñòüþ ñ òèïîì âîëíû Å010 . Êóñî÷êè èññëåäóåìûõ îðãàíîâ è òêàíåé îáúåìîì 0,05 ñì3, îñâîáîæäåííûå îò ñîåäèíèòåëüíî-òêàííûõ îáîëî÷åê, ïîìåùàëè â òî÷êó ðåçîíàòîðà ñ ìàêñèìàëüíîé íàïðÿæåííîñòüþ ýëåêòðè÷åñêîãî ïîëÿ ÑÂ×. Èçìåðåíèÿ ïðîâîäèëè ïðè ñòðîãî ïîñòîÿííîé ÷àñòîòå, êîòîðóþ îïðåäåëÿëè ñ ïîìîùüþ âîëíîìåòðà. Ýòó ÷àñòîòó ðåãèñòðèðîâàëè ïðè íàëè÷èè ïóñòîé, ñïåöèàëüíî ñêîíñòðóèðîâàííîé êþâåòû, êîòîðàÿ áûëà èçãîòîâëåíà èõ ôòîðîïëàñòà, èìåþùåãî âåñüìà ìàëûé òàíãåíñ óãëà äèýëåêòðè÷åñêèõ ïîòåðü.  ïðîöåññå èçìåðåíèé ðåçîíàíñ ôèêñèðîâàëè ïî ìàêñèìóìó àìïëèòóäû â öåíòðàëüíîé ÷àñòè ýêðàíà îñöèëëîãðàôà è íàëè÷èþ ìåòêè âîëíîìåòðà íà âåðøèíå ðåçîíàíñíîé êðèâîé.
Ãëàâà 4
Ñòð. 128
Ðèñóíîê 19. Áëîê-ñõåìà óñòàíîâêè ÑÂ×. 1 - âûñîêî÷àñòîòíûé ãåíåðàòîð; 2 - ðàçâÿçûâàþùèé âåíòèëü; 3 - íàïðàâëåííûé îòâåòâèòåëü; 4 - ïåðåñòðàèâàåìûé èçìåðèòåëüíûé ðåçîíàòîð; 5 - äåòåêòîð ñèãíàëà; 6 - îñöèëëîãðàô; 7 - âîëíîìåòð; 8 - äåòåêòîð âîëíîìåòðà; 9 - ôîðìèðîâàòåëü ÷àñòîòíîé ìåòêè; 10 - ÷àñòîòíûé ìîäóëÿòîð. Êþâåòó ñ îáðàçöîì âíîñèëè ÷åðåç ñïåöèàëüíîå îòâåðñòèå â ðåçîíàòîðíîé êðûøêå, ïîñëå ÷åãî ôèêñèðîâàëè íîâóþ ÷àñòîòó ðåçîíàòîðà. Ðàñ÷åòíûå ôîðìóëû äëÿ âû÷èñëåíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè áûëè ïîëó÷åíû ïóòåì èñïîëüçîâàíèÿ òåîðèè ìàëûõ âîçìóùåíèé. Äëÿ ýêñïåðèìåíòîâ áûëè èñïîëüçîâàíû îðãàíû è òêàíè, èçúÿòûå èç òðóïîâ 212 ëèö, äàâíîñòü ñìåðòè êîòîðûõ íå ïðåâûøàëà òðåõ ñóòîê. Ëèöà îáîåãî ïîëà, óìåðøèå ñêîðîïîñòèæíî, îò ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè, îòðàâëåíèÿ ýòèëîâûì àëêîãîëåì, îáèëüíîé êðîâîïîòåðè, ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìû, ñåïòè÷åñêîé èíòîêñèêàöèè. Èññëåäîâàíèÿ ïðîèçâîäèëè ïî ìåðå ïîñòóïëåíèÿ òðóïîâ â ìîðã è çàòåì åæåäíåâíî äî 20-28 ñóòîê. Áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî â ïðîöåññå ãíèëîñòíîãî ðàçëîæåíèÿ èññëåäóåìûõ òêàíåé è îðãàíîâ òðóïà ïðîèñõîäèò èçìåíåíèå âåëè÷èí ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè.  áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ èìåëî ìåñòî âîçðàñòàíèå âåëè÷èíû ïðîíèöàåìîñòè è ïàäåíèå ïðîâîäèìîñòè. Îäíàêî â îòäåëüíûõ îáúåêòàõ íàáëþäàëàñü ïðîòèâîïîëîæíàÿ çàêîíîìåðíîñòü â äèíàìèêå ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè: äèýëåêòðè÷åñêàÿ ïðîíèöàåìîñòü óìåíüøàëà ñâîè çíà÷åíèÿ, à ïðîâîäèìîñòü óâåëè÷èâàëà. Àíàëèç ãðàôèêîâ, ïîëó÷åííûõ íà îñíîâå èçìåíåíèé âåëè÷èí ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè â ïðîöåññå ãíèëîñòíîé òðàíñôîðìàöèè òêàíåé òðóïà, ïîêàçàë, ÷òî èìååòñÿ
Ãëàâà 4
Ñòð. 129
êàê ëèíåéíàÿ, òàê è êâàäðàòè÷íàÿ çàâèñèìîñòü ìåæäó âðåìåíåì, ïðîøåäøèì ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, è äèíàìèêîé èññëåäóåìûõ ýëåêòðè÷åñêèõ âåëè÷èí. Ïðîöåññ ãíèëîñòíîãî ðàçëîæåíèÿ òêàíåé è îðãàíîâ çàêëþ÷àåòñÿ, ïðåæäå âñåãî, â ðàñïàäå ðàçíîîáðàçíûõ, äîñòàòî÷íî ñëîæíûõ ïî ñâîåé ñòðóêòóðå áåëêîâûõ îáðàçîâàíèé, êîòîðûå â êëåòî÷íîé ïðîòîïëàçìå ïðåäñòàâëåíû ãèäðàòèðîâàííûìè áåëêîâûìè êîìïëåêñàìè. Áèîïîëèìåðíûå ìîëåêóëû â âîäíîé ñðåäå ïðåäñòàâëåíû ïîëèýëåêòðîëèòíûìè èîíàìè ñ áîëüøèì êîëè÷åñòâîì ïîëÿðíûõ ãðóïï, êîòîðûå â ñâîþ î÷åðåäü, ôîðìèðóþò âîêðóã íèõ èîííóþ àòìîñôåðó ïðîòèâîïîëîæíîãî çíàêà. Âåñü ýòîò ñëîæíûé êîìïëåêñ ïîëÿðèçóåòñÿ ïîä äåéñòâèåì âíåøíåãî ýëåêòðè÷åñêîãî ïîëÿ (Àõàäîâ ß.Þ., 1972; Áðàíäò À.À., 1963; Âîëüêåíøòåéí Ì.Â., 1972; Ñàæèí Á.È., Ëîáàíîâ À.Ì., Ýéäåëüíàíò Ì.Ï., Êîéêîâ Ñ.Ï., Ðîìàíîâñêàÿ Î.Ñ., 1970; Òàãåð À.À., 1963).  ïðîöåññå ýêñïåðèìåíòàëüíûõ èññëåäîâàíèé îêàçàëîñü, ÷òî âåëè÷èíû êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè èçó÷àåìûõ òêàíåé èçìåíÿþò ñâîè ïàðàìåòðû âî âðåìåíè. Íàèáîëåå ÷åòêî ýòè èçìåíåíèÿ ðåãèñòðèðîâàëèñü äî 17-26 ñóòîê.  ïîñëåäóþùåì îòìå÷àëè çíà÷èòåëüíîå ïàäåíèå òåìïà èçìåíåíèÿ èññëåäóåìûõ âåëè÷èí. Ýòîò ïåðèîä ðåçêîãî óìåíüøåíèÿ òåìïà ðîñòà èëè ïàäåíèÿ âåëè÷èí ÊÎÏÄ è ïðîâîäèìîñòè óñëîâíî îáîçíà÷àëñÿ àâòîðîì êàê ïåðèîä ñòàáèëèçàöèè. Áûëè îòìå÷åíû äâå ïðîòèâîïîëîæíî íàïðàâëåííûå òåíäåíöèè â äèíàìèêå ýëåêòðè÷åñêèõ âåëè÷èí ïðè ãíèëîñòíîì ðàçëîæåíèè òêàíåé òðóïà. Îêàçàëîñü, ÷òî â áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ ïðîèñõîäèëî óâåëè÷åíèå äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè îò èñõîäíûõ çíà÷åíèé äî íåêîòîðîãî óðîâíÿ, ïîñëå ÷åãî íàñòóïàëà ñòàáèëèçàöèÿ. Îäíîâðåìåííî ñ èçìåíåíèåì äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè îòìå÷åíî ïàäåíèå ïðîâîäèìîñòè (òàêæå äî ìîìåíòà ñòàáèëèçàöèè).  äðóãèõ íàáëþäåíèÿõ, êîòîðûõ áûëî ìåíüøåå êîëè÷åñòâî, ðåãèñòðèðîâàëè îáðàòíóþ çàâèñèìîñòü â äèíàìèêå âåëè÷èí ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè: îòìå÷åíî ñíèæåíèå ÊÎÄÏ è îäíîâðåìåííîå óâåëè÷åíèå ïðîâîäèìîñòè, ïðè÷åì òîæå äî ïåðèîäà ñòàáèëèçàöèè, êîòîðûé íàñòóïàë â àíàëîãè÷íûå ñðîêè. Àíàëèç çàêîíîìåðíîñòåé, ïðîèñõîäÿùèõ â äèíàìèêå êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è
Ãëàâà 4
Ñòð. 130
ïðîâîäèìîñòè â ïðîöåññå ãíèåíèÿ èññëåäîâàííûõ òêàíåé è îðãàíîâ òðóïà, ïîçâîëèë óñòàíîâèòü, ÷òî èìååòñÿ ëèíåéíàÿ çàâèñèìîñòü ýòèõ âåëè÷èí îò âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ñ ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ìàòåìàòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ïîêàçàëà, ÷òî êàæäûé èç ãðàôèêîâ, õàðàêòåðèçóþùèõ ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå, äîñòàòî÷íî õîðîøî àïðîêñèìèðîâàëñÿ ëèíåéíîé ôóíêöèåé:
Y=aX+b,
(17)
ãäå X - àðãóìåíò, íåçàâèñèìàÿ ïåðåìåííàÿ (äàâíîñòü ñìåðòè â ñóòêàõ), Y - çàâèñèìàÿ ïåðåìåííàÿ èëè ôóíêöèÿ (çíà÷åíèå ÊÎÄÏ èëè ïðîâîäèìîñòè íà ìîìåíò èññëåäîâàíèÿ), a - êîýôôèöèåíò ïðè íåèçâåñòíîì (ðàññ÷èòàí ÏÝÂÌ), b - âåëè÷èíà ñâîáîäíîãî ÷ëåíà (ðàññ÷èòàí ÏÝÂÌ). Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b äëÿ îáúåêòîâ, íàõîäÿùèõñÿ â ïðîöåññå ãíèåíèÿ â óñëîâèÿõ êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû, ïðèâåäåíû â òàáëèöå 10. Ìåæäó äèíàìèêîé ýëåêòðè÷åñêèõ âåëè÷èí (ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè) è ñòåïåíüþ ðàçâèòèÿ ãíèëîñòíûõ èçìåíåíèé â îðãàíàõ è òêàíÿõ, ïîäâåðãàâøèõñÿ ýêñïåðèìåíòàëüíîìó èññëåäîâàíèþ, óñòàíîâëåíà îïðåäåëåííàÿ ñâÿçü. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, íå èñêëþ÷åíî, ÷òî ýòà ñâÿçü îáóñëîâëåíà ïðîöåññàìè îáðàçîâàíèÿ áîëüøîãî ÷èñëà ïîëÿðíûõ ñîåäèíåíèé, ïîÿâèâøèõñÿ â ðåçóëüòàòå äåïîëèìåðèçàöèè áåëêîâûõ ñòðóêòóð. Îòìå÷åíî, ÷òî, íåñìîòðÿ íà èäåíòè÷íîñòü óñëîâèé ãíèåíèÿ è îäèíàêîâóþ äëèòåëüíîñòü ýêñïåðèìåíòà, çàðåãèñòðèðîâàí íåðàâíîçíà÷íûé ñäâèã èññëåäóåìûõ âåëè÷èí. Íàïðèìåð, ÊÎÄÏ ìûøöû äèàôðàãìû âîçðîñëà íà 23,3 åäèíèöû, ùèòîâèäíîé æåëåçû íà 17,6, ïîäêîæíîé æèðîâîé êëåò÷àòêè - íà 12,5. À.È. Çîðüêèí ñ÷èòàåò, ÷òî ðàçëè÷íàÿ íàïðàâëåííîñòü â èçìåíåíèÿõ êàê äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè, òàê è ïðîâîäèìîñòè, âîçìîæíî, ÿâëÿåòñÿ ïðîÿâëåíèåì ïîëîæèòåëüíîé è îòðèöàòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé àíèçîòðîïèè âåùåñòâ, íàõîäÿùèõñÿ â æèäêîêðèñòàëëè÷åñêîì ñîñòîÿíèè (Öâåòêîâ Â.Í., 1938, 1939; ×èñòÿêîâ È.Ã., 1961, 1966). Êàê ïîëîæèòåëüíàÿ, òàê è îòðèöàòåëüíàÿ äèýëåêòðè÷åñêàÿ àíèçîòðîïèÿ èçìåíÿþòñÿ â ñâÿçè ñ óìåíüøåíèåì ñòåïåíè óïîðÿäî÷åííîñòè ìîëåêóëÿðíûõ îáðàçîâàíèé (â ñâÿçè ñ äåïîëèìåðèçàöèåé). Ñàì æå ïðîöåññ äåïîëèìåðèçàöèè íàõîäèòñÿ ïîä çíà÷èòåëüíûì âëè-
Ãëàâà 4
Ñòð. 131
ÿíèåì óñëîâèé, îïðåäåëÿþùèõ èíòåíñèâíîñòü è íàïðàâëåííîñòü ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, èìåþùèõ ìåñòî ïðè ãíèëîñòíîì ðàçëîæåíèè. Òàáëèöà 10 Çíà÷åíèå êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b.
Объект исследования Диафрагма (рост) (падение) Щитовидная железа (рост) (падение) Подкожножир. клетчатка (рост) (падение) Матка (рост) (падение) Яички (рост) (падение)
КОДП
Проводимость
а
b
а
b
1,260571 -0,952984
39,714999 44,550841
-0,710451 0,642030
19,864737 15,463683
0,924278 -0,957458
45,503579 47,605315
-0,400902 0,637894
21,499473 21,422105
0,664623 -0,506256 0,637736 -0,676894 0,638496 -1,045037
26,946405 30,500842 36,564262 36,754894 42,575789 44,387894
-0,518571 0,524285 -0,503233 0,483458 -0,521428 0,513007
16,750000 14,049999 27,678947 26,733684 18,670000 16,878421
Îñòàëüíóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè ñëó÷àè ñìåðòè, ñîïðîâîæäàâøèåñÿ îáèëüíîé êðîâîïîòåðåé (35). Ïðè ãíèåíèè îðãàíîâ è òêàíåé â ýòèõ íàáëþäåíèÿõ âñåãäà ðåãèñòðèðîâàëîñü ïàäåíèå äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè ñ îäíîâðåìåííûì ðîñòîì ïðîâîäèìîñòè. Ñëåäóåò óêàçàòü, ÷òî ýòó çàêîíîìåðíîñòü ïðîÿâèëè íå âñå èññëåäóåìûå òêàíè, à òîëüêî äèàôðàãìàëüíàÿ ìûøöà, ùèòîâèäíàÿ æåëåçà è ÿè÷êè. Äðóãóþ ãðóïïó íàáëþäåíèé, â êîòîðûõ âñåãäà íàáëþäàëè òîëüêî âîçðàñòàíèå ïðîíèöàåìîñòè è ïàäåíèå ïðîâîäèìîñòè, îáðàçîâàëè ñëó÷àè ñìåðòè îò îñòðîãî îòðàâëåíèÿ ýòèëîâûì àëêîãîëåì (31). Îòìå÷åíî, ÷òî â íàáëþäåíèÿõ ñîïðîâîæäàþùèõñÿ îáèëüíîé êðîâîïîòåðåé, èñõîäíûå âåëè÷èíû äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè íèæå, à ïðîâîäèìîñòè âûøå, ÷åì ïðè äðóãèõ ïðè÷èíàõ ñìåðòè (òàáë. 11). Ïðè îñòðîì îòðàâëåíèè ýòèëîâûì àëêîãîëåì îòìå÷åíî ïîâûøåíèå èñõîäíûõ çíà÷åíèé ÊÎÄÏ ïîäêîæíîé æèðîâîé
Ãëàâà 4
Ñòð. 132
êëåò÷àòêè, ìûøöû íåáåðåìåííîé ìàòêè è òêàíè ÿè÷åê, à çíà÷åíèÿ ïðîâîäèìîñòè, íàîáîðîò, áûëè ìåíüøèìè, ÷åì â ñëó÷àÿõ ñìåðòè îò äðóãèõ ïðè÷èí (òàáë. 12). Òàáëèöà 11 Èñõîäíûå çíà÷åíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè â ïåðâûå ñóòêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, â çàâèñèìîñòè îò åå ïðè÷èíû Объект исследования Диафрагма Щитовидная железа Яички
Обильная кровопотеря
Другие причины смерти
КОДП
проводимость
КОДП
проводимость
38,2±0,2
23,3±0,2
44,0±0,1
46,3±0,3
42,3±0,2 37,7±0,3
25,1±0,3 20,7±0,3
46,7±0,1 43,5±0,4
21,2±0,4 18,0±0,5
Òàáëèöà 12 Èñõîäíûå çíà÷åíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè â ïåðâûå ñóòêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, â çàâèñèìîñòè îò åå ïðè÷èíû Объект исследования Подкожножир. клетчатка Матка Яички
Отравление алкоголем
Другие причины смерти
КОДП
проводимость
КОДП
проводимость
30,2±0,3 39,7±0,2 46,2±0,3
13,6±0,2 23,1±0,3 14,8±0,3
27,6±0,1 36,8±0,2 43,5±0,2
14,5±0,4 27,6±0,3 17,6±0,3
Ïðîâåäåííûé ìàòåìàòè÷åñêèé àíàëèç ïîêàçàë, ÷òî â äèíàìèêå âåëè÷èí äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè âî âðåìåíè êîýôôèöèåíò “à” è ÷èñëåííîå çíà÷åíèå ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” äëÿ èññëåäóåìûõ ãðóïï íàáëþäåíèé îêàçàëèñü ðàçëè÷íûìè (òàáë. 13 è 14).  ïðîöåññå èññëåäîâàíèÿ áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî èñõîäíûå çíà÷åíèÿ äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè â èçó÷åííûõ îðãàíàõ è òêàíÿõ ðàçëè÷íû ïî ñâîåé âåëè÷èíå. Ñòàòèñòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà ïîêàçàëà, ÷òî íåò çàâèñèìîñòè îò òàêèõ ïðè÷èí ñìåðòè, êàê ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòàÿ è ëåãî÷íàÿ ïàòîëîãèÿ ïðè ñêîðîïîñòèæíîé (íåíàñèëüñòâåííîé) ñìåðòè, ÷åðåïíî-ìîçãîâîé òðàâìå, ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (òàáë. 13 è 14).
Ãëàâà 4
Ñòð. 133 Òàáëèöà 13
Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b (ïðè îáèëüíîé êðîâîïîòåðå). Объект исследования Диафрагма Щитовидная железа Яички
КОДП
Проводимость
а
b
а
b
-0,769842
38,559842
0,438120
22,754736
-0,802744 -0,896691
43,257315 38,585262
0,660451 0,390526
24,345632 20,259473
Òàáëèöà 14 Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b (ïðè îñòðîì îòðàâëåíèè àëêîãîëåì).
