Химико-токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией и сорбцией. Наркотические и другие одурманивающие средства: Учебно-методическое пособие

М И Н И СТ Е РСТ В О О Б РА ЗО В А Н И Я И Н А У К И РО ССИ Й СК О Й Ф Е Д Е РА Ц И И В О РО Н Е Ж СК И Й ГО СУ Д А РСТ В Е Н Н ЫЙ У Н И В Е РСИ Т Е Т

ХИ М И К О -Т О К СИ К О ЛО ГИ ЧЕ СК И Й А Н А ЛИ З Н А ГРУ П П У В Е Щ Е СТ В , И ЗО ЛИ РУ Е М ЫХ ЭК СТ РА К Ц И Е Й И СО РБ Ц И Е Й . Н А РК О Т И ЧЕ СК И Е И Д РУ ГИ Е О Д У РМ А Н И В А Ю Щ И Е СРЕ Д СТ В А У ч ебно-м ет оди ч ес кое пос оби е для с т удент ов пос пеци аль нос т и 060108 – Ф арм аци я

В оронеж 2004

2

У т верж д ен о н а у чн о-м етод ическим ф а ку ль тет а , п ротокол № 3 от 11.05.2004 г.

советом

ф а рм а цевтического

Сост а вит ели: а сс. Е вст игн еева В.П. а сс., к.б.н . Ш ку т ин а И.В. а сс., к.ф .н . Бреж н ева Т .А. п роф ., д .ф .н . Сливкин А.И. п роф ., д .х.н . Селем ен ев В.Ф.

Пособие п од гот овлен о н а ка ф ед ре а н а лит ической хим ии хим ического ф а ку ль тет а Ворон еж ского госу д а рст вен н ого у н иверсит ет а Реком ен д у ет ся д ля ст у д ен т ов 4 и 5 ку рсов д н евн ого отд елен ия ф а рм а цевтического ф а ку ль т ет а .

3

Cодержание ВВЕ ДЕ НИЕ ………………………………………………………………………….4 ОБЩ ИЕ ВОПРОСЫ Пон ятие о вещ ест ва х, вы зы ва ю щ иход у рм а н ива н ие……………………………..5 Особен н ости хим ико-т оксикологического а н а лиза н а сод ерж а н ие од у рм а н ива ю щ ихсред ст в.……………………………………………6 Особен н ости ин т ерп рета ции резу ль та т ов п ри а н а лизе биологических объ ект ов н а сод ерж а н ие вещ ест в, вы зы ва ю щ иход у рм а н ива н ие.……………….9 ОБЪ Е К Т Ы ИССЛ Е ДОВАНИЯ Пра вила от бора п роб н а обн а ру ж ен ие н а ркот ическихсред ст в, п сихот роп н ы хи д ру гихтоксическихвещ ест в ………………………………… 10 Осм от робъ ект ов исслед ова н ия и оп ред елен ие н екоторы хсвойст в……………15 Х а ра кт ерист ика биологическихобъ ект ов. Пробоп од гот овка ………………….16 Э К С Т РАК Ц ИЯ К АК М Е Т ОД ИЗОЛ ИРОВАНИЯ НАРК ОТ ИЧ Е С К ИХ И ОДУ РМ АНИВАЮ Щ ИХ СРЕ ДСТ В Осн овн ы е п он ятия экст ра кции ……………………………………………………20 Осн овн ы е количествен н ы е ха ра кт еристики п роцесса экст ра кции …………...22 Влиян ие ра зличн ы хф а кт оров н а п роцесс экст ра кции ………………………….23 Т верд оф а зн а я экст ра кция …………………………………………………………24 Ж ид кост ь -ж ид кост н а я экстра кция ……………………………………………… 25 Т ОНК ОСЛ ОЙ НАЯ Х РОМ АТ ОГ РАФИЯ В АНАЛ ИЗЕ ВЕ Щ Е СТ В, ВЫ ЗЫ ВАЮ Щ ИХ ОДУ РМ АНИВАНИЕ Прин цип м етод а ……………………………………………………………………26 К а чест вен н ы й и количест вен н ы й а н а лиз м етод ом тон кослойн ой хром а тогра ф ии …………………………………………………………………...27 НЕ НАПРАВЛ Е ННЫ Й АНАЛ ИЗНАРК ОТ ИЧ Е СК ИХ И ОДУ РМ АНИВАЮ Щ ИХ ВЕ Щ Е С Т В Ан а лиз н еизвестн ы хобра зцов …………………………………………………….30 Т С Х -скрин ин г вещ ест в кислот н ого и осн овн ого ха ра кт ера ………………… 31 Х ИМ ИК О-Т ОК С ИК ОЛ ОГ ИЧ Е СК ИЙ АНАЛ ИЗОТ ДЕ Л ЬНЫ Х Г РУ ПП НАРК ОТ ИЧ Е СК ИХ И ОДУ РМ АНИВАЮ Щ ИХ ВЕ Щ Е СТ В (НАПРАВЛ Е ННЫ Й АНАЛ ИЗ) Производ н ы е ба рбит у ровой кислоты …………………………………………… 32 Алка лоид ы гру п п ы оп ия ………………………………………………………… 33 Производ н ы е 1,4-бен зод иа зеп ин а ………………………………………………. 35 Производ н ы е ф ен отиа зин а ……………………………………………………… 36 К а н н а бин оид ы …………………………………………………………………… 37 К ока ин ………………………………………………………………………………38 Ам ит рип тилин ……………………………………………………………………39 Дим ед рол …………………………………………………………………………...40 Пром ед ол …………………………………………………………………………...41 Э ф ед рин , эф ед рон ………………………………………………………………… 41 Л ИТ Е РАТ У РА ……………………………………………………………………43 ПРИЛ ОЖ Е НИЕ ……………………………………………………………………44

4

ВВЕ ДЕ НИЕ У п от реблен ие н а ркот иков ст а ло од н ой из а кт у а ль н ы х п роблем соврем ен н ого общ ест ва . Х а ра кт ерн ой чертой оборот а н а ркот ическихсред ст в в России является зн а читель н ое ра сш ирен ие их а ссортим ен т а вслед ст вие п оявлен ия м н огочислен н ы х лега ль н ы х м ед ицин ских п реп а ра тов и ин т ен сиф ика ции кон тра ба н д н ы х п ост а вок. При этом у величива ется д оля н еза кон н о п роизвод им ы х вы сокотоксичн ы х син т етических кон тра ба н д н ы х п оста вок. У гроза зд оровь ю и ж изн и лю д ей у су гу бляет ся ра сп ростра н ен ием виру са ВИЧ вслед ст вие а н тиса н ит а рн ого вн у т ривен н ого введ ен ия н а ркотиков; ра ст ет число д етей с т яж елы м и за болева н иям и и серь езн ы м и у м ст вен н ы м и и ф изическим и н ед ост а т ка м и, рож д а ем ы м и м а терям и, у п от ребляю щ им и н а ркотические сред ст ва . Неза кон н ое п роизвод ст во и оборот н а ркот иков, а т а кж е злоу п от реблен ие им и, соп ровож д а ем ы е п рот ивоп ра вн ы м и д ействиям и, созд а ю т у грозу д ля зд оровь я и ж изн и лю д ей, н а н осят серь езн ы й у щ ерб экон ом ике, п од ры ва ю т н ра вст вен н ы е осн овы общ ест ва . Од н им из сред ст в госу д а рст ва в борь бе с н а рком а н ией являет ся а н а литическа я слу ж ба , осу щ ест вляю щ а я хим ико-токсикологический а н а лиз сред ст в, вы зы ва ю щ их од у рм а н ива н ие, п озволяет кон тролирова т ь у головн о н а ка зу ем ы е д еян ия и сп особст ву ет эф ф ект ивн ой д иа гн остике и лечен ию боль н ы хн а рком а н ией. Сп ециф ика борь бы с н еза кон н ы м оборотом н а ркот иков т ребу ет д ля д остоверн ого вы ясн ен ия всех обстоятель ст в д ела п ривлечен ие сп ециа листов ра зн ы х п роф илей: крим ин а лист ов, хим иков-т оксикологов, вра чей-н а ркологов. Од н им из реш а ю щ их н а п ра влен ий п ри этом являет ся п ровед ен ие су д ебн ом ед ицин ского обслед ова н ия п од озрева ем ы х с цель ю у ст а н овлен ия ф а кта у п от реблен ия н а ркот иков, резу ль т а т ы которого во м н огом за висят от ла бора торн ого исслед ова н ия биологическихп роб обслед у ем ого. На ст оящ ее у чебн о-м ет од ическое п особие п освящ ен о од н ом у из ра зд елов ку рса “Т оксикологическа я хим ия” – хим ико-токсикологическом у а н а лизу н а ркотических и од у рм а н ива ю щ их сред ст в. В п особии ра ссм отрен а кла ссиф ика ция н а ркот ических сред ств, д а н а ха ра кт ерист ика объ ектов исслед ова н ия, обсу ж д а ю тся особен н ост и хим ико-т оксикологического а н а лиза од у рм а н ива ю щ ихсред ст в, м ет од ы ихизолирова н ия и обн а ру ж ен ия.

5

О Б Щ И Е В О П РО СЫ П онятиео вещ ест вах , вы зы ваю щ их одурм анивание На рком а н ия и т оксиком а н ия с м ед ицин ской т очки зрен ия ра ссм а т рива ю т ся ка к болезн ь , п ричин ой кот орой являет ся у п от реблен ие сред ст в, вы зы ва ю щ их за висим ост ь (п сихическу ю , а ин огд а и ф изическу ю ) м еж д у ж ивы м орга н изм ом и хим ическим вещ ест вом . П сихич е ска я з а висим ост ь – состоян ие, п ри кот ором н а ркотик (од у рм а н ива ю щ ее вещ ест во) вы зы ва ет чу вст во у д овлет ворен ия и которое т ребу ет п ериод ического или п остоян н ого п рием а н а ркот ика с цель ю п олу чен ия у д оволь ствия или во избеж а н ие н еп рият н ы хп сихическихощ у щ ен ий. Ф из ич е ска я з а висим ост ь – а д а п т а ция, п роявляю щ а яся в силь н ом ф изическом ра сстройст ве п ри за д ерж ке п рием а н а ркот ика . Да н н ое ра сстройст во (син д ром а бстин ен ции) скла д ы ва ет ся из оп ред елен н ого м н ож ест ва сим п том ов и п ризн а ков п сихического или ф изического свойст ва , ха ра кт ерн ы хд ля ка ж д ого вид а н а ркот иков. Сред ст ва , вы зы ва ю щ ие од у рм а н ива н ие, п од ра зд еляю т ся на н а ркотические сред ства и токсиком а н ические сред ст ва , в т ом числе сред ст ва , вы зы ва ю щ ие лека рст вен н у ю за висим ость . Т ерм ин “н а ркот ическое сред ст во” сод ерж ит в себе т ри крит ерия: м ед ицин ский, социа ль н ы й и ю рид ический. Он и вза им освяза н ы и в п ра вовом а сп ект е обязы ва ю т п ризн а ва т ь сред ство н а ркотическим т оль ко п ри ед ин ст ве т рех крит ериев, а им ен н о: м едицин ского, если соот вет ст ву ю щ ее сред ство ока зы ва ет сп ециф ическое д ейст вие н а Ц НС, что и являет ся п ричин ой его н ем ед ицин ского п рим ен ен ия; социа льн ого, если его н ем ед ицин ское п рим ен ен ие п рин им а ет м а ссовы е м а сш т а бы , п риобрет а ю щ ие социа ль н у ю зн а чим ост ь , и юридич е ского, если, исход я из д ву хвы ш еу ка за н н ы хкрит ериев, М З ст ра н ы п ризн а ло это сред ст во н а ркот ическим и вклю чило его в сп исок н а ркотическихсред ст в. В слу ча е от су т ст вия хот я бы од н ого из крит ериев од у рм а н ива ю щ ее сред ст во отн осится к сред ст ва м , вы зы ва ю щ им т оксиком а н ию или лека рст вен н у ю за висим ост ь . Кла ссифика ция н а ркот ич е скихи одурм а н ива ющихве ще ст в 1. Алка лоид ы гру п п ы оп ия (м орф ин , код еин , н а ркотин , п а п а верин и их син тет ические п роизвод н ы е: героин (д иа цетилм орф ин ), д ион ин (эт илм орф ин ), п ром ед ол). 2. Производ н ы е ба рбит у ровой кислот ы (ф ен оба рбит а л, ба рба м ил, бу т оба рбит а л, эт а м ин а л н а т рия). 3. Производ н ы е 1,4-бен зод иа зеп ин а (хлорд иа зеп оксид , д иа зеп а м , окса зеп а м , н итра зеп а м ).

6

4. Производ н ы е ф ен отиа зин а (а м ин а зин , д ип ра зин , левом еп ром а зин , т иорид а зин ). 5. К а н н а бин оид ы (ка н н а бид иол, ка н н а биол, т етра гид рока н н а бин ол, т етра гид рока н н а бин олова я кислот а ). 6. Фен ила лкила м ин ы (эф ед рин , эф ед рон , а м ф ет а м ин , м ета м ф ет а м ин ). 7. К ока ин . 8. Г а ллю цин оген ы (Л С Д, п силоцибин , м еска лин , ф ен циклид ин ). 9. Э тиловы й сп ирт. 10. Ра ст ворители (бен зин , а цет он , т рихлорэт илен , эф иры , хлороф орм ). 11. Вт оростеп ен н ы е п сихостим у лят оры (н икот ин , кола , ка т , коф еин ). К он вен цией ООН п о борь бе с н еза кон н ы м оборотом н а ркотических сред ст в и п сихот роп н ы хвещ ест в и Резолю цией Г ен ера ль н ой Асса м блеи ООН п о воп росу о м еж д у н а род н ом сотру д н ичест ве в борь бе с н еза кон н ы м оборотом и ра сп рост ра н ен ием н а ркот ических и п сихот роп н ы х сред ст в реком ен д ова н о ст ра н а м -у ча ст н ица м взят ь п од свой кон троль : 1) п роизвод ст во, изготовлен ие, склон ен ие к у п от реблен ию , п ред лож ен ие с цель ю п род а ж и, ра сп ростра н ен ие, п род а ж у , п ост а вку н а лю бы х у словиях, п осред н ичест во, п ереп ра вку , т ра н зит н у ю п ереп ра вку , т ра н сп орт ировку , им п орт или эксп орт лю бого н а ркотического сред ст ва или н а ркотического вещ ест ва ; 2) ку ль т ивирова н ие оп ийн ого м а ка , кока ин ового ку ста , кон оп ли (ин д ийской, ю ж н ой м а н ь чж у рской или ю ж н ой чу йской) либо д ру гих за п рещ ен н ы х к возд елы ва н ию н а ркотикосод ерж а щ ихку ль т у р в целяхп роизвод ст ва н а ркот ическихсред ст в в н а ру ш ен ии п олож ен ий К он вен ции ООН; 3) изгот овлен ие, т ра н сп ортировку , ра сп ростра н ен ие и п род а ж у обору д ова н ия и п олу п род у кт ов д ля п роизвод ст ва н а ркотическихсред ст в. От вет ст вен н ост ь за п ра вон а ру ш ен ия, связа н н ы е с н а ркот ика м и, в Российской Фед ера ции регла м ен тиру ет ся У головн ы м код ексом , К од ексом РФ об а д м ин истра тивн ы х п ра вон а ру ш ен иях, Г ра ж д а н ским код ексом , а т а кж е К од ексом о бра ке и сем ь е и Ж илищ н ы м код ексом РФ. О собенности х им ик о-т ок сик ол огическ ого анал иза на содержаниеодурм аниваю щ их средств Ц е лью а н а лиз а н а ркот ических и д ру гих од у рм а н ива ю щ их сред ст в являет ся у ст а н овлен ие ф а кт а п рису т ст вия н а ркотических и д ру гих од у рм а н ива ю щ ихсред ст в н еза висим о от т яж ест и сост оян ия, т.е. от н а йд ен н ого количест ва вещ ества . Гла вн а я з а да ч а а н а лиз а – ид ен т иф ика ция сред ст в, вы зы ва ю щ их од у рм а н ива н ие. В а н а лизе н а ркотических и д ру гих од у рм а н ива ю щ их сред ст в су щ ест ву ю т д ва осн овн ы х н а п ра влен ия: су д ебн оп ра вовое (у ст а н овлен ие ф а кт а п рису т ст вия, у п от реблен ия) и клин ическое (д иа гн остика , лечен ие, реа билита ция). При су д ебн о-п ра вовой н а п ра влен н ости вещ ест во а н а лизиру ет ся ка к м ин им у м д ву м я м ет од а м и, п ричем од ин из эт их м ет од ов исп оль зу ет ся д ля п ред ва ритель н ого исслед ова н ия, а д ру гой – д ля п од т верж д а ю щ его исслед ова н ия.

7

От личит ель н ой особен н ост ь ю Х Т А, вы д еляю щ ей его из д ру гих вид ов а н а лиза , является оп ред елен ие экзоген н ы х вещ ест в в объ ект а х, которы е п о своей п рирод е весь м а ра зн ообра зн ы . Объе кт ы , п од верга ем ы е а н а лизу , м ож н о ра зд елит ь н а след у ю щ ие гру п п ы : – биологические обра зцы (м оча , кровь , волосы , н огти, вн у т рен н ие орга н ы , д иа лиза ты , п ром ы вн ы е вод ы ); – обра зцы ра стит ель н ого п роисхож д ен ия (кон оп ля, оп иу м ), ихэкстра кт ы и п роизвод н ы е; – т верд ы е су бст а н ции (п орош ки); – та блет ки, д ра ж е; – ин ъ екцион н ы е ра ст воры . К осн овн ы м эт а па м ХТА сред ст в, вы зы ва ю щ их од у рм а н ива н ие, от н осятся: – за борп роб и хра н ен ие биом а т ериа ла ; – п робоп од готовка ; – п ред ва рит ель н ы е и п од т верж д а ю щ ие м ет од ы а н а лиза ; – обра бот ка и ин т ерп рет а ция п олу чен н ы хрезу ль т а т ов. В силу сп ециф ики а н а лиза н а сод ерж а н ие н а ркотических и д ру гих од у рм а н ива ю щ их вещ ест в (сокры тие ф а кт а у п от реблен ия, ф а ль сиф ика ция п роб и т.д .) в осн ову его м ет од ологии п олож ен м ет од скрин ин га , исп оль зу ем ы й п ри н ен а п ра влен н ом а н а лизе, т.е. п ри а н а лизе н а н еизвест н ое вещ ест во. При а н а лизе известн ого вещ ест ва , т.е. п ри н а п ра влен н ом а н а лизе, п рим ен яю т ся ча ст н ы е м етод ики оп ред елен ия. На д еж н ост ь резу ль т а тов а н а лиза , п олу чен н ы х с п ом ощ ь ю скрин ин га , оп ред еляет ся: – п ра виль н ост ь ю орга н иза цион н ы хм ероп риятий (отборп робы , хра н ен ие п роб, п ост оян н ы й кон т роль за ра ботой обору д ова н ия, чистот ой реа ген тов и д р.); – чу вст вит ель н ост ь ю и сп ециф ичн ость ю исп оль зу ем ы хм ет од ов; – зн а н ием п рирод ы вещ ест ва , сп особов введ ен ия в орга н изм , ра сп ред елен ия в орга н изм е, ст еп ен и м ета болизм а , п у т ей вы вед ен ия, а т а кж е ин д ивид у а ль н ы м и особен н ост ям и орга н изм а . Вы бор а н а литическихм етод ов д ля скрин ин га од у рм а н ива ю щ ихсред ст в оп ред еляет ся цель ю а н а лиза – д обить ся м ин им у м а отрица т ель н ы хи м а ксим у м а п олож ит ель н ы х резу ль т а т ов – и связа н с т а ким и гла вн ы м и п а ра м етра м и а н а лиза , ка к чу вст вит ель н ост ь и сп ециф ичн ост ь , т а к ка к эт им и п а ра м етра м и оп ред еляет ся н а личие лож н оотрица т ель н ы х и лож н оп олож ит ель н ы х резу ль т а т ов соот ветст вен н о. Чувст вит е льн ост ь а н а литического м етод а оп ред еляется ка к от н ош ен ие сигн а ла а н а лизиру ем ого вещ ест ва к сигн а лу ба зовой лин ии и вы ра ж а ет ся в н а н огра м м а х н а м иллилитр (н г/м л) или в гра м м а х н а килогра м м (г/кг) биообъ ект а . Под спе цифич н ост ью м етод а п он им а ю т сп особн ост ь м етод а отлича т ь хим ическу ю ст ру кт у ру д а н н ого соед ин ен ия от ем у п од обн ы х(а н а логов).