КОДП
Проводимость
Объект исследования
а
b
а
b
Подкожножир. клетчатка Матка Яички
0,562903 0,563233 0,530827
29,511168 39,711052 45,756316
-0,450225 -0,465714 -0,513931
13,627368 23,199999 15,282352
Çíà÷åíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè îêàçàëèñü íåîäèíàêîâûìè â ðàçëè÷íûõ îðãàíàõ è òêàíÿõ è â ïåðèîä ñòàáèëèçàöèè (òàáë. 15). Îïðåäåëåííûé èíòåðåñ ïðåäñòàâèëî èçó÷åíèå À.È.Çîðüêèíûì ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè äèàôðàãìàëüíîé ìûøöû, íåáåðåìåííîé ìàòêè, ùèòîâèäíîé æåëåçû, ïîäêîæíîé æèðîâîé êëåò÷àòêè, ÿè÷åê ïðè ãíèåíèè â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû (40-50îÑ) îêðóæàþùåé ñðåäû. Îêàçàëîñü, ÷òî ñðîêè ñòàáèëèçàöèè â ýòèõ ñëó÷àÿõ ïðîÿâëÿþò ñåáÿ íåñêîëüêî ðàíüøå, ÷åì ïðè îáû÷íûõ óñëîâèÿõ, à èìåííî, íà 17-18 ñóòêè. Çà ýòîò, íåñêîëüêî ìåíüøèé ïåðèîä âðåìåíè âåëè÷èíû, íà êîòîðûå ïðîèçîøëî èçìåíåíèå çíà÷åíèé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè, îêàçàëèñü ïðèìåðíî îäèíàêîâûìè. Ýòîò ôàêò ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû îêðóæàþùåé ñðåäû ïðîöåññû ãíèëîñòíîé òðàíñôîðìàöèè àêòèâèçèðóþòñÿ è ïðîòåêàþò áîëåå èíòåíñèâíî. Êðîìå òîãî, ïðè ãíèåíèè â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòó-
Ãëàâà 4
Ñòð. 134
ðû ñòàáèëèçàöèÿ ýëåêòðè÷åñêèõ âåëè÷èí â ïîäêîæíîé æèðîâîé êëåò÷àòêå è ìûøöå íåáåðåìåííîé ìàòêè íàñòóïàëà â òå æå ñðîêè, ÷òî è ïðè òåìïåðàòóðå 18-22îÑ, ò.å. ñïóñòÿ 20-26 ñóòîê. Òàáëèöà 15 Çíà÷åíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè â ïåðèîä ñòàáèëèçàöèè
Объект исследования Диафрагма (рост) (падение) Щитовидная железа (рост) (падение) Подкожножир. клетчатка (рост) (падение) Матка (рост) (падение) Яички (рост) (падение)
КОДП
Проводимость
М
±м
М
±м
64,9 25,8
0,1 0,2
29,2 5,7
0,3 0,4
64,2 28,6
0,1 0,2
34,3 13,7
0,3 0,4
40,1 21,1 49,0 23,4 55,4 23,9
0,1 0,2 0,25 0,2 0,1 0,3
24,6 6,5 36,8 17,6 27,5 8,3
0,2 0,2 0,1 0,2 0,1 0,3
Ìàòåìàòè÷åñêèé àíàëèç ãðàôèêîâ, âûðàæàþùèõ äèíàìèêó âåëè÷èí äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè, ïîçâîëèë óñòàíîâèòü çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòîâ “à” è “b” ïðè ãíèåíèè â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû îêðóæàþùåé ñðåäû (òàáë. 16). Íàðÿäó ñ ýòèì À.È. Çîðüêèí èçó÷àë èçìåíåíèÿ áèîôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ óêàçàííûõ îáúåêòîâ â ïðîöåññå ãíèåíèÿ, êîòîðîìó ïðåäøåñòâîâàëî çàìîðàæèâàíèå è ïîñëåäóþùåå îòòàèâàíèå. Óñòàíîâëåíî, ÷òî äåéñòâèå íèçêîé òåìïåðàòóðû, ò.å. çàìîðàæèâàíèå, îñòàíàâëèâàåò ïðîöåññû ãíèëîñòíîãî ðàñïàäà òêàíåé íà äîñòàòî÷íî äëèòåëüíûé ïåðèîä, íå èçìåíÿÿ â ýòî âðåìÿ áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ îáúåêòîâ. Ñëåäóåò óêàçàòü, ÷òî â ïåðèîä ïîëíîãî çàìåðçàíèÿ òêàíåé çíà÷åíèÿ äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè ñîñòàâëÿëè âåëè÷èíó ïîðÿäêà 8,29,5 åäèíèö, à ïðîâîäèìîñòü - 38,4-41,2 åäèíèöû, âíå çàâèñèìîñòè îò õàðàêòåðà îáúåêòà.
Ãëàâà 4
Ñòð. 135
Ïîñëå îòòàèâàíèÿ çíà÷åíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè âîññòàíàâëèâàëèñü äî èñõîäíûõ âåëè÷èí, çàðåãèñòðèðîâàííûõ äî çàìîðàæèâàíèÿ, õîòÿ â îòäåëüíûõ ñëó÷àÿõ è ïðåâûøàëè èõ.  äàëüíåéøåì, â õàðàêòåðå èçìåíåíèé âåëè÷èí äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè îòìå÷åíû çàêîíîìåðíîñòè, àíàëîãè÷íûå ñëó÷àÿì, êîãäà çàìîðàæèâàíèå íå ïðîèçâîäèëîñü. Îòëè÷èòåëüíîé îñîáåííîñòüþ, êàê ïðàâèëî, ÿâëÿëàñü ñòàáèëèçàöèÿ èññëåäóåìûõ ïàðàìåòðîâ â òå æå ñðîêè, êàê è â ñëó÷àÿõ ãíèåíèÿ â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû îêðóæàþùåé ñðåäû, ò.å. íà 17-18-å ñóòêè. Êîíå÷íûå æå âåëè÷èíû ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè ñóùåñòâåííî íå îòëè÷àëèñü îò èõ çíà÷åíèé â íàáëþäåíèÿõ, òêàíè òðóïîâ êîòîðûõ íå áûëè çàìîðîæåíû. Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ïðèâåäåíû â òàáëèöå 17. Òàáëèöà 16 Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b (ïðè ãíèåíèè òêàíåé â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû).
Объект исследования Диафрагма (рост) (падение) Щитовидная железа (рост) (падение) Подкожножир. клетчатка (рост) (падение) Матка (рост) (падение) Яички (рост) (падение)
КОДП
Проводимость
а
b
а
b
1,307409 -0,992806
41,479607 43,339999
-0,736326 0,719711
19,133986 16,507189
1,076029 -1,104093
46,171029 45,991544
-0,337048 0,601238
21,646405 20,854901
0,658739 -0,506230 0,669804 -0,725045 0,708771 -1,132218
28,470931 31,112615 37,050052 36,118474 44,111110 43,437189
-0,555187 0,461804 -0,543233 0,550225 -0,588648 0,568627
16,329473 13,681052 26,998947 27,022631 18,414378 17,353595
Àíàëèç âîçäåéñòâèÿ ðàçëè÷íûõ òåìïåðàòóðíûõ ôàêòîðîâ ïîçâîëÿåò ñ÷èòàòü, ÷òî ïðîöåññû ãíèåíèÿ â òêàíÿõ ïðîõîäÿò òå æå óðîâíè õèìè÷åñêèõ, ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ è ñòðóêòóðíûõ
Ãëàâà 4
Ñòð. 136
ïðåîáðàçîâàíèé, ÷òî è â ñëó÷àÿõ ãíèëîñòíîãî ðàçëîæåíèÿ ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå è ìîãóò áûòü çàðåãèñòðèðîâàíû â ïîëÿõ ñâåðõâûñîêèõ ÷àñòîò ïðè èñïîëüçîâàíèè ðåçîíàíñíîãî ìåòîäà èçìåðåíèÿ. Ïðèæèçíåííîå ââåäåíèå àíòèáèîòèêîâ è ñóëüôàíèëàìèäíûõ ïðåïàðàòîâ (â òåðàïåâòè÷åñêèõ äîçàõ) îêàçûâàåò òîðìîçÿùåå âëèÿíèå íà ïðîöåññû ãíèëîñòíîãî ðàñïàäà. Áûëî îòìå÷åíî, ÷òî â ïðîöåññå ãíèåíèÿ ùèòîâèäíîé æåëåçû è ÿè÷åê èìåëî ìåñòî çàìåäëåíèå äèíàìèêè ÊÎÏÄ è ïðîâîäèìîñòè. Ñíèæåíèå òåìïà èçìåíåíèé èññëåäóåìûõ ïàðàìåòðîâ ñîïðîâîæäàëîñü óâåëè÷åíèåì ñðîêà íàñòóïëåíèÿ ñòàáèëèçàöèè, êîòîðàÿ ïðè ââåäåíèè àíòèñåïòèêîâ íàñòóïàëà íà 25-28-å ñóòêè. Îäíàêî íå âñå èññëåäóåìûå òêàíè (ïî äèíàìèêå èõ áèîôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ) îêàçàëèñü ïîäâåðæåííûìè âëèÿíèþ àíòèñåïòèêîâ. Äèàôðàãìàëüíàÿ ìûøöà, íåáåðåìåííàÿ ìàòêà è ïîäêîæíàÿ æèðîâàÿ êëåò÷àòêà íå ïðîÿâèëè èçìåíåíèé êàê â èñõîäíûõ è êîíå÷íûõ çíà÷åíèÿõ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè, òàê è â õàðàêòåðå èõ äèíàìèêè. Òàáëèöà 17 Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b (ïðè ãíèåíèè òêàíåé ïîñëå èõ çàìîðàæèâàíèÿ è ïîñëåäóþùåãî îòòàèâàíèÿ)
Объект исследования Диафрагма (рост) (падение) Щитовидная железа (рост) (падение) Подкожножир. клетчатка (рост) (падение) Матка (рост) (падение) Яички (рост) (падение)
КОПД
Проводимость
а
b
а
b
1,498235 -1,172941
38,740000 46,719999
-0,866911 0,861617
17,824999 13,757500
0,973529 -1,064558
45,712499 49,942499
-0,434558 0,658970
20,734558 20,142500
0,553533 -0,490526 0,705705 -0,899264 0,655882 -1,073529
27,917895 29,270526 38,217750 39,299999 43,355882 44,926470
-0,411203 0,477819 -0,601617 0,722205 -0,551323 0,520735
16,222631 17,127894 25,907500 26,217499 16,554999 19,180000
Ãëàâà 4
Ñòð. 137
Ïðèæèçíåííîå ââåäåíèå äðóãèõ ãðóïï ìåäèêàìåíòîçíûõ ïðåïàðàòîâ íå îêàçàëî ñêîëüêî-íèáóäü çàìåòíîãî âëèÿíèÿ íà èçó÷àåìûå ýëåêòðè÷åñêèå âåëè÷èíû. Çíà÷åíèÿ “à” è “b” äëÿ ñëó÷àåâ ïðèæèçíåííîãî ââåäåíèÿ àíòèñåïòèêîâ ïðèâåäåíû â òàáëèöå 18. Òàáëèöà 18 Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà “à” è ñâîáîäíîãî ÷ëåíà “b” ôóíêöèè Y=aX+b (ïðè ââåäåíèè àíòèñåïòèêîâ
Объект исследования Щитовидная железа (рост) (падение) Яички (рост) (падение)
КОДП
Проводимость
а
b
а
b
0,549682 -0,738547 0,655882 -1,073529
48,772717 49,716481 43,355882 44,926470
-0,295608 0,498695 -0,445173 0,527652
17,940942 17,982970 20,210507 15,429347
Ïî ìíåíèþ À.È. Çîðüêèíà, ïðåäñòàâëÿåòñÿ âàæíûì, ÷òî ñòåïåíü âëèÿíèÿ ðàçëè÷íûõ ôàêòîðîâ óäàëîñü ó÷èòûâàòü ìàòåìàòè÷åñêè ïóòåì èñïîëüçîâàíèÿ óñòàíîâëåííûõ êîýôôèöèåíòîâ “à” è “b”. Çíà÷åíèÿ ýòèõ êîýôôèöèåíòîâ ñïåöèôè÷íû äëÿ êîíêðåòíûõ óñëîâèé è äëÿ êàæäîãî èç èññëåäóåìûõ îáúåêòîâ. Èñïîëüçóÿ ýòè êîýôôèöèåíòû ïóòåì ðåøåíèÿ ôóíêöèè: Y=aX+b, ãäå Y - çíà÷åíèå ÊÎÄÏ èëè ïðîâîäèìîñòè íà ìîìåíò èññëåäîâàíèÿ; à, b - çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòîâ, ðàññ÷èòàííûõ ÏÝÂÌ â çàâèñèìîñòè îò ïðè÷èí ñìåðòè è èññëåäóåìîé òêàíè. Àâòîð ïðèâåë ïðèìåð èç ýêñïåðòíîé ïðàêòèêè. Ïðè÷èíà ñìåðòè - ìåõàíè÷åñêàÿ àñôèêñèÿ âñëåäñòâèå ñäàâëåíèÿ îðãàíîâ øåè ðóêàìè; äàâíîñòü ñìåðòè áûëà íåèçâåñòíà. Èññëåäîâàëè ñëåäóþùèå ýëåêòðè÷åñêèå ïàðàìåòðû: ÊÎÄÏ äèàôðàãìû - 37,8, ïðîâîäèìîñòü - 19,6; ÊÎÄÏ ùèòîâèäíîé æåëåçû - 40,7, ïðîâîäèìîñòü 25,7; ÊÎÄÏ ïîäêîæíîé æèðîâîé êëåò÷àòêè - 26,5, ïðîâîäèìîñòü - 17,8; ÊÎÄÏ ÿè÷êà - 37,1, ïðîâîäèìîñòü - 20,6. Ïîäñòàâëÿÿ çíà÷åíèÿ ýòèõ âåëè÷èí â óêàçàííóþ ôîðìóëó, îïðåäåëèëè âåëè÷èíó “Õ” äëÿ êàæäîé òêàíè îòäåëüíî. Ïî ÊÎÄÏ äèàôðàãìû: à = -0,952984, b = 44,550841 37,8 = -0,953Õ + 44,551 0,953Õ = 44,551 - 37,8
Ãëàâà 4
Ñòð. 138 Х=
44 ,551 - 37 ,8 = 7 суток . 0,953
Ïî ïðîâîäèìîñòè äèàôðàãìû: à = 0,642030, b = 15,463683 19,6 = 0,642Õ + 15,464 19,6 - 15,464 = 0,642Õ
Х=
19 ,6 - 15 ,464 = 6, 4суток . 0,642
Òàêèì îáðàçîì, äàâíîñòü íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ñîñòàâèëà 6-7 ñóòîê òîìó íàçàä ïî îòíîøåíèþ ê ìîìåíòó èññëåäîâàíèÿ òêàíåé. Çíà÷åíèÿ “à” è “b” ìîãóò èñïîëüçîâàòüñÿ è â ñèòóàöèÿõ, êîãäà ñðîê íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè òî÷íî èçâåñòåí.  ÷àñòíîñòè, ïî çíà÷åíèÿì êîýôôèöèåíòîâ ìîæíî ñóäèòü îá îòäåëüíûõ ñòîðîíàõ ïðîèñøåñòâèÿ (íåêîòîðûå ïðè÷èíû ñìåðòè, ïðèåì ìåäèêàìåíòîâ íåçàäîëãî äî ñìåðòè) è îá óñëîâèÿõ îêðóæàþùåé ñðåäû, â êîòîðîé íàõîäèëñÿ òðóï. Òàêèì îáðàçîì, âåëè÷èíû êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè (ÊÎÄÏ), à òàêæå ïðîâîäèìîñòè â ðàçëè÷íûõ îðãàíàõ è òêàíÿõ (ìûøöû äèàôðàãìû è íåáåðåìåííîé ìàòêè, ïîäêîæíàÿ æèðîâàÿ êëåò÷àòêà; ùèòîâèäíàÿ æåëåçà, ÿè÷êè) â ïåðâûå ÷àñû ïîñëå ñìåðòè îêàçûâàþòñÿ íåîäèíàêîâûìè, ÷òî ÿâëÿåòñÿ ñëåäñòâèåì íå òîëüêî ðàçíîòèïíîñòè áåëêîâîé ïðèðîäû óêàçàííûõ îáúåêòîâ, íî è îñîáåííîñòåé áèîõèìè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, ïðîòåêàþùèõ â íèõ â ýòîò ïåðèîä. Óñòàíîâëåíî, ÷òî íåêîòîðûå ïðè÷èíû ñìåðòè (îáèëüíàÿ êðîâîïîòåðÿ, îñòðîå îòðàâëåíèå àëêîãîëåì) îêàçûâàþò âëèÿíèå íà âûðàæåííîñòü áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ èññëåäóåìûõ òêàíåé. Ñòåïåíü ïîñëåäóþùèõ èçìåíåíèé ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè õàðàêòåðèçóåò èíòåíñèâíîñòü àóòîëèòè÷åñêèõ è ãíèëîñòíûõ ïðîöåññîâ â òðóïå, à òàêæå ïîçâîëÿåò îöåíèâàòü èõ ðàçâèòèå â çàâèñèìîñòè îò ðÿäà ôàêòîðîâ (îòäåëüíûå âèäû ëåêàðñòâåííîé òåðàïèè, ïðîâåäåííîé íåçàäîëãî äî ñìåðòè; òåìïåðàòóðà îêðóæàþùåé òðóï ñðåäû). Ïàðàìåòðû êîìïëåêñíîé îòíîñèòåëüíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè ïðè ãíèëîñòíîì ðàçëîæåíèè òðóïà ñâÿçàíû ñ äèíàìèêîé ýëåêòðè÷åñêèõ ñâîéñòâ íàä- è êðóïíîìîëåêóëÿðíûõ áåëêîâûõ êîìïëåêñîâ.  çàâèñèìîñòè îò òèïîâ ãíèåíèÿ êîì-
Ãëàâà 4
Ñòð. 139
ïëåêñíàÿ îòíîñèòåëüíàÿ äèýëåêòðè÷åñêàÿ ïðîíèöàåìîñòü è ïðîâîäèìîñòü èçìåíÿþòñÿ ðàçëè÷íî. Òàê, âëàæíîìó òèïó ãíèåíèÿ ïðèñóùå âîçðàñòàíèå äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïàäåíèå ïðîâîäèìîñòè, ñóõîìó - ïàäåíèå ïðîíèöàåìîñòè ñ îäíîâðåìåííûì óâåëè÷åíèåì ïðîâîäèìîñòè. Þ.Í. Ëèòâèíîâà (1973, 1978) èçìåðÿëà êîìïëåêñíóþ îòíîñèòåëüíóþ äèýëåêòðè÷åñêóþ ïðîíèöàåìîñòü è ïðîâîäèìîñòü íà ñâåðõâûñîêèõ ðàäèî÷àñòîòàõ (ÑÂ×) ñ èñïîëüçîâàíèåì èçìåðèòåëüíîãî ðåçîíàòîðà 10-ñàíòèìåòðîâîãî äèàïàçîíà ðàäèîâîëí.  êà÷åñòâå áèîëîãè÷åñêîãî îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ áûëè âçÿòû ìàãèñòðàëüíûå ñîñóäû. Ñòåïåíü èçìåíåíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè ñòåíêè òðàâìèðîâàííîãî ñîñóäà ïîçâîëÿåò îðèåíòèðîâàòüñÿ â ñðîêàõ ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé ïî îòíîøåíèþ ê ìîìåíòó îñòàíîâêè ñåðäöà, äàåò âîçìîæíîñòü óñòàíàâëèâàòü ôàêò òðàâìàòèçàöèè êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ â àãîíàëüíîì ïåðèîäå èëè â ïåðâûå ÷àñû ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ôàêò ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèÿ êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ ýòèì ìåòîäîì ìîæåò áûòü óñòàíîâëåí ïðè äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà íå áîëåå îäíîãî ìåñÿöà. Ë.À. Òîìèëèíà (1979) èçó÷àëà ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòü ìÿãêèõ òêàíåé ÷àñòåé ðàñ÷ëåíåííûõ òðóïîâ â ñòàäèè ãëóáîêîãî ãíèåíèÿ äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé, âðåìåíè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè è äàâíîñòè ðàñ÷ëåíåíèÿ. Àâòîð óñòàíîâèëà, ÷òî áèîôèçè÷åñêèå ïîêàçàòåëè ðàçëè÷íûõ òêàíåé èíäèâèäóàëüíû è çàêîíîìåðíî èçìåíÿþòñÿ ïðè ãíèëîñòíîì ðàçëîæåíèè èõ â çàâèñèìîñòè îò íåêîòîðûõ ïàòîôèçèîëîãè÷åñêèõ ñîñòîÿíèé è óñëîâèé âíåøíåé ñðåäû. Áûëè ïîëó÷åíû äàííûå, ïîçâîëÿþùèå îïðåäåëÿòü äàâíîñòü ðàñ÷ëåíåíèÿ, äèôôåðåíöèðîâàòü ïðèæèçíåííóþ è ïîñìåðòíóþ òðàâìó ïðè ýêñïåðòèçå ðàñ÷ëåíåííîãî òðóïà, îïðåäåëÿòü äàâíîñòü ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû, íåêîòîðûå ïðè÷èíû ñìåðòè, à òàêæå óñëîâèÿ, â êîòîðûõ íàõîäèëñÿ òðóï. Â.Í. Êðþêîâ, À.À. Ñèðÿöêèé (1983) íà ýêñïåðòíîì ìàòåðèàëå èññëåäîâàëè ìåòîäîì ÑÂ× áèîôèçè÷åñêèå ñâîéñòâà êîæè è ìûøö, ïîâðåæäåííûõ ïðèæèçíåííî è ïîñìåðòíî â ðàçëè÷íûå ñðîêè. Ïîñìåðòíûå ïîâðåæäåíèÿ ïðè÷èíÿëè òâåðäûì òóïûì ïðåäìåòîì ÷åðåç 6 ÷àñîâ ïîñëå îñòàíîâêè ñåðäöà. Èçìåðåíèÿ ïàðàìåòðîâ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè ïðîâîäèëè êàê ñðàçó ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ òðàâìû, òàê è ÷åðåç 6, 12 è 24 ÷àñà, à çàòåì ÷åðåç êàæäûå ñóòêè â òå÷åíèå îäíîãî ìåñÿöà. Àâòîðà-
Ãëàâà 4
Ñòð. 140
ìè áûë ñäåëàí âûâîä î òîì, ÷òî èññëåäîâàíèå áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ ìÿãêèõ òêàíåé (ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòü) ïîçâîëÿåò ñóäèòü íå òîëüêî î ïðèæèçíåííîñòè è ïîñìåðòíîñòè òðàâìû, íî è î ïðè÷èíå ñìåðòè, äàâíîñòè åå íàñòóïëåíèÿ, äàæå ïðè èññëåäîâàíèè ÷àñòåé ðàñ÷ëåíåííîãî òðóïà. À.À. Òåíüêîâ è Í.À. Òóìàíîâà (1982) ñ ïîìîùüþ ÑÂ×-óñòàíîâêè èçó÷àëè äèíàìèêó äèýëåêòðè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé èíòàêòíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìÿãêèõ òêàíåé â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëè ñ 1-ãî ïî 30-å ñóòêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, äàæå êîãäà ïðîèñõîäèëî ïîëíîå ðàçðóøåíèå êëåòî÷íûõ ñòðóêòóð. Ïðè àíàëèçå ðåçóëüòàòîâ ó÷èòûâàëè ñòåïåíü àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè. Àâòîðû îòìåòèëè óìåíüøåíèå ïîêàçàòåëÿ äåéñòâèòåëüíîé è âîçðàñòàíèå ìíèìîé ÷àñòåé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè, ñâÿçàííîå ñ äåãèäðàòàöèåé òêàíåé â ñëó÷àÿõ âûðàæåííîãî ìàëîêðîâèÿ òðàâìàòè÷åñêîé ýòèîëîãèè. Âûÿâëåíû ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ â ãðóïïàõ ñ êîíöåíòðàöèåé àëêîãîëÿ â êðîâè äî è áîëåå 4‰. Âîçìîæíîñòü äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêè èíòàêòíîé è ïðèæèçíåííî òðàâìèðîâàííîé ìûøöû ñîõðàíÿëàñü íà çàãíèâøèõ ÷àñòÿõ ðàñ÷ëåíåííûõ òðóïîâ â òå÷åíèå âñåãî ïåðèîäà ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé. Òàêèì îáðàçîì, èçó÷åíèå ïîêàçàòåëåé äåéñòâèòåëüíîé è ìíèìîé ÷àñòåé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè íà ÷àñòîòå 3 Ãö ïîçâîëÿåò óñòàíàâëèâàòü ôàêò ïðèæèçíåííîé òðàâìàòèçàöèè ìûøå÷íîé òêàíè òóïûìè ïðåäìåòàìè íà ãíèëîñòíî èçìåíåííîì òðóïå. Ìåòîä ÑÂ×-èçìåðåíèé ïîçâîëèë îáúåêòèâèçèðîâàòü ó÷åò ïðîöåññà ãíèëîñòíîãî ðàçëîæåíèÿ ìÿãêèõ òêàíåé òðóïà.  ïðîöåññå èçó÷åíèÿ äèíàìèêè ïàðàìåòðîâ ÊÎÄÏ êðîâè Á.Ñ. Íèêîëàåâ (1985) ðàçðàáîòàë êðèòåðèé ïðèæèçíåííîñòè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé, ñîïðîâîæäàâøèõñÿ îáðàçîâàíèåì ãåìîïåðèòîíåóìà. 4.2. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè áèîëîãè÷åñêîé òêàíè Âïåðâûå â ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçå óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè Í.Ä. Âîðîáüåâà (1985) èñïîëüçîâàëà ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè (Êï). Ýòî îòíîñèòåëüíàÿ âåëè÷èíà, õàðàêòåðèçóþùàÿñÿ îòíîøåíèåì íèçêî÷àñòîòíîãî ïîëíîãî ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ òêàíè ê âûñîêî÷àñòîòíîìó. Ðàíåå áûëî óñòàíîâëåíî
Ãëàâà 4
Ñòð. 141
óìåíüøåíèå ýòîé âåëè÷èíû ïðè îòìèðàíèè òêàíè çà ñ÷åò èçìåíåíèÿ, ãëàâíûì îáðàçîì, íèçêî÷àñòîòíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ (Òàðóñîâ Á.Í., 1960, 1968). Îäíàêî, èñïîëüçîâàíèå àáñîëþòíûõ öèôð íèçêî÷àñòîòíîãî ñîïðîòèâëåíèÿ íåöåëåñîîáðàçíî, òàê êàê âåëè÷èíà åãî â îòëè÷èå îò îòíîñèòåëüíîé âåëè÷èíû Êï â çíà÷èòåëüíîé ìåðå çàâèñèò îò óñëîâèé èçìåðåíèÿ (ãåîìåòðèÿ ìûøå÷íîãî îáðàçöà, ýëåêòðîäîâ è ò.ä.). Äëÿ èçìåðåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè Í.Ä. Âîðîáüåâîé áûë âûáðàí ìåòîä “àìïåðìåòðà-âîëüòìåòðà”, êîòîðûé îòëè÷àåòñÿ ïðîñòîòîé èçìåðåíèÿ è äîïóñêàåò âîçìîæíîñòü èñïîëíåíèÿ èçìåðèòåëüíîé óñòàíîâêè â âèäå ïðèáîðà êàðìàííîãî òèïà. Ðàçðàáîòàíû è èçãîòîâëåíû ýëåêòðè÷åñêàÿ ñõåìà è ñòàöèîíàðíàÿ óñòàíîâêà äëÿ èçìåðåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. Ýëåêòðè÷åñêàÿ ñõåìà èçìåðèòåëüíîé óñòàíîâêè ñîäåðæèò ïîñëåäîâàòåëüíóþ öåïü, ñîñòîÿùóþ èç ãåíåðàòîðà ïåðåìåííîãî íàïðÿæåíèÿ (Ã), ýëåêòðîäîâ (Ý1 è Ý2), äîïîëíèòåëüíîãî ðåçèñòîðà (R2). Ïàðàëëåëüíî îáúåêòó áûë âêëþ÷åí âîëüòìåòð (V) (ðèñ. 20).