8

В ка чест ве осн овн ы х пре два рит е льн ы х скрин ин говы х м е т одов д ля обн а ру ж ен ия сред ст в, вы зы ва ю щ иход у рм а н ива н ие, исп оль зу ю т ся хим ические (хром оген н ы е, м икрокрист а ллические реа кции), им м у н охим ические м етод ы (ИФА, ПФИА, РИА и д р.) и т он кослойн а я хром а т огра ф ия. В ка чест ве подт ве рж да ющихм е т одов исслед ова н ия исп оль зу ю т ся Г Ж Х , ВЭ Ж Х , Г Х /М С. Под т верж д а ю щ ие м етод ы д олж н ы бы т ь вы ш е или ра вн ы м и п о чу вст вит ель н ост и, чт обы у м ен ь ш ит ь количест во лож н оотрица т ель н ы х резу ль т а т ов, н о обяза т ель н о д олж н ы бы т ь вы ш е п о сп ециф ичн ост и, д ля т ого чт обы сн изит ь количест во лож н оп олож ит ель н ы хрезу ль т а т ов. Т а блица Сра вн ен ие п реим у щ ест в и н ед ост а т ков н екот оры ха н а лит ическихм етод ов Преим у щ ест ва

Нед оста т ки

Им м у н охим ические м етод ы 1. Объ ект ивн ост ь резу ль т а т ов 1.Перекрест н о реа гиру ю щ ие вещ ест ва 2. Х орош а я чу вст вит ель н ост ь м огу т д а ть лож н оп олож ит ель н ы й 3. Полу количест вен н а я оцен ка резу ль т а т 4. Простота вы п олн ен ия 2.Г ру п п овой м етод н е ра злича ет ин д ивид у а ль н ы х соед ин ен ий вн у т ри 5. У м ерен н а я ст оим ость реа ген т ов гру п п ы , что п ривод ит к ча стичн ом у 6. Бы строта а н а лиза сокры тию п олн ого н а бора вещ ест в Х ром а тогра ф ические м етод ы 1. Х орош а я чу вст вит ель н ост ь 1.Т ребу ет ся вы сококва лиф ицирова н 2. Вы сока я сп ециф ичн ост ь н ы й п ерсон а л 3. К оличест вен н ое оп ред елен ие 2. Отн осит ель н а я д лит ель н ость а н а лиза 3. Ин огд а за висит от су бъ ект ивн ой ин т ерп рета ции резу ль т а т ов При вы боре а н а литического м ет од а н еобход им о у читы ва т ь его п реим у щ ест ва и н ед оста т ки, а та кж е вид а н а лизиру ем ого обра зца и обстоят ель ст ва д ела . Но д а ж е п ри исп оль зова н ии са м ого чу вст вит ель н ого м ет од а , резу ль т а т ы скрин ин га д олж н ы бы т ь п од т верж д ен ы а н а литическим и м ет од а м и, осн ова н н ы м и н а д ру гихф изико-хим ическихп рин цип а х. Тре бова н ия , пре дъя вля е м ы е к ра бот е ла бора т орий, з а н им а ющихся а н а лиз ом н а ркот ич е скихи другиходурм а н ива ющихве ще ст в 1. Л а бора т ория д олж н а п ройт и вн еш н ее п роф ессион а ль н ое т естирова н ие и бы т ь а тт естова н а . 2. К а ж д ы й хим ик-эксп ерт д олж ен д ока за т ь свой п роф ессион а ль н ы й у ровен ь . 3. К а ж д ы й п риборд олж ен им ет ь ин стру кцию п о эксп лу а т а ции.

9

4. Все исп оль зу ем ы е реа ген т ы д олж н ы им ет ь от м ет ку о д а т е изготовлен ия и п а сп ортизова н ы . 5. К а ж д ы й эт а п м ет од ики д олж ен бы т ь п од робн о оп иса н и им ет ь м ет рологическу ю оцен ку (восп роизвод им ост ь , п ред ел обн а ру ж ен ия, лин ейн ост ь и д р.). 6. Исп оль зу ем ы е эт а лон н ы е вещ ест ва д олж н ы бы т ь п а сп орт изова н ы . 7. Долж н ы бы т ь извест н ы п ред елы обн а ру ж ен ия а н а лизиру ем ы х вещ ест в п о ка ж д ом у исп оль зу ем ом у а н а лит ическом у м ет од у . 8. Пра вила от бора и хра н ен ия обра зцов д олж н ы бы т ь регла м ен тирова н ы . 9. К а ж д ы й п олож ит ель н ы й резу ль т а т д олж ен бы т ь п од т верж д ен д ру гим а н а литическим м етод ом . Исклю чен ие м ож ет бы т ь сд ела н о т оль ко в слу ча е н а п ра влен н ого а н а лиза . О собенности интерп ретац ии резул ьт атов п ри анал изебиол огическ их объ ек т ов на содержаниевещ еств, вы зы ваю щ их одурм анивание Исп оль зу я п олу чен н ы е резу ль т а т ы , а н а литик-т оксиколог д олж ен н е т оль ко п од т верд ит ь или оп ровергн у т ь п ред п олож ен ие о п рису т ст вии од у рм а н ива ю щ его сред ст ва в а н а лизиру ем ом обра зце, н о и ра злича т ь слу ча и хрон ического и ра зового исп оль зова н ия н а ркотических вещ ест в. Послед н его м ож н о д ост ичь , если соп оста вит ь кон цен т ра ции обн а ру ж ен н ого вещ ест ва и его м ет а болитов. К а к п ра вило, более вы сокие кон цен т ра ции м ета болитов свид ет ель ст ву ю т о хрон ическом п рим ен ен ии, а зн а читель н ое п ревы ш ен ие кон цен тра ции вещ ест ва н а д кон цен тра цией м ет а болит а – об остром отра влен ии (ра зовом у п от реблен ии). Для п ра виль н ой ин терп рета ции резу ль т а т ов а н а лиза ва ж н о зн а н ие ф орм ы и сп особа введ ен ия. Вн у т ривен н ое введ ен ие или ин га ляция в н а ча ль н ы й м ом ен т д а ю т более вы сокие кон цен тра ции вещ ества в крови, чем вн у т рим ы ш ечн ое, ора ль н ое, п од кож н ое. В слу ча е а н а лиза т ру п н ого м а териа ла ра вн ы е кон цен тра ции, обн а ру ж ен н ы е в п ечен и и крови, свид етель ст ву ю т о хрон ическом исп оль зова н ии вы соких д оз н а ркотических вещ ест в. В слу ча е острого от ра влен ия кон цен т ра ция а н а лизиру ем ого вещ ест ва в п ечен и зн а читель н о п ревы ш а ет кон цен т ра цию его в крови. Вы сокие кон цен тра ции од у рм а н ива ю щ ихсред ст в в крови н а ра н н ем эта п е п осле вн у т ривен н ого или ора ль н ого введ ен ия бу д у т соот вет ст вова т ь более вы соким кон цен тра циям в легкихи п ечен и, в то врем я ка к в п ериод вы вед ен ия кон цен тра ция в ж елчи и м оче бу д ет вы ш е, чем в крови. Од у рм а н ива ю щ ие сред ст ва осн овн ого ха ра кт ера д а ю т сра вн ит ель н о н изкие кон цен тра ции в крови, а отн ош ен ие кон цен тра ций в п ечен и и в крови ча ст о вы ш е 10. С оед ин ен ия кислого ха ра кт ера д а ю т у м ерен н о вы сокие кон цен тра ции в крови, и эт о от н ош ен ие н а ход ится в п ред ела хот 2 д о 5. Для вещ ест в н ейтра ль н ого ха ра кт ера н а блю д а ю т ся вы сокие кон цен тра ции в крови и п очт и од ин а ковое сод ерж а н ие в д ру гихтка н ях.

10

Для коррект н ой ин т ерп рета ции п олу чен н ы хд а н н ы х т а кого биообъ ект а , ка к м оча , н еобход им о т а кж е зн а н ие д озы , врем ен и, сп особа и п ериод ичн ости введ ен ия вещ ест ва , кин ет ики ра сп ред елен ия, од н а ко в слу ча е н а ркотиков п од обн а я ин ф орм а ция ред ко д ост у п н а и н е всегд а п олн а . Од н а ко м ож н о от м етит ь н екоторы е за кон ом ерн ост и: 1. Ч ем вы ш е введ ен н а я д оза , т ем боль ш е вероят н ост ь ихобн а ру ж ен ия. Вы сокие д озы обы чн о д а ю т более вы сокие кон цен т ра ции в п ла зм е и м оче. 2. К он цен тра ция вещ ест ва в п ла зм е за висит от его ра сп ред елен ия в орга н изм е, м ета болизм а и вы вед ен ия. Для ка ж д ого вещ ест ва его ф а рм а кокин етика ин д ивид у а ль н а . К он цен т ра ция н а ркот ическихвещ ест в в м оче ва рь иру ет ся п о сра вн ен ию с п ла зм ой и за висит от объ ем а и рН м очи. 3. К а ж д ое вещ ест во сохра н яет ся в орга н изм е ра зн ое врем я и за висит от хим ического ст роен ия и ча стот ы у п от реблен ия. 4. Посколь ку кон цен т ра ция боль ш ин ст ва вещ ест в в м оче (за исклю чен ием эт а н ола ) н е коррелиру ет с ихкон цен тра цией в крови и ст еп ен ь ю н а ркотического возд ейст вия, врем я у п от реблен ия н а ркотического вещ ест ва п о кон цен тра ции в м оче н е м ож ет бы т ь у ст а н овлен о. О Б ЪЕ К Т Ы И ССЛЕ Д О В А Н И Я П равил а от бора п роб на обнаружениенарк отическ их средств, п сих отроп ны х и других т ок сическ их вещ еств Резу ль т а т ы исслед ова н ия во м н огом за висят от точн ости соблю д ен ия м ет од ики п робоотбора биологических объ ект ов, у словий хра н ен ия и т ра н сп орт ировки. На ст а д ии п робоотбора в а н а лизе н а ркот ических вещ ест в след у ет у чит ы ва т ь возм ож н ост ь у н ичт ож ен ия или ф а ль сиф ика ции объ екта ; а н а лизиру ем а я п роба м ож ет бы т ь м а ла п о м а ссе, за грязн ен а и им еть хим ический сост а в, отличн ы й от п ервон а ча ль н ого из-за возд ейст вия окру ж а ю щ ей сред ы п ри н еп ра виль н ом хра н ен ии. Докум е н т а льн ое оформ ле н ие хим ико-т оксикологич е ских иссле дова н ий. Осн овн ы м д оку м ен т ом “ка бин ета ”, осу щ ест вляю щ его эксп ерт изу оп ь ян ен ия, а т а кж е от бор биологических п роб д ля хим ико-т оксикологического исслед ова н ия, является ра бочий ж у рн а л ка бин ета эксп ерт изы оп ь ян ен ия. Ж у рн а л являет ся ю рид ическим д оку м ен том , бу д у чи п рош н у рова н н ы м и оп еча т а н н ы м , за п олн яет ся и вед ет ся п о у ст а н овлен н ой ф орм е. В ж у рн а ле обяза тель н о д олж н ы бы т ь у ка за н ы ФИО боль н ого, н ом ер м ед ицин ской ка рт ы ст а цион а рн ого или а м бу ла т орн ого боль н ого или н ом ер а кта м ед ицин ского освид ет ель ст вова н ия, д а та и врем я исслед ова н ия (н а ча ло и окон ча н ие исслед ова н ия), а т а кж е все оп ера ции, п ровед ен н ы е с исслед у ем ой п робой, н а осн ова н ии которы х д а ет ся за клю чен ие о н а хож д ен ии или от су т ст вии т оксического вещ ест ва в исслед у ем ой п робе. При количествен н ом исслед ова н ии в ж у рн а ле за п исы ва ю т п ока за н ия п риборов и объ ем а исслед у ем ы хобъ ект ов.

11

На всеххром а т огра м м а х, сп ект рогра м м а хи д ру гихд оку м ен т а хд олж н ы бы т ь п рост а влен ы ФИО боль н ого, н ом ер м ед ицин ской ка рт ы ст а цион а рн ого или а м бу ла т орн ого боль н ого или н ом ер а кт а м ед ицин ского освид ет ель ст вова н ия, д а т а и врем я исслед ова н ия. Первичн ы й д оку м ен т без у ка за н н ы ха трибу т ов н е м ож ет слу ж ит ь осн ова н ием д ля за клю чен ия о хим икот оксикологическом исслед ова н ии. В ж у рн а ле регистра ции хим ико-токсикологических исслед ова н ий за п исы ва ю т резу ль т а т ы а н а лиза н а осн ова н ии за п исей в ра бочем ж у рн а ле. При за п олн ен ии ж у рн а ла регистра ции хим ико-токсикологических исслед ова н ий след у ет соблю д а ть общ ие п ра вила вед ен ия д оку м ен т а ции т а кого род а : за п иси п роизвод ят ся ш а риковой или п ерь евой ру чкой; за п рещ а ю т ся за п иси ка ра н д а ш ом , а та кж е ру чка м и с кра сн ы м и и зелен ы м и черн ила м и; за п рещ а ется исп оль зова н ие п рочерков или ка вы чек в гра ф а х “Да та ”, “Врем я”, “ФИО”, “Резу ль т а т”, исклю чен ие сост а вляет гра ф а “Врем я” п ри исслед ова н ии од н ой и т ой ж е п робы н а н есколь ко гру п п вещ ест в; в гра ф е “Объ ект исслед ова н ия” у ка зы ва ю т количест во взятого н а исслед ова н ие объ ект а и обяза т ель н о д ела ю т п ом ет ки в слу ча ях н а ру ш ен ия п ра вил отбора биологических п роб; в гра ф е “М ет од и н а йд ен н ы е величин ы ” п осле у ка за н ия м етод а за п исы ва ю т зн а чен ия ф изико-хим ических п а ра м етров вещ ест в; в гра ф е “Резу ль т а т “ за п исы ва ю т н а зва н ие обн а ру ж ен н ого (или н е обн а ру ж ен н ого) вещ ест ва или гру п п ы вещ ест в (в соот вет ст вии с п рин ятой н ом ен кла ту рой), а т а кж е кон цен т ра ции н а йд ен н ы х вещ ест в в ед ин ица хизм ерен ия “СИ”. Ну м ера ция а н а лизов сквозн а я н еза висим о от числа ж у рн а лов и н а чин а ется от 0 ч 00 м ин 1 ян ва ря и за ка н чива ется в 24 ч 00 м ин 31 д ека бря ка ж д ого год а . За од ин н ом ер (ед ин ицу исслед ова н ия) п рин им а ю т исслед ова н ие н а вещ ест во или гру п п у вещ еств, которы е ид ен тиф ициру ю т ся од н им реа ктивом , п рибором или м ет од ом . Резу ль т а т ы исслед ова н ия н а а лкоголь за п исы ва ю тся отд ель н ы м н ом ером н еза висим о от вы явлен ия в п робе д ру гих вещ ест в; исп ра влен ия в гра ф а х “Врем я”, “ФИО”, ”Резу ль т а т” н ед оп у ст им ы , в слу ча ях ош ибочн ы х за п исей т екст а кку ра т н о за черкива ет ся, скреп ляет ся п од п ись ю исслед ова вш его и ряд ом вн осит ся н ова я за п ись . Резу ль т а т ы хим ико-т оксикологического исслед ова н ия оф орм ляю т ся а кт ом , которы й вы д а ет ся н а ру ки или вы сы ла ется п очт ой п о за п росу н а п ра вивш его у чреж д ен ия, о чем д ела ет ся соот вет ст ву ю щ а я за п ись в ж у рн а ле регист ра ции хим ико-т оксикологических исслед ова н ий. Акт п од п исы ва ется лица м и, п ровод ивш им и исслед ова н ие, и за веряется гла вн ы м вра чом . К оп ия а кт а хра н ит ся в ла бора т ории. “На п ра влен ие на хим икоС опроводит е льн а я докум е н т а ция : т оксикологическое исслед ова н ие” и “Сп ра вка о д ост а вке п роб н а хим икот оксикологическое исслед ова н ие” за п олн яю т ся п о у ст а н овлен н ы м ф орм а м и п еред а ю т ся в хим ико-токсикологическу ю ла бора торию (Х Т Л ) вм ест е с п роба м и. На п ра влен ие н а хим ико-т оксикологическое исслед ова н ие ост а ет ся в Х Т Л , являет ся гла вн ы м д оку м ен т ом , н а осн ова н ии кот орого Х Т Л п ровод ит хим икот оксикологический а н а лиз и вы д а ет резу ль т а т ы о сод ерж а н ии или отсу т ст вии

12

а лкоголя в п робе п ред ст а вителям орга н ов зд ра воохра н ен ия. На п ра влен ие н а хим ико-токсикологическое исслед ова н ие п од п исы ва ет ся д еж у рн ы м вра чом и м ед сест рой (ф ель д ш ером ), п роизвод ивш им и отбор п роб, и хра н ит ся в Х Т Л в т ечен ие д ву хм есяцев. Сп ра вка о д ост а вке п роб н а хим ико-т оксикологическое исслед ова н ие вы д а ет ся лицу , осу щ ест вляю щ ем у т ра н сп орт ировку обра зцов и д оку м ен т а ции в Х Т Л , и слу ж ит д оку м ен т ом , у д остоверяю щ им п олн ом очия лица н а д ост а вку , а т а кж е сод ерж ит свед ен ия об от п ра вке и п олу чен ии обра зца . Сп ра вка сост а вляет ся в д ву х экзем п ляра х, п ервы й экзем п ляр ост а ет ся в Х Т Л , вт орой экзем п лярза веряет ся ш та м п ом Х Т Л и возвра щ а ет ся в “ка бин ет ”. В слу ча е когд а Х Т Л и “ка бин ет ” террит ориа ль н о ра сп ола га ю т ся в од н ом зд а н ии (од н ом боль н ичн ом ком п лексе) лечебн ого у чреж д ен ия, сп ра вка о д оста вке н е за п олн яется. П ра вила от бора жидкихбиосре д. М оч а . Процед у ра от бора п робы д олж н а п роизвод ит ь ся в у словиях, исклю ча ю щ их п од м ен у или за м ен у ее д ру гим и ж ид кост ям и. Проба м очи собира ет ся в п розра чн ы й ст еклян н ы й ш ирокогорлы й гра д у ирова н н ы й сосу д объ ем ом 300-600 м л. Объ ем п робы д олж ен бы т ь н е м ен ее 200 м л. После за верш ен ия п роцед у ры освид ет ель ст ву ем ы й п еред а ет сосу д с п робой п ерсон а лу . С осу д с п робой н а кры ва ет ся п окровн ой п ла стин ой (кры ш кой). Пред ва рит ель н ое исслед ова н ие п робы вклю ча ет : – изм ерен ие т ем п ера т у ры (н е более, чем через 4 м ин у т ы п осле отбора п робы ) стеклян н ы м рт у т н ы м т ерм ом ет ром ; – изм ерен ие величин ы рН с п ом ощ ь ю у н иверса ль н ой ин д ика т орн ой бу м а ги д ля оп ред елен ия рН м очи; – визу а ль н ое н а блю д ен ие (цвет, м у т н ост ь и т.п .). Т ем п ера т у ра д олж н а н а ход ит ь ся в п ред ела х32,5-37,7оС, рН м очи в н орм е д олж ен бы т ь в ин терва ле 4-8 ед . рН, визу а ль н о п роба д олж н а вы гляд еть ест ест вен н о. Е сли резу ль та т ы п ред ва рит ель н ого исслед ова н ия вы зы ва ю т п од озрен ие в ф а ль сиф ика ции, п ерсон а л обяза н п ровест и п овторн у ю п роцед у ру отбора п робы в у словиях, исклю ча ю щ ихф а ль сиф ика цию От обра н н у ю п робу м очи ра злива ю т в д ва ст еклян н ы хили п ла ст м а ссовы х герм етичн о за кры ва ю щ ихся сосу д а ем кост ь ю 100-150 м л ка ж д ы й. Кровь от бира ет ся п ри строгом соблю д ен ии а сеп тических у словий из п оверхн остн ой вен ы через иглу са м от еком в су хой п ен ициллин овы й ф ла кон , сод ерж а щ ий ра ст вор геп а рин а (3-5 ка п ель н а ка ж д ы е 10 м л крови). Фла кон т от ча с ж е за кры ва ю т ст а н д а ртн ой резин овой п робкой, ф иксиру ю т п робку , сод ерж им ое ф ла кон а сра зу ж е п ерем еш ива ю т . Для хим ико-т оксикологического исслед ова н ия н еобход им о н е м ен ее 10 м л крови, д ля исслед ова н ия толь ко н а н а личие а лкоголя д ост а точн о 2-3 м л крови. С люн а отбира ется в ст ериль н ы й су хой ф ла кон из-п од п ен ициллин а в количест ве 5 м л и ту т ж е за кры ва ет ся п робкой.