Ðèñóíîê 20. Ýëåêòðè÷åñêàÿ ñõåìà èçìåðèòåëüíîé óñòàíîâêè. Óñòàíîâêà äëÿ èçìåðåíèÿ Êï ñîäåðæèò íåïîäâèæíûå ïëàñòèí÷àòûå ïîçîëî÷åííûå ýëåêòðîäû, ïîäâèæíûé ñòîëèê äëÿ èññëåäóåìîãî îáðàçöà òêàíè ñ ôèêñèðóþùèì âèíòîì, êîàêñèàëüíûå ðàçúåìû äëÿ ïîäêëþ÷åíèÿ ãåíåðàòîðà è âîëüòìåòðà, ïåðåêëþ÷àòåëü íàïðÿæåíèÿ. Èçìåðèòåëüíàÿ ñõåìà ïîìåùåíà â ýêðàíèðóþùèé ìåòàëëè÷åñêèé êîðïóñ. Ïðè èññëåäî-
Ãëàâà 4
Ñòð. 142
âàíèè êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè æèäêîñòåé ïëàñòèí÷àòûå ýëåêòðîäû çàìåíÿþò ñòåðæíåâûìè, îáúåêò èññëåäîâàíèÿ ïîìåùàþò â V-îáðàçíóþ òðóáêó. Ýêñïåðèìåíòàëüíî áûë ðåøåí âîïðîñ î âûáîðå îïòèìàëüíûõ ÷àñòîò èçìåðåíèÿ (10 êÃö è 8 ÌÃö). Ñ ýòîé öåëüþ àâòîð èññëåäîâàëà çàâèñèìîñòü ïîëíîãî ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè (Z) îò ÷àñòîòû ïåðåìåííîãî òîêà (f) . Âûÿâëåíî, ÷òî èìïåäàíñ ìûøå÷íîé òêàíè ðåçêî ïàäàåò â äèàïàçîíå ÷àñòîò 0,01-1 ÌÃö. ×àñòîòû èçìåðåíèÿ áûëè âûáðàíû íà ïîëîãèõ ó÷àñòêàõ çàâèñèìîñòè Z (f), ïîñêîëüêó ñ óìåíüøåíèåì ÷àñòîòû ðàñòåò ïîëÿðèçàöèÿ ýëåêòðîäîâ è ñ åå óâåëè÷åíèåì ïðîèñõîäèò óäîðîæàíèå èçìåðèòåëüíîãî îáîðóäîâàíèÿ. Ìàòåðèàëîì èññëåäîâàíèÿ ñëóæèëè 199 òðóïîâ ëèö â âîçðàñòå 20-60 ëåò, óìåðøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (ïîâåøåíèå), èøåìè÷åñêîé áîëåçíè ñåðäöà è îñòðîãî îòðàâëåíèÿ ýòàíîëîì. Òðóïû èññëåäîâàëè â äèíàìèêå â òå÷åíèå 48 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ïðåäâàðèòåëüíûå èññëåäîâàíèÿ ñ öåëüþ âûáîðà îáúåêòà èçó÷åíèÿ áûëè ïðîâåäåíû íà 43 òðóïàõ. Îäíîâðåìåííî èññëåäîâàëè ëèêâîð, öåëüíóþ êðîâü, öåíòðèôóãàò êðîâè, ïå÷åíü è ñêåëåòíóþ ìûøöó. Îáùèå çàêîíîìåðíîñòè äèíàìèêè êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñêåëåòíîé ìûøöû èçó÷åíû íà òðóïàõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ (ñîáàêàõ), ïîãèáøèõ â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (ïîâåøåíèå). Èçìåðåíèÿ îñóùåñòâëÿëè ñ ìîìåíòà îñòàíîâêè ñåðäöà ÷åðåç êàæäûå 30 ìèíóò â òå÷åíèå ïåðâûõ 6-òè ÷àñîâ, ÷åðåç êàæäûé 1 ÷àñ â èíòåðâàëå 6-12 ÷àñîâ è ÷åðåç 12 ÷àñîâ â òå÷åíèå 12-24 ÷àñîâ ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Âåñü ïåðèîä äèíàìè÷åñêîãî íàáëþäåíèÿ òðóïû õðàíèëè â óñëîâèÿõ ñåêöèîííîãî çàëà ìîðãà ïðè îòíîñèòåëüíîé âëàæíîñòè âîçäóõà 50-70 % è òåìïåðàòóðå 11 - 23îÑ.  ðåçóëüòàòå èññëåäîâàíèÿ ëèêâîðà, öåëüíîé êðîâè, öåíòðèôóãàòà êðîâè, ïå÷åíè âûÿâëåíà îïðåäåëåííàÿ äèíàìèêà âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè â òå÷åíèå 18-÷àñîâîãî ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Êï ëèêâîðà èçìåíÿëñÿ íåçíà÷èòåëüíî (îò 1,42±0,1 åä. ÷åðåç 2 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè äî 1,28±0,18 åä. ê 18 ÷àñàì). Äèíàìèêà êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè öåëüíîé êðîâè õàðàêòåðèçîâàëàñü ñëåäóþùèìè îñîáåííîñòÿìè. Âåëè÷èíà Êï ÷åðåç 2 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè íàõîäèëàñü â ïðåäåëàõ 1,35±0,24, ê 24 ÷àñàì âîçðàñòàëà äî 2,43±1,05 åä., çàòåì âíîâü óìåíüøàëàñü äî 1,58±0,66 åä. ê 48 ÷àñàì ïîñìåðòíîãî ïåðèî-
Ãëàâà 4
Ñòð. 143
äà. Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè öåíòðèôóãàòà êðîâè ñíèæàëèñü îò 3,42±1,19 åä. (÷åðåç 2 ÷àñà ïîñëå ñìåðòè) äî 1,97±0,95 åä. (ê 48 ÷àñàì). Äèíàìèêà Êï ïå÷åíè õàðàêòåðèçîâàëàñü ñíèæåíèåì âåëè÷èíû Êï îò 5,14±1,27 äî 1,3±0,38 åä. Ïðè îòíîñèòåëüíî ìàëî âûðàæåííîé äèíàìèêå Êï èññëåäîâàííûõ îáúåêòîâ èç òðóïà ïîëó÷åí áîëüøîé ðàçáðîñ ðåçóëüòàòîâ (êîýôôèöèåíò ïîëÿðèçàöèè ëèêâîðà äî 14%, êðîâè äî 47%, öåíòðèôóãàòà êðîâè - äî 48%, ïå÷åíè - äî 65%).  êà÷åñòâå îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ áûëà âûáðàíà ñêåëåòíàÿ ìûøöà, õàðàêòåðèçóþùàÿñÿ çíà÷èòåëüíî ìåíüøèì ðàçáðîñîì ðåçóëüòàòîâ ïðè âûðàæåííîé äèíàìèêå Êï â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Îäíîâðåìåííûì èññëåäîâàíèåì êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè 5 ñêåëåòíûõ ìûøö (ãðóäèíî-êëþ÷è÷íî-ñîñêîâàÿ, áîëüøàÿ ãðóäíàÿ, ïðÿìàÿ ìûøöà æèâîòà, ÷åòûðåõãëàâàÿ ìûøöà áåäðà, ïîðòíÿæíàÿ) óñòàíîâëåíî, ÷òî äèíàìèêà èçìåíåíèÿ âî âðåìåíè äëÿ âñåõ ìûøö ñîïîñòàâèìà. Íàèáîëåå óäîáíîé äëÿ îñóùåñòâëåíèÿ èçìåðåíèé â ïðàêòè÷åñêèõ öåëÿõ îêàçàëàñü ïîðòíÿæíàÿ ìûøöà, èçáðàííàÿ â êà÷åñòâå îñíîâíîãî îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ.  õîäå èññëåäîâàíèÿ Í.Ä. Âîðîáüåâà ðàçðàáîòàëà ñïîñîá óêëàäêè îáðàçöîâ ñêåëåòíîé ìûøöû îòíîñèòåëüíî ýëåêòðîäîâ, ñîãëàñíî êîòîðîãî ýëåêòðè÷åñêèé òîê ïðîõîäèò ñòðîãî ïåðïåíäèêóëÿðíî ìûøå÷íûì âîëîêíàì (ðèñ. 21).
Ðèñóíîê 21. Ñïîñîá óêëàäêè îáðàçöà ìûøå÷íîé òêàíè îòíîñèòåëüíî ýëåêòðîäîâ 1 - ýëåêòðîäû, 2 - îáðàçöû ìûøå÷íîé òêàíè.
Ãëàâà 4
Ñòð. 144
Èññëåäîâàíèåì òðóïîâ ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ ëèö, óìåðøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, áûëà èçó÷åíà äèíàìèêà êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè â ïåðâûå äâîå ñóòîê ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ñâÿçü åå ñ òåìïåðàòóðîé õðàíåíèÿ òðóïîâ è íàëè÷èåì ýòàíîëà â êðîâè. Óñòàíîâëåíî, ÷òî âåëè÷èíà êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ÷åðåç 2 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íàõîäèëàñü â ïðåäåëàõ 20,9-18,7±1,0 åä., çàòåì ñ óäëèíåíèåì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà îíà çàêîíîìåðíî ñíèæàëàñü äî 1,8±0,1 åä. (ê 48 ÷àñàì). Äëÿ âûÿâëåíèÿ ñâÿçè äèíàìèêè êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñ òåìïåðàòóðîé õðàíåíèÿ òðóïà âåñü ñåêöèîííûé ìàòåðèàë áûë ðàçäåëåí íà 3 ãðóïïû íàáëþäåíèé â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû âîçäóõà: 1 ãðóïïà (11-15îÑ), 2-ÿ (16-19îÑ) è 3ÿ (20-23îÑ). Ýêñïåðèìåíòàëüíûå çàâèñèìîñòè Êï=f(t d) äëÿ êàæäîé èç ãðóïï íàáëþäåíèé õàðàêòåðèçîâàëèñü ðàçëè÷íîé ñêîðîñòüþ ñíèæåíèÿ Êï âî âðåìåíè (ðèñ. 22).
Ðèñ. 22. Çàâèñèìîñòü êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè (ÊÏ) ïîðòíÿæíîé ìûøöû òðóïîâ îò âðåìåíè ñìåðòè (td) ïðè ðàçíîé òåìïåðàòóðå õðàíåíèÿ òðóïîâ (ñìåðòü îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû). î 1 - 11-15 Ñ; 2 - 16-19îÑ; 3 - 20-23îÑ. Íà÷àëüíàÿ ñêîðîñòü ñíèæåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè íàèìåíüøàÿ â 1-é ãðóïïå íàáëþäåíèé. Êï ïàäàåò îò 7,4±1,1 åä. (ê 24 ÷àñàì), â èíòåðâàëå 24-36 ÷àñîâ èçìåíÿåòñÿ íåçíà÷èòåëüíî, äîñòèãàÿ ê 36 ÷àñàì çíà÷åíèÿ 4,8±0,76 åä. Âî 2-é ãðóï-
Ãëàâà 4
Ñòð. 145
ïå íà÷àëüíàÿ ñêîðîñòü ñíèæåíèÿ Êï áîëüøå, âåëè÷èíà åãî óìåíüøàëàñü äî 3,7±0,8 åä. (ê êîíöó ïåðâûõ ñóòîê), çàòåì äî 36 ÷àñîâ èçìåíÿëàñü íåçíà÷èòåëüíî, äîñòèãàÿ ê 36 ÷àñàì 1,8±0,1 åä., â èíòåðâàëå 36-48 ÷àñîâ íàõîäèëàñü íà òîì æå óðîâíå (1,8±0,1 åä. ê 48 ÷àñàì).  3-é ãðóïïå íàáëþäåíèé êîýôôèöèåíò ïîëÿðèçàöèè èìåë íàèáîëüøóþ ñêîðîñòü ïàäåíèÿ, äîñòèãàÿ ê 12 ÷àñàì 4,8±0,83 åä., ìåæäó 12 è 18 ÷àñàìè óìåíüøåíèå áûëî íåçíà÷èòåëüíûì (1,9±0,3 åä. ê 18 ÷àñàì ïîñëå ñìåðòè).  ðåçóëüòàòå ìàòåìàòè÷åñêîé îáðàáîòêè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûõ â îäíèõ è òåõ æå âðåìåííûõ èíòåðâàëàõ ðàçíûõ ãðóïï íàáëþäåíèé ìåæäó ñðåäíèìè çíà÷åíèÿìè êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè âûÿâëåíû äîñòîâåðíûå (P<0,05…0,001) ñòàòèñòè÷åñêèå ðàçëè÷èÿ (òàáë. 19). Òàáëèöà 19 Ðåçóëüòàòû ñðàâíåíèÿ êîýôôèöèåíòîâ ïîëÿðèçàöèè ïîðòíÿæíîé ìûøöû òðóïîâ â ðàçíûõ ãðóïïàõ íàáëþäåíèé â ñëó÷àÿõ ñìåðòè îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû Давность смерти (час)
Р 1-2
Р 2-3
Р 1-3
2 3 4 5 6 7 8 9 10 12 14 16 18 20 24 28 36
<0,01 <0,001 <0,01 <0,001 <0,001 <0,01 >0,4 >0,8 >0,4 >0,2 <0,01 <0,01 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
<0,05 <0,05 >0,1 <0,05 <0,01 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 -
>0,02 <0,02 >0,4 >0,8 >0,4 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 -
Çàâèñèìîñòü ìåæäó äèíàìèêîé Êï â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå è òåìïåðàòóðîé õðàíåíèÿ òðóïà ïðîÿâèëàñü â óñêîðåííîì ñíèæåíèè âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè âî âðåìåíè ïðè îòíîñèòåëüíî âûñîêîé (20-23îÑ) òåìïåðàòóðå õðàíå-
Ãëàâà 4
Ñòð. 146
íèÿ òðóïà è â çàìåäëåíèè ýòîãî ïðîöåññà ïðè áîëåå íèçêîé (11-15îÑ) òåìïåðàòóðå. Ýòà îñîáåííîñòü íåñîìíåííî ÿâëÿåòñÿ ïðîÿâëåíèåì âëèÿíèÿ òåìïåðàòóðû âîçäóõà íà áûñòðîòó ïðîöåññîâ óìèðàíèÿ êëåòîê è òêàíåé. Äëÿ âûÿâëåíèÿ âîçìîæíîãî âëèÿíèÿ íàëè÷èÿ ýòàíîëà â êðîâè òðóïîâ íà ïîñìåðòíóþ äèíàìèêó êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñêåëåòíîé ìûøöû àâòîð ïðîâåëà ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè â êàæäîé ãðóïïå íàáëþäåíèé ïðè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìå â îòñóòñòâèå è ïðè íàëè÷èè ìåíåå 4‰ ýòàíîëà â êðîâè òðóïîâ (òàáë. 20). Òàáëèöà 20 Ðåçóëüòàòû ñðàâíåíèÿ âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè â îòñóòñòâèå (À) è ïðè íàëè÷èè (Á) ýòàíîëà â êðîâè òðóïîâ ñ ó÷åòîì òåìïåðàòóðû âîçäóõà Температура воздуха (оС)
Группа наблюдений
11-15
А Б А Б А Б А Б
16-19
20-23
А Б А Б А Б А Б А Б А Б А Б А Б А Б
Давность смерти (час) td 4 6 8 12 4 6 8 10 12 24 4 6 12
Число измерений N 4 8 5 11 4 8 2 4
Среднее арифметическое Кп 16,1 16,4 13,9 14,0 13,1 13,2 11,8 10,3
Среднее квадр. отклонение 0,4 0,8 0,7 0,9 0,7 0,9 0,4 0,5
Уровень значимости сходства Р >0,4
5 7 5 9 7 9 6 5 3 4 3 4
17,3 17,6 15,1 15,7 12,7 13,2 11,3 12,1 10,1 10,6 4,0 3,4
1,1 0,9 0,9 1,2 1,0 0,8 0,1 0,7 0,1 0,7 0,7 0,9
>0,4
2 3 3 3 3 3
16,4 16,8 13,8 13,4 4,6 4,9
1,3 1,1 0,2 0,2 1,1 0,6
>0,8 >0,8 >0,05
>0,2 >0,2 >0,1 >0,2 >0,1 >0,4 >0,05 >0,4
Ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ âëèÿíèÿ ïðè÷èíû ñìåðòè íà ïîñìåðòíóþ äèíàìèêó Êï èññëåäîâàëè òðóïû 72 ëèö îáîåãî ïîëà â âîçðàñòå 20-60 ëåò, óìåðøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (ïîâåøåíèå), èøåìè÷åñêîé áîëåçíè ñåðäöà, îñòðîãî îòðàâëåíèÿ
Ãëàâà 4
Ñòð. 147
ýòàíîëîì. Îòìå÷åíî, ÷òî äëÿ èçó÷åííûõ ïðè÷èí ñìåðòè â ïåðâûå 2-3 ÷àñà ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè âåëè÷èíà êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè íàõîäèòñÿ â ïðåäåëàõ 21,3-18,1±1,4 åä.; ñ óäëèíåíèåì ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ïðîèñõîäèò ñíèæåíèå Êï äî 3,9-1,2±0,9 åä. (ê 48 ÷àñàì). Í.Ä.Âîðîáüåâà ïðîàíàëèçèðîâàëà ñåêöèîííûé ìàòåðèàë â çàâèñèìîñòè îò ïðè÷èíû ñìåðòè ñ ó÷åòîì òåìïåðàòóðû îêðóæàþùåãî âîçäóõà. Óñòàíîâëåíî, ÷òî èìååòñÿ óñêîðåííîå ñíèæåíèå âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ïîðòíÿæíîé ìûøöû â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå ïðè îòíîñèòåëüíî âûñîêîé (2023îÑ) òåìïåðàòóðå õðàíåíèÿ òðóïîâ è, íàîáîðîò, çàìåäëåíèå ýòîãî ïðîöåññà ïðè áîëåå íèçêîé (11-15îÑ) òåìïåðàòóðå äëÿ âñåõ èçó÷åííûõ ïðè÷èí ñìåðòè. Ñ öåëüþ âûÿâëåíèÿ îñîáåííîñòåé ïîñìåðòíîé äèíàìèêè Êï äëÿ êàæäîé èç ïðè÷èí ñìåðòè âî âñåõ ãðóïïàõ íàáëþäåíèé â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû õðàíåíèÿ òðóïîâ ïðîâåäåíî ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé êîýôôèöèåíòîâ ïîëÿðèçàöèè, ñîîòâåòñòâóþùèõ ðàçíûì ïðè÷èíàì ñìåðòè. Ñðàâíåíèå Êï ïðîâåäåíî ïðè ñðîêàõ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36 è 48 ÷àñîâ. Ðåçóëüòàòû ñðàâíåíèÿ Êï ïîðòíÿæíîé ìûøöû òðóïîâ 1-é (11-15îÑ) ãðóïïû íàáëþäåíèé è 3-é (20-23îÑ) ñâèäåòåëüñòâóþò î ïî÷òè ïîëíîì îòñóòñòâèè ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé ïðè ðàçíûõ ïðè÷èíàõ ñìåðòè (P>0,05… 0,8). Ïðè òåìïåðàòóðå âîçäóõà 16-19îÑ (2-ÿ ãðóïïà íàáëþäåíèé) ñêîðîñòü ïàäåíèÿ âåëè÷èíû Êï íàõîäèëàñü â çàâèñèìîñòè îò ïðè÷èíû ñìåðòè. Íàèìåíüøóþ ñêîðîñòü ñíèæåíèÿ Êï óñòàíîâëåíà â ñëó÷àÿõ ñìåðòè îò ìåõàíè÷åñêîé àñôèêñèè (ïîâåøåíèå), íåñêîëüêî áîëüøàÿ - ïðè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìå, åùå áûñòðåå ïðîèñõîäèëî ïàäåíèå Êï ïðè èøåìè÷åñêîé áîëåçíè ñåðäöà è, íàêîíåö, íàèáîëüøàÿ ñêîðîñòü óìåíüøåíèÿ âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå îòìå÷åíà ïðè îñòðîì îòðàâëåíèè ýòàíîëîì. Ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé êîýôôèöèåíòîâ ïîëÿðèçàöèè ïðè ðàçíûõ ïðè÷èíàõ ñìåðòè âûÿâèëî âî 2-é ãðóïïå íàáëþäåíèé ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ (òàáë. 21). Àâòîð ïîñòðîèëà èíäèâèäóàëüíûå ðàáî÷èå ãðàôèêè â êàæäîé èç òðåõ ãðóïï íàáëþäåíèé â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû õðàíåíèÿ òðóïîâ äëÿ êàæäîé èç ïðè÷èí ñìåðòè. Ðàáî÷èå ãðàôèêè ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé âûðàâíåííûå ëèíèè ðåãðåññèè,
Ãëàâà 4
Ñòð. 148
îòîáðàæàþùèå ôóíêöèîíàëüíóþ çàâèñèìîñòü ìåæäó ïåðåìåíàìè âåëè÷èíàìè Êï è td ñ íàíåñåííûìè â âèäå âåðòèêàëüíûõ îòðåçêîâ äâóìÿ ñðåäíèìè êâàäðàòè÷åñêèìè îòêëîíåíèÿìè (ðèñ. 23).
Ðèñóíîê 23. Çàâèñèìîñòü Êï îò âðåìåíè td (ìåõàíè÷åñêàÿ òðàâìà, òåìïåðàòóðà õðàíåíèÿ òðóïîâ 16-19îÑ) ñ ó÷åòîì äâóõ ñðåäíèõ êâàäðàòè÷åñêèõ îòêëîíåíèé. 1 - ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ çàâèñèìîñòü, 2 - ëèíèÿ àïïðîêñèìàöèè. Âñå ýêñïåðèìåíòàëüíûå çàâèñèìîñòè Êï=f(td) õîðîøî àïïðîêñèìèðóþòñÿ ýêñïîíåíöèàëüíûìè ôóíêöèÿìè îäíîãî âèäà: _
К п = ae
td - to + b, t
(18)
ðàçëè÷àþùèìèñÿ ÷èñëåííûìè çíà÷åíèÿìè êîýôôèöèåíòîâ àïïðîêñèìàöèè (à, b, t, to, òàáë. 22). Ïîñëåäíèå îòîáðàæàþò êîëè÷åñòâåííóþ ñâÿçü ìåæäó äèíàìèêîé êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñ îäíîé ñòîðîíû è òåìïåðàòóðîé õðàíåíèÿ òðóïîâ ñ äðóãîé. Ïðåäëîæåííàÿ àâòîðîì àïïðîêñèìàöèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíîé çàâèñèìîñòè Êï = f(td) ÿâëÿåòñÿ îäíîé èç ìàòåìàòè÷åñêèõ ìîäåëåé ðåàëüíîãî ïðîöåññà èçìåíåíèé äèíàìèêè Êï â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå.
Ðåçóëüòàòû ñðàâíåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ïîðòíÿæíîé ìûøöû òðóïîâ ïðè ðàçëè÷íûõ ïðè÷èíàõ ñìåðòè (òåìïåðàòóðà õðàíåíèÿ òðóïîâ 16-19îÑ)
Òàáëèöà 21
Ãëàâà 4 Ñòð. 149
Ãëàâà 4
Ñòð. 150
Íà îñíîâå àïïðîêñèìèðóþùåé çàâèñèìîñòè (15) àâòîðîì ïîëó÷åíà ôîðìóëà äëÿ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè:
td = t[lna-ln(Кп-b)]+t0 ;
(19)
Êîýôôèöèåíòû àïïðîêñèìàöèè à, b, t, to áåðóò èç òàáëèöû ¹ 22. Òàê, â ñëó÷àÿõ ñìåðòè â ðåçóëüòàòå ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû è õðàíåíèÿ òðóïà ïðè òåìïåðàòóðå âîçäóõà 11-15 îÑ âðåìÿ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè îïðåäåëÿåòñÿ ïî ôîðìóëå:
td = 14[ln13,5-ln(Кп-4,5)]+3 Òî÷íîñòü óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè êîëåáëåòñÿ îò ±30 ìèíóò äî 1 ÷àñà â ïåðâûå 6 ÷àñîâ; ±1-2 ÷àñà â èíòåðâàëå 7-12 ÷àñîâ; ±1,5-5 ÷àñîâ â èíòåðâàëå 13-18 ÷àñîâ; ±2,5-6 ÷àñîâ â èíòåðâàëå 19-24 ÷àñà; ±3,5-9 ÷àñîâ â èíòåðâàëå 25-36 ÷àñîâ (Pä = 0,68) ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ýêñïåðèìåíòàëüíûå êðèâûå è àïïðîêñèìèðóþùèå èõ ìàòåìàòè÷åñêèå ôîðìóëû ïîçâîëÿþò, ïî ìíåíèþ àâòîðà, äîñòàòî÷íî ïðîñòî âû÷èñëÿòü äàâíîñòü íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè êàê íà îñíîâå îäíîãî, òàê è äâóõ è áîëåå èçìåðåíèé. Ïðè òðåõêðàòíîì èçìåðåíèè Êï ñ èíòåðâàëîì â îäèí ÷àñ è âû÷èñëåíèè ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ âðåìåíè ñìåðòè ïî ðåçóëüòàòàì òðåõ èçìåðåíèé òî÷íîñòü îïðåäåëåíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ïîâûøàåòñÿ. Íàèáîëåå ìàòåìàòè÷åñêè ñòðîãî âðåìÿ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè îïðåäåëÿåòñÿ ïî ìåòîäó íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ. Ïðè íàëè÷èè íåñêîëüêèõ èçìåðåíèé êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ( Êï1, Êï2… Êï i) çàäà÷à ñâîäèòñÿ ê îïðåäåëåíèþ òàêîãî çíà÷åíèÿ âðåìåíè ñìåðòè (t d) äëÿ ïðèíÿòîé ìîäåëè èçìåðåíèÿ Êï, êîòîðîå äàâàëî áû íàèìåíüøåå ñðåäíåå êâàäðàòè÷åñêîå îòêëîíåíèå çàâèñèìîñòè Êï=f(t d) îò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ çíà÷åíèé Êï. Àâòîð ïðåäëîæèëà ôîðìóëó äëÿ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ìåòîäó íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ: n
t d = t ln
å Кп h
i
i
i= 0
n
aå h i =0
n
- bå h i i= 0
2i
,
(20)
Ãëàâà 4
Ñòð. 151
ãäå i - 0, 1, 2…, n - íîìåð èçìåðåíèÿ, Êï. - çíà÷åíèå Êï â i-îì èçìåðåíèè, h - (…150 , Dt - èíòåðâàë ìåæäó èçìåðåíèÿìè Êï. Òàáëèöà 22 Çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòîâ àïïðîêñèìàöèè (à, b, t, to) â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû õðàíåíèÿ òðóïîâ è ïðè÷èíû ñìåðòè.
Причина смерти Механическая травма Механическая асфиксия при повешении Ишемическая болезнь сердца Острое отравление этанолом
Температура хранения трупов, оС
a
b
t
to
11-15 16-19 20-23 11-15 16-19 20-23 11-15 16-19 20-23 11-15 16-19 20-23
13,5 18,0 19,0 14,5 18,0 19,0 19,0 19,0 19,0 16,0 17,0 19,0
4,5 2,0 1,0 3,5 2,0 1,0 1,0 1,0 1,0 3,0 1,0 1,0
14 10 5,5 14 11,5 4,5 17,0 8,0 4,5 14,0 8,5 4,0
3 3 3 4 3 3,5 3 3 3 3 3 3
Íà ïðèìåðàõ ïðàêòè÷åñêîãî îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè â êîíêðåòíûõ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ ýêñïåðòèçàõ óñòàíîâëåíî, ÷òî ñðîêè ñìåðòè, âû÷èñëåííûå ïî ãðàôèêàì è ïî ïðèâåäåííûì ôîðìóëàì (19) íà îñíîâå òðåõêðàòíîãî èçìåðåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè, îòëè÷àþòñÿ íåñóùåñòâåííî. Ýòî ïîçâîëÿåò â ðÿäå ñëó÷àåâ çàìåíèòü ñëîæíûé ñïîñîá âû÷èñëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ìåòîäó íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ (20) íàèáîëåå ïðîñòûìè ñïîñîáàìè ñ ïîìîùüþ ðàáî÷èõ ãðàôèêîâ è îïèñûâàþùèõ èõ ìàòåìàòè÷åñêèõ ôîðìóë (19). Òàêèì îáðàçîì, â ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííîãî Í.Ä. Âîðîáüåâîé èññëåäîâàíèÿ íåêîòîðûõ îðãàíîâ è òêàíåé òðóïà âûÿâëåíû èçìåíåíèÿ âåëè÷èíû èõ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè, çàâèñÿùèå îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Íàèáîëüøóþ ïðàêòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü ïîêàçàëè èçìåðåíèÿ ñêåëåòíûõ ìûøö, ïðåæäå âñåãî, ïîðòíÿæíîé ìûøöû. Ïðåäëîæåííàÿ ýêñïåðèìåí-
Ãëàâà 4
Ñòð. 152
òàëüíàÿ çàâèñèìîñòü ÿâëÿåòñÿ îäíîé èç ìàòåìàòè÷åñêèõ ìîäåëåé ðåàëüíîãî ïðîöåññà èçìåíåíèÿ Êï â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. Âëèÿíèå èçó÷åííûõ ïðè÷èí ñìåðòè íà ïîñìåðòíóþ äèíàìèêó âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñêåëåòíîé ìûøöû îòìå÷åíî ëèøü ïðè òåìïåðàòóðå õðàíåíèÿ òðóïà 16-19 îÑ è ïðàêòè÷åñêè îòñóòñòâóåò ïðè äðóãèõ çíà÷åíèÿõ òåìïåðàòóðû. Ðàçðàáîòàííûé àâòîðîì ìåòîä èçìåðåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ îòëè÷àåòñÿ ïðîñòîòîé ïðèìåíåíèÿ, íå òðåáóåò ñëîæíîãî äîðîãîñòîÿùåãî îáîðóäîâàíèÿ, äîïóñêàåò âîçìîæíîñòü ïðàêòè÷åñêîé åãî ðåàëèçàöèè â âèäå ìèêðîýëåêòðîííîãî ïðèáîðà êàðìàííîãî òèïà, ïîçâîëÿåò â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ (1-3) ìèíóò ïîëó÷àòü îáúåêòèâíûå êîëè÷åñòâåííûå ïîêàçàòåëè, êîòîðûå çàòåì ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ïðè ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì óñòàíîâëåíèè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íà ïðîòÿæåíèè ïåðâûõ 36-48 ÷àñîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. 4.3. Ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ Ñîâðåìåííûå ôèçè÷åñêèå ìåòîäû ïîçâîëÿþò ñ âûñîêîé ñòåïåíüþ òî÷íîñòè îïðåäåëÿòü èçìåíåíèÿ òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ îáúåêòîâ. Ýòè ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ, êàê ïðàâèëî, îñíîâàíû íà òåõ èçìåíåíèÿõ â ôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðàõ, êîòîðûå ñîïðîâîæäàþò êîìïëèìåíòàðíûé ïðîöåññ èëè èììóíîëîãè÷åñêóþ ðåàêöèþ. Èçìåíåíèÿ êàñàþòñÿ ôîðìû è ðàçìåðîâ ìàêðîìîëåêóë, ýëåêòðè÷åñêèõ ñâîéñòâ ñèñòåìû è äðóãèõ ïîêàçàòåëåé ìîëåêóëÿðíî-äèñïåðñíîé ñòðóêòóðû. Óêàçàííûå ñäâèãè ìåíÿþò è ðÿä ôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ, íåïîñðåäñòâåííî ñâÿçàííûõ ñî ñòðîåíèåì ìàêðîìîëåêóë, è, ñëåäîâàòåëüíî, ñ õàðàêòåðîì èõ òåïëîâîãî äâèæåíèÿ. Ê ýòèì ôèçè÷åñêèì ñâîéñòâàì ñëåäóåò îòíåñòè äèôôóçèþ, âÿçêîñòü, òåïëîïðîâîäíîñòü è òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòü, êîòîðûå ïðèíèìàþò áèîïîëèìåðû â ðàñòâîðå (Ôðåíêåëü ß., 1938). Ôèçè÷åñêèå ìåòîäû ïîçâîëÿþò èññëåäîâàòü ïðîöåññû ñòàðåíèÿ òêàíåé, ôèêñèðóÿ íåçíà÷èòåëüíûå èçìåíåíèÿ êîýôôèöèåíòà òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè æèäêîñòè òðåáóåò äëÿ èçìåðåíèÿ îêîëî 30 ñåêóíä. Îí ïîçâîëÿåò ñëåäèòü çà èçìåíåíèåì ýòîãî êîýôôèöèåíòà â ñûâîðîòêå, â êîòîðîé ïðîòåêàåò áèîëîãè÷åñêàÿ ðåàêöèÿ, è, ñëå-
Ãëàâà 4
Ñòð. 153
äîâàòåëüíî, ñëåäèòü çà èçìåíåíèåì ñ òå÷åíèåì âðåìåíè ðÿäà ïàðàìåòðîâ, ò.å. èçó÷àòü êèíåòèêó áèîëîãè÷åñêîé ðåàêöèè. Îáîñíîâàíèå ýòîãî ìåòîäà ñâîäèòñÿ ê ðåøåíèþ ñîîòâåòñòâóþùåãî óðàâíåíèÿ òåïëîïðîâîäíîñòè ïðèìåíèòåëüíî ê çàäà÷å î ðàñïðîñòðàíåíèè òåïëà îò èìïóëüñíîãî òî÷å÷íîãî èñòî÷íèêà òåïëà. Ïîëó÷åííîå ðåøåíèå ïîçâîëÿåò ñâÿçàòü êîýôôèöèåíò òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè ñðåäû c ñ ðàññòîÿíèåì r ìåæäó èñòî÷íèêîì òåïëà è äåòåêòîðîì òåìïåðàòóðû, è âðåìåíåì tm íàñòóïëåíèÿ ìàêñèìóìà òåìïåðàòóðû â ðàéîíå äåòåêòîðà:
c=
r2 , 3(2t m r )
(21)
ãäå r - äëèòåëüíîñòü òåïëîâîãî èìïóëüñà.  êà÷åñòâå èñòî÷íèêà òåïëà è äåòåêòîðà òåìïåðàòóðû Ã.Ã. Êîëîíäà (1973) èñïîëüçîâàë ìèêðîòåðìîðåçèñòîðû òèïà ÌÒ-54. Ìåòîäèêà èññëåäîâàíèÿ ñâîäèòñÿ ê ñëåäóþùåìó.  ôàðôîðîâóþ (èëè èç îðãàíè÷åñêîãî ñòåêëà) êþâåòó íàëèâàþò èññëåäóåìóþ æèäêîñòü îáúåìîì â 1 ñì3, êþâåòó ñòàâÿò â áëîê äàò÷èêà. Çàòåì ñ ïîìîùüþ ðåãóëèðîâî÷íîãî âèíòà îáà òåðìîðåçèñòîðà îïóñêàþò â èññëåäóåìóþ æèäêîñòü íà ãëóáèíó 12 ìì îò ïîâåðõíîñòè æèäêîñòè. Âêëþ÷àþò ìîñò ïîñòîÿííîãî òîêà òèïà ÌÎ-62 è óñòàíàâëèâàþò áàëàíñ ìîñòà. Âåëè÷èíà ñîïðîòèâëåíèÿ R, ñîîòâåòñòâóþùàÿ áàëàíñó ìîñòà, ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíà äëÿ îïðåäåëåíèÿ íà÷àëüíîé òåìïåðàòóðû æèäêîñòè ïî ãðàäóèðîâî÷íîé êðèâîé äëÿ òåðìîðåçèñòîðà, ðàáîòàþùåãî â ðåæèìå ýëåêòðîòåðìîìåòðà. Çàòåì âêëþ÷àþò ñïåöèàëüíî ðàçðàáîòàííûé ïðèáîð, êîòîðûé àâòîìàòè÷åñêè ÷åðåç îïðåäåëåííûå ðàâíûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè ïîäàåò òåïëîâûå èìïóëüñû äëèòåëüíîñòüþ 1-2 ñ è ðåãèñòðèðóåò âåëè÷èíó tm, òåì ñàìûì ïîçâîëÿåò â ñîîòâåòñòâèè ñ ôîðìóëîé (1) ñëåäèòü çà èçìåíåíèåì Õ â ïðîöåññå ðåàêöèè. Ïðèâîäèì îñíîâíûå õàðàêòåðèñòèêè äàííîãî ïðèáîðà. Åãî îñíîâíûì íàçíà÷åíèåì ÿâëÿåòñÿ ðåãèñòðàöèÿ âðåìåíè äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ ñèãíàëà, èçìåðåíèå è èíäèêàöèÿ âðåìåíè, â òå÷åíèå êîòîðîãî âõîäíîå íàïðÿæåíèå ñ äàò÷èêà äîñòèãàåò ñâîåãî ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ: ∙ èçìåðÿåìîå íàïðÿæåíèå, ïîäàâàåìîå íà âõîä ïðèáîðà, îò 0 äî 3,5 Â; ∙ âõîäíîå ñîïðîòèâëåíèå ïðèáîðà - 150 êÎì;
Ãëàâà 4
Ñòð. 154
∙ òî÷íîñòü ôèêñèðîâàíèÿ ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ 0,5 %; ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò ôîðìèðîâàíèå ìåòîê âðåìåíè ÷àñòîòîé 10 Ãö (0,1 ñ); òî÷íîñòü ôîðìèðîâàíèÿ ìåòîê âðåìåíè - 10-5; ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò èçìåðåíèå âðåìåíè äîñòèæåíèÿ âõîäíûì íàïðÿæåíèåì ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ è âèçóàëüíóþ èíäèêàöèþ çàôèêñèðîâàííîãî çíà÷åíèÿ âðåìåíè â äåñÿòè÷íîé ñèñòåìå èñ÷èñëåíèÿ; ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò âûäà÷ó ñèãíàëà óïðàâëåíèÿ â òå÷åíèå 1 ñ, 2 ñ èëè íà âðåìÿ äîñòèæåíèÿ âõîäíûì íàïðÿæåíèåì ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ; ∙ ìàêñèìàëüíîå âðåìÿ, èçìåðÿåìîå ïðèáîðîì, 49,9 ñ, ÷òî âïîëíå äîñòàòî÷íî äëÿ èçó÷àåìûõ ïðîöåññîâ; ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò ðàçîâîå ïðîâåäåíèå èçìåðåíèÿ èëè íåïðåðûâíîå àâòîìàòè÷åñêîå èçìåðåíèå ÷åðåç 90, 120 èëè 150 ñ. Òî÷íîñòü âûäåðæêè âðåìåíè 5%; ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò äâà ðåæèìà ðàáîòû: èçìåðåíèå è êîíòðîëü; â ðåæèìå “êîíòðîëü” îáåñïå÷èâàåòñÿ ïðîâåðêà ðàáîòîñïîñîáíîñòè óñòðîéñòâ ïðèáîðà (çà èñêëþ÷åíèåì óñòðîéñòâà âûäà÷è ñèãíàëà “ìàêñèìóì”); ∙ ïðèáîð îáåñïå÷èâàåò íîðìàëüíóþ ðàáîòû â èíòåðâàëå òåìïåðàòóð 5-50îÑ; ∙ ïèòàíèå ïðèáîðà îñóùåñòâëÿåòñÿ îò ñåòè 220 Â, 50 Ãö; ïîòðåáëåíèå ïðèáîðà íå áîëåå 20 Âò; ∙ ãàáàðèòíûå ðàçìåðû ïðèáîðà 190õ220õ540 ìì, ìàññà - 4 êã. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, ìåòîä ïåðñïåêòèâåí ïðè ðåøåíèè âîïðîñà î äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè è ïðè îïðåäåëåíèè îïòèìàëüíûõ ñðîêîâ âçÿòèÿ òðóïíîãî ìàòåðèàëà ñ öåëüþ òðàíñïëàíòàöèè ðàçëè÷íûõ îðãàíîâ è òêàíåé. Ïî ìåðå óâåëè÷åíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà ïðîèñõîäèò ðÿä èçìåíåíèé ôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ òêàíåé (òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè, âÿçêîñòè, ýëåêòðîïðîâîäíîñòè è äð.) è ýòè èçìåíåíèÿ âîçíèêàþò çà ñ÷åò íàðóøåíèÿ è ðàçóêðóïíåíèÿ áåëêîâûõ ìîëåêóë â ïðîöåññå ãíèåíèÿ, àóòîëèçà è ò.ï., Ã.Ã. Êîëîíäà ïîñ÷èòàë öåëåñîîáðàçíûì èçó÷èòü íåêîòîðûå ôèçè÷åñêèå ÿâëåíèÿ, êîòîðûå ìîãëè áûòü èñïîëüçîâàíû â ïðàêòè÷åñêîé ñóäåáíîé ìåäèöèíå. Åñëè ñ òå÷åíèåì âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ñ ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, â îáúåêòå èññëåäîâàíèÿ ïðîèñõîäÿò ñòðóêòóðíû ïåðåñòðîéêè ñóáñòðàòà, òî ïðè ýòîì áóäåò ìåíÿòüñÿ êîýôôèöèåíò òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè ñðåäû. Îïðåäåëÿÿ åãî