13

У всех ф ла кон ов с отобра н н ы м и п роба м и (м очи, слю н ы или крови) ф иксиру ю т п робки а лю м ин иевы м и колп а чка м и с п ом ощ ь ю п рисп особлен ия д ля обж им а колп а чков, обесп ечива ю щ его герм ет иза цию ф ла кон а , и ст а вят ихв холод иль н ик. В слу ча е герм ет иза ции д ру гим сп особом ф ла кон ы д олж н ы бы ть оп еча т а н ы . На ка ж д ы й ф ла кон н а клеива ет ся этикет ка с у ка за н ием н ом ера п робы (п о регистра цион н ой кн иге), д а т ы , врем ен и за бора п робы , ф а м илии освид ет ель ст ву ем ого, ф а м илии м ед ицин ского ра ботн ика , п од готовивш его п робу . Исслед ова н ие н а н а личие а лкоголя п ровод ится в т ечен ие 1 ча са п осле п олу чен ия биологических п роб. Доп у ска ет ся хра н ен ие п робы п ри у словии а сеп тического от бора в холод иль н ике п ри т ем п ера т у ре 0+2оС н е более су ток. При д лит ель н ом хра н ен ии биосред с н а ру ш ен ием т ем п ера т у рн ого реж им а в н их ра звива ю т ся брод иль н ы е и гн илостн ы е п роцессы , которы е м огу т су щ ест вен н о иска зит ь резу ль т а т ы количест вен н ого оп ред елен ия. Да н н ы е об отборе биологической п робы за н осят ся в ж у рн а л регист ра ции а н а лизов и их резу ль т а т ов. При эт ом у ка зы ва ю т ся: п оряд ковы й н ом ер, д а та и врем я взятия м очи, крови или слю н ы ; ф а м илия, им я, от чест во обслед у ем ого, год рож д ен ия, п ол; ф а м илия, им я, от чест во вра ча , п роизвод ивш его взят ие п робы крови (от ку д а взят а кровь и сп особ обра бот ки кож и), количест во взят ы хбиосред , д а та и врем я п еред а чи биосред н а а н а лиз, д а т а п ровед ен ия исслед ова н ия, резу ль т а ты исслед ова н ия. Склян ки, п робирки, п ред н а зн а чен н ы е д ля взят ия крови и м очи, м ою т ся 2% ра ст вором сод ы , оп ола скива ю т ся д ист иллирова н н ой вод ой и ст ерилизу ю т ся обы чн ы м сп особом . П ра вила от бора волос, н огт е й и пот ожировы х вы де ле н ий для хим икот оксикологич е ского иссле дова н ия н а н а лич ие н а ркот ич е ских сре дст в и психот ропн ы хве ще ст в. В олосы от бира ю т от д ель н о с лобн ой, т ем ен н ой, за т ы лочн ой, п ра вой и левой височн ы хобла стей волосистой ча ст и головы в вид е п у чка в количестве н е м ен ее 15-20 волос, которы е обреза ю т ся у корн я н ож н ица м и ка к м ож н о ближ е к кож е. При н еобход им ости отбира ю т обра зцы волос с д ру гих волосисты х у ча ст ков т ела . От обра н н ы е обра зцы волос п ом ещ а ю т ка ж д ы й в от д ель н ы й кон верт с соот вет ст ву ю щ ей н а д п ись ю , которы й за т ем оп еча ты ва ю т. Все п олу чен н ы е кон верты с обра зца м и п ом ещ а ю т в од ин общ ий кон верт, кот оры й оп еча ты ва ю т . Н огт и отбира ю т от д ель н о с ка ж д ой ру ки или, п ри н еобход им ости, с ка ж д ой н оги. Ногти обреза ю т ся н ож н ица м и п о возм ож н ост и ближ е к кож е. От обра н н ы е обра зцы н огт ей с ка ж д ой ру ки или н оги п ом ещ а ю т в от д ель н ы й кон верт с соответст ву ю щ ей н а д п ись ю , которы й за т ем оп еча ты ва ю т. Все п олу чен н ы е кон верты с обра зца м и п ом ещ а ю т в од ин общ ий кон верт , которы й т а кж е оп еча ты ва ю т . От бор обра зцов пот ожировы х вы де ле н ий н а ру ка х и д ру гих у ча ст ка х т ела п роизвод ится ва т н ы м т а м п он ом , см очен н ы м сп иртом . Вес та м п он а д олж ен сост а влят ь 400-500 м г п ри ра сход е эт а н ола д о 1 м л.

14

Да н н ы м т а м п он ом т щ а т ель н о п ротира ю т ся п оверхн ости ру к и лица (гла вн ы м обра зом вокру г рт а ), п осле чего т а м п он вы су ш ива ет ся н а возд у хе. Во избеж а н ие вза им оп еред а чи исслед у ем ы хвещ ест в с од н ого та м п он а н а д ру гой, ка ж д ы й из н их у п а ковы ва ю т в от д ель н ы й п олим ерн ы й п а кет, им ею щ ий соот вет ст ву ю щ у ю м а ркировку . Все п олу чен н ы е п а кет ы с обра зца м и п ом ещ а ю т в од ин общ ий кон верт, которы й оп еча ты ва ю т . П одгот овка обра з цов и докум ен т ов к т ра н спорт ировке в ХТЛ . Для от п ра вки биоп роб в Х Т Л готовятся д ва сосу д а , в кот оры х н а ход ит ся п роба биож ид кост и од н ого освид ет ель ст ву ем ого. Первы й – “обра зец” – п ред н а зн а чен д ля а н а лиза , вт орой – “кон т роль н ы й обра зец” – п о п рибы т ии в Х Т Л п ом ещ а ет ся н а хра н ен ие без н а ру ш ен ия у п а ковки и исп оль зу ет ся д ля п овторн ого а н а лиза п робы в слу ча е н еобход им ости: п ри п овт орн ой эксп ертизе, по требова н ию п ра воохра н итель н ы х орга н ов, п ри н еобход им ост и исп оль зова н ия более соверш ен н ы х м ет од ов а н а лиза и связа н н ой с эт им н еобход им ост и от п ра вки кон троль н ого обра зца в д ру гу ю Х Т Л и т.д . Для м а ркировки сосу д ов гот овят д ва “ярлы ка ”. На д п ись н а ярлы ке сод ерж ит ш естизн а чн ы й код обслед у ем ого (д ля код ирова н ия исп оль зу ет ся п роизволь н ы й ряд чисел от 0 д о 9, н а п рим ер: 008745 и т.д .), д а т у и код д а н н ого п у н кт а (п о общ ей сист ем е код ирова н ия “ка бин ет а ” и Х Т Л н а ркологических д исп а н серов и боль н иц). При этом ярлы к кон т роль н ого обра зца сод ерж ит бу кву “К ” п осле ш естизн а чн ого код а , а та кж е п од п ись освид етель ст ву ем ого н а оборотн ой ст орон е. За п олн ен н ы е ярлы ки д олж н ы леж а т ь н а д п ись ю вн из, когд а освид ет ель ст ву ем ы й п ригла ш а ет ся п ост а вит ь п од п ись н а од н ом из н их (кон т роль н ом ). Освид етель ст ву ем ы й н е д олж ен вид ет ь своего код а . Реком ен д у ет ся, чтобы за п олн ен ие ярлы ков п ровод илось лицом , от вет ствен н ы м за вед ен ие ра бочего ж у рн а ла “ка бин ет а ”. Во избеж а н ие п у та н ицы оборотн а я ст орон а ярлы ка кон троль н ого обра зца от м еча ет ся ка ким либо обра зом , н а п рим ер, цветн ы м ка ра н д а ш ом . Я рлы к креп ит ся к сосу д у с п ом ощ ь ю клейкой лен т ы т а к, чтобы лен т а п роход ила через д н о, бокову ю п оверхн ост ь и головку сосу д а , а н а д п ись ра сп ола га ла сь н а ст ен ке. М ест о соед ин ен ия кон цов лен ты н а головке сосу д а за лива ет ся су ргу чом , н а н ем д ела ется от т иск ш т а м п а “ка бин ета ”. Доп у ска ет ся исп оль зова н ие соврем ен н ы хн а д еж н ы хсред ст в д ля оп еча ты ва н ия. В слу ча е, если обслед у ем ы й н е согла сен с п ра виль н ост ь ю п роизвед ен н ого от бора п робы п ерсон а лом “ка бин ет а ”, он м ож ет: – ост а вит ь за п ись в ра бочем ж у рн а ле; – п отребова ть п овторн ого взятия п робы (безотла га тель н о); – сд ела т ь за явлен ие в вы ш естоящ ие орга н ы . Тра н спорт ировка обра з цов и докум е н т ов. Т ра н сп орт ировку обра зцов п роб с н а п ра влен иям и н а хим ико-т оксикологическое исслед ова н ие осу щ ест вляет лицо, н а им я кот орого сост а влен а сп ра вка о д ост а вке. Х Т Л н еза м ед лит ель н о у вед ом ляет ся об от п ра вке п роб и д оку м ен т а ции исп оль зова н ием т елеф он а , т елеф а кса или телегра ф а . Неза висим о от ст еп ен и у д а лен н ости обра зцы реком ен д у ет ся т ра н сп орт ирова т ь в кон т ейн ере-ящ ике, в кот оры й вм ещ а ет ся д оста т очн ое

15

количест во обра зцов. К а ж д ы й кон т ейн ер м а ркиру ет ся н ом ером и код овы м обозн а чен ием “ка бин ета ”. После у п а ковки обра зцов кон т ейн ер за кры ва ет ся кры ш кой, за п ира ется и за клеива ется бу м а ж н ой лен т ой. Л ен т а ра сп ола га ет ся т а ким обра зом , чт обы бы ло н евозм ож н о вскры т ь кон тейн ер без н а ру ш ен ия ее целостн ост и. Перевозка обра зцов в ж а ркое врем я год а п роизвод ит ся в су м ка ххолод иль н ика х. П е ре да ч а обра з цов и докум е н т ов в ХТЛ . В ла бора торию п робы м очи, крови и слю н ы п еред а ю т ся с н а п ра влен ием , в кот ором у ка за н ы п оряд ковы й н ом ер п робы (п о регистра цион н ой кн иге), н а им ен ова н ие, количест во, д а та и врем я взятия биосред , у словия хра н ен ия, цель а н а лиза , Ф.И.О. н а п ра вивш его вра ча , а д рес н а п ра вивш его у чреж д ен ия. При п олу чен ии обра зцов п роб в Х Т Л п роизвод ят н а ру ж н ы й осм отр целостн ост и у п а ковки. Доста влен н ы е обра зцы п роб вскры ва ет за вед у ю щ ий Х Т Л или от вет ст вен н ое лицо. Проверяет ся н а ру ж н а я у п а ковка обра зцов и соот вет ст вие за п исей н а ярлы ка х. Ра сп а кова н н ы е обра зцы п роб п еред а ю т п ерсон а лу Х Т Л д ля а н а лиза . Все свед ен ия п о п рием ке обра зцов регист риру ю т ся в ж у рн а ле регистра ции резу ль т а т ов хим ико-т оксикологических исслед ова н ий Х Т Л . К он троль н ы е обра зцы ст а вят н а хра н ен ие в за п ира ем ы е и оп еча ты ва ем ы е холод иль н ы е ш ка ф ы (п ри тем п ера т у ре –18оС) д ля возм ож н ы х кон троль н ы х исслед ова н ий в т ечен ие 2-хм есяцев со д н я п ост у п лен ия в Х Т Л . Е сли в т ечен ие эт ого срока отсу т ст вова ла н еобход им ост ь в п овт орн ом хим икот оксикологическом исслед ова н ии, т о п о ист ечен ии д ву х м есяцев обра зец у н ичт ож а ю т . При п роба х н е биологич е ского происхожде н ия (ра ст итель н ое сы рь е, п орош ки, т а блет ки, экст ра кт ы и д р.) н а веска д ля а н а лиза от бира ет ся п роизволь н о, если он а т оль ко н е оговорен а м етод икой и н е огра н ичен а м а лы м объ ем ом обра зца . Са м а я м а ла я п роба д олж н а бы ть п роа н а лизирова н а са м ы м и чу вст вит ель н ы м и м ет од а м и. К ритерием вы бора м ет од а в д а н н ом слу ча е являет ся п ред ел обн а ру ж ен ия вещ ест ва . Обра зцы н ебиологического п роисхож д ен ия, ка к п ра вило, изы м а ю т ся в п роцессе оп ера тивн о-след ст вен н ы х м ероп рият ий и являю т ся вещ ествен н ы м и д ока за тель ст ва м и. О см отр объ ек тов иссл едования и оп редел ениенек от оры х свойст в При осм от ре объ ект ов исслед ова н ия отм еча ю т вн еш н ий вид , цвет и за п а х д оста влен н ы хобра зцов. При п од готовке п робы к а н а лизу след у ет обра щ а т ь вн им а н ие н а вн е ш н ий вид д оста влен н ы х биообъ ект ов, кот оры й м ож ет слу ж ит ь ва ж н ой п од ска зкой п ри п ровед ен ии а н а лиза , н а п рим ер, изм ен ен ие цвет а сод ерж им ого ж елу д ка м ож ет бы т ь связа н о с от ра влен ием та ким и вещ ест ва м и, ка к п ерм а н га н а т ка лия – п у рп у рн ы й или розовы й цвет; соли м ед и – зелен ы й или голу бой; соли н икеля-зелен ы й;

16

соли коба ль т а – розовы й; кислот ы а зотн а я, п икрин ова я – ж елты й; кислот ы серн а я, солян а я, щ а велева я – цвет коф ейн ой гу щ и. При осм отре м очи т а кж е от м еча ю т н еобы чн ы й цвет и за п а х, кот оры е н а блю д а ю т ся п ри от ра влен иям и след у ю щ им и п реп а ра т а м и. К ра сн о-коричн евы й цвет им еет м оча п ри отра влен ии п роизвод н ы м и п ира зола , ф ен отиа зин а , ф ерроцерон ом , риф а д ин ом ; зелен о-син ий – ф ен олом , м етилен овой син ь ю ; ж елты й – ф ен а цет ин ом , вит а м ин а м и, п роизвод н ы м и н итроф у ра н а , п икрин овой кислотой. За п а хф иа лок н а блю д а ет ся п ри от ра влен ии скип ид а ром ; За п а х а цетон а – п ри отра влен ии изоп роп иловы м сп ирт ом , а цетон ом , у боль н ы хд иа бет ом . Ц ве т п реп а ра т а т а кж е м ож ет бы т ь п од ска зкой п ри его ид ен т иф ика ции. Ж елты е п реп а ра ты : п роизвод н ы е н итроф у ра н а , н евигра м он , н иф ед ип ин , н ит а зол, н о-ш п а , н иста т ин , м ерка п топ у рин , п ира зид ол, т ет ра циклин овы е а н т ибиотики, т а вегил, леворин , леп он екс, кот а рн ин , ку ра н т ил, рива н ол, п икрин ова я кислот а , ка лия бихром а т, ф у ра цилин … Ж елто-ора н ж евы е п реп а ра т ы : вит а м ин В2, ф олиева я кислота … Зелен ы е: ру т ин , бриллиа н това я зелен ь … Розовы й: вита м ин В12, розова т ы й – м а н ин ил. К ра сн ы е: п ервин иу м п а м оа т, ру бом ицин … К ра сн о-коричн евы е: риф а д ин , ф ерроцерон … Т ем н о-ф иолетовы й – ка лия п ерм а н га н а т . Ч ерн о-коричн евы й – иод . Необход им о от м етит ь , что кром е лека рст вен н ы х вещ еств в н екот оры е лека рст вен н ы е ф орм ы вход ят всп ом ога т ель н ы е вещ ест ва , кон серва н т ы , ст а билиза торы , которы е бы ва ю т д оба влен ы в зн а чит ель н ы хколичест ва х. Он и м огу т извлека т ь ся из биологического м а т ериа ла и п ри оцен ке резу ль т а т ов а н а лиза п ривод ит ь к ош ибочн ы м за клю чен иям . На п рим ер, в т а блетки м огу т вход ит ь гип с, ф осф а т ы , та ль к, ж ела тин , а га р, коллоид н ы е са лицила ты , м а н н итол и д р. За па х. Солод , м ен тол, м етилса лицила т, ка м ф ора , ксероф орм , н екоторы е вит а м ин ы , ф орм а лин , бен зин , керосин , а ром а т ические и хлорирова н н ы е у глевод ород ы , эф иры этилен гликоля обла д а ю т сп ециф ическим за п а хом . Фен олы , креозот им ею т ф ен оль н ы й за п а х; а цет он , хлороф орм – сла д кова ты й; а лиф а т ические сп ирт ы и ихэф иры – сп ирт овой, ф ру кт овы й за п а х. “Ра зд ра ж а ю щ ий ” за п а хха ра кт ерен д ля а зот н ой, солян ой, хлорн ой, у ксу сн ой, т рихлору ксу сн ой, м у ра вь ин ой кислот ; чесн очн ы й за п а х– д ля ф осф ора , т еллу ра , м ы ш ь яка . Харак теристик а биол огическ их объ ек тов. П робоп одгот овк а

17

На ст а д ии п робоп од гот овки обра зец очищ а ет ся от п рим есей и за грязн ен ий, которы е н е след у ет от бра сы ва т ь , т а к ка к он и м огу т бы ть ист очн иком д оп олн ит ель н ой ин ф орм а ции. Пробоп од гот овка – ст а д ия риска п от ерят ь а н а лизиру ем ое вещ ест во и объ ект . Поэтом у все п ред п рин им а ем ы е д ейст вия д олж н ы бы ть логически оп ра вд а н ы и н а п ра влен ы н а сохра н ен ие обра зцов, от обра н н ы хд ля а н а лиза , д ля д а ль н ейш его исслед ова н ия. М оч а – н а иболее ра сп ростра н ен н ы й объ ект исслед ова н ия н а лека рст вен н ы е токсичн ы е соед ин ен ия и н а иболее п рост ой биообъ ект д ля а н а лиза вслед ст вие н изкого сод ерж а н ия белковы хком п он ен т ов. Ва ж н ы м п ока за т елем м очи ка к биообь ект а являет ся рН, п оэт ом у ра бот а с н ей требу ет п ост оян н ого вн им а н ия к изм ен ен ию рН. Величин а рН м очи п овы ш а ется со врем ен ем из-за д ействия ба кт ериа ль н ой ф лоры , вы д еляю щ ей а м м иа к. Т а кое у величен ие м ож н о п ред от вра тит ь п у т ем хра н ен ия ее п ри п он иж ен н ы х тем п ера т у ра х (п ри а н а лизе очен ь ла биль н ы х вещ ест в – в за м орож ен н ом вид е). Необход им о у чит ы ва ть т а кж е, чт о п ри хра н ен ии м очи в холод иль н ике в н ей п роисход ит н овообра зова н ие эт а н ола д о кон цен тра ции 0,5 ‰ . При са ха рн ом д иа бет е н овообра зова н ие эт а н ола в м оче, хра н ящ ейся в холод иль н ике, д оход ит д о 1,1‰ . Вм ест е с тем след у ет п ом н ит ь , что п ри боль ш ом объ ем е возд у ш н ого слоя во ф ла кон е н а д кровь ю или м очой п роисход ит окислен ие а лкоголя и сн иж ен ие его сод ерж а н ия в объ ект е. Дейст вие ба кт ериа ль н ой ф лоры м ож н о за м ед лит ь д оба влен ием ф торид а н а т рия, борн ой кислот ы и д ру гихба кт ериоста т ическихп реп а ра тов, од н а ко н а д о у чит ы ва т ь их д а ль н ейш ее у ча ст ие в экст ра кции и обра зова н ии ф он а . М очу м ож н о лиоф илизирова т ь , п ред ва ритель н о п еревед я лету чие соед ин ен ия в соот вет ст ву ю щ ие соли. При а н а лизе м очи и д ру гих биологических объ ект ов н а сод ерж а н ие од у рм а н ива ю щ ихвещ ест в н еобход им о обра щ а т ь вн им а н ие н а п от ен циа ль н ы е ф он овы е соед ин ен ия ка к эн д оген н ого, т а к и экзоген н ого ха ра кт ера , п рису т ст вие кот оры хв а н а лизиру ем ом обра зце н еизбеж н о п ри лю бом сп особе п робоп од готовки. Из п от ен циа ль н ы х эн д оген н ы х соед ин ен ий н еобход им о отм ет ит ь п рису т ст вие н изком олеку лярн ы х п род у кт ов м ет а болизм а а м ин окислот и са ха ров (а м ин ы , м очевин а , ка рбон овы е кислоты , соли ка рбон овы х кислот и д р.), н еболь ш ихколичест в п еп т ид ов и са ха ров (в н орм е), ст ероид ов, п игм ен та у робилин а , окра ш ива ю щ его м очу в ж елты й цвет и д ру гихвещ ест в. К ф он овы м экзоген н ы м соед ин ен иям отн осят ся п род у кты биотра н сф орм а ции вещ ест в, п осту п ивш их с п ищ ей, и ра зличн ы х лека рст вен н ы х вещ ест в, исп оль зу ем ы х н а рком а н а м и д ля у силен ия н а ркотического эф ф ект а , сн ят ия син д ром а а бстин ен ции, см ягчен ия “вы ход а ” из состоян ия н а ркотического оп ь ян ен ия (ба рбит у ра т ы , п роизвод н ы е 1,4бен зод иа зеп ин а ), а т а кж е м ет а болит ы д ру гиххим ическихвещ ест в, п оп а вш ихв орга н изм (кра сит ели, а н тиоксид а н т ы , п род у кт ы т а ба коку рен ия и т.д .). На сод ерж а н ие эн д оген н ы хи экзоген н ы хком п он ен тов в п робе влияю т: возра ст , п ол и вес человека , оп ред еляю щ ие во м н огом ра сп ред елен ие яд а и его м ет а болизм ; 2) п а ра ллель н ое п рису т ствие д ру гих экзоген н ы х хим ических

18

вещ ест в (лека рст вен н ы е сред ст ва , коф еин , т а ба к, а лкоголь и д р.), изм ен яю щ их ф а рм а кокин етические и ф а рм а код ин а м ические п а ра м етры яд а ; 3) д иета – свобод н ы е ж ирн ы е кислот ы связы ва ю т ся с а ль бу м ин а м и и кон ку риру ю т н а эт а п е связы ва н ия яд а с белком ; 4) ген етический ф а кт ор – от д ель н ы е ин д ивид у у м ы обла д а ю т п овы ш ен н ой т олера н тн ост ь ю к д ейст вию н екоторы х хим ическиха ген тов; если д ля од н ихд оза введ ен н ого яд а является см ерт ель н ой, т о д ля д ру гихэт а ж е д оза от н осит ель н о безвред н а (или н е вы зы ва ет лет а ль н ого исход а ); 5) д ру гие ф а кторы , д ейст вие кот оры хн еобход им о п ред у см а т рива т ь , болезн ь (м ож ет д а т ь п овы ш ен н ы й ф он н екоторы х эн д оген н ы х соед ин ен ий), ра бот а с соед ин ен иям и бы т овой или ин д у ст риа ль н ой хим ии (п овы ш ен н ы й ф он эн д о- и экзоген н ы хвещ ест в). Пред а н а лит ическа я обра бот ка м очи м ож ет состоят ь из ра зличн ы х оп ера ций: п рям ое кон цен т рирова н ие (у п а рива н ие н екот орого количест ва м очи д о н еболь ш ого объ ем а н а вод ян ой ба н е либо роторн ом исп а рит еле), экстра кция ра ст ворит елям и, лиоф илиза ция, хром а т огра ф ическое ра зд елен ие или сорбция н а т верд ом сорбен те или ком бин а ция ра зличн ы хоп ера ций (кон цен трирова н ие – экст ра кция, лиоф илиза ция – экстра кция и д р.). Кровь. У ровен ь т оксическихвещ ест в и ихм ет а болитов у ж ивы хобъ ект ов и в крови т ру п а н еод ин а ков вслед ст вие биохим ическихизм ен ен ий. Сод ерж а н ие т оксического вещ ест ва в а рт ериа ль н ой или вен озн ой крови т а кж е бу д ет ра зличн ы м . Да ж е п олож ен ие тела у ж ивого п а циен т а – ст оя, сид я или леж а – влияет н а биохим ический сост а в п робы , т а к ка к в эт ом слу ча е м ен яет ся сод ерж а н ие белков в крови, чт о особен н о ва ж н о д ля т оксическихвещ ест в, в зн а чит ель н ой ст еп ен и связы ва ю щ ихся с белка м и. Обра бот ке экст ра кцией м ож ет бы т ь п од вергн у т а цель н а я кровь , п ла зм а или сы ворот ка . Е сли д ля п ред от вра щ ен ия сверты ва н ия крови исп оль зова лись а н т икоа гу лян т ы , то н еобход им о у читы ва т ь , чт о геп а рин вы т есн яет ж ирн ы е кислот ы из м ест ихсвязы ва н ия с а ль бу м ин ом . Э то влияет, с од н ой сторон ы , н а у величен ие связы ва н ия токсическихвещ ест в с белка м и, с д ру гой – н а п ереход ж ирн ы хкислот в орга н ический ра створит ель п ри экст ра кции. Для у м ен ь ш ен ия эн зим а тической а кт ивн ост и кровь реком ен д у ет ся хра н ить в холод иль н ике в за м орож ен н ом вид е. Посколь ку ст еклян н ы е ст ен ки п осу д ы сод ерж а т боль ш ое количест во свобод н ы хгид роксиль н ы хгру п п , возм ож н о связы ва н ие п олярн ы х т оксических соед ин ен ий ст ен ка м и п осу д ы за счет обра зова н ия вод ород н ой связи. Э то явлен ие особен н о ва ж н о у чит ы ва ть п ри а н а лизе след овы хколичест в вещ ест ва . Пред ва рит ель н ое силилирова н ие ст ен ок п осу д ы п озволяет свести это явлен ие к м ин им у м у . Аль т ерн а т ивой являет ся исп оль зова н ие п осу д ы из п олип роп илен а или т еф лон а , хот я п ри эт ом н еобход им о счит а т ь ся с за грязн ен ием п робы м он ом ера м и см олы . Из эн д оген н ы хсоед ин ен ий п ом им о ж ирн ы хкислот в экст ра кт а хиз крови вст реча ю т ся ра зличн ы е ст ероид н ы е горм он ы (т естост ерон и д р.), холестерин , кот оры е в крови н а ход ятся в связа н н ом состоян ии с п ротеин а м и п ла зм ы . При хра н ен ии крови более су т ок п ри ком н а тн ой т ем п ера т у ре п роисход ит н овообра зова н ие а лкоголя, д остига я кон цен тра ции 1‰ .