Ãëàâà 4
Ñòð. 155
â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ìîæíî âûÿâèòü êèíåòèêó ïðîöåññà ñòàðåíèÿ. È, íàîáîðîò, çíàÿ çíà÷åíèå êîýôôèöèåíòà òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè â ðàçëè÷íûå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ìîæíî ðåøèòü âîïðîñ î âðåìåíè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Äàííûé êîýôôèöèåíò îïðåäåëÿåòñÿ ïî ñêîðîñòè ïðîõîæäåíèÿ òåïëîâîãî èìïóëüñà îò èñòî÷íèêà òåïëà äî ìèêðîýëåêòðîòåðìîìåòðà, ðàñïîëîæåííûõ â èññëåäóåìîé æèäêîñòè îáúåìîì 1 ñì3 íà ðàññòîÿíèè r = 4,5 ìì äðóã îò äðóãà. Äëèòåëüíîñòü òåïëîâîãî èìïóëüñà t = 2 ñ. Ã.Ã. Êîëîíäà èññëåäîâàë æèäêîñòü ñòåêëîâèäíîãî òåëà ãëàçà, âçÿòóþ îò òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ íàñèëüñòâåííîé ñìåðòüþ èëè ñìåðòüþ, ïîäîçðèòåëüíîé íà íàñèëüñòâåííóþ. Æèäêîñòü ñòåêëîâèäíîãî òåëà ãëàçà áûëà èçáðàíà ïîòîìó, ÷òî ãëàç îêðóæåí ïëîòíûìè îáîëî÷êàìè, íàõîäèòñÿ â ãëàçíîé âïàäèíå è ïîýòîìó íàèìåíåå ïîäâåðæåí ðàçëè÷íûì âëèÿíèÿì âíåøíåé ñðåäû. Ïðîöåññû ãíèåíèÿ, âûñûõàíèÿ, àóòîëèçà è äð. ïðîÿâëÿþòñÿ â íåì çíà÷èòåëüíî ïîçäíåå, ÷åì â äðóãèõ îðãàíàõ è òêàíÿõ, ÷òî ïîçâîëÿåò áîëåå îáúåêòèâíî ñóäèòü î òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâàõ äàííîé ñðåäû â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñòìîðòàëüíîãî ïåðèîäà. Òàáëèöà 23 Ñðåäíÿÿ àðèôìåòè÷åñêàÿ âçâåøåííàÿ êîýôôèöèåíòà òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè Время наступления смерти (сутки) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Расстояние между источником тепла и микроэлектротермометром. (М) r´102 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45
Длительность теплового импульса (сек). 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
Время наступления максимума температуры среды (сек.) tm 23,8±0,9 25,7±0,6 21,6±0,5 20,0±0,7 19,1±0,5 17,3±0,8 16,4±0,6 15,2±0,6 14,4±0,6 13,6±0,5
Коэффициент температуропроводности среды (М2/сек.) Х´107 1,48±0,06 1,36±0,04 1,63±0,04 1,77±0,06 1,86±0,05 2,07±0,09 2,19±0,08 2,37±0,09 2,51±0,10 2,67±0,10
Âñåãî àâòîð èññëåäîâàë 100 òðóïîâ ëèö ðàçíîãî âîçðàñòà, îáîåãî ïîëà, áåç ó÷åòà ïðè÷èíû ñìåðòè. Èçìåðåíèÿ ïðîâîäèëèñü êàæäûå ñóòêè â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ âíåøíåé ñðåäû â òå÷åíèå 10 ñóòîê.  äàííîé ðàáîòå Ã.Ã. Êîëîíäà íå ó÷èòûâàë
Ãëàâà 4
Ñòð. 156
âîçðàñò, ïîë ïîãèáøåãî, ìåñòî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè è åå ïðè÷èíó. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû áûëè îáðàáîòàíû ìåòîäàìè âàðèàöèîííîé ñòàòèñòèêè. Ñðåäíÿÿ àðèôìåòè÷åñêàÿ âçâåøåííàÿ êîýôôèöèåíòà òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè ïî ñóòêàì ñ ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïðèâåäåíà â òàáëèöå 23. Èç òàáëèöû ñëåäóåò, ÷òî êîýôôèöèåíò òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè æèäêîñòè ñòåêëîâèäíîãî òåëà ãëàçà ÷åëîâåêà â êàæäûé îòäåëüíûé ìîìåíò ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà ÿâëÿåòñÿ âåëè÷èíîé ïîñòîÿííîé è çàâèñèò îò âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Ýòî ñâÿçàíî, ïî-âèäèìîìó, ñ ðàçóêðóïíåíèåì áåëêîâûõ ìîëåêóë ñóáñòðàòà ïîä âëèÿíèåì ïîñìåðòíî ïðîòåêàþùèõ áèîõèìè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, âëèÿþùèõ íà òåïëîôèçè÷åñêèå ñâîéñòâà èññëåäóåìîãî îáúåêòà. Òàêèì îáðàçîì, ïðåäëîæåí îáúåêòèâíûé ñïîñîá èçó÷åíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ ïî ñêîðîñòè ïðîõîæäåíèÿ òåïëîâîãî èìïóëüñà â îáúåêòå. Ðàçðàáîòàííûé Ã.Ã. Êîëîíäîé ïðèáîð ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü åãî äëÿ ðåãèñòðàöèè ìåäëåííûõ áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, âðåìÿ ïðîòåêàíèÿ êîòîðûõ ñîñòàâëÿåò íåñêîëüêî äåñÿòêîâ ñåêóíä èëè ìèíóò. Îí ìîæåò áûòü ïðèìåíåí ñ ëþáûì äàò÷èêîì òàì, ãäå òðåáóåòñÿ èçìåðåíèå âðåìåíè äîñòèæåíèÿ âõîäíûì íàïðÿæåíèåì ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ è åãî âèçóàëüíàÿ èíäèêàöèÿ. Óñòàíîâëåíî, ÷òî ïàðàëëåëüíîå èññëåäîâàíèå äèíàìèêè òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòè è êîíöåíòðàöèÿ âîäîðîäíûõ èîíîâ â îáúåêòå äàåò âîçìîæíîñòü îïðåäåëÿòü âðåìÿ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ñ òî÷íîñòüþ äî 24 ÷àñîâ íà ïðîòÿæåíèè 10 ñóòîê.  òåðìîäèíàìèêå è òåïëîòåõíèêå òåïëîâûå ïîäõîäû íå èñ÷åðïûâàþòñÿ òåìïåðàòóðîé, à âêëþ÷àþò â ñåáÿ ó÷åò òàêèõ òåïëîôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ êàê òåïëîåìêîñòü è òåïëîïðîâîäíîñòü, íåðàçðûâíî ñâÿçàííûõ ñ ïîíÿòèåì òåìïåðàòóðû. Ïî ìíåíèþ À.Þ. Âàâèëîâà, Â.È. Âèòåðà è Â.Þ. Òîëñòîëóöêîãî (1996), ó÷åò ýòèõ çíà÷åíèé ïîçâîëèò óëó÷øèòü òî÷íîñòü èñêîìîãî ðåçóëüòàòà è îáîñíîâûâàòü èõ îáúåêòèâíûìè äàííûìè. Ïîâûøåíèå òî÷íîñòè è ýôôåêòèâíîñòè ìàòåìàòè÷åñêèõ ìåòîäîâ îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, â ðàìêàõ òåðìîìåòðè÷åñêîãî ñïîñîáà, áåç ó÷åòà òàêèõ òåïëîôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ ÷åëîâå÷åñêîãî îðãàíèçìà êàê òåïëîïðîâîäíîñòü è òåïëîåìêîñòü òêàíåé ïðåäñòàâëÿåòñÿ àâòîðàì çàòðóäíèòåëüíûì. Ñ öåëüþ îïðåäåëåíèÿ äàííûõ âåëè÷èí áûë èñ-
Ãëàâà 4
Ñòð. 157
ïîëüçîâàí ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà òåïëîïðîâîäíîñòè áèîëîãè÷åñêîé òêàíè.  ìàòåìàòè÷åñêîé òåîðèè òåïëîïðîâîäíîñòè ðàñïðîñòðàíåíèå òåïëà ðàññìàòðèâàåòñÿ ïîäîáíî òå÷åíèþ æèäêîñòè. Ïëîòíîñòüþ ïîòîêà òåïëà íàçûâàåòñÿ âåêòîð j, ñîâïàäàþùèé ïî íàïðàâëåíèþ ñ íàïðàâëåíèåì ðàñïðîñòðàíåíèÿ òåïëà è ÷èñëåííî ðàâíûé êîëè÷åñòâó òåïëà, ïðîõîäÿùåìó â îäíó ñåêóíäó ÷åðåç ïëîùàäêó â îäèí êâàäðàòíûé ñàíòèìåòð, ïåðïåíäèêóëÿðíóþ ê íàïðàâëåíèþ ïîòîêà òåïëà. Íà îñíîâàíèè ìàòåìàòè÷åñêîãî âûðàæåíèÿ äàííîãî ïðîöåññà j=x(dT/L), ãäå j - ïëîòíîñòü ïîòîêà òåïëà, dT - ïàäåíèå òåìïåðàòóðû íà èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå, L - òîëùèíà èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà), x - ïîëîæèòåëüíàÿ ïîñòîÿííàÿ, çàâèñÿùàÿ òîëüêî îò ìàòåðèàëà ïëàñòèíêè è åãî ôèçè÷åñêîãî ñîñòîÿíèÿ, Â.À. Êóëèêîâûì è Â.Í. Ñÿêòåðåâûì (ÒÎÎ “Ïðèçìà”) áûë ñîçäàí îðèãèíàëüíûé ïðèáîð äëÿ èçìåðåíèÿ òåïëîïðîâîäíîñòè áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. Ñõåìà ïðèáîðà ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 24.
Ðèñ. 24. (ïîÿñíåíèå â òåêñòå). Òåìïåðàòóðû íàãðåâàòåëÿ, äàò÷èêà è õîëîäèëüíèêà â îïûòå àâòîðû èçìåðÿëè ýëåêòðîííûì ÷åòûðåõêàíàëüíûì òåðìîìåòðîì “Òåìï-4”, ðàáîòàþùåì è ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíîñòüþ äî 0,1îÑ. Äëÿ èçìåðåíèÿ òåìïåðàòóðû ñëóæèëè ïðåöèçèîííûå óñòðîéñòâà - äàò÷èêè òåìïåðàòóðû, âûïîëíåííûå â âèäå èãë.
Ãëàâà 4
Ñòð. 158
Çíàÿ ïàäåíèå òåìïåðàòóðû íà èññëåäóåìîì îáúåêòå, êîýôôèöèåíò åãî òåïëîïðîâîäíîñòè (Õ) áûë ðàññ÷èòàí ïî ôîðìóëå: Õ = ê(Ò1-Ò2)/L.  êà÷åñòâå èññëåäóåìîãî îáúåêòà èñïîëüçîâàíî âåùåñòâî ãîëîâíîãî ìîçãà ÷åëîâåêà, âçÿòîãî ïðè àóòîïñèè ëèö ñ ðàçëè÷íûìè ïðè÷èíàìè ñìåðòè. Ïðè âûáîðå îáúåêòà èññëåäîâàíèÿ àâòîðû ðóêîâîäñòâîâàëèñü òåì, ÷òî òêàíü ãîëîâíîãî ìîçãà, ÿâëÿÿñü ñðàâíèòåëüíî îäíîðîäíîé, îáëàäàåò âûñîêîé ñêîðîñòüþ àóòîëèòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, è âñëåäñòâèå ýòîãî èçìåíåíèÿ òåïëîïðîâîäíîñòè äîëæíû íîñèòü áîëåå âûðàæåííûé è äèíàìè÷íûé õàðàêòåð. Îáðàçåö äëÿ èññëåäîâàíèÿ îòñåêàëè íà óðîâíå ëîáíûõ äîëåé ãîëîâíîãî ìîçãà âî ôðîíòàëüíîé ïëîñêîñòè. Ïî ðåçóëüòàòàì èññëåäîâàíèÿ áûëà âûäåëåíà ãðóïïà ëèö ñ èøåìè÷åñêîé áîëåçíüþ ñåðäöà, â êîòîðîé èçìåíåíèÿ êîýôôèöèåíòà òåïëîïðîâîäíîñòè áûëè íàèáîëåå âûðàæåíû (òàáë. 24). Òàáëèöà 24 Èçìåíåíèÿ êîýôôèöèåíòà òåïëîïðîâîäíîñòè ДН С до 14 часов до 20 часов более 20 часов
ИБ С , О К Н
П рочи е
№ акта
Т еплопров одность
№ акта
Т еп лопров одность
269 290 141 316 1170
0,373 0,356 0,354 0,364 0,358
506 545 1106
0,309 0,310 0,307
241 1176 225 388 403 1187 -
0,341 0,334 0,334 0,315 0,332 0,328 0,324 -
Ïî äàííûì àâòîðîâ, ñðåäíèé ïîêàçàòåëü òåïëîïðîâîäíîñòè ãîëîâíîãî ìîçãà, ò.å. áåç ó÷åòà ïðè÷èíû è äàâíîñòè ñìåðòè, ðàâåí 0,335 Âò/ì´Ê±0,36 Âò/ì´Ê.  ãðóïïå ñëó÷àåâ ñ äèàãíîçîì: èøåìè÷åñêàÿ áîëåçíü ñåðäöà, îñòðàÿ êîðîíàðíàÿ íåäîñòàòî÷íîñòü êîýôôèöèåíò òåïëîïðîâîäíîñòè áûë íåñêîëüêî âûøå è ðàâíÿëñÿ 0,341±0,034 Âò/ì´Ê. Îòìå÷åíû îáùèå äëÿ âñåõ ñëó÷àåâ îñîáåííîñòè ïðîòåêàíèÿ ïðîöåññà, íàèáîëåå îò÷åòëèâî ïðîÿâèâøèåñÿ â ïðîâåäåííûõ èìè îïûòàõ.  êàæäîì îïûòå ñòàöèîíàðíûé ïåðèîä ðàçëè÷åí, ÷òî, ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, âîçìîæíî, îáúÿñíÿåòñÿ íåîäèíàêîâûì ñðîêîì îò ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè äî íà÷àëà
Ãëàâà 4
Ñòð. 159
èññëåäîâàíèÿ. Åñëè ïðèíÿòü ñïðàâåäëèâûì äàííîå óòâåðæäåíèå àâòîðîâ, òî íå èñêëþ÷åíî, ÷òî èìåííî äëèòåëüíîñòü ñòàöèîíàðíîãî ïåðèîäà ìîæåò îðèåíòèðîâàòü ýêñïåðòà â îïðåäåëåíèè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Îäíàêî, äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ èëè èñêëþ÷åíèÿ ñïðàâåäëèâîñòè äàííîãî ïðåäïîëîæåíèÿ îíè ïîñ÷èòàëè íåîáõîäèìûì ïðîäîëæèòü èññëåäîâàíèÿ â ýòîì íàïðàâëåíèè. Îïðåäåëåííûé ïðàêòè÷åñêèé èíòåðåñ ïðåäñòàâëÿþò äàííûå îäíîãî èç îïûòîâ, ïðîâåäåííîãî àâòîðàìè (À.Þ. Âàâèëîâ, Â.À. Êóëèêîâ, Â.Í. Ñÿêòåðåâ, À.Â. Áëàãîäàòñêèõ, 1996) ñ îáðàçöîì îò òðóïà ñ äàâíîñòüþ ñìåðòè îêîëî 3-õ ñóòîê (ðèñ. 25).
Теплопроводность
0,600 0,500 0,400
y = 0,4932e-0,0007x 2 R = 0,2898
0,300 0,200 0,100
358 379 400
190 211 232 253 274 295 316 337
1 22 43 64 85 106 127 148 169
0,000 Время (х 10 мин)
Ðèñ. 25. (ïîÿñíåíèå â òåêñòå). Ïðè ýòîì îòìå÷åíî, ÷òî êîýôôèöèåíò òåïëîïðîâîäíîñòè ñ òå÷åíèåì âðåìåíè èçìåíÿëñÿ, è êîíöó ýêñïåðèìåíòà ñîñòàâëÿë îêîëî 1/3 èñõîäíîãî çíà÷åíèÿ. Òåìï èçìåíåíèÿ òåïëîïðîâîäíîñòè ê êîíöó îïûòà ñíèçèëñÿ, ïðîäîëæàÿñü âòîðûì ñòàöèîíàðíûì ïåðèîäîì, óñëîâíî íàçâàííûì àâòîðàìè ïåðèîäîì íàñûùåíèÿ, õàðàêòåðèçóþùèì îáðàçåö â òîò ìîìåíò, êîãäà îí äîñòèã íåêîòîðîãî êîíå÷íîãî çíà÷åíèÿ òåïëîïðîâîäíîñòè, äàëåå êîòîðîãî îíà óæå íå ìåíÿåòñÿ. Èñõîäÿ èç ïîëó÷åííûõ äàííûõ, àâòîðàìè äåëàåòñÿ ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî ïåðâîíà÷àëüíûé ñòàöèîíàðíûé ïåðèîä äîëæåí ñîîòâåòñòâîâàòü 1 è 2-é ñòàäèÿì àóòîëèòè÷åñêîãî ïðî-
Ãëàâà 4
Ñòð. 160
öåññà ïî êëàññèôèêàöèè Å.Ô. Ëóøíèêîâà è Í.À. Øàïèðî (1974), êîãäà îáùåå ñòðîåíèå êëåòêè åùå íå íàðóøåíî. Ðàçâèâàþùèéñÿ â äàëüíåéøåì àóòîëèç (3 è 4-ÿ ñòàäèè) ïðèâîäèò ê íàðóøåíèþ êëåòî÷íîé ñòåíêè, ÷òî âûçûâàåò èçìåíåíèå êîýôôèöèåíòà òåïëîïðîâîäíîñòè ïî ýêñïîíåíöèàëüíîìó òèïó è ïåðåõîä â ïåðèîä íàñûùåíèÿ, êîãäà àóòîëèòè÷åñêèé ïðîöåññ èçìåíÿåò ñâîþ ñêîðîñòü. Òàêèì îáðàçîì, ïî ïðåäâàðèòåëüíûì äàííûì, ïîëó÷åííûì àâòîðàìè (À.Þ. Âàâèëîâ, Â.È. Âèòåð, Â.Þ. Òîëñòîëóöêèé, 1996; À.Þ. Âàâèëîâ, Â.À. Êóëèêîâ, Â.Í. Ñÿêòåðåâ, À.Â. Áëàãîäàòñêèõ, 1996), êîýôôèöèåíò òåïëîïðîâîäíîñòè ãîëîâíîãî ìîçãà çàâèñèò îò ïðè÷èíû ñìåðòè, è ñ òå÷åíèåì âðåìåíè èçìåíÿåòñÿ. Èçìåíåíèþ òåïëîïðîâîäíîñòè ïðåäøåñòâóåò ñòàöèîíàðíûé ïåðèîä, äëèòåëüíîñòü êîòîðîãî, âîçìîæíî, çàâèñèò îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Èçìåíåíèå òåïëîïðîâîäíîñòè íîñèò S-îáðàçíûé õàðàêòåð, âåðîÿòíî îòðàæàþùèé èçìåíåíèÿ ñêîðîñòè àóòîëèòè÷åñêîãî ïðîöåññà.  íàñòîÿùåå âðåìÿ èññëåäîâàíèÿ òåïëîôèçè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ òêàíåé ÷åëîâåêà ïðîäîëæàþòñÿ.
Çàêëþ÷åíèå
Ñòð. 161 ÇÀÊËÞ×ÅÍÈÅ
 ïåðâîé ïîëîâèíå äâàäöàòîãî âåêà îòå÷åñòâåííûìè è çàðóáåæíûìè ó÷åíûìè áûëè ðàçðàáîòàíû íîâûå ïåðñïåêòèâíûå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ, áàçèðóþùèåñÿ íà çàêîíàõ ðàçëè÷íûõ îáëàñòåé çíàíèé, â ïåðâóþ î÷åðåäü, ôèçèêè è õèìèè.  ïîñëåäóþùèå ãîäû ýòè ìåòîäû ïðèîáðåëè ñàìîñòîÿòåëüíîå çíà÷åíèå, èõ ñòàëè íàçûâàòü áèîôèçè÷åñêèìè è øèðîêî ïðèìåíÿòü â áèîëîãèè è ìåäèöèíå. Ñ ñåðåäèíû 70-õ ãîäîâ ñóäåáíûå ìåäèêè ïðåäïðèíÿëè ìíîãî÷èñëåííûå ïîïûòêè èñïîëüçîâàòü áèîôèçè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ ïðè ðåøåíèè ðÿäà àêòóàëüíûõ è â òî æå âðåìÿ íàèáîëåå ñëîæíûõ çàäà÷ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû (óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííîñòè è ñðîêîâ îáðàçîâàíèÿ òåëåñíûõ ïîâðåæäåíèé ïðè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìå è ò.ï.). Èññëåäîâàíèÿ áûëè ïðîâåäåíû íà ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è ïðàêòè÷åñêîì ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì ìàòåðèàëå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñâèäåòåëüñòâîâàëè î âîçìîæíîñòè ïîëó÷åíèÿ äîïîëíèòåëüíîé èíôîðìàöèè îá èçó÷àåìûõ îáúåêòàõ. Èìåÿ ïåðåä ñîáîé çàäà÷ó ñîäåéñòâîâàòü âíåäðåíèþ áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ â ïðàêòèêó ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû, íàìè â ïåðâûå îñóùåñòâëåíà ïîïûòêà îáîáùèòü è ñèñòåìàòèçèðîâàòü èìåþùèåñÿ â ñïåöèàëüíîé ëèòåðàòóðå ïóáëèêàöèè è ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ íàó÷íûõ èññëåäîâàíèé. Ñ öåëüþ îáëåã÷åíèÿ ïðàêòè÷åñêîãî îñâîåíèÿ íîâûõ äëÿ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ ýêñïåðòîâ ëàáîðàòîðíûõ ìåòîäîâ ïî íåêîòîðûì, íàèáîëåå ñëîæíûì èç íèõ, íàìè ïðèâåäåíû òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû, ïðèíöèïèàëüíûå ñõåìû è òåõíè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè ïðèìåíåííûõ ïðèáîðîâ è óñòàíîâîê, ìåòîäèêè ïîäãîòîâêè îáúåêòîâ (îðãàíû, òêàíè è æèäêîñòè îò òðóïîâ), à òàêæå ñïîñîáû ýêñïåðòíîé îöåíêè ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ. Íàèáîëüøåå êîëè÷åñòâî íàó÷íûõ èññëåäîâàíèé íà ïðîòÿæåíèè ïîñëåäíèõ äâóõ äåñÿòèëåòèé âûïîëíåíî ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Ñ îäíîé ñòîðîíû ýòî áûëî îáóñëîâëåíî íàëè÷èåì â ðÿäå íàó÷íûõ ó÷ðåæäåíèé îòå÷åñòâåííîãî ðàäèîñïåêòðîìåòðà “Ðóáèí” è îïðåäåëåííîé åãî äîñòóïíîñòüþ äëÿ èññëåäîâàòåëåé; ñ äðóãîé ñòî-
Çàêëþ÷åíèå
Ñòð. 162
ðîíû - ïîëó÷åíèåì îáíàäåæèâàþùèõ ðåçóëüòàòîâ ïðè ðåøåíèè çàäà÷ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû. Òàê, ïóòåì èññëåäîâàíèÿ ÝÏÐ-ñïåêòðîâ ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè, ãîëîâíîãî ìîçãà ñêåëåòíûõ ìûøö ïîêàçàíà ïðèíöèïèàëüíàÿ âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ ñðîêîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.  ðåçóëüòàòå èññëåäîâàíèÿ êðóïíûõ êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ è êîñòíîãî ìîçãà îò òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ îò ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû è äðóãèõ ïðè÷èí, óäàåòñÿ äèàãíîñòèðîâàòü ïðèæèçíåííîñòü ïîâðåæäåíèé óêàçàííûõ áèîëîãè÷åñêèõ òêàíåé äàæå â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. ÝÏÐ-ñïåêòðû ìûøå÷íîé òêàíè, âçÿòîé èç îáëàñòè ïðèæèçíåííî è ïîñìåðòíî ïðè÷èíåííûõ ïåðåëîìîâ ðåáåð è äëèííûõ òðóá÷àòûõ êîñòåé, ïîêàçàëè ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ â ñðîêè äî 24 ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Íà ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è ïðàêòè÷åñêîì ìàòåðèàëå óñòàíîâëåíà äîñòîâåðíàÿ äèíàìèêà ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâûõ çîíäîâ êðîâüþ â ñðîêè äî 24 ÷àñîâ ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, ÷òî ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü ïîëó÷åííûå äàííûå ïðè îïðåäåëåíèè äàâíîñòè åå ïðè÷èíåíèÿ. Ïðèâåäåííûå äàííûå áåññïîðíî ñâèäåòåëüñòâóþò î çíà÷èòåëüíîé ïåðñïåêòèâå ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà ïðè ðåøåíèè ðÿäà ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèõ çàäà÷, â òîì ÷èñëå è â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Ýôôåêò ñâåðõñëàáûõ ñâå÷åíèé áèîëîãè÷åñêèõ òêàíåé (õåìèëþìèíåñöåíöèÿ) áûë èñïîëüçîâàí ïðè èññëåäîâàíèè ðàçíûõ îðãàíîâ è òêàíåé (ïå÷åíü, ìûøå÷íàÿ òêàíü è äð.), ïîëó÷åííûõ îò òðóïîâ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ è ëþäåé, ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ïðèæèçíåííîñòè è ñðîêîâ ïåðåæèâàíèÿ ïîñëå ïðè÷èíåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. Óêàçàííûå èññëåäîâàíèÿ áûëè ïðîâåäåíû êàê íà ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ëàáîðàòîðíûõ óñòàíîâêàõ, òàê è ñ ïîìîùüþ ëþìèíîìåòðà. Áûëî âûÿâëåíî çàêîíîìåðíîå ïàäåíèå èíòåíñèâíîñòè ÕË ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè, ïî÷êè è ìèîêàðäà â çàâèñèìîñòè îò ñðîêà ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà.  ðåçóëüòàòå èññëåäîâàíèÿ ìûøå÷íîé òêàíè, ïëàçìû êðîâè è ïå÷åíè ïîëó÷åííûå äàííûå, ñâèäåòåëüñòâóþùèå î âîçìîæíîñòè îïðåäåëåíèÿ ñðîêîâ ïðèæèçíåííîé òðàâìû â èíòåðâàëå îò 30 ìèíóò è äî 3 ÷àñîâ äî íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè, ÷òî èìååò íåñîìíåííîå ïðàêòè÷åñêîå çíà÷åíèå. Èíòåíñèâíîñòü õåìèëþìèíåñöåíöèè òåõ æå îáúåêòîâ ðàçëè÷àëàñü â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñ-
Çàêëþ÷åíèå
Ñòð. 163
òè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû, à òàêæå îò ïðèæèçíåííîãî èëè ïîñìåðòíîãî õàðàêòåðà åå ïðè÷èíåíèÿ. Ïàðàìåòðû õåìèëþìèíåñöåíöèè êîæè èç îáëàñòè êðîâîïîäòåêîâ ñóùåñòâåííî îòëè÷àëèñü îò íåïîâðåæäåííîé êîæè è èçìåíÿëèñü ñ òå÷åíèåì âðåìåíè ïîñëå îáðàçîâàíèÿ ýòèõ êðîâîïîäòåêîâ. Ïðè èññëåäîâàíèè ãîìîãåíàòîâ ãîëîâíîãî ìîçãà, ïå÷åíè, ñêåëåòíûõ ìûøö, ïî÷êè, æåë÷è, ïåðèêàðäèàëüíîé è ñèíîâèàëüíîé æèäêîñòåé, à òàêæå æèäêîñòè ñòåêëîâèäíîãî òåëà ãëàçà ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ âûÿâëåíû èçìåíåíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ óêàçàííûõ îáúåêòîâ â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Îáùàÿ ñâåòîñóììà è ïèê ñâå÷åíèÿ ÕË â ïåðèêàðäèàëüíîé æèäêîñòè äîñòèãàëè ìàêñèìàëüíûõ çíà÷åíèé ÷åðåç 6 ÷àñîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, à çàòåì ñíèæàëèñü â 7 è 10 ðàç ñîîòâåòñòâåííî â ñðàâíåíèè ñ èñõîäíûìè ïîêàçàòåëÿìè ê êîíöó ïåðâûõ ñóòîê. Ìåòîäîì èçìåðåíèÿ ýëåêòðîïðîâîäíîñòè êîñòíîãî ìîçãà îò òðóïîâ ëþäåé, óìåðøèõ îò ðàçëè÷íûõ ïðè÷èí, óñòàíîâëåíî, ÷òî, ïî ìåðå óäëèíåíèÿ ñðîêîâ (äî òðåõ ñóòîê) ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà, ïðîèñõîäèò óìåíüøåíèå ýòîãî ïàðàìåòðà â ñóñïåíçèè ýðèòðîöèòîâ è âîçðàñòàíèå â ñóñïåíçèè ÿäåðíûõ êëåòîê. Íà ýêñïåðèìåíòàëüíîì è ïðàêòè÷åñêîì ìàòåðèàëå âûÿâëåíà äèíàìèêà ïîêàçàòåëÿ àêòèâíîãî è ðåàêòèâíîãî ñîïðîòèâëåíèé òðàâìèðîâàííîé ïðè æèçíè è èíòàêòíîé ìûøå÷íîé òêàíè íà âûñîêîé ÷àñòîòå â çàâèñèìîñòè îò äëèòåëüíîñòè ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà, ÷òî ïîçâîëÿåò óñòàíîâèòü ïðèæèçíåííîñòü è äàâíîñòü âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé â ñðîêè äî 72 ÷àñîâ è ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. Îïðåäåëåííûé èíòåðåñ ïðåäñòàâëÿþò ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé íåêîòîðûõ èíûõ ýëåêòðè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ (îðãàíîâ è òêàíåé îò òðóïîâ ëþäåé) â äèàïàçîíå ÑÂ× ñ ðåãèñòðàöèåé êîìïëåêñíîé äèýëåêòðè÷åñêîé ïðîíèöàåìîñòè è ïðîâîäèìîñòè. Îòìå÷åíû èçìåíåíèÿ ýòèõ ïîêàçàòåëåé â ñðîêè äî 17-26 ñóòîê ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè.  áîëüøèíñòâå íàáëþäåíèé ïðè ãíèëîñòíîì ðàçëîæåíèè òðóïà ïðîèñõîäèëî óâåëè÷åíèå ÊÎÄÏ äî íåêîòîðîãî óðîâíÿ è ïàäåíèå ïðîâîäèìîñòè äî ìîìåíòà ñòàáèëèçàöèè.  ïðîöåññå ãíèåíèÿ îðãàíîâ è òêàíåé òðóïà îòìå÷åíà ëèíåéíàÿ çàâèñèìîñòü ýòèõ âåëè÷èí îò âðåìåíè, ïðîøåäøåãî ñ ìîìåíòà íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòü äèàôðàãìàëüíîé ìûøöû, íåáåðåìåííîé ìàòêè, ùèòîâèäíîé æåëåçû, ïîäêîæíîé
Çàêëþ÷åíèå
Ñòð. 164
æèðîâîé êëåò÷àòêè, ÿè÷åê ïðè ãíèåíèè â óñëîâèÿõ ïîâûøåííîé òåìïåðàòóðû (40-50 îÑ) îêðóæàþùåé ñðåäû ïðîÿâëÿþò ñâîè ñðîêè ñòàáèëèçàöèè íåñêîëüêî ðàíüøå, ÷åì ïðè îáû÷íûõ óñëîâèÿõ, à èìåííî íà 17-18-å ñóòêè, à ïðè òåìïåðàòóðå 18-22îÑ - ñïóñòÿ 20-26 ñóòîê. Ñòåïåíü èçìåíåíèÿ ÊÎÄÏ è ïðîâîäèìîñòè ñòåíêè òðàâìèðîâàííîãî ìàãèñòðàëüíîãî êðîâåíîñíîãî ñîñóäà äàåò âîçìîæíîñòü îðèåíòèðîâàòüñÿ â ñðîêàõ ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé îòíîñèòåëüíî ìîìåíòà îñòàíîâêè ñåðäå÷íîé äåÿòåëüíîñòè è óñòàíàâëèâàòü ôàêò òðàâìàòèçàöèè êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ â àãîíàëüíîì ïåðèîäå èëè â ïåðâûå ÷àñû ïîñëå íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. ýòè ïîêàçàòåëè ïðè èññëåäîâàíèè ìÿãêèõ òêàíåé ÷àñòåé ðàñ÷ëåíåííîãî òðóïà â ñòàäèè ãëóáîêîãî ãíèåíèÿ ïîçâîëÿþò îïðåäåëÿòü ïðèæèçíåííîñòü ïîâðåæäåíèé, âðåìåíè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè è äàâíîñòè ðàñ÷ëåíåíèÿ. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ëèêâîðà, öåëüíîé êðîâè, öåíòðèôóãàòà êðîâè, ïå÷åíè è ñêåëåòíûõ ìûøö ïîçâîëèë âûÿâèòü îïðåäåëåííóþ äèíàìèêó åãî â òå÷åíèå 18÷àñîâîãî ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Íàèáîëüøóþ ïðàêòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü ïîêàçàëè èçìåðåíèÿ ñêåëåòíûõ ìûøö. Âëèÿíèå ïðè÷èíû ñìåðòè íà ïîñìåðòíóþ äèíàìèêó âåëè÷èíû êîýôôèöèåíòà ïîëÿðèçàöèè ñêåëåòíîé ìûøöû îòìå÷åíî ëèøü ïðè òåìïåðàòóðå õðàíåíèÿ òðóïà 16-19îÑ è ïðàêòè÷åñêè îòñóòñòâóåò ïðè äðóãèõ çíà÷åíèÿõ òåìïåðàòóðû. Ýòîò ìåòîä ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí ïðè ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîì óñòàíîâëåíèè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè íà ïðîòÿæåíèè ïåðâûõ 36-48 ÷àñîâ ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. Èçìåíåíèÿ òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ (òåìïåðàòóðîïðîâîäíîñòü è òåïëîïðîâîäíîñòü) áûëè âûÿâëåíû â ðåçóëüòàòå èññëåäîâàíèÿ æèäêîñòè ñòåêëîâèäíîãî òåëà ãëàçà îò òðóïîâ ëèö, ïîãèáøèõ íàñèëüñòâåííîé ñìåðòüþ. Áûë ïðåäëîæåí îáúåêòèâíûé ñïîñîá èçó÷åíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ ïî ñêîðîñòè ïðîõîæäåíèÿ òåïëîâîãî èìïóëüñà â îáúåêòå. Ýòî äàëî âîçìîæíîñòü îïðåäåëÿòü âðåìÿ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè â òî÷íîñòüþ 24 ÷àñà íà ïðîòÿæåíèè 10 ñóòîê. Îêàçàëîñü, ÷òî êîýôôèöèåíò òåïëîïðîâîäíîñòè ãîëîâíîãî ìîçãà çàâèñèò îò ïðè÷èíû ñìåðòè è ñ òå÷åíèåì âðåìåíè èçìåíÿåòñÿ.  ïåðñïåêòèâå ýòîò ôàêò ïîçâîëèò èñïîëüçîâàòü óêàçàííûé ïîêàçàòåëü ïðè óñòàíîâëåíèè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè.