19

С люн а является п род у кт ом секреции ж елез ротовой п олост и. От обра н н у ю п робу цен т риф у гиру ю т и д ля хра н ен ия за м ора ж ива ю т , чт обы за м ед лить а кт ивн ост ь ф ерм ен тов. Х ра н ит ь лу чш е всего слю н у в склян ка хиз т еф лон а или п роп илен а , чт обы избеж а т ь п оглощ ен ия след овы х количест в а н а лизиру ем ого вещ ест ва ст ен ка м и стеклян н ой п осу д ы . У ст а н овлен о, что н еион изирова н н ы е ф орм ы т оксического вещ ест ва , н а ход ящ иеся в вод н ом ра ст воре п ла зм ы , п а ссивн о д иф ф у н д иру ю т в слю н у , т а к что су щ ест ву ет п рям а я за висим ость м еж д у кон цен т ра цией а н а лизиру ем ого вещ ест ва в слю н е и его кон цен т ра цией в крови. В олосы п ред ст а вляю т отн осит ель н о гом оген н ы й (с т очки зрен ия а грега т н ого сост оян ия) биологический су бстра т . Я вляясь легкод ост у п н ы м д ля от бора , он и п ред ст а вляю т зн а чит ель н ы й ин т ерес в ка чест ве объ ект а п ри п ровед ен ии хим ико-т оксикологического а н а лиза ка к н а н еорга н ические, т а к и н а орга н ические вещ ест ва . При а н а лизе волос н а ркот ики м огу т бы ть обн а ру ж ен ы в от д а лен н ы е сроки п осле окон ча н ия ихп рием а и в техслу ча ях, когд а а н а лиз биож ид костей д а ет от рица тель н ы й резу ль т а т . Исп оль зова н ие волос в ка чест ве объ ект а исслед ова н ия п озволяет п рослед ит ь д ин а м ику п ост у п лен ия н а ркот ического вещ ест ва в орга н изм человека . Ан а лиз волос д лин ой 6-8 см (6-8 м есяцев) п озволяет су д ит ь о ст еп ен и н а ркотической за висим ости. По сра вн ен ию с биож ид костям и, исслед ова н ие т верд ы х кож н ы х обра зова н ий им еет целы й ряд отличит ель н ы х особен н ост ей, кот оры е н а кла д ы ва ю т отп еча т ок н а все эт а п ы п ровед ен ия ра бот. Исслед ова н ие волос вклю ча ет в себя д ве п рин цип иа ль н о ва ж н ы е с т очки зрен ия ин терп рет а ции резу ль т а т ов ст а д ии: п ред ва ритель н ое исслед ова н ие п оверхн ости волос н а п рису т ст вие а н а лизиру ем ы х вещ ест в и п ровед ен ие очист ки у ка за н н ой п оверхн ости от м еш а ю щ их д а ль н ейш ем у исслед ова н ию вещ ест в с обяза тель н ой п роверкой эф ф ект ивн ости д а н н ой оп ера ции. К осн овн ы м м етод а м ра зру ш ен ия волос от н осят ся след у ю щ ие: экст ра кция орга н ическим и ра ст ворит елям и; кислот н ы й или щ елочн ой гид ролиз; эн зим а тическое ра зру ш ен ие; экст ра кция орга н ическим и ра ст ворит елям и п ри сверхкритических у словиях; т ерм ическое ра злож ен ие объ ектов. Ж е лч ь являет ся п род у кт ом секрет орн ой д еят ель н ости п ечен и, ж елчн ого п у зы ря и д вен а д ца т ип ерстн ой киш ки. Э та ж ид кост ь сод ерж ит боль ш ое количест во вод ы , эн д оген н ы х вещ ест в, п од обн ы х т ем , кот оры е н а ход ятся в крови, п ла зм е и сы ворот ке, а т а кж е ж елчн ы е кислот ы и п игм ен т ы . Ж елчь ра злича ет ся п о величин е рН (в п ред ела х6,7-8,3), чт о за ст а вляет кон т ролирова т ь рН в ход е п од готовки к экст ра кции, а п ри н еобход им ости исп оль зова ть п од ход ящ ий бу ф ер. Реком ен д у ет ся п робу т а кж е цен триф у гирова т ь п ри н изких скоростях (д ля у д а лен ия холест ерин а ) и оса д ит ь белки д оба влен ием см еси хлороф орм – м ет а н ол (2:1) или хлороф орм – изоп роп а н ол (9:2). П е ч е н ь п ред ст а вляет собой цен т ра ль н ы й орга н хим ического гом еоста за . В п ечен и н а ход ит ся боль ш ое ра зн ообра зие экзоген н ы хи эн д оген н ы хвещ ест в: п род у кт ы белкового, у глевод н ого, ж ирового обм ен ов, п род у кт ы биотра н сф орм а ции экзоген н ы х, в том числе токсических вещ ест в. С т очки

20

зрен ия п рису т ст вия эн д оген н ы хи экзоген н ы хвещ ест в в экст ра кт е из п ечен и эт от объ ект являет ся са м ы м н еу д обн ы м вслед ст вие ихболь ш ого ра зн ообра зия. Да ж е са м а я д литель н а я и м н огоэт а п н а я экст ра кция, н а п рим ер, кислы х лека рст вен н ы х сред ств д а ет в хлороф орм н ом экст ра кт е д о вось м и ра зн ообра зн ы хэн д оген н ы хсоед ин ен ий. ЭК СТ РА К Ц И Я К А К М Е Т О Д И ЗО ЛИ РО В А Н И Я Н А РО Т И ЧЕ СК И Х И О Д У РМ А Н И В А Ю Щ И Х СРЕ Д СТ В О сновны еп онятия эк страк ц ии В хим ико-т оксикологическом а н а лизе м етод экст ра кции ш ироко исп оль зу ет ся д ля изолирова н ия т оксических вещ ест в из объ ект ов биологического п роисхож д ен ия, д ля очист ки вы т яж ек из биологического м а т ериа ла от п рим есей, д ля вы д елен ия т оксическихвещ еств из п ред ва ритель н о очищ ен н ы х вы т яж ек, д ля кон цен т рирова н ия исслед у ем ы х вещ ест в, н а ход ящ ихся в силь н о ра зба влен н ы хра ст вора х. Э кст ра кция – п роцесс извлечен ия ра ст ворит елям и соот вет ст ву ю щ их вещ ест в из ра зличн ы х объ ект ов. Объ ект ы , из кот оры х извлека ю т соот вет ст ву ю щ ие соед ин ен ия, м огу т бы т ь т верд ы м и вещ ест ва м и или ж ид костям и. Поэтом у п роцессы изолирова н ия п од ра зд еляю т н а экст ра кцию в сист ем е т верд ое т ело – ж ид кост ь (т верд ож ид кост н а я экст ра кция) и н а экст ра кцию в сист ем е ж ид кост ь -ж ид кост ь (ж ид кост н а я экст ра кция). Э кст ра ге н т – орга н ический ра ст воритель , в ин д ивид у а ль н ом состоян ии или сод ерж а щ ий ка кие-либо реа ген т ы , извлека ю щ ий (экст ра гиру ю щ ий) д а н н ое вещ ест во из вод н ой ф а зы . В хим ико-токсикологическом а н а лизе м ет од т верд оф а зн ой экст ра кции п рим ен яет ся д ля изолирова н ия исслед у ем ы х вещ ест в из орга н ов т ру п ов, ра ст ен ий, п очвы и д ру гихобъ ект ов. При экст ра кции вещ еств в сист ем е т верд ое т ело–ж ид кост ь в ка чест ве экст ра ген тов п рим ен яю т орга н ические ра ст ворит ели. Для д а н н ой систем ы в ряд е слу ча ев исп оль зу ю т вы щ ела чива н ие. В ы ще ла ч ива н ие – извлечен ие ком п он ен т ов из т верд ы х т ел с п ом ощ ь ю вод ы . Ж идкост н а я экст ра кция – п роцесс ра сп ред елен ия ра ст ворен н ого вещ ест ва м еж д у д ву м я н есм еш ива ю щ им ися ж ид ким и ф а за м и, од н ой из кот оры хв боль ш ин ст ве слу ча ев является вод а , а второй – н есм еш ива ю щ ийся с вод ой орга н ический ра ст ворит ель . Э кст ра кцион н ы й ре а ге н т – сост а вн а я ча ст ь экст ра ген т а , вза им од ейст ву ю щ а я с извлека ем ы м вещ ест вом с обра зова н ием экст ра гиру ю щ егося соед ин ен ия. Э кст ра кт – отд елен н а я ж ид ка я орга н ическа я ф а за , сод ерж а щ а я экст ра гирова н н ое из вод н ой ф а зы вещ ест во. Р е экст ра кция – п роцесс обра тн ого извлечен ия вещ ест ва из экст ра кт а в вод н у ю ф а зу .

21

Р е экст ра ге н т – ра ст вор реа ген т а , исп оль зу ем ы й д ля извлечен ия вещ ест ва из экст ра кт а . Р е экст ра кт - отд елен н а я вод н а я ф а за , сод ерж а щ а я вещ ест во, извлечен н ое из экст ра кт а . Р а з ба вит е ль – отн осит ель н о ин ерт н ы й орга н ический ра ст ворит ель , п риба вляем ы й к экст ра ген т у д ля у лу чш ен ия его ф изических или экст ра кцион н ы хсвойст в. П ром ы вка – п роцесс ча стичн ого или п олн ого у д а лен ия п рим есей из экст ра кт а или реэкст ра кт а . П е риодич е ска я экст ра кция – экст ра кция вещ ест ва из од н ой и той ж е ф а зы , п ровод им а я от д ель н ы м и п орциям и экстра ген т а . Н е пре ры вн а я экст ра кция – экстра кция, п ровод им а я п ри н еп реры вн ом п ерем еш ива н ии од н ой ж ид кой ф а зы (д ру га я ж ид ка я ф а за ост а ет ся н еп од виж н ой). П рот ивот оч н а я экст ра кция – экст ра кция, осу щ ест вляем а я п ри вст речн ом д виж ен ии обеихф а з. В ла бора т орн ы х у словиях экст ра кцию обы чн о п ровод ят с п ом ощ ь ю д елит ель н ой ворон ки. В ворон ку п ом ещ а ю т исслед у ем ы й ра ст вор, сод ерж а щ ий ра ст ворен н ое вещ ест во, п од леж а щ ее экст ра гирова н ию , и н е см еш ива ю щ ийся с вод ой орга н ический ра ст ворит ель , кот оры м извлека ется экст ра гиру ем ое вещ ест во из вод н ого ра ст вора . Ворон ка эн ергичн о вст ряхива ет ся (обы чн о 2-5 м ин ). При эт ом обе ж ид кие ф а зы д исп ергиру ю т ся д ру г в д ру га , обра зу я ка п ли ра зличн ого ра зм ера . Э кстра гиру ем ое вещ ество через гра н ицу ра зд ела вод н ой и орга н ической ф а з п ереход ит из вод н ой ф а зы в орга н ическу ю д о т ехп ор, п ока в сист ем е н е н а ст у п ит м еж ф а зн ое ра вн овесие, п ри кот ором д ост ига ю тся ра вн овесн ы е кон цен т ра ции экст ра гиру ем ого вещ ест ва в вод н ой и в орга н ической ф а за х. При д остиж ен ии м еж ф а зн ого ра вн овесия скорость п ереход а ра ст ворен н ого вещ ест ва из вод н ой ф а зы в орга н ическу ю ст а н овит ся ра вн ой скорост и п ереход а того ж е вещ ест ва из орга н ической ф а зы в вод н у ю , т .е. осу щ ест вляется состоян ие д ин а м ического ра вн овесия. После п рекра щ ен ия вст ряхива н ия обе ж ид кие ф а зы ра ссла ива ю т ся, п ричем т ем бы стрее, чем боль ш е ра зн ица в п лотн ости вод ы (вод н ого ра ст вора ) и п рим ен яем ого орга н ического ра створит еля, п лот н ость которого м ож ет бы т ь ка к вы ш е, т а к и н иж е п лот н ости вод ы . Тре бова н ия , пре дъя вля е м ы е к орга н ич е ским ра ст ворит е ля м • Орга н ический ра ст ворит ель д олж ен обла д а т ь сп особн ость ю эф ф ект ивн о и п о возм ож н ости избира т ель н о извлека т ь экст ра гиру ем ое вещ ест во из исслед у ем ого ра ст вора . • Ра ст ворит ель д олж ен м а ло ра ст ворять ся в вод е и м а ло ра ст ворят ь вод у , н е гид ролизова т ь ся. Плотн ост ь орга н ических ра ст ворит елей п о возм ож н ости д олж н а отлича т ь ся от п лот н ости вод ы . • Ра ст ворит ель д олж ен бы т ь н елет у чим и д оста т очн о вы сококип ящ им (т ем п ера т у ра кип ен ия п ри а т м осф ерн ом д а влен ии д олж н а бы ть вы ш е 50оС).

22

• Орга н ические ра ст ворит ели д олж н ы бы т ь н еогн еоп а сн ы м и, н ет оксичн ы м и и д еш евы м и. Ра ст ворители, которы е обла д а ли бы всем и этим и свойства м и в п олн ой м ере, вст реча ю т ся ред ко. В хим ико-токсикологическом а н а лизе н а иболее ча сто исп оль зу ю т ся след у ю щ ие ра ст ворит ели: д иэт иловы й эф ир, хлороф орм , бен зол, н -а м ила цета т , эт ила цет а т, н -бу т иловы й, изоа м иловы й, изобу т иловы й сп ирты , н -гекса н , н -геп т а н . При исп оль зова н ии м етод а экст ра кции от су т ст ву ет хим ическое п ревра щ ен ие ра зд еляем ы х вещ ест в и н е обра зу ю т ся п обочн ы е п род у кт ы . Вещ ест ва , вы д елен н ы е с п ом ощ ь ю м ет од а экст ра кции, ка к п ра вило, н е сод ерж а т п рим есей, связа н н ы х с п роцесса м и а д сорбции и окклю зии. Э тот м ет од м ож ет исп оль зова т ь ся д ля ра зд елен ия терм ола биль н ы х вещ ест в. Прим ен ен ие м етод а экстра кции д ля кон цен т рирова н ия п озволяет п еревод ить вещ ест ва из силь н о ра зба влен н ы хра ст воров в н еболь ш ой объ ем орга н ического ра ст ворит еля. О сновны ек ол ичест венны ех арак т еристик и п роц есса эк страк ц ии Для ра счет а количест ва вещ ест ва , кот орое экст ра гиру ет ся орга н ическим и ра ст ворит елям и, н еобход им о зн а т ь кон ста н т у и коэф ф ициен т ра сп ред елен ия, ст еп ен ь экстра кции. Кон ст а н т а ра спре де ле н ия ве ще ст ва – величин а , вы ра ж а ю щ а я от н ош ен ие кон цен тра ций ра сп ред еляем ого вещ ест ва , н а ход ящ егося в вод н ой и орга н ической ф а за х(п осле н а ст у п лен ия ра вн овесия) в од н ой и той ж е ф орм е.

Р=

[ А ] орг [ А ] водн

,

гд е Р – кон ст а н т а ра сп ред елен ия; [А]орг – кон цен тра ция вещ ест ва в ф а зе орга н ического ра створит еля, м оль /л; [А]вод н – кон цен тра ция вещ ест ва вод н ой ф а зе м оль /л. Величин а кон ст а н ты ра сп ред елен ия за висит от п рирод ы ра сп ред еляем ого вещ ест ва , соста ва и свойст в п рим ен яем ого экстра ген т а , т ем п ера т у ры , п ри кот орой п ровод ит ся экст ра кция. Э та кон ст а н т а н е за висит от ра вн овесн ы х кон цен тра ций экст ра гиру ем ого вещ ест ва и объ ем ов вод н ой и н евод н ой ф а з. Коэффицие н т ра спре де ле н ия – от н ош ен ие су м м а рн ой а н а литической кон цен тра ции вещ ества в ф а зе орга н ического ра ст ворит еля к су м м а рн ой а н а литической кон цен тра ции этого вещ ест ва в вод н ой ф а зе (без у чет а т ого, в ка кой ф орм е н а ход ит ся вещ ест во в ка ж д ой ф а зе):

D=

с орг с водн

,

гд е D – коэф ф ициен т ра сп ред елен ия; сорг – су м м а рн а я а н а лит ическа я кон цен тра ция вещ ест ва в ф а зе орга н ического ра ст ворителя, м оль /л; свод н – су м м а рн а я а н а литическа я кон цен тра ция вещ ест ва в вод н ой ф а зе, м оль /л.

23

Cт е пе н ь экст ра кции – отн ош ен ие количест ва экст ра гирова н н ого вещ ест ва к общ ем у (н а ча ль н ом у ) количест ву эт ого вещ ест ва в вод н ом ра ст воре:

R=

nорг nорг + nводн

⋅ 100%,

гд е R – cт еп ен ь экст ра кции вещ ест ва , %; nорг – количест во вещ ест ва , которое экст ра гирова лось орга н ическим ра ст ворит елем ; nорг + nвод н – общ ее (н а ча ль н ое) количест во вещ ест ва в вод н ом ра ст воре. В л ияниеразл ичны х ф ак торов на п роц ессэк ст рак ц ии На экст ра кцию вещ ест в орга н ическим и ра ст ворит елям и ока зы ва ю т влиян ие ра зличн ы е ф а кт оры : п рирод а экст ра гиру ем ого вещ ест ва , п рирод а экст ра ген т а , число экст ра кций, объ ем экст ра ген т а , т ем п ера т у ра , рН сред ы , п рису т ст вие элект ролитов в вод н ы хра ст вора х, скорост ь взба лты ва н ия и д р.). Число экст ра кций и объе м экст ра ге н т а . Ч ем боль ш е число экст ра кций, т ем вы ш е ст еп ен ь извлечен ия экст ра гиру ем ого вещ ест ва . Ч ем боль ш е объ ем орга н ической ф а зы экст ра ген т а , т.е. чем вы ш е от н ош ен ие Vорг / Vвод н , т ем боль ш е ст еп ен ь извлечен ия экстра гиру ем ого вещ ест ва . Од н а ко у величен ие числа экст ра кций силь н ее влияет н а ст еп ен ь извлечен ия экст ра гиру ем ого вещ ест ва , чем у величен ие объ ем а экст ра ген т а в т о ж е число ра з, п оэтом у од н у и т у ж е ст еп ен ь извлечен ия м ож н о п олу чит ь , у м ен ь ш а я объ ем экст ра ген т а Vорг, н о у величива я число экст ра кций n. Обы чн о исп оль зу ю т д ву кра тн ы й объ ем экст ра ген т а п о сра вн ен ию с вод н ой ф а зой и п рим ен яю т 2-6 п ослед ова т ель н ы хэкстра кций. Влиян ие рН сре ды н а экст ра кцию . С п овы ш ен ием рН (т .е. с у м ен ь ш ен ием кон цен тра ции вод ород н ы х ион ов в вод н ом ра ст воре) у величива ет ся д иссоциа ция кислот ы в ра ст воре, чт о п ривод ит к у м ен ь ш ен ию ее н ед иссоциирова н н ы х м олеку л. В резу ль т а т е п он иж а ет ся экст ра гиру ем ост ь сла бой кислоты орга н ическим и ра ст ворителям и. При п овы ш ен ии кон цен тра ции вод ород н ы хион ов (т.е. с п он иж ен ием рН) в вод н ом ра ст воре у величива ет ся число н ед иссоциирова н н ы х м олеку л, а след ова т ель н о, возра ст а ет экст ра гиру ем ост ь вещ ест в кислот н ого ха ра кт ера орга н ическим и ра створителям и. При п риба влен ии кислот к орга н ическим осн ова н иям он и п ереход ят в соли. При этом у величива ет ся количест во ион ов и у м ен ь ш а ет ся количество н ед иссоциирова н н ы х м олеку л. Вслед ст вие эт ого у м ен ь ш а ет ся ст еп ен ь экст ра кции эт их вещ ест в орга н ическим и ра ст ворит елям и. От п риба влен ия щ елочей к солям орга н ических осн ова н ий у м ен ь ш а ет ся количест во ион ов и у величива ется количество н ед иссоциирова н н ы х м олеку л эт их осн ова н ий. В резу ль т а т е эт ого, в щ елочн ой сред е у величива ется ст еп ен ь экст ра кции орга н ическихосн ова н ий. На иболь ш ие количест ва а м ф от ерн ы х соед ин ен ий экст ра гиру ю т ся п ри зн а чен ии рН, соот вет ст ву ю щ ем изоэлект рической точке эт ихвещ ест в.