Çàêëþ÷åíèå
Ñòð. 165
Îòñóòñòâèå ñåðèéíûõ ïðèáîðîâ çàâîäñêîãî èçãîòîâëåíèÿ äëÿ áîëüøèíñòâà áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ îáóñëîâèëî íåîáõîäèìîñòü èñïîëüçîâàíèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ óñòàíîâîê ðàçëè÷íîé êîíñòðóêöèè ïðè àïðîáàöèè ýòèõ ìåòîäîâ íà îáúåêòàõ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû. Òàêîå ïîëîæåíèå â îïðåäåëåííîé ñòåïåíè íåãàòèâíî ïîâëèÿëî íà âîñïðîèçâîäèìîñòü öèôðîâûõ ïîêàçàòåëåé, íà âîçìîæíîñòü ñîïîñòàâëåíèÿ è îöåíêó ïðàêòè÷åñêîé çíà÷èìîñòè ðåçóëüòàòîâ, ïîëó÷åííûõ ðàçíûìè èññëåäîâàòåëÿìè. Ïî íàøåìó ìíåíèþ, òîëüêî ïðè óñëîâèè ðàçðàáîòêè è èçãîòîâëåíèÿ â çàâîäñêèõ óñëîâèÿõ äîñòàòî÷íî êîìïàêòíûõ ñåðèéíûõ ïðèáîðîâ ïîÿâèòñÿ ðåàëüíàÿ âîçìîæíîñòü îáåñïå÷åíèÿ èìè ó÷ðåæäåíèé ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû. Ýòî ïîçâîëèò îñóùåñòâèòü øèðîêîå âíåäðåíèå â ýêñïåðòíóþ ïðàêòèêó ðåçóëüòàòîâ íàó÷íûõ äîñòèæåíèé, ïîëó÷åííûõ ñ ïîìîùüþ ñîâðåìåííûõ áèîôèçè÷åñêèõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 166 ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ (îñíîâíàÿ)
1. ÀÆÈÏÀ ß.È. Ìåäèêî-áèîëîãè÷åñêèå àñïåêòû ïðèìåíåíèÿ ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. Ì. Íàóêà. - 1983. - Ñ. 3-523. 2. ÀÇÈÇÎÂÀ Î.À., ÂÀÍÈÍ À.Ô., ÒÛÃËÈßÍ Í.Â. // Òåçèñû Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå”. - ×åðíîãîëîâêà. - 1981. - Ñ. 210. 3. ÀËÛÁÀÅÂÀ Ê.Í. Áèîôèçè÷åñêèå èññëåäîâàíèÿ êàê ìåòîä óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè ñìåðòè (êîìïëåêñíîå ïðèìåíåíèå èîíîñåëåêòèâíûõ ýëåêòðîäîâ è ìåòîäà áèîõåìèëþìèíåñöåíòíîãî àíàëèçà â ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå). Àôòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1987. - 21 ñ. 4. ÀÍÀÍÜÅ Ã.Â. Î âîçìîæíîñòè äèàãíîñòèêè äàâíîñòè ïðîèñõîæäåíèÿ êðîâîïîäòåêîâ ìåòîäîì õåìèëþìèíåñöåíöèè. // Ñîâðåìåííûå ëàáîðàòîðíûå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîèñõîæäåíèÿ ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È.Ïèðîãîâà. - Ì., 1982. - Ñ. 48-50. 5. ÀÐÒÅÌÎÂÀ Ë.Ã., ÃÎÐÎÕÎÂÑÊÀß Ò.È., ÑÓ×ÊÎÂÀ Ñ.Í., ÀÇÈÇÎÂÀ Î.À., ÃÅÐÀÑÈÌÎÂÀ Å.Í. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ñïèíîâûõ çîíäîâ äëÿ èçó÷åíèÿ ðîëè ñòðóêòóðû ëèïîïðîòåèäîâ ïëàçìû â ðàçâèòèè àòåðîñêëåðîçà. // Òåçèñû 1-ãî Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå”. 1977. - Ì., Ñ. 119. 6. ÀÐÓÒÞÍßÍ Í.À. Ýêñïåðòíîå óñòàíîâëåíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî íåêîòîðûì ìîðôîëîãè÷åñêèì, ãèñòîõèìè÷åñêèì è áèîôèçè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì ïå÷åíè. Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Åðåâàí. - 1979. - 22 ñ. 7. ÀÐÓÒÞÍßÍ Í.À. Îïðåäåëåíèå äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ìåòîäîì õåìèëþìèíåñöåíöèè. // Ñóä.-ìåä. ýêñïåðò. 1979 - Ò.32. - ¹ 4. - Ñ. 26-28. 8. ÀÐÕÈÏÅÍÊÎ Þ.Â., ÁÈËÅÍÊÎ Ì.Â., ÄÎÁÐÈÍÀ Ì.Ê., ÊÎÃÀÍ Â.Å., ÊÎÇËΠÞ.Ï., ØÅËÅÍÊÎÂÀ Ë.Í. Ïîâðåæäåíèå ñàðêîïëàçìàòè÷åñêîãî ðåòèêóëóìà ñêåëåòíûõ ìûøö ïðè èøåìèè: Ðîëü ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ. // Áþëë. ýêñïåðèìåíòàëüíîé áèîëîãèè è ìåäèöèíû. - 1977. - ; 6. - Ñ. 683-686. 9. ÀÐ×ÀÊΠÀ.È., ÏÀÍ×ÅÍÊÎ Ë.Ô., ÁÎÃØÀÍÎÂÀ Ã.È., ×ÅÐÍÎÁÐÎÂÊÈÍÀ Ò.Â., ÄÈÂÈ×ÅÍÑÊÈÉ Â.Ì. Îðèåíòàöèÿ öåïåé ïåðåíîñà ýëåêòðîíîâ â ìåìáðàíàõ ýíäîïëàçìàòè÷åñêîãî ðåòèêóëóìà êëåòîê ïå÷åíè. // Äîêë. ÀÍ ÑÑÑÐ. - 1971. - Ñ. 196-223.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 167
10. ÀÓØÅ Ð.À. Óñòàíîâëåíèå ïðèæèçíåííîñòè ïåðåëîìîâ ïî ñîñòîÿíèþ ìèêðîöèðêóëÿòîðíîãî ðóñëà íàäêîñòíèöû è ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà ìûøå÷íîé òêàíüþ. - Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1990. - 115 ñ. 11. ÁÅÐËÈÍÅÐ Ë. Ìåòîä ñïèíîâûõ ìåòîê. Òåîðèÿ è ïðèìåíåíèå. Ì., 1979. - Ñ. 9, 156, 275-277. 12. ÁÀÑÊÀÊΠÂ.Ã. Ìåòîä ñïåêòðîñêîïèè ýëåêòðîáèîëþìèíåñöåíöèè êàê çâåíî êîìïëåêñíûõ áèîôèçè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. // Âîïðîñû ñóä.-ìåä. ýêñïåðòèçû è êðèìèíàëèñòèêè. Òðóäû Ãîðüêîâñêîãî ìåäèö. èíñòèòóòà, ¹ 6. - Ãîðüêèé, 1997, Ñ. 65-68. 13. ÁËÞÌÅÍÔÅËÜÄ Ë.À., ÊÀËÌÀÍÑÎÍ Ë.Ý. Ñïåêòðû ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. // Áèîôèçèêà. - 1978. - ¹ 2. - Ñ. 552. 14. ÁÎÃÄÀÍΠÃ.Í., ÂÀÐÔÎËÎÌÅÅ Â.Í., ÏÀÂËÎÂÀ Â.Ì., ÝÌÌÀÍÓÝËÜ Í.Ì. // Äîêë. ÀÍ ÑÑÑÐ. - 1976. - 222. - ¹ 1. - Ñ. 207-209. 15. ÁÎÍÄÀÐÅ Í.Ì., ÆÓÐÀÂËÅ À.È., ØÏÎËßÍÑÊÀß À.Ì. Èíòåíñèâíîñòü õåìèëþìèíåñöåíöèè ñûâîðîòêè êðîâè êðûñ ïðè òóáåðêóëåçå è îïóõîëåâîì ïîðàæåíèè ëåãêèõ. // Ïðîáëåìû òóáåðêóëåçà. - 1971. - ¹ 9. - Ñ. 71-74. 16. ÁÓÍÈÍ Þ.Í. Èçìåíåíèÿ àêòèâíîãî ýëåêòðè÷åñêîãî ñîïðîòèâëåíèÿ êîæè òðóïà â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè (ýêñïåðèìåíòàëüíîå èññëåäîâàíèå). - Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê., Áàðíàóë. - 1978. - 18 ñ. 17. ÁÓÒÒÀÅÂÀ Ã.Ì. Ýêñïåðòíàÿ äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ â ïîçäíèå ñðîêè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà (ïðèìåíåíèå ìåòîäà ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà). - Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1986. - 182 ñ. 18. ÂÀÂÈËΠÀ.Þ., ÂÈÒÅÐ Â.È., ÒÎËÑÒÎËÓÖÊÈÉ Â.Þ. Ýêñïåðèìåíòàëüíîå èññëåäîâàíèå òåïëîïðîâîäíîñòè òêàíè ãîëîâíîãî ìîçãà ïðè ðàçëè÷íûõ íîçîëîãèÿõ (ïðåäâàðèòåëüíîå ñîîáùåíèå). // Ñîâðåìåííûå âîïðîñû ñóä. ìåäèöèíû è ýêñïåðòíîé ïðàêòèêè. - âûï. 8, ïîä ðåä. Ïðîô. Â.È. Âèòåðà. Èæåâñê. - Ýêñïåðòèçà. - 1996. - Ñ. 75-81. 19. ÂÀÂÈËΠÀ.Þ., ÊÓËÈÊΠÂ.À., ÑßÊÒÅÐÅ Â.Í., ÁËÀÃÎÄÀÒÑÊÈÕ À.Â. Èçìåðåíèå òåïëîïðîâîäíîñòè òêàíè ãîëîâíîãî ìîçãà òðóïà âî âðåìåííîé ïåðñïåêòèâå. // “Ó÷åíûå ÈæÃÒÓ ïðîèçâîäñòâó. Òåçèñû äîêëàäîâ êàôåäðû “Âû÷èñëèòåëüíàÿ òåõíèêà”. - Èæåâñê: “Ýêñïåðòèçà”, 1996. Ñ. 40-41.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 168
20. ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À. Ðåãóëÿöèÿ öåïíûõ ðåàêöèé ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ. // Èçâåñòèÿ ÀÍ ÑÑÑÐ, ñåðèÿ áèîëîãè÷åñêàÿ, ¹ 4. - Íàóêà. - 1972. - Ñ. 489-501. 21. ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À., ËÜÂÎÂÀ Î.Ô. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå è îêèñëèòåëüíîå ôîñôîðèëèðîâàíèå â ìèòîõîíäðèÿõ. // Áèîôèçèêà, Ò. 9. - 1964. - ¹ 4. - Ñ. 506. 22. ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À., ËÜÂÎÂÀ Î.Ô., ×ÅÐÅÌÈÑÈÍÀ Ç.Ï. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ìèòîõîíäðèé è åãî ñâÿçü ñ ôåðìåíòàòèâíûì îêèñëåíèåì ëèïèäîâ. // Áèîõèìèÿ. - 1966. - Ò. 31. âûï. 3. - Ñ. 507-515. 23. ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À., ÌÅËÜÍÈÊΠÞ.Ë., ÊÅÁÅÄÌÀÃÎÌÅÄÎÂÀ Õ.À. Âûÿâëåíèå ïîñìåðòíûõ èçìåíåíèé â òêàíÿõ ìåòîäîì õåìèëþìèíåñöåíöèè (Ñîîáùåíèå 1). // Ñîâðåìåííûå ìåòîäû ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà, âûï. 1. - Ì., 1968. - Ñ. 60-63. 24. ÂÎÐÎÁÜÅÂÀ Í.Ä. Êîýôôèöèåíò ïîëÿðèçàöèè ñêåëåòíîé ìûøöû òðóïà è åãî çíà÷åíèå äëÿ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. - Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1985. - 17 ñ. 25. ÂÎÐÎØÊÎ Â.Í. Óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ãèñòîëîãè÷åñêèì, ãèñòîõèìè÷åñêèì è áèîõèìè÷åñêèì èññëåäîâàíèÿì ñåëåçåíêè â ýêñïåðèìåíòå è ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå. - Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1975. - 16 ñ. 26. ÃÓÁÀÍΠÍ.È., ÓÒÅÏÁÅÐÃÅÍΠÀ.À. Ìåäèöèíñêàÿ áèîôèçèêà. - Ì., Ìåäèöèíà. - 1978. - 335 ñ. 27. ÃÓÊÀÑΠÂ.Ì., ÔÅÄÎÐΠÂ.Ê. Âëèÿíèå ãîðìîíîâ íà ïðîöåññ ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿ ëèïèäîâ áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí. // Ñá. òðóäîâ 2 ÌÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà “Ðîëü èçìåíåíèé ñòðóêòóðû ìåìáðàí â êëåòî÷íîé ïàòîëîãèè”. - 1977. - Ò. 72. - ñåðèÿ áèîôèçèêà. - âûï. 1. - Ñ. 8-52. 28. ÃÓÑÅÉÍΠÒ.Ì., ÄÆÀÔÀÐΠÀ.È. Âëèÿíèå ôîðìàëèíà íà ïåðåêèñíîå îêèñëåíèå ëèïèäîâ ïåðåæèâàþùèõ òêàíåé. // Ìý,ðóçàëåðýð. Àðçåá. ÑÑÐ Åë Ìèýð. Àêàä., Äîêë. ÀÍ Àçåðá. ÑÑÐ. - 1975. - 31. - ¹ 4. - Ñ. 60-64. 29. ÃÓÑÅÉÍΠÒ.Ì., ÄÆÀÔÀÐΠÀ.È. Âëèÿíèå âíåøíèõ óñëîâèé íà èíòåíñèâíîñòü ñâå÷åíèÿ òêàíåé æèâîòíûõ. // Ìý ,ðóçàëåðýð. Àðçåá. ÑÑÐ Åëìëýð. Àêàä., Äîêë. ÀÍ Àçåðá. ÑÑÐ. 1975. - 31. - ¹ 7. - Ñ. 59-63.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 169
30. ÄÌÈÒÐÈÅÍÊÎ Þ.À. Ñèñòåìíûé àíàëèç ìîðôî-ôóíêöèîíàëüíûõ, áèîõèìè÷åñêèõ è áèîôèçè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé êîñòíîãî ìîçãà ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. - Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1982. - 16 ñ. 31. ÆÄÀÍΠÐ.È. Ïàðàìàãíèòíûå ìîäåëè áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé. Ì., Íàóêà. - 1981. - 280 ñ. 32. ÆÓÐÀÂËÅ À.È. Ðîëü àíòèîêñèäàíòîâ â ïåðâè÷íûõ ðàäèîáèîëîãè÷åñêèõ ýôôåêòàõ. // “Ðîëü ïåðåêèñåé è êèñëîðîäà â íà÷àëüíûõ ñòàäèÿõ ðàäèîáèîëîãè÷åñêîãî ýôôåêòà”. - Ì., Èçä. ÀÍ ÑÑÑÐ. - 1960. - 55 ñ. 33. ÆÓÐÀÂËÅ À.È., ÊÎÐÆÅÍÊÎ Â.Í. Õåìèëþìèíåñöåíöèÿ ëèïèäîâ è ñêîðîñòü ðîñòà òèõîîêåàíñêèõ ëîñîñåé. - Ì., Èçä. ÀÍ ÑÑÑÐ. - 1963. - 152. - ¹ 2. - Ñ. 457-460. 34. ÆÓÐÀÂËÅ À.È. Áèîàíòèîêèñëèòåëè è èõ ðîëü â ðåãóëÿöèè îêèñëèòåëüíûõ ïðîöåññîâ. // “Ôèçèêî-õèìè÷åñêèå îñíîâû àâòîðåãóëÿöèè â êëåòêàõ”. - Ì., ÌÎÈÏ, Íàóêà. - 1968. - Ñ. 7-14. 35. ÇÀÁÅËÜÑÊÈÉ À.È. Ýêñïåðòíàÿ äèàãíîñòèêà äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ìåòîäîì ÝÏÐ. - Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. Ì., 1982. - 156 ñ. 36. ÇÀÊÀÐßÍ À.Å. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ñûâîðîòêè êðîâè ïðè çëîêà÷åñòâåííîì ðîñòå. Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì., 1967 (…169 37. ÇÎÐÜÊÈÍ À.È. Ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîå îïðåäåëåíèå äàâíîñòè ñìåðòè ïðè áèîôèçè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ òêàíåé òðóïà. Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Áàðíàóë. - 1975. - 19 ñ. 38. ÈÂÀÍΠÍ.È., ÁÓÇÀÑ Ñ.Ê., ÃÎËÜÄØÒÅÉÍ Í.Í., ÒÀÐÓÑΠÁ.Í. Ïðèìåíåíèå àêòèâàòîðîâ õåìèëþìèíåñöåíöèè ïðè îêèñëåíèè æèðíûõ êèñëîò è áèîïîëèìåðîâ. // Áèîôèçèêà. 1971. - Ò. 16. - Ñ. 735. 39. ÊÀÐÀÑÅÂÀ Ë.Ã., ÊÓÏËÈÊΠÍ.Ê., ÃÐÎÌΠÂ.Â., ÊÈÑÈÍ Ì.Â. Î âîçìîæíîñòè îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîèñõîæäåíèÿ âûñîõøåé êðîâè ìåòîäîì ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà. // Ñîâðåìåííûå ëàáîðàòîðíûå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóäåáíî-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò.Ñ1Õ, âûï. 2. - Ì., 1978. - Ñ. 94-97. 40. ÊÀÑÓÌΠÂ.Ì., ÄÀÍÈËΠÄ.Ñ., ÄÆÀÔÀÐΠÀ.È. Èçìåíåíèå èíòåíñèâíîñòè õåìèëþìèíåñöåíöèè ìèòîõîíäðèé ïåðåæèâàþùèõ òêàíåé ïðè ðàçëè÷íûõ óñëîâèÿõ. // “Ñâåðõñëàáûå ñâå÷åíèÿ â áèîëîãèè”. Òåçèñû äîêëàäîâ, ÌÎÈÍ, ñåêöèÿ áèîôèçèêà. - Ì., ÌÃÓ. - 1969. - Ñ. 29.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 170
41. ÊÀÞØÈÍ Ë.Ï., ÊÎËÎÌÈÉÖÅÂÀ È.Ê., ËÜÂΠÊ.Ì. Èçó÷åíèå ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ â ïåðåæèâàþùèõ òêàíÿõ. // Äîêë. ÀÍ ÑÑÑÐ. - 134. - 1971. - Ñ. 1229. 42. ÊÎËÎÍÄÀ Ã.Ã. Âîçìîæíîñòü èññëåäîâàíèÿ íåêîòîðûõ áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ ïî èçìåíåíèþ òåïëîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ îáúåêòà. Àâòîðåô. äèññ. êàíä. áèîë. íàóê. - Íîâîñèáèðñê. - 1973. - 14 ñ. 43. ÊÎÍÎÂÀËΠÞ.Â., ÊÓËÈÊÎÂÀ Ë.À. Ðåãèñòðàöèÿ ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ òêàíåé êàê ìåòîä óñòàíîâëåíèÿ äëèòåëüíîñòè ïîñìåðòíîãî ïåðèîäà. // Âîïðîñû ñóä. ìåäèöèíñêîé òàíàòîëîãèè. Ñá. íàó÷í. òðóäîâ. - Õàðüêîâ. - 1983. - Ñ. 92-93. 44. ÊÎ×ÅÐÃÈÍÑÊÈÉ Þ.Ì., ÎÑÒÐÎÂÑÊÈÉ Ä.Ì., ÄÀÂÛÄΠÐ.Ì. Êèíåòèêà âîññòàíîâëåíèÿ èìèíîîêñèëüíûõ ðàäèêàëîâ êàê òåñò íà ñîñòîÿíèå ýëåêòðîíòðàíñïîðòíîé öåïè ìåìáðàí. // Ìàòåð. Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ôèçèêî-òåõíè÷åñêèå îñíîâû ôóíêöèîíèðîâàíèÿ íàäìîëåêóëÿðíûõ ñòðóêòóð êëåòêè”. Ì., 1974. - ÷.1. - Ñ. 223. 45. ÊÐÞÊΠÂ.Í., ÑÈÐßÖÊÈÉ À.À. Äèôôåðåíöèàëüíàÿ äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííîñòè òóïîé òðàâìû â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè è ïðè÷èíû ñìåðòè. // Ñóä.-ìåäèöèíñêîå óñòàíîâëåíèå ìåõàíèçìà, ïðèæèçíåííîñòè, ïîñëåäîâàòåëüíîñòè è äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé. - Ì., 1983. - Ñ. 49-53. 46. ÊÓÇÍÅÖΠÀ.Í. Ìåòîä ñïèíîâîãî çîíäà (îñíîâû è ïðèìåíåíèå). - Ì., 1976. - 210 ñ. 47. ÊÓÐÎÏÒÅÂÀ Ç.Ï., ÌÈÊÀÝËßÍ Ñ.Ã., ÑÀÍÈÊÀÄÇÅ Ò.Â., ÅÂÑÅÅÍÊÎ Ë.Ñ., ÃÅÐÀÑÈÌÎÂÀ Ë.È. Èññëåäîâàíèÿ ìåòîäîì ÝÏÐ èçìåíåíèé â ñîñòîÿíèè êîæè ïðè ýêñïåðèìåíòàëüíîì è êëèíè÷åñêîì îæîãå. // Òåç. Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñà â áèîëîãèè è ìåäèöèíå”, ×åðíîãîëîâêà. Ì., 1981. - Ñ. 85-86. 48. ËÅÏÅØÊÈÍ Â.Â. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. - Ïðèðîäà. - 1934. - ¹ 5. - Ñ. 12-17. 49. ËÈÒÂÈÍÎÂÀ Þ.Í. Íåêîòîðûå ìîðôîëîãè÷åñêèå è áèîôèçè÷åñêèå èçìåíåíèÿ ñòåíîê ìàãèñòðàëüíûõ êðîâåíîñíûõ ñîñóäîâ â çàâèñèìîñòè îò ñðîêîâ èõ ïîâðåæäåíèé. // Âîïðîñû ñóä. ìåäèöèíû è ýêñïåðòíîé ïðàêòèêè, âûï. 5. Ìàòåð. ðåñïóáëèêàíñêîé íàó÷í. êîíôåðåíöèè ïî ïðîáëåìàì ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé òðàâìàòîëîãèè. - ×èòà. - 1973. - Ñ. 309-311. 50. ËÓØÍÈÊΠÅ.Ô., ØÀÏÈÐÎ Í.À. Àóòîëèç. - Ì., Ìåäèöèíà. - 1974. - 200 ñ.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 171
51. ÌÅËÜÍÈÊΠÞ.Ë. Ìàòåðèàëû äëÿ ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîãî îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè (êîìïëåêñ ãèñòîëîãè÷åñêèõ, ãèñòîõèìè÷åñêèõ, áèîõèìè÷åñêèõ è áèîôèçè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé ïå÷åíè â ýêñïåðèìåíòå è ýêñïåðòíîé ïðàêòèêå). Àâòîðåô. äèññ. äîêòîðà ìåä. íàóê. - Ì., 1970. - 37 ñ. 52. ÌÅËÜÍÈÊΠÞ.Ë. Ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîå äèôôåðåíöèðîâàíèå ïðèæèçíåííîãî è ïîñìåðòíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ ìåõàíè÷åñêèõ ïîâðåæäåíèé. // Òåç. Äîêëàäîâ ê ÕV Ïëåíóìó ïðàâëåíèÿ ÂÍÎÑÌ. - 1978. - Ñ. 7-11. 53. ÌÈÐÎØÍÈÊ Ã.Ì. Âëèÿíèå àëêîãîëüíîé èíòîêñèêàöèè íà èçìåíåíèå àêòèâíîñòè ëèçîñîìàëüíûõ ôåðìåíòîâ ìèîêàðäà ïðè ðåøåíèè âîïðîñà î äàâíîñòè ïðîöåññîâ íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. // Ñîâðåìåííûå ëàáîð. ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Ñá íàó÷í. òðóäîâ 2 ÌÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ì., 1978. - Ñ. 50-52. 54. ÍÅÉÔÀÕ Å.À. Ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíûé ìåõàíèçì ñâîáîäíî-ðàäèêàëüíîé õåìèëþìèíåñöåíöèè, ñîïðÿæåííîé ñ ïåðåêèñíûì îêèñëåíèåì íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò. // Áèîôèçèêà. - 1971. - Ò. 16. - ¹ 3. - Ñ. 560-563. 55. ÎÃÀÍÅÑßÍ Ì.À. Óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî íåêîòîðûì öèòîëîãè÷åñêèì, ãèñòîõèìè÷åñêèì è áèîôèçè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì êðîâè. Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Åðåâàí. - 1984. - 218 ñ. 56. ÎÄÈÍÎÊÎÂÀ Ã.Ã. Óëüòðàôèîëåòîâîå èçëó÷åíèå è åãî ïðèìåíåíèå â áèîëîãèè. Ïóùèíî. - Èçä. Íàó÷í. öåíòðà áèîëîã. Èññëåäîâàíèé ÀÍ ÑÑÑÐ. - 1973. - 62 ñ. 57. ÏÀØÈÍßÍ Ã.À., ÇÀÁÅËÜÑÊÈÉ À.È., ÒÛÃËÈßÍ Í.Â. è ñîàâò. Èñïîëüçîâàíèå ñïèíîâûõ çîíäîâ äëÿ äèàãíîñòèêè äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. // Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå. - Ì., 1981. - Ñ. 209. 58. ÏÀØÈÍßÍ Ã.À., ÏÐÓÒÎÂÛÕ Â.Â., ÔÈËÈÏÏΠÀ.À., ÀÐÓÒÞÍßÍ Í.À., ÎÃÀÍÅÑßÍ Ì.À. Äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííûõ ìåõàíè÷åñêèõ òðàâì è èõ äàâíîñòè ïî íåêîòîðûì áèîôèçè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì ñêåëåòíûõ ìûøö, ïëàçìû êðîâè è ïå÷åíè. / / Âòîðîé Âñåñîþçíûé ñúåçä ñóäåáíûõ ìåäèêîâ. Òåç. äîêëàäîâ. - Ì.-Ìèíñê. - 1982. - Ñ. 118-120. 59. ÏÀØÈÍßÍ Ã.À., ÔÈËÈÏÏΠÀ.À. Î âîçìîæíîñòè èñïîëüçîâàíèÿ èíèöèèðîâàííîé õåìèëþìèíåñöåíöèè ïëàçìû êðîâè äëÿ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. // Ñîâðåìåííûå ëàáîð. ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîèñ-
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 172
õîæäåíèÿ ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ì., 1982. - Ñ. 86-90. 60. ÏÅÐÅËÛÃÈÍ Â.Â., ÒÀÐÓÑΠÁ.Í. Âñïûøêà ñâåðõñëàáîãî ñâå÷åíèÿ ïðè ïîâðåæäåíèÿõ æèâûõ òêàíåé. // Áèîôèçèêà, Ò. 11. - 1966. - Ñ. 539-541. 61. ÏÎÊÐÎÂÑÊÈÉ À.À., ÀÐ×ÀÊΠÀ.È., ËÞÁÈÌÖÅÂÀ Î.Í. Îñîáåííîñòè ñîëþáèëèçàöèè ôåðìåíòîâ ëèçîñîì è ñàðêîïëàçìàòè÷åñêîé ñåòè ñåðäöà êðûñ. // Áèîõèìèÿ. - 1967. - 32. ¹ 4. - Ñ. 824-827. 62. ÏÐÎØÓÒÈÍ Â.Ë. Ýêñïåðòíàÿ äèàãíîñòèêà ïðèæèçíåííîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî ïàðàìåòðàì ÝÏÐ-ñïåêòðîâ êîñòíîãî ìîçãà. Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì. - 1988. - 20 ñ. 63. ÏÐÓÒÎÂÛÕ Â.Â. Ýêñïåðòíîå óñòàíîâëåíèå ïðèæèçíåííîñòè è äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî íåêîòîðûì áèîôèçè÷åñêèì è áèîõèìè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì ñêåëåòíûõ ìûøö (ýêñïåðèìåíòàëüíî-ýêñïåðòíîå èññëåäîâàíèå). Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì. - 1978. - 20 ñ. 64. ÏÐÓÒÎÂÛÕ Â.Â. Äèíàìèêà õåìèëþìèíåñöåíöèè ãîìîãåíàòîâ ñêåëåòíûõ ìûøö â ïåðâûå ñóòêè ïîñëå ñìåðòè. // Ñîâðåìåííûå ëàáîð. ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò.Ñ1Õ, âûï. 2. - Ì., 1978. - Ñ. 59-61. 65. ÐÅÓÒΠÂ.Ï., ÀÆÈÏÀ ß.È., ÊÀÞØÈÍ Ë.Ï., ÍÈÊÈØÊÈÍ Å.È. Îöåíêà âëèÿíèÿ àñêîðáèíîâîé êèñëîòû, ïîñòóïàþùåé â êðîâü ïðè íèòðèòíîé èíòîêñèêàöèè íà âîññòàíîâëåíèå íèòðèòíûõ èîíîâ. // Òåç. Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå”, ×åðíîãîëîâêà. - 1981. - Ñ. 117. 66. ÑÀÀÊßÍ Å.Ñ. Ïàðàìåòðû ýëåêòðîïðîâîäíîñòè, ìîðôîëîãè÷åñêèå è ãèñòîõèìè÷åñêèå èçìåíåíèÿ ñêåëåòíûõ ìûøö â äèíàìèêå ïîñòòðàâìàòè÷åñêîãî ïåðèîäà. Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì. - 1992. - 21 ñ. 67. ÑÀÏÐÈÍ À.È., ÝÌÀÍÓÝËÜ Í.Ì., ÊÐÓÃËßÊÎÂÀ Ê.Å. Êèíåòèêà èçìåíåíèÿ êîíöåíòðàöèè ñâîáîäíûõ ðàäèêàëîâ ïðè ðàçâèòèè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ çëîêà÷åñòâåííûõ îáðàçîâàíèé. // Àêòóàëüíûå âîïðîñû ñîâðåìåííîé îíêîëîãèè. - Ì., Èçä ÌÃÓ. - 1968. - Ñ. 142. 68. ÑÅÐÃÅÅÂÀ Â.À. Î äèíàìèêå õåìèëþìèíåñöåíöèè ñóñïåíçèè ìèòîõîíäðèé ìèîêàðäà è ïî÷êè â çàâèñèìîñòè îò äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè. // Ñîâðåìåííûå ëàáîð. ìåòî-
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 173
äû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò.Ñ1Õ, âûï. 2. - Ì., 1978. - Ñ. 61-64. 69. ÑÈÄÎÐÈÍ Â.Í., ÁÅÐÅÃÎÂÑÊÀß Í.Í. Èçó÷åíèå ñâÿçè ñîñòîÿíèÿ æåëåçîñîäåðæàùèõ áåëêîâ ñ íàðóøåíèåì ïðîöåññîâ îêèñëèòåëüíîãî ôîñôîðèëèðîâàíèÿ ïðè êàíöåðîãåíåçå. // Òåç. Âñåñîþçíîãî ñèìïîçèóìà “Ìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå”, ×åðíîãîëîâêà. - 1981. - Ñ. 201-202. 70. ÑÓÑËÎÂÀ Ò.Á., ÎËÅÍÅ Â.È., ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À. Î ðîëè æåëåçà â õåìèëþìèíåñöåíöèè ëèïèäîâ. // Áèîôèçèêà. - 1968. - Ò. 13. - ¹ 4. - Ñ. 723-726. 71. ÑÓÑËÎÂÀ Ò.Á., ÎËÅÍÅ Â.È., ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À. Õåìèëþìèíåñöåíöèÿ, ñîïðÿæåííàÿ ñ îáðàçîâàíèåì ëèïèäíûõ ïåðåêèñåé â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ. 1. Ñâå÷åíèå ìèòîõîíäðèé ïðè äîáàâëåíèè Fe +2. // Áèîôèçèêà. - 1969. - Ò. 14. - ¹ 3. - Ñ. 510-516. 72. ÑÓÑËÎÂÀ Ò.Á., ÎËÅÍÅ Â.È., ÊÎÐ×ÀÃÈÍÀ Ì.Â., ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À. Õåìèëþìèíåñöåíöèÿ, ñîïðÿæåííàÿ ñ îáðàçîâàíèåì ëèïèäíûõ ïåðåêèñåé â áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàíàõ. 4. Ðîëü èçìåíåíèÿ âàëåíòíîñòè æåëåçà â ýòèõ ïðîöåññàõ. // Áèîôèçèêà. - 1970. - Ò. 15. - ¹ 4. - Ñ. 622-628. 73. ÒÀÐÓÑΠÁ.Í. Îñíîâû áèîëîãè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ðàäèîàêòèâíûõ èçëó÷åíèé. Ì., Ìåäãèç. - 1954. - 140 ñ. 74. ÒÅÍÜÊΠÀ.À. Èññëåäîâàíèå íåêîòîðûõ áèîôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ òêàíè ãîëîâíîãî ìîçãà ïðè ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçå òðóïà. - Àâòîðåô. äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Áàðíàóë. - 1974. - 17 ñ. 75. ÒÅÍÜÊΠÀ.À. Ñóäåáíî-ìåäèöèíñêàÿ äèàãíîñòèêà äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ êðîâîïîäòåêîâ ïî ìàãíèòíîé âîñïðèèì÷èâîñòè ìûøå÷íîé òêàíè. // Âòîðîé Âñåñîþçíûé ñúåçä ñóä. ìåäèêîâ. Òåç. äîêëàäîâ. - Ì.-Ìèíñê, 1982. - Ñ. 124-125. 76. ÒÅÍÜÊΠÀ.À., ÒÓÌÀÍÎÂÀ Í.À. Äèíàìèêà äèýëåêòðè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé èíòàêòíûõ è òðàâìèðîâàííûõ ìÿãêèõ òêàíåé â ïîñìåðòíîì ïåðèîäå. // Ñóäåáíî-ìåäèö. ýêñïåðòèçà. 1982. - ¹ 2. - Ñ. 12-13. 77. ÒÎÌÈËÈÍÀ Ë.À. Áèîôèçè÷åñêèå èçìåíåíèÿ ìÿãêèõ òêàíåé êàê ñóäåáíî-ìåäèöèíñêèå êðèòåðèè îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè è ïðèæèçíåííîñòè ïîâðåæäåíèé ïðè ýêñïåðòèçå ðàñ÷ëåíåííîãî òðóïà. Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Áàðíàóë. - 1979. - 157 ñ.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 174
78. ÒÓÐÎÂÅÖ Ã.Ë. Èíèöèèðîâàííàÿ Fe2+ õåìèëþìèíåñöåíöèÿ ïëàçìû êðîâè è ìî÷è â îñòðîì ïåðèîäå ðåâìàòèçìà ó äåòåé. // Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ïëàçìû êðîâè â êëèíè÷åñêîé äèàãíîñòèêå. Òðóäû 2 ÌÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò. 9, âûï. 8, ñåðèÿ - õèðóðãèÿ. - Ì., 1974. - Ñ. 72-79. 79. ÒÛÃËÈßÍ Í.Â., ÇÀÁÅËÜÑÊÈÉ À.È., ÏÀØÈÍßÍ Ã.À. Êðèòåðèè óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè íàñòóïëåíèÿ ñìåðòè ïî ïàðàìåòðàì ÝÏÐ-ñïåêòðà ïå÷åíè. // Ñîâðåìåííûå ëàáîð. ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ äàâíîñòè ïðîöåññîâ è îáúåêòîâ ñóä.-ìåäèö. ýêñïåðòèçû. Òðóäû 2 ÌÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò.Ñ1Õ, âûï. 2. - Ì., 1978. - Ñ. 68-70. 80. ÓÇÅÍÅÂÀ Ð.Á. Óñòàíîâëåíèå äàâíîñòè ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû ïî êîíñòàíòå ñêîðîñòè ðåàêöèè âîññòàíîâëåíèÿ ñïèíîâîãî çîíäà êðîâüþ. Äèññ. êàíä. ìåä. íàóê. - Ì. - 1986., 146 ñ. 81. ÔÅÄÈÍ Â.À., ÊÀÑÀÒÊÈÍ Þ.Í. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ìûøö íåêîòîðûõ ïîçâîíî÷íûõ ïðè ðàçäðàæåíèè. // Ñâåðõñëàáûå ñâå÷åíèÿ â áèîëîãèè. Òåç. äîêëàäîâ. - Ì., ÌÎÈÏ. 1969. - Ñ. 62. 82. ÔÅÄÎÐΠÞ.Ë. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ïðè îñòðûõ ïàíêðåàòèòàõ. // Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ïëàçìû êðîâè â êëèíè÷åñêîé äèàãíîñòèêå. Òðóäû 2 ÌÎËÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò. 9, âûï. 8. - Ì., 1974. - Ñ. 63-66. 83. ÖÎÉ Ê.Ì., ÏÎÃÎÑÜßÍ Ñ.Ì., ÂÅÑÅËÎÂÑÊÈÉ Â.À. Õåìèëþìèíåñöåíòíûé ìåòîä îöåíêè ñòåïåíè ïîâðåæäåíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ ïðè çàìîðàæèâàíèè è îòòàèâàíèè. // Ñâåðõñëàáûå ñâå÷åíèÿ â áèîëîãèè. Òåç. äîêëàäîâ. - Ì., ÌÎÈÏ. - 1969. - Ñ. 66. 84. ×ÅÐÍÎÂÀ Ð.Á., ÃÀÐÅÅ À.Ì., ×ÅÐÍΠÍ.Â. Ïðèìåíåíèå ìåòîäà ýëåêòðîííîãî ïàðàìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà äëÿ óñòàíîâëåíèÿ äàâíîñòè âîçíèêíîâåíèÿ ìåõàíè÷åñêîé òðàâìû. // Ëàáîð. ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ â ñóä. ìåäèöèíå è çàäà÷è ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé íàóêè è ïðàêòèêè ïî èõ ñîâåðøåíñòâîâàíèþ. Ìàòåð. VIII Âñåðîññèéñêîãî ïëåíóìà ñóä. ìåäèêîâ. - Ì. - Àñòðàõàíü. - 1993. - Ýêñïåðòèçà. - Èæåâñê. - 1994. - Ñ. 182-184. 85. ØÀÐΠÀ.Ï., ÂËÀÄÈÌÈÐΠÞ.À., ËÎÏÓÕÈÍ Þ.Ì., ÌÎËÎÄÅÍÊΠÌ.Í. Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ïëàçìû êðîâè â ïðèñóòñòâèè èîíîâ äâóõâàëåíòíîãî æåëåçà êàê äîïîëíèòåëüíûé äèàãíîñòè÷åñêèé òåñò. // Ñâåðõñëàáîå ñâå÷åíèå ïëàçìû êðîâè â êëèíè÷åñêîé äèàãíîñòèêå. Òðóäû 2 ÌÎËÃÌÈ èì. Í.È. Ïèðîãîâà. - Ò. 9, âûï. 8. - Ì., 1974. - Ñ. 49-55.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 175
86. BARNES R., CONNELLY J.L., JONES O.T.L. The utilisation of ion and its complexos by mammalian mitochondria. // Biochem.J., 1972, 128, 1043. 87. BURR V., KOSHLAND D.E. // Jr., Proc., Nat.Fcfd.Sci.U.S., 1964. - 52. - 1017-1024. 88. BUTLER K.W. // J.Pharm. Sci., 1975. - 64. - 497. 89. COLE T., HELLER H.C. // J.Chem.Phys., 1965. - 42. - 1668-1675. 90. COMMONER B., TAUNSEND J.F., PAKE G.E. // Nature. 1954. - 174. - 679. 91 . CO MM ON ER B ., H EIS E I. , TA UNSE ND J . // Proc.Nat.Fcfd.Sci. - 1956. - 42. - 710. 92. GORDI W., KUSITA J. // J.Chem.Phys. - 1960. - 33. 1074-1077. 93. ÄÀÂÈÄ Ð. (DAVID R.). Ââåäåíèå â áèîôèçèêó. Ïåð. Ñ ôðàíö. - Ì., Ìèð. - 1982. - 207 ñ. 94. DEMOPOULOS H.B. Control of free radicals in biological systems. // Fed.Proc., 1973. - 32. - 8. - 1903-1908. 95. EWETZ L., THORE A. Factors affecting the specificity of lamind reaction with hematin compounds. // Anal.Biochem., 1976. - 71. - 1. - 564-570. 96. FUJITA T. Formation of li pid peroxid in rat liver mitochondria // Yakugaku Zasshi., 1972., 92. - 250. 97. FORTHMY S.R., LINN W.S. Role of ascorbate and cystein on swelling and li pid peroxidation in rat liver mitochondria. // Arch.Biochem. and Biophys. - 1964. - 104. - 2. -241. 98. FRIDOVICH I. Oxigen: boon and bone // Amer.Sci. - 1975.63. - 1. - 54-59. 99. FUJITA T. Formation of li pid peroxide in rat liver mitochondria after administration of iron and ascorbic acid. // Yakugaku Zasshi J. Pharm.Soc.Jap. - 1973. - 9. - 756. 100. FUJITA T. Li pid peroxide content in rat liver mitochondria and soluble fraction after administration of ascorbic acid and ferrums ion. // Yakugaku Zasshi. - 1974. - 94. - 215. 101. GETS G.S., BARTLEY W. The intracellular distribution of fatty acids in rat liver. The fatty acids of intracellular compartments. // Biochem.J. - 1961. - 78. - 2. - 307-312. 102. GORDI W., ARD W., SHIELDS H. // Proc.Nat.Acad.Sci. 1955. - 983-996. 103. HERAK I.N., GORDI W. // Proc.Nat.Acad.Sci. - 1965. - 54. - 1287-1292. 1966. - 56. - 1354-1360.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 176
104. HODBERG J., ORRENIN S. Li pid peroxidation in isol lated hepatocytes. // Eur.J.Biochem. - 1975. - 50. - 3. - 595-602. 105. INGALLS R.B., WALL Z.A. // J.Chem.Phys. - 1961. - 35. 370-371. 106. ÈÍÃÐÅÌ Ä. (INGREM D.) Ýëåêòðîííûé ïàðàìàãíèòíûé ðåçîíàíñ â áèîëîãèè. Ì., 1972. - 296 ñ. 107. ISACSSON T., WETERMARK G. Chemiluminescence analitical chemistry. // Anal. Chem.Acta - 1974. - 68. - 2. - 339-362. 108. KAGAN V.E., SHVEDOVA A.A., NOVICOV K.N., KOZLOV V.P. Lightinduced radical oxydation of membrane li pids in phothoreceptors of frog retina. // Biochem. And Biophys.Acta. 1977. - 330. - 1. - 70-79. 109. KORNBERG R.D., Mc CONNELL H.M. // Biochemistry. 1971. - 10. - 1111. 110. LEE G., HERCULES D., KARMIER M. Mechanisms of ch em il um in es cen ce a nd b iol um in es ce . // Proc.Int.Symp.Athens.Ga. 1972., New York-London. - 1973. - 1-6. 111. LEUTE R.K. // Ann.N.Y.Sci. - 1973. - 222. - 1087-1096. 112. LEUTE R.K., ULLMAN E.F., GOLDSTEIN A., HERZENBERG L.A. // Nature (L)., New Biol., 1972. - 236. - ¹ 4. - 93-94. 113. LEVI M., SAUNER M.T. Composition en phospholi pides des membranes interne et externe des mitochondries. // Compt.Rent.Soc.Biol., 1967. - 161. - 2. - 277-279. 114. LIEBLING G.R., Mc CONNELL H.M. // J.Chem.phys., 1965. - 42. - 39-41. 115. MAHRLA Z., ZACHAR J. Li pid composition of isolated exte rn al a nd i nt er na l sc ele ta l mu sc le m em br an es . // Comp.Biochem. and Physiol. - 1974. - 47. - 2. - 493-502. 116. MEDUSKI J.W., ABBOTT B.C., WEN S.C., MEDUSKI J.D., HOSHIZAKI G. Oxygen and the ultraweals chemiluminescence of biomembranes of the rat. // Biophys.J. - 1975. - 15. - 2. - 57. 117. MILVY P., KAKARI S., CAMPBELL J., DEMOPOULOS H. Paramagnetic species and radical hroducts in cat spinal cord. // Ann.Acad.Sci. - 1973. - 222. - 4. - 1102-1110. 118. MORRISETT J.D., DROTT H.B. // J.Biol.Chem. - 1969. 224. - 5038-5084. 119. MICHAELIS D., MENTEN M.D. // Biochem.Z., 1913. - 49. - 333. 120. OHNISHI S., Mc CONNELL H.M. // J.Chem.Phys., 1965. 43. - 2909.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 177
121. OTTOLENGHI A. Interaction of ascorbic acid and mitochondrial li pides. // Arch. Biochem. And Biophys. - 1959. 79. - 35 55-363. 122. PALLET P.L., PASCOE B., SHAAFI R. Aminoacid composition of cat and human erytrocyte membranes. // Comp.Biochem. and Physiol. - 1972. - 3. - 483-486. 123. RAND J.P., SENGUPTA S. // Biochem., Biophys.Acta. 1972. - 255. - 484. 124. ÐÈÄ Ñ. (REED S.). Âîçáóæäåííûå ýëåêòðîííûå ñîñòîÿíèÿ â õèìèè è áèîëîãèè. - Ì., ÈË. - 1960. 125. ÐÎÁÅÐÒÑÎÍ Á. (ROBERRTSON B.). Ñîâðåìåííàÿ ôèçèêà â ïðèêëàäíûõ íàóêàõ. - Ì., 1985. - 157 ñ. 126. SCHREIER S., MUCELLO S., MARSH D., SMITH J.C.P. // Arch. Biochem and Biophys. - 1976. - 1721. 127. SELIGER H.H. Applications of bioluminescences and chemiluminescence. Chemiluminescence and Bioluminescence. // Proc.Symp.Athens. Ga 1972, New York-London. - 1973. - 461478. 128. SHIGA T., MASON H.S., SIMO C. // Biochemistry. - 1966. - 5. - 1877. 129. SKIPSKI V.P., BARCLAY M., ARCHIBALD F.M., TEREBUSKEKISHO, REICHMAN E.S., GOOD J.J. Li pid composition of rat liver cell membranes. // “Life Sci.”. - 1965. - 4. - 17. - 16731680. 130. SZENT-GYORGYI A. The study of energy-levels in biochemistry. // Nature. - 1941. - 148. - 157. 131. SZENT-GYORGYI A., ISENBERG J., BAIRD S.L. // Proc.Nat.Acad.Sci., 1960. - 46. - 1445. 132. STAINLEY P.E. Bioluminescence methods for determining pyrophocphate, melate and axal acetate in biological material. Ch em il um in es ce nc e and B i o lu mi ne sc en ce . // Proc.Int.Symp.Athens, Ga. - 1972. - New York-London. - 1973. 494. 13 3. S TA UF F J. , W OL F H. Kon fo rma ti on sa bh an gi ge Phosphoreszenz und Ghemilumineszenz einiger Proteine. // Z.Naturforsch. - 1964. - 19. - 2. - 87. 134. SHIMADA O., JASUDA H. Li pid peroxidation and its inhibition by tinoridine. 1. Li pid peroxidation - induced disintegration of microsomal membrane and cytochrome P450 in rat liver. // Biochem.et Biophys.Acta. - 197. - 489. - 1. - 163-172.
Ëèòåðàòóðà
Ñòð. 178
135. SOLIC F. Influence of the temperature on the quantily of free radicals in muscules. // Period.Biologorum. - 1975. - 77. - 83. 136. STEVEN A.D., BUS J.S., BUEGE J.A., SVINGEN B.A. Li pid peroxidation. “Int.Conf.Singlet Origen and Helat Species chemistry and Biology. - Pinawa. - 1977. 137. TAPPEL A .L. Li pi d peroxi dation d amage to cell components. Fed.Proc., 1973. - 32. - 8. - 1870-1874. 138. TAPPEL A.L. Free-radical li pid peroxidation damage and its inhibition by vitamin E. // Fed.Proc., 1965. - 24. - 73. 139. WHITE H. The chemiluminescence of luminol. // Symp. On light and life. Baltimore 1963. - John Hopkins Press. - 1960. 183. 140. WILS E.D., WILKINSON F.E. The effect of irradiation on li pid peroxide formation in subcellular fractions. // Red.Res.,1967. - 31. - 732. 141. WINTERHALTER K.H. Sauerstoff in biologischen Sistem. // Chemica, 1976. - 30. -1. - 8- 12. 142. WOOD D.E., Mc CONNELL H.M. // Chem.Phys. - 1962. 37. - 115. 143. ZWEIFACH B.W. (ÖÂÀÉÔÀÕ Á.Â.). Èçìåíåíèÿ ìèêðîöèðêóëÿöèè ïðè ãåìîððàãè÷åñêîì øîêå // Àêò. ïðîáëåìû îáùåé ïàòîëîãèè è ïàòîôèçèîëîãèè. - Ì., 1976. - Ñ. 163-173.
Ïàøèíÿí Ãóðãåí Àìàÿêîâè÷ Íàçàðîâ Ãåîðãèé Íèêîëàåâè÷
БИОФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В СУДЕБНОЙ МЕДИЦИНЕ Отпечатано с оригинал-макета, набранного и сверстанного издательством “Экспертиза” ЛУ № 066, тираж 400 экз. 426009, Ижевск, ул. Ленина, 87-а, тел. (3412) 75-24-94