24

Влиян ие т е м пе ра т уры н а экст ра кцию . Изм ен ен ие т ем п ера т у ры влияет н а кон ст а н т у ра сп ред елен ия экст ра гиру ем ого вещ ест ва . Э т о объ ясн яет ся т ем , чт о п ри изм ен ен ии т ем п ера т у ры изм ен яет ся ра ст ворим ост ь экст ра гиру ем ы х вещ ест в в ка ж д ой ф а зе, а т а кж е изм ен яется вза им н а я ра ст ворим ост ь орга н ической и вод н ой ф а з. Причем с изм ен ен ием т ем п ера т у ры ра ст ворим ость вещ ест ва в ка ж д ой ф а зе изм ен яет ся н еод ин а ково. При изм ен ен ии т ем п ера т у ры м ож ет изм ен ят ь ся д иссоциа ция и а ссоциа ция вещ ества в соот ветст ву ю щ ей ф а зе. Поэтом у п ри изм ен ен ии т ем п ера т у ры изм ен яет ся гид ра т а ция (соль ва та ция) и экст ра гиру ем ост ь хим ическихсоед ин ен ий. Влиян ие эле кт ролит ов н а экст ра кцию . Пон иж ен ие ра ст ворим ости вещ ест в в вод н ы х ра ст вора х п од влиян ием элект ролит ов н а зы ва ет ся вы са лива н ием , а п овы ш ен ие ра ст ворим ост и – вса лива н ием . Вы са лива н ие являет ся ф а кт ором , п он иж а ю щ им ра ст ворим ост ь вещ ест в в вод е и п овы ш а ю щ им их экст ра гиру ем ост ь орга н ическим и ра ст ворителям и из вод н ы хра ст воров. Т вердоф азная эк ст рак ц ия Л ека рст вен н ы е и н а ркот ические сред ства , п ост у п а ю щ ие н а исслед ова н ие, кра йн е ред ко являю т ся ин д ивид у а ль н ы м и соед ин ен иям и. Неред ко объ ект а м и исслед ова н ия являю т ся п ост у п а ю щ ие из н еза кон н ого оборот а син т етические н а ркотические сред ст ва , которы е п роизвод ят ся в п од п оль н ы хла бора т ориях. В п од а вляю щ ем боль ш ин ст ве слу ча ев он и им ею т в своем сост а ве ра зличн ы е н а п олн ит ели и д оба вки (са ха р, соли ж ирн ы хкислот, кра хм а л, сод а , т а ль к и д р.), либо сод ерж а т за грязн ен ия или п ром еж у т очн ы е и п обочн ы е п род у кт ы син т еза , сод ерж а н ие ж е н а ркот ически а кт ивн ого ком п он ен та в т а кихп реп а ра т а хочен ь н изкое. При эт ом ра зд елен ие, вы д елен ие, кон цен трирова н ие и очист ка целевы х ком п он ен т ов тра д ицион н ы м и м ет од а м и (н а п рим ер, ж ид кост н ой экст ра кцией) н еэф ф ект ивн ы , а ин огд а п рост о н евозм ож н ы . Реш ен ие та кого род а п роблем возм ож н о п ри п рим ен ен ии н а ст а д ии п робоп од гот овки м ет од а т верд оф а зн ой экст ра кции, п озволяю щ его осу щ ест влят ь од н оврем ен н ое ра зд елен ие, вы д елен ие и кон цен трирова н ие целевы х ком п он ен тов из биологических ж ид костей и ихэкст ра кт ов, лека рст вен н ы хи н а тивн ы хн а ркот ическихсред ств. Т а кой п од ход д а ет возм ож н ост ь п олу чен ия вещ ест в в чист ом вид е, что в д а ль н ейш ем п озволяет п ровод ит ь ид ен тиф ика цию м ет од а м и ИК -, У Ф– сп ект роскоп ии, Т СХ , Г Ж , ВЭ Ж Х , м етод ом хром а т о-м а сс-сп ект ром ет рии. В осн ове м етод а тверд оф а зн ой экст ра кции леж ит п рин цип колон очн ой хром а тогра ф ии, кот оры й осн ова н н а сп ециф ическом вза им од ейст вии вы д еляем ого из биом а т ериа ла ком п он ен т а с сорбен том , н а ход ящ им ся в н еболь ш ом п а трон е. Па трон –ка рт рид ж им еет п олиэтилен ову ю оболочку , вн у т ри кот орой н а ход ит ся сорбен т, у п а кова н н ы й м еж д у д ву м я п ористы м и ф иль т ра м и. Па трон ы м огу т соед ин ят ь ся д ру г с д ру гом , п ред ст а вляя более

25

ш ирокие возм ож н ост и д ля их исп оль зова н ия. Ч а щ е всего д ля за п олн ен ия п а т рон ов п рим ен яю т сорбен ты н а осн ове силика геля и хим ически м од иф ицирова н н ого силика геля. Для м од иф ика ции силика геля исп оль зу ю т ся вещ ест ва , сод ерж а щ ие ра зличн ы е ф у н кцион а ль н ы е гру п п ы (н итриль н ы е, д иоль н ы е, а м ин о-, ка рбокси- и су ль ф огру п п ы ), а т а кж е а лиф а тические (С 1 –С 18) и а ром а тические (ф ен иль н ы е) гру п п ы . Вы бор соот вет ст ву ю щ его т ип а п а трон а связа н со свойст ва м и оп ред еляем ого вещ ест ва и осу щ ест вляет ся п о т ип у п од обия. Ч а ст о в п ра кт ике Х Т А исп оль зу ю т ся от ечест вен н ы е п а т рон ы ф ирм ы “Диа п а к”, за п олн ен н ы е н ем од иф ицирова н н ы м силика гелем (Диа п а к Силика гель ) и силика гелем , м од иф ицирова н н ы м гекса д ециль н ы м и гру п п а м и С 16 (Диа п а к С 16). При исп оль зова н ии п а т рон ов Диа п а к д ля боль ш ин ст ва вещ ест в п ровод ят след у ю щ ие оп ера ции. 1. Акт ива ция – п ривед ен ие п а трон а в ра бочее состоян ие п у т ем п ром ы вки эт иловы м или м етиловы м сп иртом (2-10 м л). Скорост ь п роп у ска н ия 2,5 м л/м ин . 2. К он д ицион ирова н ие – п роп у ска н ие бу ф ерн ого ра ст вора (а цета т н ого или а м м иа чн ого) в за висим ости от исслед у ем ы х вещ ест в. Объ ем бу ф ерн ого ра ст вора – 10 м л. Скорост ь п роп у ска н ия 2,5 м л/м ин . 3. Сорбция – п роп у ска н ие исслед у ем ого ра ст вора через п а т рон . Объ ем п робы обы чн о 100 м л. Скорост ь п роп у ска н ия 2,5 м л/м ин . 4. Десорбция – у д а лен ие исслед у ем ого вещ ест ва с сорбен т а с п ом ощ ь ю возд у ха ш п рицем или ва ку у м н ы м н а сосом . 5. Э лю ирова н ие обра зца осу щ ест вляется реа ген том , кот оры й п рим ен ялся н а ст а д ии а ктива ции. Объ ем элю ен т а – 50-100 м л. Вы сока я эф ф ект ивн ост ь вы п у ска ем ы хп а трон ов п озволяет исп оль зова т ь их д ля п робоп од гот овки ш ирокого кру га объ ект ов – от лека рст вен н ы х п реп а ра тов слож н ого сост а ва д о “у личн ы х н а ркот иков” и биологических ж ид костей (м оча , кровь , сы ворот ка и т .д .), а та кж е экст ра кт ов биологических ж ид костей. Ж идк ост ь-жидк ост ная эк страк ц ия Ж ид кост ь – ж ид кост н а я экстра кция ка к м ет од изолирова н ия являет ся н а сегод н яш н ий д ен ь са м ы м ра сп ростра н ен н ы м сп особом вы д елен ия н а ркотическихвещ еств из биообъ ект ов. Э кст ра кция ве ще ст в кислого и осн овн ого ха ра кт е ра . 50 м л м очи в д елит ель н ой ворон ке н а 200 м л п од кисляю т 2 М солян ой кислот ой д о рН 1-2 п о у н иверса ль н ом у ин д ика т ору . Доба вляю т 50 м л д иэтилового эф ира и п ровод ят экст ра кцию в т ечен ие 3-5 м ин у т (п ерем еш ива я ф а зы , без эн ергичн ого вст ряхива н ия). После ра зд елен ия ф а з н иж н ю ю вод н у ю ф а зу слива ю т в д ру гу ю д елит ель н у ю ворон ку , сод ерж а щ у ю 50 м л д иэтилового эф ира , а орга н ическу ю ф а зу ф иль т ру ю т через безвод н ы й су ль ф а т н а трия в су хой ст а ка н . Повторн у ю

26

экст ра кцию из вод н ой ф а зы п ровод ят а н а логичн о. Э ф ирн ое извлечен ие ф иль т ру ю т через безвод н ы й Na2SO4 и обе эф ирн ы е вы т яж ки объ ед ин яю т (экст ра кт I). Вод н у ю ф а зу сохра н яю т, п ерен осят в д елит ель н у ю ворон ку , д овод ят рН д о 9-10 NaOH. За тем п ровод ят экстра кцию 50 м л хлороф орм а в т ечен ие 3-5 м ин у т . За т ем н иж н ю ю орга н ическу ю ф а зу слива ю т, ф иль т ру я через безвод н ы й су ль ф а т н а т рия в су хой ста ка н . Вод н у ю ф а зу п овт орн о экст ра гиру ю т 50 м л хлороф орм а . Орга н ические ф а зы объ ед ин яю т (экстра кт 2). Вод н у ю ф а зу от бра сы ва ю т. Орга н ические ра ст ворит ели из экст ра кт ов 1 и 2 у д а ляю т в исп а рит ель н ы х ча ш ка хв т оке т еп лого возд у ха . С у хие ост а т ки экст ра кт ов 1 и 2 ра ст воряю т в 1-2 м л хлороф орм а или д иэт илового эф ира и п ерен осят в м а ркирова н н ы е п робирки с п ритерты м и п робка м и. Э кстра кт 1 сод ерж ит вещ ест ва кислого, н ейтра ль н ого и сла боосн овн ого ха ра кт ера ), экст ра кт 2 – вещ ест ва осн овн ого ха ра кт ера . Да лее п ровод ят а н а лиз экст ра кт ов. Некот оры е вещ ест ва м ет а болически связа н ы с белком или кон ъ ю гирова н ы (т .е. биохим ически п еревед ен ы в вод ора ст ворим ы е п роизвод н ы е, н а п рим ер, с глю ку рон овой кислотой). Поэт ом у биож ид кост ь п еред экстра кцией н еобход им о гид ролизова т ь д ля т ого, чт обы ра зру ш ит ь кон ъ ю га н т п еред изолирова н ием . Т О Н К О СЛО Й Н А Я ХРО М А Т О ГРА Ф И Я В А Н А ЛИ ЗЕ В Е Щ Е СТ В , В ЫЗЫВ А Ю Щ И Х О Д У РМ А Н И В А Н И Е П ринц ип м ет ода М ет од тон кослойн ой хром а тогра ф ии (Т С Х ) являет ся од н им из осн овн ы х м ет од ов исслед ова н ия вещ ест в од у рм а н ива ю щ его д ейст вия. М етод т он кослойн ой хром а т огра ф ии п рим ен яется п ри п ровед ен ии скрин ин говы х исслед ова н ий обра зца н еизвест н ой п рирод ы и п од т верж д а ю щ их (ча ст н ы х) исслед ова н ий н а кон кретн ое сред ст во или вещ ест во, п од т верж д а ю щ их или от рица ю щ ихего п рису т ст вие в исслед у ем ом обра зце. М ет од Т СХ от н осится к п лоскост н ы м вид а м хром а тогра ф ии. Х ром а тогра ф ическое ра зд елен ие обу словлен о п ерен осом ком п он ен тов п од виж н ой ф а зы вд оль слоя н еп од виж н ой ф а зы с ра зличн ы м и скоростям и в соот вет ст вии с коэф ф ициен т а м и ра сп ред елен ия ра зд еляем ы х ком п он ен т ов м еж д у д ву м я ф а за м и. Cорбе н т ы . В тон кослойн ой хром а т огра ф ии обы чн о исп оль зу ю т за креп лен н ы е слои сорбен т а н а м ет а ллической, ст еклян н ой или п ла стиковой п од лож ке. В ка честве сорбен т а п рим ен яю т ся силика гели ра зличн ого зерн ен ия, обра бота н н ы е или н еобра бот а н н ы е реа кт ива м и д ля осу щ ест влен ия ка к п рям ого, т а к и обра щ ен н оф а зн ого ва риа н т ов хром а т огра ф ии, а т а кж е

27

целлю лозу , окись а лю м ин ия, кизель гель , сеф а д екс, п олиа м ид и н екоторы е д ру гие м а т ериа лы . Ин огд а к сорбен т а м д оба вляю т ф лу оресцен тн ы й ин д ика тор. Для за креп лен ия а д сорбцион н ого слоя п рим ен яю т ся гип с, кра хм а л, а га р-а га ри д ру гие связу ю щ ие м а т ериа лы . В а н а лизе ча сто исп оль зу ю т гот овы е п ла стин ки “Силу ф ол” и “С орбф ил”. В ка чест ве п од лож ки зд есь исп оль зу ет ся а лю м ин иева я ф оль га или п олим ерн ы е м а т ериа лы , сорбен т – силика гель . Обы чн о в п ра кт ике Х Т А исп оль зу ю т п ла стин ы ра зм ером 5х5, 10х10 или 20х20 см . Х ром а т огра ф ирова н ие вещ ест в п ровод ят в герм ет ически за кры т ы х ка м ера х. При этом н а иболее ча сто из всехвозм ож н ы хва риа н тов исп оль зу ет ся восход ящ ее и горизон т а ль н ое элю ирова н ие хром а тогра ф ической систем ы ра ст ворит елей. В целом ряд е слу ча ев хорош ие резу ль т а т ы д а ет м н огом ерн а я и кру гова я хром а тогра ф ия. М е т одика ТС Х за клю ча ется в след у ю щ ем : н а лин ию ст а рт а осторож н о н а н осят а н а лизиру ем ы е ра ст воры , чт обы н е п овред ить п оверхн ост ь слоя сорбен т а . Ра ст воры н а п ла стин ку н а н осят с исп оль зова н ием м ерн ы хка п илляров или м икрош п рицов в н есколь ко п рием ов, обра щ а я вн им а н ие н а ра зм еры п ят н а (д иа м етр п ят н а н е д олж ен п ревы ш а ть 3 м м ). Од н оврем ен н о н а п ла стин ку н а н осят эт а лон н ы е ра створы исслед у ем ы х вещ ест в или ра ст воры м ет чиков. Ра сст оян ие м еж д у п ят н а м и обра зцов н а лин ии ста рт а н е д олж н о бы т ь м ен ь ш е 1 см . При ра боте с хром а тогра ф ической п ла стин кой н ель зя ка са т ь ся п а ль ца м и слоя сорбен т а , п ла ст ин ку беру т т оль ко за кра я. Сист ем ы ра ст ворит елей см еш ива ю т в т ребу ем ы х соотн ош ен иях н еп осред ст вен н о п еред исп оль зова н ием п ри п ом ощ и ин т ен сивн ого п ерем еш ива н ия. К а м еры герм етичн о за кры ва ю т кры ш кой и оста вляю т н а 0,5-1 ча с д ля у ст а н овлен ия ра вн овесия. Для ка ж д ой н овой п ла стин ки гот овят н ову ю п орцию систем ы . Доп у ска ет ся врем ен н ое хра н ен ие готовой сист ем ы в п осу д е с п рит ерт ой п робкой. К оличество ра ст ворит еля д ля п ровед ен ия эксп ерим ен т а ра ссчиты ва ет ся т а ким обра зом , чтобы п ри восход ящ ем ва риа н т е п ровед ен ия хром а тогра ф ии у ровен ь его соот ветст вова л п огру ж ен ию п ла стин ы н е более чем н а 5 м м . Ра сход сист ем ы н а ста н д а рт н у ю ка м еру д ля п ла ст ин ра зм ером 10х10 см с п лоским д н ом сост а вляет 4-4,2 м л. К ра й п ла ст ин ки п огру ж а ю т н иж е ст а ртовой лин ии в сист ем у ра ст ворит елей. По м ере п род виж ен ия ж ид кост и п о п ла стин ке п од д ейст вием ка п иллярн ы х сил п роисход ит ра зд елен ие см еси вещ еств, от д елен ие их от п рису т ст ву ю щ их п рим есей. Да лее вы н им а ю т п ла стин ку , от м еча ю т гра н ицу п од ъ ем а ж ид кост и, су ш а т и п роявляю т оп ред елен н ы м реа ген том . От м еча ю т п олож ен ие п ят ен , от веча ю щ ихисслед у ем ы м вещ ества м и н а ход ящ иеся м еж д у лин иям и ст а рта и ф рон т а ра ст ворителя. К ачественны й и к ол ичественны й анал из м етодом т онк осл ойной х ром ат ограф ии

28

Ка ч е ст ве н н ы й а н а лиз . На иболее ча ст о п ри ид ен тиф ика ции н а ркотических и од у рм а н ива ю щ их сред ст в п роявлен ие хром а тогра ф ических зон осу щ ест вляет ся п о свечен ию в У Ф-свете или га ш ен ию ф лу оресцен ции ин д ика тора , д оба влен н ого к сорбен т у . После п росм отра п ла ст ин ок в У Ф-свет е, их обра ба ты ва ю т реа кт ивом или п ослед ова т ель н о н есколь ким и реа кт ива м и в соот вет ст вии с м етод икой. После обра бот ки реа кт ива м и отм еча ю т п олож ен ие и окра ску хром а тогра ф ическихзон . Осн овн ой ка чест вен н ой ха ра кт еристикой вещ ест ва в т он кослойн ой хром а тогра ф ии являет ся з н а ч е н ие Rf (от н осит е льн а я скорост ь пе ре м е ще н ия ком пон е н т а в т он ком слое ) , ра счет которого п ровод ят п о ф орм у ле:

Rf =

Lx , Ls

гд е Lx – д лин а п робега цен тра хром а тогра ф ической зон ы исслед у ем ого соед ин ен ия; Ls – д лин а п робега ф рон та ра ст ворит еля. В соот вет ствии с оп ред елен ием Rf всегд а ≤1. Величин а Rf за висит от п рирод ы н осит еля, т олщ ин ы слоя, ка чест ва и п рирод ы ра ст ворит елей, их соот н ош ен ия, сп особа н а н есен ия п робы , д ет ект ирова н ия, т.е. от техн ики эксп ерим ен та , т ем п ера т у ры и ряд а д ру гихф а кт оров. Для сн иж ен ия влиян ия н а п олу ча ем ы е резу ль т а т ы ф а кт оров, обу словлен н ы х у словиям и п ровед ен ия эксп ерим ен т а , ча ст о исп оль зу ю т от н осит е льн ую ве лич ин у RRf,, котора я п ред ста вляет собой от н ош ен ие зн а чен ия Rf исслед у ем ого вещ ест ва к зн а чен ию Rf ‘ ст а н д а рт а -м ет чика .

RRf =

Rf Rf

'

Бесцветн ы е вещ ест ва м ож н о п еревести в окра ш ен н ы е п у т ем обра бот ки их сп ециа ль н ы м и реа ген т а м и. Для эт ого п ла ст ин ку оп ры скива ю т из п у ль вериза т ора или н а н осят реа ген т ка п ель н о в зон у вещ ест ва или м ет чика . Для ка ж д ого сп ециф ического реа ген т а ж ела т ель н о им ет ь ин д ивид у а ль н ы й п у ль вериза т ор. Пу ль вериза тор, у ж е исп оль зова вш ийся, н еобход им о т щ а т ель н о п ром ы т ь ! Некоторы е возн ика ю щ ие окра ски м огу т бы стро исчеза т ь . За клю чен ие о п рису т ст вии или от су тст вии исслед у ем ого вещ ест ва д а ется н а осн ова н ии зн а чен ий Rf, п ри сра вн ен ии ха ра кт еристик п оглощ ен ия или исп у ска н ия У Ф-свет а п ри ра зличн ы х д лин а х волн , а та кж е п у т ем сра вн ен ия окра ски хром а тогра ф ических зон исслед у ем ого вещ ест ва и исп оль зова н н ого ст а н д а рт а п осле обра бот ки ихсп ециф ическим реа ген том . В н а стоящ ее врем я су щ ест ву ю т ком п лексы д ля ид ен тиф ика ции ра зличн ы хкла ссов вещ ест в н а осн ове м ет од а Т С Х , осн ову кот оры хсост а вляю т д а н н ы е о хром а т огра ф ическом п овед ен ии боль ш ого количества , д о н есколь ких сот ен или ты сяч вещ ест в. Колич е ст ве н н ы й а н а лиз . При а н а лизе п ят ен п ред п ола га ю т су щ ест вова н ие оп ред елен н ой связи м еж д у п лощ а д ь ю п ятн а и сод ерж а н ием исслед у ем ого вещ ест ва (н а п рим ер, н а личие п роп орцион а ль н ой или лин ейн ой за висим ости), кот ору ю у ст а н а влива ю т м ет од ом п остроен ия гра д у ировочн ого гра ф ика ,

29

изм еряя п лощ а д и п ят ен “свид ет елей”. Ин огд а сра вн ива ю т ин т ен сивн ост ь окра ски п ят ен , п ола га я, что ин т ен сивн ост ь окра ски п ятн а п роп орцион а ль н а количест ву окра ш ен н ого ком п он ен т а . Ра зд елен н ы е зон ы м ож н о сн ят ь с п ла стин вм есте со слоем , д есорбирова т ь ком п он ен т в ра створит ель и д а лее п роа н а лизирова т ь ра ст вор ф изикохим ическим и м етод а м и, что п озволяет д оп олн ят ь у ж е им ею щ у ю ся ин ф орм а цию об исслед у ем ы х вещ ест ва х д ру гим и м ет од а м и а н а лиза и п ровод ит ь ихколичест вен н ое оп ред елен ие. С п ом ощ ь ю Т СХ м ож н о оп ред елят ь вещ ест ва в количества хот 10-9 д о 10-6 г, ош ибка оп ред елен ия ком п он ен тов – 5-10%. В оспроиз водим ост ь ре з ульт а т ов иссле дова н ия м е т одом ТС Х д остига ет ся п ровед ен ием ихп ри след у ю щ иху словиях: 1. Ин стру м ен т а ль н ы е у словия п ровед ен ия эксп ерим ен т а , кот оры е вклю ча ю т кон ст ру кцию исп оль зу ем ой хром а тогра ф ической ка м еры ; сп особ ее герм етиза ции; у словия н а сы щ ен ия ка м еры п а ра м и ра ст ворит еля и т.д . 2. Свойст ва хром а т огра ф ической сист ем ы , кот оры е вклю ча ю т т ип и сп особ хим ической обра бот ки исп оль зова н н ого сорбен т а ; величин у его зерн ен ия; т олщ ин у слоя, а т а кж е тип п од лож ки, н а кот ору ю он н а н есен ; вид и количест во вн есен н ы х в а д сорбен т всп ом ога т ель н ы х вещ ест в, т а ких ка к связу ю щ ие ком п он ен т ы и ф лу оресциру ю щ ие вещ ест ва ; м ет од а кт ива ции сорбен т а , н а п рим ер, вы д ерж ива н ие п ри п овы ш ен н ой т ем п ера т у ре; сп особ обра бот ки п ла ст ин ки им п регн иру ю щ им и бу ф ера м и, щ елоча м и или кислота м и, а т а кж е вещ ества м и, м од иф ициру ю щ им и ее свойст ва . 3. М етод ические п од ход ы к н а н есен ию п робы и п ровед ен ию хром а тогра ф ирова н ия, которы е п ред у см а т рива ю т сп особ н а н есен ия обра зца н а п ла ст ин ку и исп оль зова н н ое п ри этом у ст ройст во; ра зм еры н а ча ль н ой зон ы хром а тогра ф ирова н ия; п олярн ост ь ра ст ворит еля, исп оль зова н н ого д ля н а н есен ия обра зца и его количест во; п род олж итель н ост ь исслед ова н ия и величин у п робега ра ст ворит еля; его сост а в и чистот у ; т ем п ера т у ру и вла ж н ость окру ж а ю щ ей сред ы в м ом ен т п ровед ен ия исслед ова н ия. П ре дст а вле н ие ре з ульт а т ов иссле дова н ий. В эксп ертн ом за клю чен ии п олу чен н ы е ра ссм а т рива ем ы м м етод ом резу ль т а т ы д олж н ы сод ерж а ть п од робн ое оп иса н ие у словий п ровед ен ия эксп ерим ен та : хром а тогра ф ические п ла ст ин ы (а д сорбен т , н а личие или от су т ст вие ин д ика т ора в его сост а ве, исп оль зова н н ое связу ю щ ее вещ ест во, т ип п од лож ки д ля а д сорбен т а , ф ирм а – изготовитель , а т а кж е п ровед ен ие сп ециа ль н ой обра бот ки п ла стин п еред исслед ова н ием , н а п рим ер, вы су ш ива н ие п ри п овы ш ен н ой т ем п ера т у ре или им п регн ирова н ие щ елочь ю или бу ф ером ). Во м н огих слу ча ях ф ирм ы – изготовители ш иф ру ю т н екот ору ю ин ф орм а цию о своей п род у кции п од ф ирм ен н ы м и н а зва н иям и, н а п рим ер, SILUFOL и СОРБФИЛ или СОРБИТ ОН. В эт ом слу ча е д ост а т очн о п ривести д а н н ое н а зва н ие п олн ост ь ю . Да лее ид ет оп иса н ие исп оль зова н н ы хсист ем ра ст ворителей с у ка за н ием ихка чествен н ого и количест вен н ого соста ва , сп особа хром а тогра ф ирова н ия (вертика ль н ы й – обы чн о оп у ска ет ся, горизон та ль н ы й, кру говой или м н огом ерн ы й), а т а кж е особы х п рием ов, н а п рим ер, п ровод илось ли хром а т огра ф ирова н ие без

30

н а сы щ ен ия ка м еры или п ри п овы ш ен н ой тем п ера т у ре. Схем а обра бот ки хром а тогра ф ических п ла стин д олж н а сод ерж а т ь оп иса н ие исп оль зова н н ы х реа кт ивов с их п олн ы м ка чест вен н ы м и количест вен н ы м соста вом , п ослед ова т ель н ости п ровед ен ия эт а п ов обра бот ки, их ин т ен сивн ост и и п род олж ит ель н ости. Особо от м еча ет ся ин тен сивн ост ь и окра ска хром а тогра ф ических зон исслед у ем ы х вещ ест в п осле обра бот ки ка ж д ы м реа кт ивом , а т а кж е величин а их Rf или RRf. При п ровед ен ии п од т верж д а ю щ их исслед ова н ий н а кон кретн ое вещ ест во д оп у ска ет ся у ка за н ие о том , что в д а н н ы хкон кретн ы ху словияхвеличин а Rf и окра ска хром а т огра ф ической зон ы исслед у ем ого вещ ест ва исп оль зова н н ы м и реа кт ива м и совп а д а ет с величин ой Rf и окра ской ст а н д а рт н ого ра ст вора -м етчика . В за клю чен ии п ривод ят ся т а кж е д а н н ы е о п ред еле обн а ру ж ен ия м етод а . Н Е Н А П РА В ЛЕ Н Н ЫЙ А Н А ЛИ З Н А РК О Т И ЧЕ СК И Х И О Д У РМ А Н И В А Ю Щ И Х В Е Щ Е СТ В А нал из неизвестны х образц ов Ан а лиз н е из ве ст н ы х т а бле т ок. Е сли н а а н а лиз д ост а влен ы н еизвестн ы е т а блет ки, от м еча ю т их цвет, ф орм у , ра зм ер, м а ркировку н а п оверхн ости и сра вн ива ю т с коллекцион н ы м и обра зца м и. За т ем т а блет ку , п ри н еобход им ости п од стру ей вод ы , отм ы ва ю т от оболочки, изм ель ча ю т и см еш ива ю т с эта н олом (м ет а н олом ). При эт ом в оса д ке ока ж у т ся вход ящ ие в сост а в т а блет ки, н ера ст ворим ы е в сп ирт е н а п олн ители. Ниж е п ред ст а влен кра т кий п еречен ь н екот оры х всп ом ога т ель н ы х вещ ест в, д оба вляем ы х п ри изгот овлен ии лека рст вен н ы хф орм . Л ека рст вен н а я ф орм а Аэрозоли Ин га лят оры Ин ъ екцион н ы е ра створы Свечи Т а блет ки

Всп ом ога т ель н ы е вещ ест ва Фт ороу глевод ород ы (три- и д ихлорф лю ором ета н ) Ин ертн ы е га зы Проп илен гликоль , эт илолеа т, бен зилбен зоа т, ф ен ол, крезол, хлорбу т а н ол, бен зиловы й сп ирт, цит ра т ы , а цет а т ы , ф осф а ты и д р. Проп илен гликоль , п олиэт илен гликоль Г ип с, ф осф а ты , т а ль к, ж ела т ин , а га р, коллоид н ы е са лицила ты , м а н н итол и д р.

Полу чен н у ю сп ирт ову ю вы т яж ку ф иль т ру ю т и исп оль зу ю т д ля п ровед ен ия п ред ва рит ель н ы хп роб, цветн ы хтестов, Т СХ . Е сли д ост а влен н ы й п реп а ра т м а ркирова н , н о в ла бора тории отсу т ст ву ет м ет од ика д ля его исслед ова н ия, н еобход им о у зн а т ь хим ическое н а зва н ие или ф орм у лу п реп а ра т а , оп ред елит ь , к ка ком у кла ссу соед ин ен ий он отн осит ся, ка кие ф у н кцион а ль н ы е гру п п ы , оп ред еляю щ ие п рин а д леж н ост ь п реп а ра т а к

31

д а н н ом у кла ссу соед ин ен ий, м огу т бы ть исп оль зова н ы д ля его обн а ру ж ен ия в биосред а х, п ри ка ком зн а чен ии рН он бу д ет экст ра гирова т ь ся орга н ическим ра ст ворит елем из биосред . После отра бот ки м етод а оп ред елен ия его н а д оста влен н ом п реп а ра т е этот м ет од м ож н о исп оль зова т ь п ри ра бот е с биом а т ериа лом . Ан а лиз объе кт ов ра ст ит е льн ого происхожде н ия . При осм отре объ ект а ра стит ель н ого п роисхож д ен ия обра щ а ю т вн им а н ие н а его вн еш н ий вид : от м еча ю т ст еп ен ь изм ель чен н ости, н а личие сем ян (м а к), цвет и за п а х. М а кова я солом ка им еет цвет от серо-зелен ого д о серого, га ш иш – от серо-зелен ого д о коричн евого и им еет а ром а тический за п а х. Из д ост а влен н ого н а а н а лиз ра стит ель н ого объ ект а гот овят сп ирт овое извлечен ие, д ля п риготовлен ия кот орого беру т 1 г ра стит ель н ого сы рь я и 10 м л см еси эт а н ола с хлороф орм ом (1:2), н а грева ю т н а вод ян ой ба н е д о н а ча ла кип ен ия. Полу чен н ое извлечен ие ф иль т ру ю т исслед у ю т м етод а м и Т СХ , п ровод ят цветн ы е тест ы . Ан а лиз порош ка орга н ич е ской природы . (С м . “Ан а лиз н еизвест н ы х т а блеток”). Ан а лиз жидкост и н е из ве ст н ого сост а ва . Доста влен н у ю н а исслед ова н ие ж ид кост ь сн а ча ла п од верга ю т орга н олеп тическом у а н а лизу . 1. От м еча ю т цвет, за п а х. 2. У ст а н а влива ю т величин у рН п о у н иверса ль н ом у ин д ика т ору (кислот а , щ елочь ). 3. Проверяю т см еш ива ем ост ь с вод ой. 4. Изм еряю т п ока за т ель п релом лен ия ж ид кости н а реф ра кт ом етре. 5. Провод ят п ред ва рит ель н ы е п робы . Т СХ-ск рининг вещ еств к исл отного и основного х арак т ера Х ром а тогра ф ический скрин ин г п реслед у ет цель отобра т ь , от сеят ь ча ст ь вещ ест в, чт обы су зит ь кру г исслед ова н ия и сокра т ит ь врем я а н а лиза . ТС Х-скрин ин г в а н а лиз е ве ще ст в кислот н ого и сла боосн овн ого ха ра кт е ра , экст ра гируе м ы ххлороформ ом из кислого ра ст вора (рН 2-2,5) Из лека рст вен н ы хвещ ест в, им ею щ их оп ред елен н ое т оксикологическое зн а чен ие, в извлечен иях из кислого ра ст вора м огу т бы т ь : п роизвод н ы е ба рбит у ровой кислот ы , п ира золон а , 1,4-бен зод иа зеп ин а , коф еин . Пла ст ин ку п ом ещ а ю т в общ у ю сист ем у ра ст ворит елей: хлороф орм – д иокса н – а цет он – 25%-н ы й ра ст вора м м иа ка (45:47,5:5:2,5). К огд а ра ст воритель п од н им ет ся н а вы сот у 10 см , п ла стин ку вы н им а ю т, вы су ш ива ю т и обра ба т ы ва ю т реа ген та м и в след у ю щ ей п ослед ова т ель н ости: • 5%-н ы й ра ст ворсу ль ф а т а рт у т и(II) в кон ц. серн ой кислоте и 0,1%-н ы й ра ст вор д иф ен илка рба зон а (ДФК ) в хлороф орм е. При эт ом н а п ла стин ке обн а ру ж ива ю т ся п роизвод н ы е ба рбит у ровой кислоты в вид е ф иолетовы хп ят ен .

32

• 10%-н ы й ра ст ворхлорид а ж елеза (III). Обн а ру ж ива ю т ся п роизвод н ы е п ира золон а . • м од иф ицирова н н ы й реа кт ив Дра ген д орф а . Обн а ру ж ива ю т ся соед ин ен ия, сод ерж а щ ие в ст ру кт у ре вт оричн ы й и трет ичн ы й а том а зота (п роизвод н ы е 1,4-бен зод иа зеп ин а , п ира золон а , коф еин ). • 10%-н ы й ра створ серн ой кислоты . Для п овы ш ен ия чу вст вит ель н ости реа кт ива Дра ген д орф а . Е сли н и в од н ой из зон н е п роявилось н и од н ого п ятн а , т о д ела ю т за клю чен ие о н ен а хож д ен ии вещ ест в в извлечен ии из кислого ра ст вора . ТС Х-скрин ин г в а н а лиз е ве ще ст в осн овн ого ха ра кт е ра , экст ра гируе м ы х хлороформ ом из ще лоч н ого ра ст вора (рН 8-10) Из лека рст вен н ы хвещ ест в, им ею щ их оп ред елен н ое т оксикологическое зн а чен ие, в извлечен иях из щ елочн ого ра ст вора м огу т бы ть а лка лоид ы и син тет ические вещ ест ва осн овн ого ха ра кт ера . Пла стин ку п ом ещ а ю т в сист ем у ра ст ворит елей: хлороф орм – д иокса н – а цетон – 25%-н ы й ра ст вор а м м иа ка (45:47,5:5:2,5). К огд а ра ст ворит ель п од н им ет ся н а вы соту 10 см , п ла стин ку вы н им а ю т, вы су ш ива ю т и обра ба т ы ва ю т реа ген та м и в след у ю щ ей п ослед ова т ель н ости: • 10%-н ы й ра ст вор хлорид а ж елеза (III). При эт ом обн а ру ж ива ю т ся п роизвод н ы е п ира золон а и ф ен отиа зин а . • 16%-н ы й ра ст вор серн ой кислоты в эт а н оле. Обн а ру ж ива ю т ся п роизвод н ы е ф ен отиа зин а . • 10%-н а я серн а я кислот а и У Ф-свет. Обн а ру ж ива ется хин ин . • м од иф ицирова н н ы й реа кт ив Дра ген д орф а . Обн а ру ж ива ю т ся соед ин ен ия, сод ерж а щ ие в стру кт у ре т рет ичн ы й а зот. • 10%-н а я серн а я кислот а . Для п овы ш ен ия чу вст вит ель н ост и и у силен ия окра ски п ят ен с реа кт ивом Дра ген д орф а . Е сли н и в од н ой из зон н е п роявилось н и од н ого п ятн а , т о д ела ю т за клю чен ие о н ен а хож д ен ии вещ ест в в извлечен ии из щ елочн ого ра ст вора . ХИ М И К О -Т О К СИ К О ЛО ГИ ЧЕ СК И Й А Н А ЛИ З О Т Д Е ЛЬ Н ЫХ ГРУ П П Н А РК О Т И ЧЕ СК И Х И О Д У РМ А Н И В А Ю Щ И Х В Е Щ Е СТ В (Н А П РА В ЛЕ Н Н ЫЙ А Н А ЛИ З) П роизводны ебарбитуровой к исл оты И з олирова н ие . 10 м л м очи в д елит ель н ой ворон ке п од кисляю т 2 М ра ст вором солян ой кислот ой д о рН 2, т риж д ы экст ра гиру ю т хлороф орм ом п о 10 м л. Х лороф орм н ы е ф а зы отд еляю т и объ ед ин яю т, ф иль тру я через безвод н ы й су ль ф а т н а т рия. Орга н ический ра ст ворит ель у д а ляю т в т оке т еп лого возд у ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие Ост а ток ра ст воряю т в н еболь ш ом объ ем е (0,1-0,2 м л) хлороф орм а и количест вен н о с п ом ощ ь ю ка п илляра п ерен осят н а ст а рт ову ю лин ию хром а тогра ф ической п ла стин ки

33

“Cилу ф ол”. На ра сст оян ии 2 см от а н а лизиру ем ой п робы в од н у т очку (д иа м етр н е более 0,5 м л) п ослед ова тель н о вн осят п о 0,02 м л сп иртовы хра ст воров (1 м г/ м л) ба рбит а ла , ф ен оба рбита ла и эт а м ин а ла н а т рия. Пят н а п од су ш ива ю т , хром а тогра ф ирова н ие п ровод ят в систем е хлороф орм – н -бу т а н ол – 25%-н ы й ра ст вор а м м иа ка (70 : 40 : 5). К а м ера п ред ва ритель н о н а сы щ а ется систем ой ра ст ворителей в т ечен ие 20 м ин у т . Длин а п робега ра ст ворит елей 10 см . После п од су ш ива н ия п ри ком н а т н ой т ем п ера т у ре или в т оке т еп лого возд у ха д о п олн ого у д а лен ия ра ст ворит елей, п ла ст ин ки оп ры скива ю т соот ветст ву ю щ им и реа ген та м и. Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. 1. Ра ст ворсу ль ф а т а рту т и(II), НgSO4, 5%-н ы й ра ст вор. 2. Ра ст вор д иф ен илка рба зон а (ДФК ), 0,02%-н ы й ра ст вор (след у ет избега ть избы т ка д иф ен илка рба зон а ). Ба рбит у ра т ы обн а ру ж ива ю т в вид е син е-ф иолет овы хили кра сн ы хп ят ен н а исчеза ю щ ем сирен евом ф он е. Пред ел обн а ру ж ен ия: 1 м кг а н а лизиру ем ого соед ин ен ия. Зн а ч е н ия Rf: Ба рбит а л 0,70-0,75. Фен оба рбит а л 0,49-0,55. Э т а м ин а л н а трия 0,94-0,96. Ба рба м ил 0,85-0,92. Бу т оба рбит а л 0,78-0,85. Величин ы Rf п о от н ош ен ию к м ет чика м д а ю т возм ож н ост ь сд ела т ь п ред п олож ен ие о п рису т ст вии ба рбит у ра т ов в исслед у ем ой п робе. При п олож ит ель н ом резу ль т а т е хром а тогра ф ического исслед ова н ия п ровод ит ся д оп олн ит ель н ое обн а ру ж ен ие с п ом ощ ь ю цвет н ы х тест ов или м икрокрист а ллоскоп ическихреа кций. Да н н ы е реа кции п ровод ят ся с ост а т ка м и п осле у д а лен ия орга н ического экст ра ген т а и п ровед ен ия изолирова н ия из н овой а ликвот ы м очи (10 м л) п о м етод ике, оп иса н н ой вы ш е. Ц ве т н ой т е ст : н а ф иль трова ль н у ю бу м а гу в од н у т очку н а н осят 2-3 ка п ли ра створа ба рбит у ра та в орга н ическом ра ст ворит еле или кислого извлечен ия из м очи, п од су ш ива ю т , за т ем н а сла ива ю т 1-3 ка п ли 1%-н ого сп иртового ра ст вора н ит ра т а коба ль т а С о(NO3)2, п од су ш ива ю т и вн осят бу м а гу в п а ры 25%-н ого ра ст вора а м м иа ка – п ят н о п риобрет а ет кра сн о-ф иолетовое окра ш ива н ие. М икрокрист а ллоскопич е ска я ре а кция : к су хом у ост а т ку н а п ред м ет н ом ст екле д оба вляю т од н у ка п лю 10%-н ого ра ст вора а м м иа ка , а п осле ра ст ворен ия ост а т ка од н у ка п лю 10%-н ого ра ст вора серн ой кислоты . Ч ерез 10-15 м ин у т н а блю д а ю т ха ра кт ерн ы е срост ки криста ллов. А л к ал оиды груп п ы оп ия И з олирова н ие . 20 м л м очи п од кисляю т 6 М НСl д о рН 2 и гид ролизу ю т н а вод ян ой ба н е в течен ие 20 м ин у т . Г ид ролиза т охла ж д а ю т , д оба вляю т 10%н ы й ра ст вор а м м иа ка д о рН 9,0-9,5. Э кст ра гиру ю т 2 ра за в т ечен ие 5 м ин у т д войн ы м количест вом см еси хлороф орм – бу т а н ол (9:1). От д еляю т орга н ический слой, объ ед ин яю т оба извлечен ия д ля д а ль н ейш его исслед ова н ия.

34

Филь т ру ю т через бу м а ж н ы й ф иль т р с безвод н ы м су ль ф а т ом н а трия и вы п а рива ю т в ф а рф оровой ча ш ке. Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . С ист ем а д ля хром а тогра ф ирова н ия: этила цет а т – эта н ол (м ета н ол) – а м м иа к (17: 2: 1). В ка чест ве м ет чиков н а н осят ра ст воры м орф ин а , код еин а , н а ркотин а , п а п а верин а . Длин а п робега – 10 см . Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. 1. Реа кт ив М а рки. 2. Реа кт ив Фред е. Реа кт ивы н а н осят ка п ель н о от ст а рт а д о ф ин иш а сн а ча ла в зон у м ет чиков, а за т ем в исслед у ем ы е зон ы . Соед ин ен ие М орф ин К од еин На ркот ин Па п а верин Ом н оп он Г ероин

с реа кт ивом М а рки кра сн о-ф иолетовое ф иолет овое ф иолет овое ф иолет овое кра сн о-ф иолетовое кра сн о-ф иолетовое

Окра ш ива н ие с реа кт ивом Фред е ф иолет овое ф иолет ово-зелен ое син е-зелен ое син е-зелен ое ф иолет овое ф иолет овое

М икрокрист а ллоскопич е ские ре а кции. С у хой ост а т ок н а п ред м ет н ом ст екле ра ст воряю т в ка п ле 0,1 М ра ст вора солян ой кислоты и д оба вляю т ка п лю реа ген т а . М орфин 1. Реа кция с иод ид ом ка лия, KI, 15%-н ы й ра ст вор. На блю д а ет ся обра зова н ие белого оса д ка , сост оящ его из бесцветн ы хигл, собра н н ы хв п у чки. Пред ел обн а ру ж ен ия: 2,5 м кг м орф ин а . 2. Реа кция с хлорид ом рт у т и, HgCl2, 5%-н ы й ра створ. На блю д а ю т ся ха ра кт ерн ы е п у чки из игл. 3. Реа кция с соль ю Рейн еке. Обра зу ет ся сирен евы й оса д ок, сод ерж а щ ий крист а ллы в вид е срост ков из п у чков т он кихигл. Пред ел обн а ру ж ен ия: 2 м кг м орф ин а . Коде ин 1. Реа кция с ра ст вором п икрин овой кислот ы . При соед ин ен ии ка п ель исслед у ем ого ра ст вора и н а сы щ ен н ого ра ст вора п икрин овой кислоты обра зу ет ся ж елт ы й а м орф н ы й оса д ок, кот оры й п ри ст оян ии ста н овит ся крист а ллическим . На блю д а ю т ся крист а ллы д ву х вид ов: ж елты е сф ероид ы и п у чки из блед н о-ж елты хп ла стин ок. Пред ел обн а ру ж ен ия: 1 м кг код еин а . 2. Реа кция с хлорид ом рт у т и, HgCl2, 5%-н ы й ра створ. При п отира н ии п ред м ет н ого ст екла в обла ст и ка п ель ст еклян н ой п а лочкой вы д еляет ся крист а ллический оса д ок из иглообра зн ы хи п ла стин ча т ы х крист а ллов. Пред ел обн а ру ж ен ия: 13 м кг код еин а .

35

П роизводны е1,4-бензодиазеп ина I.И з олирова н ие . 20 м л м очи п од щ ела чива ю т NaOH д о рН 10. Э кстра гиру ю т д ва ж д ы хлороф орм ом д войн ы м объ ем ом . Орга н ический ра ст ворит ель у п а рива ю т в т оке т еп лого возд у ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . С ист ем а д ля хром а тогра ф ирова н ия - хлороф орм – д иокса н – а цетон – 25%-н ы й ра ст вор а м м иа ка (45:47,5:5:2,5). Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. Проявляю т п ла стин ку реа кт ивом Дра ген д орф а . Производ н ы е 1,4бен зод иа зеп ин а обн а ру ж ива ю тся в вид е ора н ж ево-коричн евы хп ят ен . Вслед ст вие особен н ост ей ра сп ред елен ия и м ета болизм а п роизвод н ы х1,4бен зод иа зеп ин а , их оп ред елен ие целесообра зн о п ровод ит ь п о п род у кт а м их гид ролиза – а м ин обен зоф ен он а м . Э т о п озволяет оп ред елять общ ее количество п реп а ра тов (ка к су м м у н а т ивн ого соед ин ен ия и его м ет а болитов) в биологической ж ид кост и. II.И з олирова н ие . К 10 м л а н а лизиру ем ой м очи или 2 м л крови д оба вляю т соот вет ст вен н о 10 м л и 2 м л кон цен трирова н н ой НСl и н а грева ю т в колбе с обра тн ы м холод иль н иком н а кип ящ ей вод ян ой ба н е в т ечен ие 1 ча са (кислот н ы й гид ролиз). По окон ча н ии реа кции гид ролиза т н ейтра лизу ю т н а сы щ ен н ы м ра ст вором NaOH, д овод ят рН д о 8-10 и экст ра гиру ю т д ва ж д ы хлороф орм ом (10 м л х2 д ля м очи и 5 м л х 2 д ля крови). Слой орга н ического ра ст ворит еля отд еляю т н а д елит ель н ой ворон ке, а за т ем в объ ед ин ен н ы х экст ра кт а х у п а рива ю т орга н ический ра створит ель п од стру ей т еп лого возд у ха д о объ ем а в н есколь ко ка п ель д ля Т СХ -а н а лиза и д осу ха д ля количест вен н ого оп ред елен ия. Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . Ост а т ок экст ра кт а п ерен осят н а ст а ртову ю лин ию п ла стин ки “Силу ф ол”. На т у ж е ст а рт ову ю лин ию н а н осят п ятн о м ет чиков, сост оящ ее из см еси бен зоф ен он ов, п роизвод н ы х 1.4-бен зод иа зеп ин а (10-15 м кг ка ж д ого). Пробег ф рон та ра ст ворит еля 10 см . Под виж н а я ф а за – бен зол. По окон ча н ии хром а тогра ф ирова н ия бен зол у д а ляю т с п ла ст ин ки током т еп лого возд у ха . При кон цен тра ции бен зоф ен он ов более 5 м кг/м л, ихм ож н о обн а ру ж ит ь п о собст вен н ой ж елт ой окра ске или ф лю оресцен ции в У Ф-свет е, п ри м ен ь ш их кон цен тра циях – п о ф лю оресцен ции в У Ф-свет е и реа кции окра ш ива н ия Бра т тон а -М а рш а лла . Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. 1. Нит рит н а трия, NaNO2, свеж еп риготовлен н ы й 0,1%-н ы й ра ст вор. 2. Солян а я кислота , НСl, 2 М ра ст вор. 3. М очевин а , (NH2)2CO, н а сы щ ен н ы й ра ст вор (д ля у д а лен ия избы т ка н итрита н а трия). Пла ст ин ку оп ры скива ю т через 2 м ин у т ы . 4. N-2-н а ф т илэтилен д иа м ин д ихлорид (или щ елочн ой ра ст ворβ-н а ф т ола ). В м ест е лока лиза ции а м ин обен зоф ен он ов п оявляет ся ора н ж ево-кра сн ое окра ш ива н ие.

36

П роизводны еф енотиазина П ре два рит е льн а я проба . К 2 м л м очи п риба вляю т 1 м л реа кт ива FРN. При н а личии в исслед у ем ой п робе п роизвод н ы х ф ен от иа зин а м гн овен н о ра звива ется окра ш ива н ие от розового д о син его в за висим ост и от ст ру кт у ры и количест в соед ин ен ий в исслед у ем ой п робе. Проба с реа кт ивом FРN н е сп ециф ичн а и им еет т оль ко от рица т ель н ое зн а чен ие. При от рица тель н ом резу ль т а т е п робы д а ль н ейш ее исслед ова н ие м очи н а н а личие п роизвод н ы хф ен отиа зин а н е п ровод ит ся. И з олирова н ие . 5-10 м л м очи или 2 м л крови п од щ ела чива ю т 50%-н ы м ра ст вором ед кого н а т ра д о рН 13 и см есь кип ятят в т ечен ие 10 м ин у т н а вод ян ой ба н е. Полу чен н ы й гид ролиза т охла ж д а ю т д о ком н а т н ой т ем п ера т у ры и д ва ж д ы (п о 20 м л) экстра гиру ю т н -геп т а н ом , сод ерж а щ им 3%-н ы й изоа м иловы й сп ирт. Г еп та н овы е извлечен ия из м очи объ ед ин яю т, п ром ы ва ю т вод ой, н а сы щ ен н ой геп т а н ом , и д елят н а д ве ра вн ы е ча ст и. В од н ой ча сти п ровод ит ся обн а ру ж ен ие п роизвод н ы х ф ен от иа зин а м етод ом тон кослойн ой хром а тогра ф ии, а в д ру гой – количествен н ое оп ред елен ие. Э кст ра кт из крови п олн ость ю ра сход у ет ся н а количест вен н ое оп ред елен ие, т а к ка к сод ерж ит м ен ь ш ее количест во соэкст ра гиру ем ы х вещ ест в. Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руж е н ие . Из а ликвоты орга н ического экст ра кт а у д а ляю т в т оке т еп лого возд у ха орга н ический ра ст ворит ель . С у хой ост а ток ра створяю т в 0,2-0,5 м л хлороф орм а и п олу чен н ы й ра ст ворп оровн у н а н осят н а д ве п ла стин ки “Cилу ф ол”. В ка честве м ет чиков н а н осят а м ин а зин (обяза т ель н о) и т е п роизвод н ы е ф ен от иа зин а , кот оры е бы ли обн а ру ж ен ы в п роцессе п ред ва рит ель н ого исслед ова н ия (Т СХ скрин ин г). Х ром а т огра ф ирова н ие п ровод ят в сист ем е 1 и 2. Длин а п робега – 10 см . Сист ем а –1: бен зол – д иокса н – 25%-н ы й ра ст вора м м иа ка (60 : 35 : 5). Сист ем а –2: этила цет а т –- а цетон – 25%-н ы й ра ст вора м м иа ка в эт а н оле (1:1) (50 : 45 : 4). Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. Од н у п ла стин ку оп ры скива ю т ра ст вором кон цен трирова н н ой серн ой кислот ы в эта н оле (1:9) и п ри п олож итель н ом резу ль т а т е н а вт орой п ла ст ин ке обн а ру ж ен ие п ровод ят с п ом ощ ь ю реа кт ива М а рки. Ниж е п ривед ен ы величин ы и окра ски п ят ен н екоторы х п роизвод н ы х ф ен от иа зин а .

37

Реа кция окра ш ива н ия Соед ин ен ие кон ц.Н2SO4 – реа кт ив эт а н ол (1:9) М а рки т ем н от ем н оАм ин а зин кра сн ое кра сн ое т ем н от ем н оДип ра зин кра сн ое кра сн ое кра сн ое кра сн ое Проп а зин голу бое голу бое Л евом еп ром а зин Т риф та зин кра сн ое кра сн ое Э т а п ера зин т ем н от ем н окра сн ое кра сн ое Френ олон кра сн ое кра сн ое

С ист ем а -1 RSt (п о а м ин а зин у ) 1,00

Сист ем а -2 RSt (п о а м ин а зин у ) 1,00

0,74

2,95

1,29 1,56 0,48 0,34

1,08 1,87 0,26 0,48

1,71

3,21

К аннабиноиды Осн овн ы м и ком п он ен т а м и, оп ред еляем ы м и в биож ид костях, являю т ся: Δ -т етра гид рока н н а бин ол, Δ 8-тет ра гид рока н н а бин ол, ка н н а бин ол, ка н н а бид иол. От бор пробы осу щ ест вляет ся п ротира н ием ру к п од озрева ем ого в ку рен ии га ш иш а ва т н ы м или м а рлевы м т а м п он ом , см очен н ы м этиловы м сп иртом . С п ирт из обра зцов исп а ряю т п ри ком н а т н ой т ем п ера т у ре, а т а м п он ы у п а ковы ва ю т в п олиэтилен овы е п а кет ы и н а п ра вляю т н а исслед ова н ие в ла бора торию . И з олирова н ие . К а н н а бин оид ы экст ра гиру ю т из м а т ериа ла т а м п он а д ва ра за д иэтиловы м эф иром п орциям и п о 10 м л в т ечен ие 1 м ин . Э кст ра кт у п а рива ю т д о кон ечн ого объ ем а 0,1-0,3 м л и исп оль зу ю т ка к д ля п ред ва ритель н ого оп ред елен ия ка н н а бин оид ов ха ра ктерн ы м и цветн ы м и реа кциям и, та к и д ля ка чест вен н ого оп ред елен ия их м етод ом тон кослойн ой хром а тогра ф ии. Для пре два рит е льн ого иссле дова н ия от бира ю т 5 м кл от а ликвоты у п а рен н ого д о м а лого объ ем а экст ра ткт а , н а н осят п робу н а ф иль трова ль н у ю бу м а гу , вы су ш ива ю т и за тем оп ры скива ю т 0,5%-н ы м ра ст вором п рочн ого син его Б в 10%-н ом вод н ом ра ст воре ка рбон а т а н а трия. От су т ст вие ора н ж евого окра ш ива н ия п ят н а слу ж ит осн ова н ием д ля за клю чен ия, что в п робе н е обн а ру ж ен ы ка н н а бин оид ы . При п оявлен ии ора н ж евого окра ш ива н ия втору ю а ликвот у экст ра кт а н а н осят н а п ла ст ин ку “Силу ф ол”. Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . Х ром а тогра ф ирова н ие осу щ ест вляет ся в сист ем е п ет ролейн ы й эф ир-д иэт иловы й эф ир(4:1) д ву кра т н о. Вы явлен ие п ят ен осу щ ест вляет ся оп ры скива н ием хром а тогра м м ы 0,5%-н ы м ра ст вором п рочн ого син его Б в 10%-н ом ра ст воре ка рбон а т а н а трия. При этом в осн овн ом вы являет ся ка н н а бин ол (Rf = 0,76) и т ет ра гид рока н н а бин ол (Rf = 0,84). 9

38

След у ет им ет ь в вид у , чт о обн а ру ж ен ие т ет ра гид рока н н а бин ола т оль ко в см ы ва хс кож и ру к н е являет ся осн ова н ием д ля за клю чен ия, чт о д а н н ое лицо ку рило га ш иш , п осколь ку возм ож н о слу ча йн ое соп рикосн овен ие с га ш иш ем , о кот ором освид ет ель ст ву ем ы й и н е п од озрева л. В ы я вле н ие ка н н а бин оидов в слюн е курильщика га ш иш а . От бор проб. У лиц, п од озрева ем ы х в ку рен ии га ш иш а , в склян ку с п рит ерт ой п робкой вм естим ост ь ю 100 м л от бира ю т п рим ерн о 10 м л слю н ы , п осле чего п ром ы ва ю т п олост ь рт а 50 м л 70%-н ого этилового сп ирт а , которы й н а сы щ ен хлорист ы м н а т рием (п ослед н ий ввод ят д ля п ред у п реж д ен ия глота н ия сп ирта ). Слю н у и см ы в объ ед ин яю т , склян ку за кры ва ю т , оп еча ты ва ю т и н а п ра вляю т н а исслед ова н ие в ла бора т орию . И з олирова н ие . Полу чен н у ю п робу см еш ива ю т с 50 м л н а сы щ ен н ого вод н ого ра ст вора хлорид а н а трия. Э кст ра гиру ю т ка н н а бин оид ы 10 м л эт ила цет а та . Врем я экстра кции – 5 м ин . Ч исло экст ра кций – 3. Э кст ра кт вы су ш ива ю т п у т ем д оба влен ия 1-1,5 г безвод н ого су ль ф а т а н а трия. За т ем ф иль т ру ю т экст ра кт через бу м а ж н ы й ф иль т р и у п а рива ю т д о н есколь ких ка п ель . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие Весь п олу чен н ы й ра ст вор н а н осят н а п ла стин ку “С илу ф ол”. Х ром а т огра ф ирова н ие осу щ ест вляет ся в у словиях, оп иса н н ы хвы ш е. При эт ом след у ет у чит ы ва т ь , чт о отрица т ель н ы й резу ль т а т ещ е н е являет ся осн ова н ием д ля вы вод а , что д а н н ое лицо н е у п от ребляло га ш иш , т а к ка к след ы га ш иш а п осле его ку рен ия сохра н яю тся в п олост и рт а д о 1 ча са , а н а кож е – д о 24 ча сов (если п оверхн ост ь кож и н е п од верга ла сь п рот ира н ию ра ст ворит елям и т ип а од еколон а , эт илового сп ирт а ). В ы я вле н ие ка н н а бин оидов в пла з м е крови. 5 м л п ла зм ы крови экстра гиу ю т чет ы рехкра т н о п о 5 м л см еси п ет олейн ого эф ира , сод ерж а щ его 1,5% п ен т а н ола п о объ ем у . Объ ед ин ен н ы й орга н ический экст ра кт у п а рива ю т д о объ ем а н есколь кихка п ель и п ерен осят н а п ла ст ин ку “Силу ф ол”. Х ром а тогра ф иру ю т в т ехж е у словиях, чт о и экст ра кт из слю н ы . К ок аин И з олирова н ие . 5 м л крови экстра гиру ю т 15 м л н -бу т илхлорид а . Орга н ическу ю ф а зу от д еляю т , д оба вляю т к н ей 10 м л 0,1 М НCl, вст ряхива ю т в т ечен ие 5 м ин . От д еляю т вод н у ю ф а зу (орга н ическу ю от бра сы ва ю т ) и п рилива ю т к н ей 10%-н ы й ра ст вора м м иа ка д о рН 10. В д елитель н у ю ворон ку п ом ещ а ю т п од щ елочен н у ю вод н у ю ф а зу и д ва ж д ы экст ра гиру ю т п о 5 м л хлороф орм ом . Объ ед ин ен н ы й хлороф орм н ы й экст ра кт у п а рива ю т д о объ ем а 0.5 м л в т оке т еп лого возд у ха . 50 м л м очи п од кисляю т HCl д о рН 2 и экст ра гиру ю т 50 м л эф ира д ля у д а лен ия кислы хи н ейтра ль н ы хсоед ин еий. К ока ин и его м ет а болиты ост а ю тся в осн овн ом в вод н ой ф а зе. Вод н у ю ф а зу п од щ ела чива ю т 25%-н ы м ра ст вором

39

а м м иа ка д о рН 10. Э кст ра кцию п роизвод ят ра вн ы м объ ем ом см еси хлороф орм изоп оп а н ол (3:1) д ва ж д ы . Объ ед ин ен н ы й экст ра кт у п а рива ю т д осу ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . С у хой ост а ток ра ст воряю т в 0,2 м л хлороф орм а и п оловин у объ ем а н а н осят н а ст а ртову ю лин ию п ла стики ВЭ Т СХ . В ка чест ве м ет чиков исп оль зу ю т см есь кока ин а и бен зоилэкгон ин а . Х ром а т ога ф иру ю т в систем е хлороф орм – м ет а н ол (50:50). Длин а п робега – 10 см . Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. Сн а ча ла п ла ст ин ку оп ры скива ю т реа ктивом Дра ген д орф а , за т ем иод п ла тин а т ом . Ид ен тиф ика цию п ровод ят п о совп а д ен ию величин Rf исслед у ем ы хсоед ин ен ий и м ет чиков. При п олож ит ель н ой п робе ост а вш у ю ся а ликвот у ра ст вора хром а т огра ф иру ю т в систем е эт ила цет а т -циклогекса н м ет а н ол-а м м иа к (70:15:10:5) или эт ила цет а т – м ет а н ол (80:20)и п ровод ят м икрокрист а ллоскоп ические реа кции. М икрокрист а ллоскопич е ские ре а кции. 1. Реа кция с ра ст вором п ла т ин охлористовод ород н ой кислоты . Соед ин яю т н а п ред м ет н ом ст екле ка п ли исслед у ем ого ра ст вора и 10%н ы й ра ст вора п ла тин охлористовод ород н ой кислоты . Из кон цен трирова н н ы х ра ст воров соли кока ин а сра зу ж е вы п а д а ю т п ерист ы е д ен д рит ы , а из ра зба влен н ы х – крист а ллы в вид е ш т ы ков. Пред ел обн а ру ж ен ия – 3,3 м кг кока ин а . 2. Реа кция с ра ст вором п ерм а н га н а т а ка лия. К кру п ин ке хлористовод ород н ой соли кока ин а п риба вляю т н а п ред м етн ом ст екле ка п лю 1%-н ого ра ст вора п ерм а н га н а т а ка лия. При п отира н ии стеклян н ой п а лочкой в обла сти исслед у ем ой ка п ли и д оба влен ии реа кт ива вы д еляю т ся кра сн о-ф иолетовы е п рям оу голь н ы е и ква д ра т н ы е п ла ст ин ки. Пред ел обн а ру ж ен ия - 4 м кг. А м итрип тил ин И з олирова н ие . 5 м л крови или 50 м л м очи п од щ ела чива ю т 50%-н ы м ра ст вором ед кого н а т ра д о рН 9-10 и п роизвод ят экст ра кцию д иэт иловы м эф иром д ва ж д ы п о 20 м л. Э ф ирн ы е извлечен ия объ ед ин яю т , объ ем д овод ят в м ерн ой колбе ем кост ь ю 50 м л д о м етки, д елят н а а ликвот ы соот вет ст вен н о 10,10,10 и 20 м л, п ом ещ а ю т в стеклян н ы е ст а ка н чики, у п а рива ю т д осу ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие а м ит рипт илин а . Оста т ки в ст еклян н ы хста ка н чика хколичест вен н о с п ом ощ ь ю хлороф орм а п ерен осят н а ст а ртову ю лин ию п ла стин ки “Cилу ф ол”, н а н ося п олоса м и (д лин а 1-2 см ). В ка чест ве м етчика н а п ла стин ку н а н осят 5-10 ка п ель ст а н д а рт н ы х хлороф орм н ы х ра ст воров а м итрип тилин а -осн ова н ия и н ортрип тилин а осн ова н ия (0,5 м г/м л) и п ла ст ин ку хром а т огра ф иру ю т в сист ем е бен зол-а цетон (80:20) д о п род виж ен ия ф рон та ра ст ворит елей н а 10 см . После вы су ш ива н ия п ла ст ин ку хром а т огра ф иру ю т в сист ем е бен зол-д иокса н -а м м иа к (60:35:5) д о п род виж ен ия ф рон та ра створит елей н а 10 см . Х ром а т огра м м у вы су ш ива ю т н а возд у хе и в зон а х м ет чиков и п ервой п олосы (а ликвот а соот в.10 м л),

40

д ет ект иру ю т (ка п ель н о) кон цен трирова н н ой серн ой кислотой. При н а личии а м итрип т илин а н а блю д а ет ся п ят н о ярко-ора н ж евого цвета н а у ровн е м ет чика с Rf =0,74-0,78, в слу ча е н ортрип т илин а п роявляется п ятн о ора н ж евого или ж елтого (в за висим ост и от кон цен тра ции) цвет а с Rf=0,38-0,46. От кры ва ем ы й м ин им у м – 0,2 м кг а м итрип т илиа -осн ова н ия и н ортрип т илин а -осн ова н ия в п робе. При от су т ст вии н а хром а тогра м м е п ятн а с Rf=0,74-0,78 д а ю т за клю чен ие о н еобн а ру ж ен ии а м ит рип т илин а . При н а личии н а хром а т огра м м е п ят ен с Rf=0,74-0,78 и Rf=0,38-0,46, п а ра ллель н ы х м етчика м а м итрип тилин а и н ора м итрип т илин а , п роизвод ят д а ль н ейш ее исслед ова н ие извлечен ия. Неп роявлен н ы е у ча ст ки силика геля, п а ра ллель н о п роявлен н ы м п ятн а м а м итрип т илин а и н ортрип тилиа , п ерен осят с п ом ощ ь ю ска ль п еля в 3 п робирки с п рит ерт ы м и п робка м и и д оба вляю т п о 10 м л хлороф орм а . См есь вст ряхива ю т , от ст а ива ю т и ж ид кость д ека н т а цией слива ю т через стеклян н ы й ф иль т р в ст еклян н ы й ста ка н чик д ля исслед ова н ия. В п робирку вн овь д ва ж д ы н а лива ю т п о 10 м л хлороф орм а и см есь т а кж е вст ряхива ю т и от ф иль тровы ва ю т . Полу чен н ы е хлороф орм н ы е ра ст воры д а лее исслед у ю т с п ом ощ ь ю цветн ы хи м икрокрист а ллоскоп ическихреа кций. Р е а кции окра ш ива н ия . Ост а ток, п олу чен н ы й п осле у д а лен ия хлороф орм а , соот вет ст ву ю щ ий 20 м л эф ирн ого извлечен ия, ра ст воряю т в 2 м л хлороф орм а и п о н есколь ко ка п ель п ом ещ а ю т в 3 ф а рф оровы е ча ш ки и н а од н о п ред м етн ое ст екло. К су хим ост а тка м в ф а рф оровы х ча ш ка х д оба вляю т п о 2 ка п ли кон цен трирова н н ой серн ой кислоты , реа кт ива Фред е, реа кт ива М а рки (в од н у ча ш ку – од ин реа ген т ). При н а личии а м ит рип т илин а и н орт рип т илин а н а блю д а ет ся ж елто-ора н ж евое окра ш ива н ие. Ч у вст вит ель н ость реа кций- от 0.1 д о 1,0 м кг в п робе. М икрокрист а ллоскопич е ска я ре а кция . К су хом у ост а т ку н а п ред м етн ом ст екле д оба вляю т 1 ка п лю 0,1%-н ого ра ст вора и 1 ка п лю 0,1%-н ого ра ст вора соли Рейн еке. При н а личии а м ит ритилин а н а блю д а ет ся обра зова н ие слож н ы х крист а ллов в вид е сросш ихся у осн ова н ия игл. Ч у вст вит ель н ость реа кции 0,02 м кг в п робе. При н а личии в п ят н е н орт рип тилин а н а блю д а ет ся обра зова н ие крист а ллов в вид е вет очек. Ч у вст витель н ост ь реа кции – 0,01 м кг в п робе. Д им едрол И з олирова н ие . К 10 м л м очи или 2 м л крови д оба вляю т вод н ы й ра ст вор а м м иа ка д о рН 10 и экст ра гиру ю т д им ед рол д ву хкра т н ы м объ ем ом хлороф орм а . Х лороф орм н у ю ф а зу от д еляю т и у п а рива ю т хлороф орм (экст ра кт н е д олж ен вскип а ть !) д о объ ем а н есколь ких ка п ель (д ля Т СХ ) и д осу ха п ри количест вен н ом оп ред елен ии. Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . У п а рен н ы й экст ра кт н а н осят н а ст а ртову ю лин ию п ла стин ки “Силу ф ол”. Ряд ом п ом ещ а ю т п ятн о

41

м ет чика и хром а т огра ф иру ю т в сист ем е хлороф орм -а цетон -а м м иа к (12:24:1). Длин а п робега – 10 см . Обн а ру ж ен ие п ровод ят кон цен трирова н н ой серн ой кислот ой. От м еча ю т п оявлен ие окра ш ен н ы хп ятен . Rf сост а вляет 0,67-0,68. П ром едол И з олирова н ие . 50 м л м очи д овод ят д о рН 11-13 0,1 М ра створом NaOH и т риж д ы экстра гиру ю т хлороф орм ом п о 45, 40 и 25 м л. Объ ед ин ен н ы е хлороф орм н ы е извлечен ия ф иль тру ю т через ф иль т р, см очен н ы й хлороф орм ом и орга н ический ра створит ель у д а ляю т в исп а рит ель н ой ча ш ке д осу ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . С у хой ост а ток ра ст воряю т в хлороф орм е. Полу чен н ы й ра ст ворд елят н а д ве ра вн ы е ча ст и. На ст а ртову ю лин ию хром а тогра ф ической п ла ст ин ки с за креп лен н ы м слоем силика геля н а н осят в д ве п олосы экстра кт ы 1 и 2 и ряд ом ра ст вор м етчика (ст а н д а рт н ы й ра створ п ром ед ола осн ова н ия в хлороф орм е). В ка чест ве п од виж н ой ф а зы исп оль зу ю т хлороф орм , кот оры й п ом ещ а ю т в ка м еру объ ем ом 500 см 3, н а д н о кот орой п ом ещ а ет ся бю кс или т игель , сод ерж а щ ий 5 м л 25%-н ого ра ст вора а м м иа ка . На сы щ а ю т в т ечен ие 30 м ин у т . Длин а п робега – 10 см . Р е а ге н т ы , использ уе м ы е для проя вле н ия пла ст ин ки. Од н у из зон оп ры скива ю т реа кт ивом Дра ген д орф а . При н а личии п ром ед ола н а блю д а ет ся ора н ж евое п ятн о. Во второй зон е и зон е м ет чика п ром ед ол обн а ру ж ива ет ся ка п ель н о с п ом ощ ь ю реа кт ива М а рки (п у рп у рн о-кра сн ое окра ш ива н ие). Пред ел обн а ру ж ен ия – 0,25 м кг. М икрокрист а ллич е ска я ре а кция с а лиз а рин овы м кра сн ы м . Ора н ж евое п ятн о, п олу чен н ое п осле обра бот ки реа кт ивом Дра ген д орф а , сн им а ю т с п ом ощ ь ю ска ль п еля в п робирку , сод ерж а щ у ю 5 м л см еси эт а н ола 25%-н ого ра ст вора а м м иа ка (9:1). После вст ряхива н ия см еси в т ечен ие 1 м ин у т ы п олу чен н ы й ра ст вор от д еляю т ф иль трова н ием через ст еклян н ы й ф иль т р. Ра ст ворит ель у д а ляю т , а ост а ток п ерен осят с п ом ощ ь ю хлороф орм а н а п ред м етн ое ст екло. К су хом у ост а т ку д оба вляю т 1 ка п лю 0,1 М ра ст вора HCl и вн осят 1-2 крист а лла кра сителя а лиза рин ового кра сн ого. При н а личии п ром ед ола (через 5-10 м ин у т ) обра зу ю т ся иголь ча т ы е криста ллы ж елт ого цвет а . Эф едрин, эф едрон П ре два рит е льн ое иссле дова н ие . К 1 м л м очи д оба вляю т крист а ллический су ль ф а т н а т рия д о н а сы щ ен ия и за тем п о 0,5 м л сероу глерод а в бен золе и а м м иа ка т м ед и. Полу чен н у ю см есь вст ряхива ю т в течен ие 30 м ин . В эт их у словиях эф ед рин и эф ед рон обра зу ю т ком п лексн ое соед ин ен ие с м ед ь ю , сод ерж а щ ееся в верхн ем орга н ическом слое. Орга н ическу ю ф а зу от бира ю т, а вод н у ю п ром ы ва ю т 1 м л бен зола . Объ ед ин ен н ы е орга н ические экстра кты

42

у п а рива ю т в т оке холод н ого возд у ха д о объ ем а 50-100 м кл. У п а рен н ы й экст ра кт количест вен н о н а н осят п олосой 3 см н а лин ию ст а рт а п ла стин ки “Cилу ф ол-У Ф-354”. В ка чест ве м ет чиков исп оль зу ю т ком п лексы эф ед рон а и эф ед рин а с м ед ь ю в кон цен тра ции 1 м г/ м л, п ригот овлен н ы е из чист ы х су бста н ций. Х ром а тогра ф ирова н ие п ровод ят в систем е хлороф орм – а цет он (48:2) – д ля эф ед рин а и в сист ем е циклогекса н -а цет он -м ет а н ол (40:10:2) –д ля эф ед рон а . Rf (эф ед рин а ) –0,26; Rf (эф ед рон а )-0,27. Длин а п робега ра створит еля 10 и 15 см соответ ст вен н о. Пла стин ку п росу ш ива ю т и п росм а т рива ю т в У Ф-свет е. Ж елтокоричн евое окра ш ива н ие и совп а д ен ие величин Rf с м ет чика м и слу ж ит п олож ит ель н ой реа кцией и осн ова н ием д ля п ровед ен ия д оп олн ит ель н ого исслед ова н ия. При отрица т ель н ом резу ль т а т е н а эф ед рин и эф ед рон д а ль н ейш ее исслед ова н ие н е п ровод ит ся. И з олирова н ие . 10 м л биологической п робы (м очи) д овод ят д о рН 10 ра ст вором ка рбон а та н а трия и триж д ы экст ра гиру ю т хлороф орм ом п о 10 м л. Объ ед ин ен н ы е хлороф орм н ы е извлечен ия ф иль тру ю т через ф иль т р, см очен н ы й хлороф орм ом , и орга н ический ра ст ворит ель у д а ляю т в вы п а рит ель н ой ча ш ке д осу ха . Хром а т огра фич е ска я оч ист ка и обн а руже н ие . Оста т ок ра ст воряю т в 0,5 м л хлороф орм а и н а н осят н а п ла ст ин ку “Силу ф ол”, в ка чест ве м ет чиков исп оль зу ю т эф ед рин , эф ед рон и ф ен а м ин в вид е осн ова н ий. Х ром а тогра ф ирова н ие п ровод ят в сист ем е бен зол – эта н ол – д иэт ила м ин (9 :1: 1). Длин а п робега 10 см . После хром а т огра ф ирова н ия п ла стин ку су ш а т в п отоке т еп лого возд у ха и оп ры скива ю т свеж еп риготовлен н ы м ра ст вором н ин гид рин а в а цет он е. За т ем п ла стин ку н а грева ю т в су ш иль н ом ш ка ф у п ри 801000С или в т оке т еп лого возд у ха . При н а личии в п робе исслед у ем ы хвещ еств обра зу ю т ся т ем н о-ф иолет овы е п ятн а с соот вет ст ву ю щ им и зн а чен иям и м ет чиков (эф ед рин , эф ед рон ). М икрокрист а ллоскопич е ские ре а кции. Э федрин гидрохлорид 1. Реа кция с иод висм у т а т ом ка лия. При вза им од ейст вии ка п ель ра ст воров эф ед рин а гид рохлорид а и иод висм у т а т а ка лия через 10 м ин у т н а блю д а ется вы п а д ен ие крист а ллического оса д ка , сост оящ его из крист а ллов д ву х вид ов: т ем н о-кра сн ы х игл и т он ких ора н ж евы хп ла стин ок. Пред ел обн а ру ж ен ия: 1 м кг эф ед рин а . 2. Реа кция с соль ю Рейн еке. При вза им од ействии ка п ель ра ст вора эф ед рин а гид рохлорид а и 1%-н ого свеж еп ригот овлен н ого ра ст вора соли Рейн еке вы п а д а ет крист а ллический оса д ок, состоящ ий из тон ких п ла стин ок п рям оу голь н ой ф орм ы . Пред ел обн а ру ж ен ия: 7 м кг эф ед рин а .

43

ЛИ Т Е РА Т У РА 1. Е рем ин С.К . Ан а лиз н а ркот ических сред ст в : ру ковод ст во п о хим икот оксикологическом у а н а лизу н а ркот ических и д ру гих од у рм а н ива ю щ их вещ ест в / С.К . Е рем ин , Б.Н. Изотов, Н.В. Веселовска я. – М . : М ы сль , 1993. 2. Изотов Б.Н. Нен а п ра влен н ы й а н а лиз н а вещ ест ва , изолиру ем ы е экст ра кцией п олярн ы м и ра ст ворит елям и / Б.Н. Изотов. – М . : М ед ицин а , 1996. 3. Веселовска я Н.В. На ркотики. Свойст ва , д ейст вие. Фа рм а кокин ет ика . М ет а болизм / Н.В. Веселовска я [и д р.]. – М ., 2002. 4. С им он ов Е .А. На ркот ики. М ет од ы а н а лиза н а кож е в ее п рид а т ка х и вы д елен иях/ Е .А. Сим он ов, Б.Н. Изот ов, А.В.Фесен ко. – М . : Ан а ха рсис, 2000. 5. Х им ико-т оксикологический а н а лиз вещ ест в, вы зы ва ю щ иход у рм а н ива н ие : м ет од ические у ка за н ия. – М . : М ЗCCCР, 1989. 6. Л у ж н иков Е .А. К лин ическа я токсикология / Е .А.Л у ж н иков. – М . : М ед ицин а , 1999. 7. К лин ическа я т оксикология д ет ей и п од рост ков : в 2-х т. / п од ред . И.В. М а рковой [и д р.]. – С.-Пб. : Ин т ерм ед ика , 1998. 8. Э н циклоп ед ия клин ическихла бора торн ы хт естов / п од ред . Н.Т ица . – М . : “Л а бин ф орм ”, 1997. 9. Ду н а евский В.В. На рком а н ии и т оксиком а н ии / В.В.Ду н а евский, В.Д.Стяж кин . – Л . : М ед ицин а . – 1990. 10. Ба ба ян Э .А. На ркология / Э .А.Ба ба ян , М .Х .Г он оп оль ский. – М . : М ед ицин а , 1987. 11. Л ичко А.Е . Под рост кова я н а ркология / А.Е .Л ичко, В.С.Битен ский. – М . : М ед ицин а , 1991. 12. К ра м а рен ко В.Ф. Т оксикологическа я хим ия / В.Ф. К ра м а рен ко. – К иев : Вы сш а я ш кола , 1989.

44

П РИ ЛО Ж Е Н И Е П риготовл ение реак тивов • Реа кт ив Дра ген д орф а . В 20 м л а зот н ой кислоты (ρ 1,18 г/ см 3) ра ст воряю т 8 г осн овн ого н итра т а висм у т а . Полу чен н ы й ра ст вор влива ю т в ра ст вор, сод ерж а щ ий 27,2 г иод ид а ка лия в 30 м л вод ы . Ч ерез н есколь ко д н ей ж ид кость ф иль тру ю т и ра зба вляю т вод ой д о 100 м л. • Реа кт ив Дра ген д орф а , м од иф ицирова н н ы й п о М у н ь е. В 10 м л лед ян ой у ксу сн ой кислоты ра ст воряю т 0,85 г осн овн ого н итра т а висм у т а и п риба вляю т 40 м л вод ы . К этой ж ид кости п риба вляю т ра ст вор, сод ерж а щ ий 8 г иод ид а ка лия в 20 м л вод ы . Перед у п от реблен ием беру т 1 м л у ка за н н ого ра ст вора , п риба вляю т к н ем у 2 м л лед ян ой у ксу сн ой кислоты и 10 м л вод ы . • Реа кт ив М а рки. К 1 м л кон цен т рирова н н ой серн ой кислот ы п риба вляю т ка п лю ф орм а лин а и охла ж д а ю т. Э т от реа кт ив исп оль зу ю т свеж еп ригот овлен н ы м . • Реа кт ив С им он а . Да н н ы й реа кт ив п олу ча ю т п ри см еш ива н ии ра вн ы х объ ем ов 10%-н ого ра ст вора а цет а ль д егид а и 1%-н ого ра створа н ит роп ру ссид а н а т рия. • Реа кт ив Фред е. К ра ст ерт ом у в п орош ок м олибд а т у а м м он ия (или н а т рия) п риба вляю т кон цен трирова н н у ю серн у ю кислот у . См есь ин т ен сивн о взба лты ва ю т. Полу чен н ы й н а сы щ ен н ы й ра ст вор м олибд ен овой кислоты в кон цен трирова н н ой серн ой кислот е слива ю т с оса д ка . Реа кт ив исп оль зу ю т свеж еп ригот овлен н ы м . При стоян ии реа кт ив м ож ет изм ен ят ь свою окра ску . • Реа кт ив Э рд м а н а . К 20 м л кон цен т рирова н н ой серн ой кислот ы п риба вляю т 10 ка п ель 15%-н ой а зот н ой кислоты и взба лты ва ю т . • Реа кт ив FPN. К 5 м л 5%-н ого ра ст вора хлорид а ж елеза (III) п риба вляю т 45 м л 20%-н ого ра ст вора хлорн ой кислоты и 50 м л 50%-н ого ра ст вора а зотн ой кислот ы . • С у ль ф а т рт у т и(II), 2%-н ы й ра ст вор. 5,0 г ж елтой окиси рт у т и ра ст воряю т в см еси 100 м л вод ы и 10 м л кон ц. H2SO4, охла ж д а ю т , д овод ят вод ой д о 250 м л. • Диф ен илка рба зон , 0,02%-н ы й ра ст вор. 0,02 г ДФК ра ст воряю т в 100 м л хлороф орм а .

45

М ин ист ерст во зд ра воохра н ен ия Российской Фед ера ции Г У ЗОНД

К од ф орм ы п о ОК У Д ____________ К од у чреж д ен ия п о ОК ПО ________ М ед ицин ска я д оку м ен та ция Форм а № 454 / у

РЕ ЗУ ЛЬ Т А Т Ы ХИ М И К О -Т О К СИ К О ЛО ГИ ЧЕ СК О ГО И ССЛЕ Д О В А Н И Я Х им ико-токсикологическа я ла бора тория ОНД, (а д рес) Ан а лиз № ________________ п Да т а п ровед ен ия исслед ова н ия _________________________________________ ФИО сп ециа лист а , п ровод ивш его исслед ова н ие __________________________ Исслед ова н ие п роизвед ен о п о н а п ра влен ию № ______ от ___________________ Л ичн ое за явлен ие ФИО освид етель ст ву ем ого_____________________________________________ К од п робы __________________________________________________________ Объ ект исслед ова н ия _________________________________________________ М ет од а н а лиза _______________________________________________________ Резу ль т а т _______________________________________________________ Под п ись _____________________ М .П.

46

Бю ро су д ебн о-м ед ицин ской эксп ертизы Ворон еж ского облзд ра вотд ела г.Ворон еж , у л.Феокт ист ова ,1

К од ф орм ы п о ОК У Д___________ К од ф орм ы п о ОК ПО___________ М ед ицин ска я д оку м ен т а ция Форм а 3 175/У У т верж д ен а М ин зд ра вом РФ

А К Т судебно-х им ическ ого иссл едования № ______________ На осн ова н ии отн ош ен ия____________________________________________

от

№

в хим ическом от д елен ии су д ебн о-м ед ицин ской ла бора тории

бю ро су д ебн о-м ед ицин ской эксп ертизы Ворон еж ского облзд ра вотд ела ,_____ эксп ертом -хим иком от д елен ия________________________________________

п роизвед ен о исслед ова н ие

Исслед ова н ие н а ча т о_______________________________________________ Исслед ова н ие за кон чен о_____________________________________________

Воп росы , п од леж а щ ие ра зреш ен ию п ри исслед ова н ии, и д ру гие ра зд елы “Акт а су д ебн о-хим ического исслед ова н ия” изла га ю т ся н а след у ю щ их ________________ листа х.

П РИ ЛО Ж Е Н И Е

47

Cост а вит ели: Е вст игн еева Ва лен тин а Пет ровн а Ш ку тин а Ирин а Викт оровн а Бреж н ева Т а т ь ян а Алекса н д ровн а Сливкин Алексей Ива н ович Селем ен ев Вла д им ирФед орович

Ред а кт ор

Т ихом ирова О.А.